雄激素与前列腺疾病

从胎儿期到老年，男性一生之中都依赖雄激素的作用，而前列腺是一个雄激素依赖性器官，体内循环雄激素是前列腺生长发育乃至前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PC）发生的基本条件。现就雄激素和前列腺疾病的关系作一阐述。     

4-羟基他莫昔芬对前列腺基质细胞增殖与凋亡的作用

目的:研究4-羟基他莫昔芬(OHT)对原代培养的前列腺基质细胞增殖与凋亡的影响。方法:以10-8~10-5mol/L的雌二醇(E2)、己烯雌酚(DES)、OHT以及10-8~10-6mol/L的E2与10-7mol/L的OHT混合物分别作用于原代培养的前列腺基质细胞,采用MTT法和TUNEL法分别检测细胞增殖和凋亡。结果:OHT对前列腺基质细胞增殖和凋亡的作用与E2和DES比较均有显著差异(P均<0.05),在10-7~10-5mol/L浓度下表现出与浓度相关(r=-0.383,P=0.005)的抑制增殖作用(P<0.05),10-7mol/L的OHT可以抑制相同甚至更高浓度(10-6mol/L)E2的促增殖作用(P<0.05);OHT在10-8~10-5mol/L浓度下显示与浓度相关(r=0.349,P=0.012)的促凋亡作用(P<0.05),且10-7mol/L OHT的促凋亡作用不能被相同甚至更高浓度(10-6mol/L)E2所逆转(P>0.05)。结论:OHT在一定浓度范围内对原代培养的前列腺基质细胞具有明显的抑制增殖和促凋亡作用,该作用可能不完全是通过竞争性抑制雌激素受体而实现的。     

前列腺增生症各区细胞增殖与凋亡特征的研究

目的 探讨良性前列腺增生症（ＢＰＨ）各区细胞增殖和凋亡特征及其与ＢＰＨ发病的关系。方法 采用流式细胞术对３３例ＢＰＨ病人前列腺各区细胞表皮生长因子（ＥＧＦ）,表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）,碱性纤维细胞生长因子和转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）表达,细胞ＤＮＡ含量和细胞凋亡情况进行定量对比分析。结果 ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ的标记率和表达量在移行区（ＴＺ）明显高于周边区（ＰＺ）和中央区（ＣＺ）。     

TRPM7在膀胱癌细胞增殖与凋亡中的调控作用

目的 探讨薄荷醇受体7（transient receptorpotential melastatin 7,TRPM7）在膀胱癌细胞株T24细胞增殖与凋亡中的调控作用及分子机制.方法 采用RT-PCR及Western blot检测T24细胞株中TRPM7 mRNA及蛋白的表达;分别采用通道阻滞剂及基因沉默的方法阻断TRPM7离子通道的功能,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率,Western blot检测Cdk4、Cdk6及Cyto C的表达.结果 RT-PCR及Western blot证实T24细胞株中存在TRPM7 mRNA及蛋白的表达;采用基因沉默及通道阻滞剂阻断TRPM7的功能后,T24细胞存活率分别下降了56.48％和54.87％,处于G0/G1期的细胞随阻滞剂浓度增加而显著增加,细胞凋亡率亦随之增加并呈浓度依赖性,与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.Western blot显示阻断TRPM7后,T24细胞Cdk4、Cdk6的表达减少,而Cyto C的表达增加.结论 TRPM7可促进T24细胞增殖,抑制细胞凋亡.这一过程可能通过调节Cdk4、Cdk6及Cyto C的表达来实现.阻断TRPM7的功能,能够抑制T24细胞增殖,促进细胞凋亡,可能为临床治疗膀胱癌提供新的靶点.     

