microRNA-145在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

[目的]探讨肝细胞肝癌中microRNA-145(miR-145)水平的变化及其临床意义。[方法]采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测30例肝癌组织、癌旁组织及3例正常肝组织中miR-145表达量,以及Hep G2肝癌细胞、L-O2胎肝细胞中miR-145表达量并计算miR-145相对表达量。结合采集组织的性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度等临床病理参数分析miR-145表达水平有无明显差异。[结果]肝癌组织中miR-145表达明显低于正常肝组织,差异有统计学意义(P0.05),癌旁组织与正常肝组织及肝癌组织之间表达差异无统计学意义(均P0.05),Hep G2细胞中miR-145表达明显低于L-O2细胞,差异有统计学意义(P0.05)。miR-145在肝癌中的表达异常与性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度无相关,差异无统计学意义。[结论]miR-145在肝癌患者中低表达,在肿瘤发生发展过程中可能担任了抑癌基因的角色,对肝细胞肝癌的临床诊断有意义。     

卵巢癌组织中miR-581、FOXO1表达与患者病理特征和预后的关系

目的 探讨卵巢癌组织中微小RNA-581(miR-581)、叉头框转录因子O1(FOXO1)的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法 选取97例卵巢癌患者，采用RT-qPCR法检测癌组织与癌旁组织中miR-581、FOXO1mRNA表达。采用Pearson相关系数分析卵巢癌组织中miR-581与FOXO1 mRNA表达的相关性。根据卵巢癌组织中miR-581、FOXO1 mRNA表达均值分为高、低表达，采用Kaplan-Meier法绘制不同miR-581、FOXO1 mRNA表达卵巢癌患者生存曲线。结果 与癌旁组织比较，卵巢癌组织中miR-581表达高，FOXO1 mRNA表达低（P均<0.05）。Pearson相关系数分析显示，卵巢癌组织中miR-581与FOXO1 mRNA表达呈负相关（r=-0.728,P<0.05）。不同分化程度、国际妇产科联盟（FIGO）分期、淋巴结转移卵巢癌组织中miR-581、FOXO1 mRNA表达比较，差异均有统计学意义（P均<0.05）。随访3年，死亡42例，3年累积生存率为56.70%(55/97)。K-M生存曲线分析显示，miR...     

miR-552和miR-592在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨miR-552和miR-592在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达情况,分析其与临床病理特征的关系及其诊断价值。方法收集60例胃癌患者的胃癌组织及癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-552和miR-592在癌组织及癌旁正常组织中的表达水平,分析其与临床病理特征的关系,并进行ROC分析。结果 miR-552、miR-592在胃癌组织中的相对表达量分别为4.73±1.75和5.65±2.11,显著高于癌旁正常组织中两者相对表达量,分别为0.98±0.55和1.22±0.79,差异有统计学意义(P0.001)。胃癌组织中miR-552、miR-592的表达水平均与TNM分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移有关(P0.05)。胃癌组织中miR-552相对表达量与miR-592相对表达量呈正相关(r=0.528,P0.001)。miR-552:AUC=0.949,95%CI:0.909～0.988,miR-592:AUC=0.932,95%CI:0.885～0.979。结论 miR-552、miR-592在胃癌组织中表达均显著上调,对胃癌的发生、发展、侵袭起着重要的作用。miR-552、miR-592对胃癌的诊断价值高,可作为潜在的胃癌诊断标志物和治疗靶点。     

miR-509-3p及XIAP表达与肝癌细胞增殖侵袭能力影响

目的了解微小RNA(micro RNA,miR)miR-509-3p和XIAP表达对肝癌细胞增殖侵袭能力的影响及其作用机制。方法应用实时定量PCR(RT-PCR)检测107例肝癌患者肝癌组织和癌旁组织中miR-509-3p和XIAP表达,利用细胞增殖实验和Transwell侵袭实验观察转染miR-509-3p类似物和抑制剂的HepG2细胞、RNA干扰XIAP表达的HepG2细胞的增殖和侵袭能力。结果肝癌组织miR-509-3p与XIAP的相对表达量分别为0.415±0.098、1.657±0.147,癌旁组织miR-509-3p与XIAP的相对表达量分别为1.127±0.126、0.425±0.113,癌组织中miR-509-3p相对表达量显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=3.257,P=0.002),而XIAP的相对表达量显著偏高(t=4.201,P=0.000)。肝癌组织miR-509-3p与XIAP mRNA表达水平呈负相关(r=0.218,P=0.046)。与对照组相比,转染miR-509-3p类似物48、72、96及120 h时,HepG2细胞增殖率明显偏低,差异有统计学意义(均P0.05);与对照组相比,转染miR-509-3p抑制剂48 h后HepG2细胞增殖明显偏高(P均0.05),与对照组相比,转染miR-509-3p类似物后24 h HepG2细胞侵袭数目明显较低,分别为96.32±0.52、51.47±0.45,差异有统计学意义(t=2.263,P=0.021);与对照组相比,转染miR-509-3p抑制剂后24 h HepG2细胞侵袭数目明显较高,分别为94.65±0.42、120.14±0.45,差异有统计学意义(t=2.463,P=0.013)。结论 miR-509-3p与XIAP的表达与肝癌细胞的增殖与侵袭能力有关,miR-509-3p表达可能通过影响XIAP表达而发挥调节肝癌细胞增殖和侵袭能力的作用。     

