长春地区人群HEV流行特点及病毒基因型分析

目的探讨长春地区戊型肝炎病毒（既v）在人群中的感染情况及戊型肝炎病毒系统进化关系。方法用抗，HEV抗体试剂盒检测人血清中的抗体；对部分血清和粪便标本用逆转录聚合酶链式反应的方法（RT-PER）检测HEV RNA，并对PER阳性产物进行克隆测序，然后将序列进行分析。结果长春地区各年龄组共4944份人血清中有1127份为抗-HEV抗体阳性，阳性率为22．79％；其中男性阳性率为34．27％，女性阳性率为10．88％。20岁以下人群感染率为1．00％左右，自20岁起男性和女性分别以每年接近10．00％和3．00％的速度平稳上升。戊肝感染者中男性与女性的抗体阳性率之比为3．3：1，随着年龄上升，人群中戊肝感染者的抗体水平也缓慢上升。我们从急性戊肝患者血清中检测到1份HEV RNA阳性样本，从急性戊肝患者粪便中检测到2份为HEV RNA阳性样本。序列分析显示从我们克隆出的3株HEV的核苷酸序列的同源性为91．2-99．1％。该3株序列在ORF 2区438bp同1-4型间核苷酸同源性分别为：77．8％-82．3％、77．2％-78．1％、77．2％-99．1％、85．2％-95．2％；结论HEV在各年龄段人群中均有流行，但在年龄段20岁人群后的流行率呈逐年增长趋势，说明长春地区HEW感染主要发生在成年后。人感染的HEV的基因序列与猪群戊型肝炎病毒的基因Ⅳ型同源性最高。由进化关系看在长春地区人HEV与猪HEV不能分为不同的两支。说明长春地区人HEV和猪HEV很可能是由同一支分支进化而来。     

2017-2020年上海市戊型肝炎病毒基因型特征研究

目的 研究2017-2020年上海市急性戊型肝炎(戊肝)患者及猪胆汁样本中获得的人源与猪源戊肝病毒(HEV)序列基因型特征.方法 对样本进行HEV抗体检测、HEV RNA荧光定量PCR检测、巢式PCR特异性扩增,对获得的HEV核苷酸序列进行深入研究,包括进化分析、基因型及亚型分析、同源性分析等.结果 从525份急性戊肝...     

TT病毒核酸的检测

目的初步测定献血员、慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎及慢性非甲～戊型，非庚型肝炎患者中ＴＴ病毒的感染情况，分析不同ＴＴ病毒感染者血清中ＴＴ病毒开放读码框架２区部分基因序列。方法以套式聚合酶链反应测定ＴＴ病毒核酸，取献血员（ＴＸ２）、慢性乙型肝炎（ＴＸ３）、慢性丙型肝炎（ＴＸ４）及慢性非甲～戊型，非庚型肝炎患者（ＴＸ１）各１例ＴＴ病毒ＰＣＲ阳性产物，以双脱氧核苷酸链终止法测定核苷酸序列。结果检测２０例献血员、２９例慢性乙型肝炎、３１例慢性丙型肝炎及３２份慢性非甲～戊型，非庚型肝炎标本，ＴＴ病毒核酸阳性者分别占５．０％（１／２０）、６．９％（２／２９）、２９．０％（９／３１）和３４．４％（１１／３２）。与Ｎ２２克隆相比，ＴＸ１、ＴＸ２、ＴＸ３与ＴＸ４在核苷酸水平的同源性分别为９５．４１％、９８．４７％、９７．４５％和９７．９６％。结论本组献血员、慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎及慢性非甲～戊型，非庚型肝炎患者中均存在ＴＴ病毒感染者。从本组不同ＴＴ病毒感染者血清中分离出４株ＴＴ病毒序列，其开放读码框架２区部分基因序列高度保守     

