烧伤患者外周血单个核细胞TLR2和TLR4表达的变化

目的观察烧伤患者外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4表达的变化。方法选取深II度以上烧伤30%~50%TBSA烧伤患者23例,伤后48 h取外周血20 mL,同时抽取健康献血者(设为对照组)12例,外周血20 mL。常规方法分离出单个核细胞,用异硫氢酸荧光素(FITC)标记的小鼠抗人TLR2抗体和藻红蛋白(PE)标记的小鼠抗人TLR4抗体对外周血单个核细胞进行免疫染色,流式细胞仪(FCM)测定FITC、PE阳性细胞率及其平均荧光强度(MFI)。结果烧伤后48 h,患者外周血单个核细胞TLR2-FITC阳性细胞数量上升,为(57.57±18.56)%,与对照组的(26.32±10.31)%相比,P<0.05;细胞表面TLR2-FITC荧光强度下降,TLR2-FITC MFI为58.5±18.76,低于对照组(69.79±23.42);TLR4-PE阳性率为(29.84±13.28)%,与对照组的(12.75±5.18)%相比,P<0.05;TLR4-PE MFI减弱,与对照组相比,P<0.05。结论烧伤患者外周血单个核细胞TLR2/4阳性数量均升高,而TLR2/4表达强度降低。     

PD-L1 抑制剂在非小细胞肺癌 治疗中的研究进展

程序性死亡分子配体1（PD-L1）抑制剂等免疫疗法是治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的一项重 大进展。但由于缺乏明确的生物标志物来选择最佳的受益人群,因此该抑制剂只在约20% 晚期NSCLC 患者 中起作用。与单药治疗比较,NSCLC 患者结合常规和/ 或靶向治疗显示更好的安全性和疗效。笔者总结几 种已批准用于NSCLC 治疗的抗PD-L1 药物,且强调抗PD-L1 治疗与化学疗法、血管内皮生长因子抑制剂、 靶向治疗,以及放射治疗等其他非免疫治疗相结合的临床研究进展。     

EGFR、pEGFR蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸化表皮生长因子受体(pEGFR)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和癌旁正常肺组织中的表达情况,探讨其临床意义.方法 采用免疫组化法检测140例NSCLC组织及癌旁正常肺组织中EGFR和pEGFR蛋白的表达.结果 EGFR和pEGFR蛋白在肺癌组织中的表达高于癌旁正常肺组织...     

表皮生长因子受体检测在非小细胞肺癌中的临床意义

非小细胞肺癌(NSCLC)是危害人类生命最常见的恶性肿瘤之一.表皮生长因子受体(EGFR)基因突变及过表达与NSCLC的发生、发展、侵袭等密切相关.EGFR突变是最有前途的NSCLC靶向治疗分子机制之一,EGFR检测指导选择合适的患者进行靶向治疗成为靶向治疗成败的关键.本文就EGFR检测方法及其在NSCLC中的应用作一...     

小细胞肺癌患者外周血中Th9细胞水平检测及其临床意义

目的: 检测小细胞肺癌(SCLC)患者血清中白细胞介素9(IL-9)的水平和外周血中Th9的细胞比例,探讨Th9在SCLC疾病进展过程中的作用。方法: 选择20例局限期SCLC患者(局限期SCLC组)、16例扩散期SCLC患者(扩散期SCLC组)和10名健康对照者(健康对照组)。ELISA法检测各组研究对象血清中IL-9水平,流式细胞术检测各组研究对象外周血Th9细胞在CD4⁺T细胞中所占比例。结果: SCLC组患者外周血中Th9细胞比例高于健康对照组(t=3.731,P<0.01),局限期SCLC患者外周血中Th9细胞比例低于扩散期SCLC组(t=2.825,P<0.01)。SCLC组患者血清IL-9水平高于健康对照组(t=4.001,P<0.01),局限期SCLC组患者血清中IL-9水平低于扩散期SCLC组(t=3.089,P<0.01);结论: Th9可能通过分泌IL-9直接促进SCLC的疾病进展,外周血中Th9细胞和IL-9可能成为评价小细胞肺癌的分子标志。     