外源性胃泌素在胃癌细胞增殖和凋亡中的作用

我们应用ＭＫＮ45胃癌细胞株通过四唑蓝 (ＭＴＴ)比色分析法及流式细胞仪观察胃泌素在细胞增殖、凋亡中的作用 ,同时观察丙谷胺对胃泌素的拮抗作用 ,并与 5 氟尿嘧啶 (5 Ｆｕ)作比较 ,结果报道如下。一、材料与方法1.细胞培养 :ＭＫＮ45胃癌细胞株(上海市消化疾病研究所提供 )培养于ＲＰＭＩ 164 0培养液中 ,加入体积分数为10 %小牛血清 ,置 3 7℃ 5 %ＣＯ2 恒温培养箱 ,隔天换液 ,3ｄ传代。2 .试剂配制及实验分组 :用 5 %的小牛血清的 164 0液将胃泌素 (上海丽珠东风生物技术公司 )配为 2 5ｍｇ/Ｌ浓度 ,丙谷胺 (江苏金坛制药厂 )浓度为 …     

高血压对良性前列腺增生细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨高血压对良性前列腺增生(BPH)细胞增殖与凋亡的影响。　方法:分别采用Ki 67免疫组织化 学染色及核酸末端原位标记技术(TUNEL)对40例单纯BPH和40例BPH合并高血压患者前列腺组织的细胞增殖 指数(proliferativeindex,PI)与凋亡指数(apoptoticindex,AI)进行检测。　结果:在单纯BPH以及BPH合并高血 压组,前列腺上皮和间质细胞的PI均大于AI(P<0.05),且PI与前列腺体积呈正相关(P<0.05)。与单纯BPH组 比较,BPH合并高血压组前列腺上皮和间质细胞的PI明显增高(P<0.05)。在BPH合并高血压组,高血压病程的 长短与前列腺上皮和间质细胞的PI呈正相关(P<0.05)。　结论:高血压尤其是长期高血压状态可促进前列腺 上皮和间质细胞的增殖,进而导致前列腺体积增大。     

牛磺酸对系膜细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察牛磺酸对系膜细胞增殖及凋亡的影响，并探讨其作用的可能机制。方法 用噻唑蓝MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡，吖啶噔活体染色观察细胞凋亡形态，免疫细胞化学结合计算机图文分析系统检测cjn,cfos表达。结果 在5－50mmol/L浓度范围内牛磺酸能剂量依赖性地抑制系膜细胞增殖，可使G0－G1期细胞增多，S期细胞减少，并能明显抑制c-jun,c-fos的表达（P＜0．01），而牛磺酸并不诱导系膜细胞的凋亡。结论 牛磺酸可显著抑制系膜细胞增殖，使系膜细胞阻滞于G0－G1期；牛磺酸对系膜细胞增殖的抑制作用与其抑制c-jun,c-fos的表达有关。牛磺酸对系膜细胞凋亡无诱导作用。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠增生前列腺细胞增殖和凋亡的影响

目的了解血管紧张素Ⅱ对良性前列腺增生(BPH)大鼠前列腺细胞增殖和凋亡的作用。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组(A组),BPH模型组(B组)和BPH+血管紧张素转化酶抑制剂依那普利组(C组),每组10只。B组在双侧睾丸切除后1周开始皮下注射丙酸睾酮并灌饲生理盐水,C组在双侧睾丸切除术后1周开始皮下注射丙酸睾酮并灌饲依那普利。4周后观察各组大鼠前列腺重量和组织学变化,Ki-67免疫组化染色及TUNEL染色测定前列腺上皮和间质细胞的增殖和凋亡指数。结果3组大鼠前列腺指数[前列腺湿重(mg)／体重(g)]分别为1．54±0．09,1．65±0．07和1．59±0．09,B组大鼠前列腺指数显著大于A组和C组(P<0．05)。光镜显示B组前列腺上皮细胞增生明显,C组上皮细胞明显萎缩。A组上皮和间质细胞增殖率分别为(1．4±0．4)％和(1．1±0．4)％,B组为(3．0±0．4)％和(1．4±0．4)％,C组为(2．1±0．5)％和(1．2±0．5)％,B组上皮细胞增殖率显著高于A组和C组(P<0．05),而3组间质细胞的增殖率比较差异无统计学意义(P>0．05);3组上皮细胞凋亡率分别为(1．2±0．5)％,(1．1±0．3)％和(1．1±0．5)％(P>0．05)。结论血管紧张素Ⅱ在大鼠BPH组织中表达上调。血管紧张素Ⅱ可能影响大鼠前列腺细胞的增殖,但对细胞凋亡影响不明显。     

PARP-1抑制剂对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨PARP-1抑制剂3-aminobenzamide(3-AB)对骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响.方法 常规培养骨肉瘤U2OS细胞,采用CCK-8法检测U2OS细胞的增殖和流式细胞术检测细胞凋亡,并用caspase-3活性测定试剂盒检测caspase-3活性和Western-blot技术检测Bcl-2、Ba...     