一起甲型病毒性肝炎暴发疫情的病原学诊断与基因分析

目的 查明引起2004年宁波局部地区甲型病毒性肝炎（甲肝）暴发疫情的病原并分析其基因特征。 方法 用酶联免疫吸附试验检测血清中的甲肝病毒IgM抗体（HAV IgM）和戊型肝炎病毒IgM抗体（HEV IgM），利用逆转录-聚合酶链反应（RT PCR）检测粪便样品中的HAV核酸（RNA）并扩增VP1基因，测序结果利用DNA star软件进行比对分析。 结果　172份血清样品中HAV IgM均为阳性，HEV IgM均为阴性。172份粪便样品中共检测到HAV RNA阳性样品74份，占43.0%。选择5份样品进行HAV VP1基因扩增并测序，测序结果经过比对后发现4株宁波株(NB2004-10、NB2004-11、 NB2004-51和 NB2004-71)的VP1基因是完全一致的；NB2004-75与以上4株的核苷酸的同源性为99.9％，氨基酸的同源性为99.7％；宁波株与HAV各基因型标准株比较， 与IA亚型毒株AH2的核苷酸和氨基酸的同源性最高， 分别为98.9％和99.7%～100.0％；与中国其他地区流行株比较，核苷酸和氨基酸的同源性波动于89.4%～96.7%和97.0％~100.0％。结论　引起这次肝炎暴发疫情的病原是甲肝病毒，其基因型为IA亚型，与日本株AH2、AH3亲缘关系最近，与中国其他地区流行株处于不同的进化簇上。     

HEV国内外研究现状及目前所面临的问提

戊型肝炎（Hepatitis E，HE，简称戊肝）是由戊型肝炎病毒（HEV）引起的病毒性肝炎，占急性肝炎总数的10％-20％。本病主要经粪一口途径传播，常引起暴发性流行。戊肝的潜伏期为10—60天，平均40天。戊肝主要经粪-口途径传播，即经消化道传播。也可经血液传播，但由于HEV在血液中存在的时间不及在粪便中存在的时间长，经血传播不是戊肝的主要传播途径。     

O139群霍乱弧菌ctxAB基因序列分析

目的 探讨O130群霍乱JX株的ctxAB基因序列，分析该株基因特点。方法 采用PCR扩增技术，检测含O130群霍乱标本，对ctxAB阳性者进行核苷酸序列测定，分析基因变异情况。结果 发现阳标本中，对其中一株进行了ctxAB基因序列测定，该序列与853（O139群）和N16961（Eltor)同源性为100％，与569B（古典型）同源性99．7％。结论 该研究证明本株与O1群（EVC）遗传关系最近，可能属于B型。     

逆转录聚合酶链反应检测广东地区高危人群庚型肝炎病毒RNA

为了解广东地区庚型肝炎病毒流行情况，为广东地区庚型肝炎的防治客观资料，以ＤＮＡＳＩＳ软件对Ｇｅｎｂａｎｋ收录的３株ＨＧＶ全序列；Ｕ４４４０２，Ｕ４５９６６和Ｕ３６３８０进行同源性比较，取高度保守的５‘非翻译区设计合成两对套式引物，建立检测ＨＧＶＲＮＡ的逆转录聚合酶链反应技术，并对其中一输血后非甲－戊型肝炎血清ＰＣＲ产物进行分子克隆与核苷酸序列分析以及鉴定其特异性。     

戊型肝炎IgM抗体诊断试剂的临床应用评价

目的评价2种戊型肝炎病毒（HEV）IgM抗体诊断试剂的可靠性。方法用捕获法试剂（E2 IgM）和间接法试剂（GL IgM）对349例临床诊断为急性戊型肝炎及急性非甲~戊型肝炎患者的血清进行HEV IgM检测。同时结合其HEV RNA检测结果作为戊型肝炎的确认标准,以此为依据对2种HEV IgM诊断试剂和以往常用的ELISA试剂的可靠性进行评估。同时检测69例散发性急性肝炎患者血清的HEV IgM及甲型肝炎病毒（HAV）IgM,分析HAV IgM对HEV IgM检测可能造成的干扰。结果E2 IgM试剂的敏感性为98.2%,特异性为100.0%;GL IgM试剂的敏感性仅为60.0%,特异性为91.7%;而传统诊断方法的敏感性为77.9%,特异性仅66.0%,三者差异有统计学意义（P〈0.05）。E2 IgM、GL IgM及传统诊断方法的总符合率分别为99.1%、85.5%和70.5%。HAV IgM有可能导致GL IgM试剂的假阳性。结论E2 IgM试剂是一种良好的戊型肝炎急性诊断试剂,在临床应用中优于GL IgM试剂和传统诊断方法。     

散发性戊型肝炎67例流行病学及临床特征分析

自1989年东京国际会议正式命名戊型肝炎（hepatitis E,HE）和HE病毒（hepatitis Evirus,HEV）至今已20年了,其流行病学和临床研究都有了很多新进展,现将我院散发HE67例患者相关资料报道如下,以探讨散发HE的感染途径、好发年龄、临床特征、影响转归因素。     