肝癌组织中miR-200和Notch1蛋白表达的相关性

目的探讨肝癌组织中miR-200表达和Notch1蛋白表达的相关性。方法选择36例肝癌及对照癌旁组织,以荧光实时定量RTPCR检测miR-200在癌旁组织及肝癌的各级临床分期中的表达;Western印迹分析肝癌及癌旁组织中Notch1蛋白表达,并进行相关性分析。结果miR-200在肝癌组织中表达量比在癌旁组织中表达低,在转移癌组织中的表达量比非转移癌组织中低;而Notch1蛋白在癌旁组织、非转移癌组织、转移癌组织中的表达依次增加;Notch1蛋白表达和miR-200表达在肝癌组织中呈负相关(P0.01)。结论 Notch1是miR-200的标靶,可能是miR-200发挥肿瘤抑制作用的重要靶点。     

胆管癌患者miR-93的表达水平及其临床意义

目的探讨miR-93在胆管细胞癌(cholangiocarcinoma,CC)中的表达及其临床意义。方法选取我院60例外科行手术的胆管癌患者癌旁组织及癌组织标本以及细胞培养实验检测HIBEC、RBE、HUCCT1等miR-93表达水平;统计胆管癌临床特征与miR-93的表达水平的相关性;分析胆管癌患者miR-93的表达水平与预后的关系。结果胆管癌细胞株RBE、HUCCT1中miR-93相对表达量显著高于正常细胞株HIBE (P 0. 05)。胆管癌患者癌组织中的miR-93相对表达量与癌旁组织相比,显著高于癌旁组织中的表达量(P 0. 05)。在miR-93在癌组织表达与临床特征关系中发现,分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期均与胆管癌组织中miR-93表达水平有相关性(P 0. 05);影响患者预后的独立危险因素为miR-93高表达、TNM分期Ⅲ期及有淋巴结转移等,差异有统计学意义(P均0. 05)。miR-91表达未上升胆管癌患者随访3生存率明显高于miR-91高表达患者(P 0. 05)。结论在胆管癌患者中miR-93存在高水平表达,而且胆管癌的发展、发生及预后都可能与其关系密切。     

HBx及Beclin1在肝癌中表达的关系研究

目的了解HBx和Bcclin1在原发性肝癌、癌旁组织的表达水平,及其在HCC的发病机制中作用及其相互关系。方法收集经病理确诊的HCC患者64例,患者术前术经任何抗肿瘤治疗,采用免疫组化、Western印迹及实时PCR方法检测HBx及Beclin 1在肝癌组织及其癌旁组织中的表达情况,并将实验结果与患者的临床资料结合进行统汁学分析。结果 53例患者的肝癌组织HBx蛋白表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05);肝癌组织与癌旁组织中HBx与GAPDH相对灰度比值分别为1.54±0.13、0.62±0.07,肝癌组织表达量明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)、肝癌组织与癌旁组织中HBx表达量分别为0.78±0.10、0.11±0.01,差异有统汁学意义(P0.05)。51例患者肝癌组织Beclin1蛋白表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织与癌旁组织中Bcclin1与GAPDH相对灰度比值分别为1.52±0.11、0.98±0.05,肝癌组织表达量叫显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织与癌旁组织中Beclin1表达量分别为0.83±0.15、0.1 8±0.03,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HBx和Beclin1在HCC中高表达,两者相互作用且共同参与HCC的发生、发展过程,联合检测HBx和Beclin1对判断HCC的发生和转移有重要价值,是有潜力的肝癌治疗的候选靶基因。     

肝细胞肝癌组织中miR-21表达水平及与预后的相关性

目的探讨肝细胞肝癌患者组织中miR-21的表达水平及其预后意义。方法共收集50例肝细胞肝癌的患者,采用免疫组化法检测肝细胞肝癌及配对癌旁组织中miR-21的表达水平,分析miR-21蛋白的表达与患者临床病理特征及预后生存的相关性。结果肝细胞肝癌组织中miR-21表达水平显著高于癌旁组织(58.0%vs 6.0%,χ~2=31.07,P0.000 1)。miR-21高表达与临床T分期相关(χ~2=8.043,P=0.018);但miR-21蛋白表达水平与患者年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、N分期及分化程度均无显著关联(P0.05)。高表达miR-21的肝细胞肝癌患者总生存时间明显降低(P=0.032),但患者无疾病进展生存期差异无统计学意义(P=0.116)。结论肝细胞肝癌患者miR-21高表达可能作为肿瘤患者预后不良的重要标志物之一,而与肿瘤的发生及发展的机制性研究尚需进一步验证。     