雄激素对大鼠前列腺细胞凋亡与生长因子表达的影响

目的：探讨雄激素去势对大鼠前列腺侧叶LP1、LP2细胞凋亡与生长因子TGFα、KGF、bFGF、TG-Fβ1mRNA表达的影响。方法：将健康成年雄性Wistar大鼠,随机分成正常对照组、雄激素去势组及雄激素替代组。应用TUNEL法及半定量PCR方法分别检测大鼠前列腺侧叶LP1和LP2细胞凋亡及各生长因子表达变化。结果：在去势和雄激素替代治疗前后,前列腺腹、侧叶LP1的TGFβ1和TGFα表达变化,与前列腺LP1细胞凋亡、增殖密切相关;而LP1的KGF、bFGFmRNA表达与雄激素并不呈简单的正相调节关系。在侧叶,雄激素对LP2四种生长因子的表达无明显影响。结论：大鼠前列腺不同分叶的细胞对雄激素调节敏感忡与其生长因子表达的调节方式不同有关：TGFβ1和TGFα是前列腺生长调节中最重要的抑制和促分裂生长因子,KGF、hFGF可能主要参与雄激素介导的生长因子的平衡调节。     

Smad4、7在增生前列腺组织中的表达及意义

目的 探讨增生前列腺组织中Smad4和Smad7的表达及意义.方法 采用免疫组化SABC法检测30例增生前列腺组织及10例正常前列腺组织中Smad4和Smad7的表达.结果 在正常前列腺组织中,Smad4和Smad7的平均面密度值分别为0.1013±0.0326,0.0997±0.0467;在BPH组织中,Smad4和Smad7的平均面密度值分别为0.0601±0.0485,0.0354±0.0267,表达水平均下调,不论Smad4还是Smad7,其在BPH组织中.的平均面密度值与正常前列腺组织中的平均面密度值比较,差别有显著意义(P＜O.05).但不具有显著的相关性,r=0.138,P＞O.05.结论 Smad4和Smad7在前列腺增生组织中的表达下调,提示其参与了前列腺增生的病理过程.     

Loss of BMP2, Smad8, and Smad4 expression in prostate cancer progression

BACKGROUND: The role of the bone morphogenetic protein (BMP) pathway in prostate cancer (PC) is unclear. This study aimed to characterize aspects of the BMP pathway in PC by assessing BMP2, Smad8, and Smad4 expression in normal, hyperplastic, and malignant prostate tissue, and to correlate findings with progression to PC. METHODS: Radical prostatectomy (RP) specimens from 74 patients with clinically localized PC (median follow-up 51 months, range 15-152), 44 benign prostatic hypertrophy (BPH) lesions, and 4 normal prostates (NPs) were assessed for BMP2, Smad8, and Smad4 expression using immunohistochemistry. RESULTS: Both BMP2 (P < 0.001) and nuclear Smad4 (P < 0.0001) expression were significantly decreased in PC compared to benign prostate tissue. Nuclear Smad8 was present in normal/benign prostate tissue but absent in PC and adjacent hyperplasia. Furthermore, loss of BMP2 (P < 0.001) and decreased nuclear Smad4 (P = 0.05) expression correlated with increasing Gleason score. CONCLUSIONS: These data suggest that decreased BMP2, nuclear smad8 and nuclear Smad4 expression are associated with the progression to PC, and in particular loss of BMP2 and Smad4 are related to progression to a more aggressive phenotype.     