不同基因型戊型肝炎病毒株宿主选择性差异的基因突变分析

目的初步探讨影响不同基因型戊型肝炎病毒(HEV)能否跨物种传播的核苷酸或氨基酸突变位点的特点。方法从DNA序列Gen Bank数据库获得87株HEV全基因组序列,根据宿主选择不同的特点将其分为H类和Z类,其中H类为基因1型和2型,Z类为基因3型和4型。通过ALIGNX软件对两类中全部HEV全基因组序列进行比对分析,寻找影响两类HEV病毒株间宿主选择或致病性差异的可疑核苷酸或氨基酸突变位点。结果本研究共发现26个可疑的核苷酸或氨基酸突变位点,可能参与决定不同基因型HEV宿主选择性差异;这些突变位点分布在ORF1区有16个,ORF2区有7个,ORF3区有1个,5'UTR和3'UTR区分别各有1个,特别是G11A/C(5'UTR区)、T511S(E2s蛋白决定簇区)及E78D(ORF3区)相对于其他突变子更为重要。结论 26个可疑特异性核苷酸或氨基酸突变位点的发现为研究不同基因型HEV宿主选择性和致病性差异提供了重要线索。     

115例抗-HEV E2-IgM、IgG阳性感染者HEV RNA检测与基因分型研究

目的对戊型肝炎暴发人群中115例抗-HEV E2-IgM、IgG阳性感染者进行病毒RNA检测和基因分型研究,探讨其临床意义。方法对收集的暴发人群中115例抗．HEV E2-IgM、IgG均阳性人员血清和23例戊型肝炎患者粪便标本,采用通用引物进行逆转录-酶链聚合反应（RT-PCR）扩增戊型肝炎病毒Ⅰ、Ⅳ型基因片段,并进行测序和同源进化分析。结果从被检血清中扩增出8例戊型肝炎病毒阳性RNA基因片段,阳性毒株之间核苷酸同源性在97．3％～100％之间,进化树分析提示阳性毒株与戊型肝炎病毒基因Ⅳ型距离最近,与日本株和中国原型株的同源性分别为93．3％～95．3％和86．7％～87．3％;粪便标本中未能检测到戊型肝炎病毒RNA。结论本次急性戊型肝炎暴发流行由戊型肝炎病毒基因型Ⅳ型导致,暴发毒株与日本株有更近的亲缘关系;高灵敏度引物和取样时机是提高戊型肝炎病毒RNA检出率的前提。     

HEVⅣ型ORF2编码蛋白N-端合成肽的抗原性检测

目的　检测戊型肝炎病毒 (HEV)Ⅳ型开放阅读框架 2 (ORF2 )编码蛋白N 端表位的抗原性 ,寻找良好的抗原肽 ,以便用于HEV抗体测。方法　根据HEVORF2编码蛋白N 端中含有的抗原表位 ,从HEV中国株蛋白的氨基酸序列中选取 2 5～ 38位序列氨基酸 ,用固相化学合成法合成抗原肽 ,并用ELISA检测抗原性。结果　HEVⅣORF2编码蛋白N 端氨基酸顺序为2 5～ 38的抗原肽与急性期戊型肝炎病人血清有较高的反应性 ,与Genelab诊断试剂盒的符合率达 93.8%。结论　为提高HEV抗体的检出率 ,在包被抗原中应含有HEVⅣ型ORF2编码蛋白N 端的抗原肽     

2017年辽宁省人感染汉坦病毒G2片段基因序列特征分析

目的 了解2017年辽宁省肾综合征出血热（HFRS）患者感染汉坦病毒的（HV）的基因型别及变异情况。 方法 采集HFRS患者急性期血清,采用酶联免疫吸附试验筛选IgM抗体阳性标本,从阳性标本全血中提取HV的RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增G2基因片段并进行基因分型,对扩增产物进行核苷酸序列测定,利用DNAStar软件包分析。 结果 10份标本经RT-PCR提取扩增出的目的片段,4份为汉滩型（HTN型）,6份为汉城型（SEO型）。 扩增产物测序结果与已测得国内毒株及部分国际标准株比较,4份HTN型HV之间核苷酸同源性达到95.6% ~ 98.9%。 与HTN76–118株同源性最高,为89.3% ~ 90.1%,氨基酸同源性为98.4% ~ 99.2%。 6份SEO型HV间核苷酸同源性高达98.3% ~ 99.8%。 与80–39株同源性最高,为96.3% ~ 96.6%,推导氨基酸同源性为99.3% ~ 99.6%。 结论 辽宁省是以SEO型HV为主的SEO型和HTN型混合型疫区,病毒G2基因片段间高度同源,无明显变异,遗传物质相对稳定。      