miR-378靶向胰岛素样生长因子1类受体抑制肝癌细胞生长

目的 探讨miR-378对肝癌细胞生长增殖的影响及其机制. 方法 用miR-378过表达慢病毒感染肝癌细胞株HepG2和稳定表达HBV的肝癌细胞株HepG2.2.15,采用四甲基偶氮唑盐和克隆形成实验研究其在肝癌发生和发展中的作用.生物信息学方法预测miR-378的靶基因,荧光素酶报告实验验证靶基因,并用实时定量PCR方法和Western blot方法研究上调miR-378表达对其靶基因表达的影响,分析miR-378在肝癌中作用的机制.采用SPSS13.0软件进行统计分析,两组间比较采用t检验. 结果 与空载体感染组比较,miR-378过表达慢病毒感染组肝癌细胞的增殖活性降低和克隆形成减少,差异有统计学意义(P＜ 0.01或P＜ 0.05).用生物信息学方法预测胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)为miR-378的靶基因,荧光素酶报告实验结果显示,与对照组比,miR-378与IGF1R 3 '-UTR共转染组荧光酶活性下降了41.8％,差异有统计学意义(P＜0.01).上调肝癌细胞中miR-378表达后,IGF1R mRNA表达与对照组差异无统计学意义(P＞0.05),而IGF1R蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论 miR-378可抑制肝癌细胞的增殖和克隆形成,起抑癌基因的作用,其作用是通过抑制其下游靶基因IGF1R发挥的.HBV导致的miR-378下调表达可能是HBV相关性肝癌发生和发展的分子机制之一.     

slp-76基因在肝癌及其他消化系统肿瘤中的差异表达分析

目的分析slp-76基因在肝癌、食管癌、贲门癌、胃癌、结肠癌及其癌旁组织中的表达情况。方法应用微阵列技术筛选出slp-76基因在肝癌组织中高表达,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对上述消化系统肿瘤组织及其癌旁组织中的slp-76基因表达进行检测;应用Northern blot技术对肝癌组织及其癌旁组织中的slp-76基因表达进行检测。结果 RT-PCR证实slp-76在79.3%(24/29)的肝癌组织中高表达(P=0.005);在73.3%(22/30)的食管癌组织中高表达(P=0.005);在75%(21/28)的贲门癌组织中高表达(P=0.014);在75%(15/20)胃癌组织中高表达(P=0.005);在72.2%(13/18)结肠癌组织中高表达(P=0.008);Northern blot证实slp-76基因在肝癌组织中呈高水平表达。结论 slp-76基因在消化系统肿瘤中高表达,slp-76与上述消化系统肿瘤生长关系密切;在RNA水平,该基因在上述肿瘤间的表达无显著性差异(P=0.968)。     

Research and Evaluation of the Influence of the Construction of the Gate and the Influence of the Piston Velocity on the Distribution of Gases into the Volume of the Casting

Distribution of gasses to the cast volume and volume of pores can be maintained within the acceptable limits by means of correct setting of technological parameters of casting and by selection of suitable structure and gating system arrangement. The main idea of this paper solves the issue of suitability of die casting adjustment—i.e., change of technological parameters or change of structural solution of the gating system—with regards to inner soundness of casts produced in die casting process. Parameters which were compared included height of a gate and velocity of a piston. The melt velocity in the gate was used as a correlating factor between the gate height and piston velocity. The evaluated parameter was gas entrapment in the cast at the end of the filling phase of die casting cycle and at the same time percentage of porosity in the samples taken from the main runner. On the basis of the performed experiments it was proved that the change of technological parameters, particularly of pressing velocity of the piston, directly influences distribution of gasses to the cast volume.     

县级以下综合医疗机构医务人员对现代结控知识的认识现状调查

目的本文旨在了解医务人员现代结控知识掌握的现状及培训效果?方法于培训前后进行问卷调查,内容包括:病例发现?结核病诊断及化疗?结果培训前疫情报告和转诊,回答正确者占75.2%?71.7%;对临床表现?查痰和诊断依据,回答正确者占83.5%?42.5%?40.8%;抗痨药物?用药方法?化疗原则?短化方案?短化疗程?治愈标准六项,回答正确者占58%?14.4%?20.8%?9.2%?17%?24.3%?培训后再次调查发现,90%以上医务人员对现代结控基本知识已掌握?结论各级医务人员现代结控知识是很贫乏的,因此,对其进行系统培训是极为必要的,此项工作省时?省力?投入少,可收到事半功倍的效果。