双氢睾酮对LNCaP细胞系Smad3和Smad4转录及表达的影响

目的:探讨双氢睾酮(DHT)对前列腺癌细胞系LNCaP中转化生长因子β(TGFβ)信号通路的下游信号蛋白Smad3、Smad4的基因转录及表达是否有影响,氟他胺对这些影响有无拮抗作用。方法:用含不同浓度DHT(2、10、50nmol/L)和氟他胺(100nmol/L)的RPMI1640培养液培养LNCaP细胞株。RTPCR检测LNCaP细胞中Smad3、Smad4mRNA水平,Western印迹法检测Smad3、Smad4蛋白表达情况。结果:与不含DHT和氟他胺的对照组比较,10、50nmol/LDHT明显增强LNCaP细胞中Smad3mRNA的表达(P<0.05),不同浓度的DHT均使Smad3蛋白的表达增高(P<0.05),氟他胺明显抑制DHT的这种增强作用(P<0.05);10nmol/L浓度的DHT对Smad4mRNA的转录有明显的抑制作用(P<0.05),这种抑制作用受氟他胺的抑制,不同浓度的DHT均可以使Smad4蛋白的表达下降,而且下降程度要比Smad4mRNA下降更为明显(P<0.05),氟他胺能够减轻这种抑制作用。结论:DHT能够增强Smad3mRNA的转录和表达,而对Smad4mRNA的转录和表达有抑制作用,氟他胺可以不同程度地抑制DHT的这些作用。雄激素受体(AR)信号通路和TGFβ信号通路可能在Smads水平上存在交联。     

转化生长因子β1及其信号转导分子Smad4,Smad7在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的　探讨转化生长因子 β1及其超家族肽类的细胞内转导分子Smad4和Smad7在人脑胶质瘤中的表达及其意义。方法　采用免疫组织化学方法 ,对经过石蜡包埋的 3 0例胶质瘤和8例正常脑组织标本进行定位和定性检测。结果　TGF β1,Smad4和Smad7蛋白在胶质瘤中均有不同程度的表达 ,Smad4的表达水平随着胶质瘤恶性程度的增高而降低 ,且在正常脑组织、低、高级别胶质瘤组中的表达差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;TGF β1,Smad7在正常脑组织中几乎不表达 ,在低级别胶质瘤 (Ⅰ Ⅱ级 )中表达较少 ,在高级别胶质瘤 (Ⅲ Ⅳ级 )中表达较多 ,两者在正常脑组织及高、低级别胶质瘤中的表达两两比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。且TGF β1与Smad7的表达水平呈正相关 (r =0 .78,P <0 .0 1) ;TGF β1与Smad4的表达水平呈负相关(r =-0 .67,P <0 .0 1)。结论　TGF β1,Smad7蛋白的阳性表达与组织学分级密切相关 ,它们参与了在人脑胶质瘤细胞的恶性转化 ,而Smad4对胶质瘤的进展有抑制作用。     

Smad4在膀胱癌发生中的作用

目的　探讨Smad4 在膀胱癌发生中的作用。　方法　采用免疫组化方法对 4羟丁基亚基硝胺 (BBN)诱导大鼠膀胱癌组织Smad4 表达进行观察分析。　结果　Smad4 在增生膀胱粘膜中阳性表达率为 2 4% (5 / 2 1) ,膀胱癌组织中为 5 3% (17/ 32 ) ,P <0 .0 5。G1阳性表达率 35 % (7/ 2 0 ) ,G2 83 %(10 / 12 ) ,P <0 .0 5。Ta阳性表达率 36 % (8/ 2 2 ) ,T190 % (9/ 10 ) ,P <0 .0 5 ,差别均有显著性意义。随BBN作用时间延长膀胱癌组织Smad4 阳性表达率升高。　结论　Smad4 与大鼠膀胱癌形成有关 ,随病理分期、细胞分级增高阳性表达率升高。     

Immunolocalisation and expression of Smad2 and Smad4 proteins in dog testis during postnatal development

The expression and localisation of downstream signalling molecules of transforming growth factor beta superfamily, Smad2 and Smad4 proteins, was investigated in immature and mature dog testis. Cellular localisation of Smad2 and Smad4 proteins was examined using immunohistochemistry. Quantitative analysis of immunostaining was determined by the image analysis system. The specificity of the antibodies was examined using Western blotting assay. Smad2 and Smad4 were widely expressed in the testes, mainly immunolocalised in the cytoplasm of gonocytes, Leydig cells and Sertoli cells of immature testes, and Leydig cells and Sertoli cells of mature testes. At the same time, the expression levels for both proteins were different between immature and mature age groups: the expression of Smad2 and Smad4 proteins in the Sertoli cells of mature testis was higher than in the immature group (P < 0.05), but the expression of these two proteins in Leydig cells of mature testis was weaker than that seen in immature stage (P < 0.05). The temporospatial distribution of Smad2 and Smad4 proteins in testicular cells suggests that these two signalling molecules may play an important role in specific stages of testicular development and spermatogenesis, thus providing direct evidences for transforming growth factor beta action in the dog testis.     