戊型肝炎病毒IgA抗体的研究进展

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的经消化道传播的急性传染病,发病率逐年升高,目前尚无特效治疗方法,也无特异性被动和主动免疫制剂可供预防。在急性戊型肝炎患者中,血液或粪便中HEV RNA持续时间较短,操作复杂、成本高,不能在临床广泛开展。HE的诊断主要依靠血清HEV抗体检测,抗-HEV IgM是HE急性感染的诊断指标之一,类风湿因子等的存在会影响血清IgM的检测,造成假阳性。抗-HEV IgG一般在发病2周后可检测到,可持续1年甚至数年,因此抗-HEV IgG不能鉴别患者为HEV急性感染还是既往感染。有研究表明抗-HEVIgA是HE的急性指标,可代替或辅助现有IgM诊断试剂用于HE诊断,既增加了检测特异性,又能有效减少漏诊。     

非甲非戊型肝炎患者TT病毒感染的检测

目的 了解非甲非戊型肝炎患TT病毒感染状况。方法 采用套式PCR方法对44份临床诊断为急慢性非甲非戊型肝炎患的血清标本,进行TT病毒检测。结果 14例TTV-DNA阳性,检出率31．8％(14／44)。对TTV-DNA阳性标本的PCR产物进行克隆后测序,结果表明该序列与日本株相应位置核苷酸序列同源性为98％。结论 推测TT病毒可能为临床急慢性非甲非戊型肝炎病因之一。     

400例献血员TT病毒检测与分析

目的 探讨靖江地区献血员中TT病毒（TTV）感染情况。方法 用套式－聚合酶链反应（nested-PCR)对400名职业献血员作TT病毒检测。结果 发现阳性36名，阳性率为9％。从中随机取10名作序列分析，并与日本报道的N22克隆核苷酸序列相比较，发现同源性为89％－99．5％。结论 TTV检测对保障输血安全至为重要。     

戊型病毒性肝炎52例临床分析

世界上首次记载戊型病毒性肝炎（HE），始于1955～1956年在印度新德里发生的急性肝炎爆发流行。1980年Wong等证实为经肠道传播的非甲非乙型肝炎。1989年Reyes等用分子克隆技术获得本病病毒基因克隆，在当年国际病毒性肝炎学术会议上将其命名为成型肝炎病毒（HEV）［‘’。我国自1980年以来也有HE流行，保定地区亦有本病存在。现将1993年以来本院收治的52例散发戊型肝炎进行临床分析。1材料和方法1.至一般资料52例中，男38例（73.l％），女14例（26.9％），男：女为巴7：1。年龄18～6O岁，平均31岁，18～40岁者占80.8％。1.2方法52例均在…     

散发性戊型肝炎的临床和血清学特征

目的　探讨散发性戊型肝炎的临床和血清学特征。方法　对 117例散发性戊型肝炎的临床表现、血清学检查进行回顾性分析。结果　 6 0岁以上组肝功能TBil、DBil、GGT与 6 0岁以下组相比较 ,存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;117例单纯戊型感染 94例 (80 .3% ) ,甲、乙、戊型重叠感染 3例 (2 .6 % ) ,甲、戊型合并感染 10例 (8.5 % ) ,乙、丙、戊型重叠感染 1例 (0 .8% ) ,乙、丁、戊型重叠感染 2例 (1.7% ) ,乙、戊型重叠感染 7例 (6 .0 % )。 117例血清抗 HEV阳性 113例 ,其中 113例血清HEV RNA阳性 4 2例 (37.2 % ) ,余 4例血清抗 HEV阴性而血清HEV RNA阳性 (19例已知肝炎病毒标志物均阴性的急性肝炎患者 ,血清HEV RNA阳性 4例 (2 1.1% )。结论　散发性戊型肝炎老年患者黄疸发生率高 ,且淤胆现象多见 ;目前临床检测的抗 HEV是诊断戊型肝炎的主要方法 ,感染HEVⅣ型或HEV变异株的戊型肝炎 ,可用RT PCR方法检测HEV RNA确诊。     

365名供血者戊型肝炎病毒抗体的调查

我国供血者戊型肝炎病毒抗体（抗HEV）的调查资料甚少，现报道本市365名供血者（男203，女162）抗HEV的调查结果。抗HEV用间接ELISA检测，试剂由上海森雄科技实业有限公司提供，批号：960715。严格按试剂说明进行操作。检测仪器为伯乐公司550型酶标仪。检测结果365名供血者抗HEV阳性44例（12．05％），其中男性30例（8．22％），女性14例（3．84％）。近年来，文献报道血液透析和接受输血患者抗HEV阳性率分别高达10．9％和37．0％，［Lancet1994，344（8924）：746］明显高于其他人群，表明HEV有可能通过血液传播，以及处于亚临床…