奥曲肽上调Smad4表达抑制肝癌细胞生长

目的观察奥曲肽（octreotide,OCT）对Bel7402人肝癌细胞内Smad4调节及其对肝癌细胞的抑制作用。方法以MTr法测量OCT对Bel7402细胞增殖的影响,光镜下观察细胞形态的变化。以细胞迁移实验和粘附实验观察细胞侵袭和粘附能力的影响。以流式细胞仪检测细胞周期和Smad4蛋白的变化。以裸鼠人肝癌种植模型,观察OCT对种植瘤生长的影响,以免疫组化观察种植瘤内Smad4蛋白的表达。以半定量RT—PCR观察体内外Smad4mRNA的表达。结果OCT处理的Bel7402细胞增殖能力和细胞形态无明显改变,细胞的侵袭和粘附能力明显下降,细胞生长静止期（G0／G1）的比例显著增加（48．0％±3．2％vs57．7％±0．9％）,OCT明显抑制裸鼠人肝癌种植瘤的生长,抑瘤率达到67．9％。体外OCT流式细胞仪检测治疗组种植瘤内Smad4蛋白（6．36±1．22）的表达显著高于对照组（3．22±1．20）。体内外Smad4 mRNA的表达,治疗组（0．701±0．035,1．091±0．131）也明显高于对照组（O．531±O．073,0．634±0．222）。结论OCT能显著抑制体内外肝癌细胞的生长,上调肝癌细胞内Smad4的表达可能是其抑瘤的重要机制。     

前癃通胶囊含药血浆对前列腺间质细胞Smad4基因表达的影响

目的:探讨中药前癃通胶囊含药血浆对体外培养前列腺间质细胞Smad4基因表达的影响,为中药复方治疗良性前列腺增生(BPH)提供实验依据。方法:收集2012年8~10月门诊BPH患者15例,按照随机数字表对入选患者进行实验分组,分为前癃通高、中、低剂量组,制备前癃通含药血浆。同时,体外培养前列腺间质细胞,当细胞接近长成单层后进行免疫荧光检测,进行间质细胞鉴定;加含药血浆后培养24 h,采用实时荧光定量PCR(q-PCR)技术检测间质细胞Smad4基因表达;Western印迹检测Smad4蛋白在间质细胞的表达。结果:经含药血浆处理后间质细胞Smad4基因mRNA的表达随药物剂量增加依次增强,与空白组、无血浆组比较,各组差异均有统计学意义(P0.01)。经含药血浆处理后间质细胞Smad4蛋白的表达随药物剂量增加依次增强,与空白组比较,低剂量组差异无统计学意义(P0.05),中剂量组差异有统计学意义(P0.01);与低剂量组比较,中剂量组差异有统计学意义(P0.05);与高剂量组比较,各组之间差异均有统计学意义(P均0.01)。结论:中药前癃通胶囊含药血浆体外培养前列腺间质细胞,可抑制其增殖,其机制与促进Smad4基因及蛋白表达有关。     

Smad4、Smad7在大鼠慢性前列腺炎前列腺组织中的表达及意义

目的 研究慢性前列腺炎SD大鼠前列腺组织Smad4和Smad7的表达,并初步探讨它对慢性前列腺炎发病机制的意义.方法 将40只6月龄SD大鼠随机分为正常对照组和CP实验组,每组20只.实验组采用去势+高剂量苯甲酸雌二醇肌注方法建模,并以免疫组化和蛋白免疫印迹实验方法检测Smad4、Smad7在前列腺组织中的表达变化.结果 与正常对照组相比,Smad7表达显著下调(P<0.01),Smad4表达亦显著下调(P<0.01);Smad4与Smad7在慢性前列腺炎大鼠前列腺组织中表达无相关性.结论 Smad4、Smad7在慢性前列腺炎前列腺组织中表达异常,提示可能参与CP的病理过程.