Th9细胞对非小细胞肺癌患者CD_8~+T 细胞抗肿瘤活性的调控作用

目的:观察并分析Th9细胞及其分泌的白细胞介素-9(IL-9)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者CD_8~+T细胞抗肿瘤活性的影响。方法:选择32例NSCLC患者(肺癌组)和11例健康对照者(对照组)。分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞(PBMCs)、肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液(BALF)及对照组血浆和PBMCs,检测Th9细胞比例、IL-9水平和转录因子PU.1 mRNA相对表达量。纯化肺癌组Th9细胞、CD_8~+T细胞和原代NSCLC细胞,使用重组IL-9刺激CD_8~+T细胞,观察细胞增殖和分泌穿孔素、颗粒酶B水平。建立Th9细胞、CD_8~+T细胞与原代NSCLC细胞的共培养细胞,观察IL-9对CD_8~+T细胞的细胞杀伤功能和非细胞杀伤功能的影响。组间比较采用t检验、配对t检验或Wilcoxon配对检验。结果:肺癌组外周血Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于对照组(均P<0.0001),肺癌组肿瘤部位分离的BALF中Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于非肿瘤部位(均P<0.0001)。IL-9刺激可增加肺癌组CD_8~+T细胞增殖和穿孔素、颗粒酶B分泌,IL-9刺激还可提升肺癌组CD_8~+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,主要表现为细胞死亡比率增加、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌升高。Th9细胞也可提升肺癌组CD_8~+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,抗IL-9中和抗体可抑制Th9细胞对CD_8~+T细胞功能的调控作用。结论:Th9细胞可能通过分泌IL-9在体外增强NSCLC患者CD_8~+T细胞的抗肿瘤功能。     

TLR4与NF-kB在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的检测TLR4与NF—kB在非小细胞肺癌（NSCLC）组织和正常肺组织中的表达情况,探讨其临床意义。方法采用免疫组化方法检测TLR4与NF—kB在49例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中的表达,分析TLR4和NF—kB与非小细胞肺癌病理分级。临床分期、淋巴结转移等的相关性以及TLR4和NF—kB之间的相关性。结果TLR4和NF—kB在NSCLC组织中的表达阳性率分别为55．1％和69．4％,均显著高于正常肺组织中的15％和10％（P〈0．05）。同时还发现TLR4的表达与肿瘤的分化程度密切相关（P〈0．05）,NF—kB在腺癌中的表达明显高于鳞癌（P〈0．05）,TLR4和NF—kB的表达呈正相关（P〈0．05）。结论TLR4与NF—kB可能在NSCLC的发生、发展过程中起重要作用。     

白细胞介素-9及其受体在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨白细胞介素-9?(IL-9)?及其受体?(IL-9R)?在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义.方法 收集2017年1月至2018年12月中国医科大学附属盛京医院胸外科110例手术切除并经病理确诊的非小细胞肺癌癌组织及其癌旁正常石蜡包埋组织标本,并收集其中19例非小细胞肺癌的癌组织及其周围正常的新鲜组织标本....     

尖锐湿疣患者外周血单个核细胞 TLR 2、3、9 mRNA表达的研究

目的 从天然免疫角度探讨尖锐湿疣发病机制.方法 收集尖锐湿疣患者45例及健康对照者25例,用实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞(PBMCs)TLR 2、3、9 mRNA的表达.结果 尖锐湿疣组PBMCs TLR 2、3、9 mRNA表达水平与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 尖锐湿疣患者循环中的天然免疫受体TLR 2、3、9可能并未在抗尖锐湿疣病毒感染的免疫过程中起作用.     

阿米福汀在局部晚期非小细胞肺癌放疗中的作用研究

目的 探讨阿米福汀在局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)放疗中对近期疗效的影响及降低放射性食管炎和放射性肺炎的作用.方法 2008年1月-2010年2月我院放疗科收治62例局部晚期NSCLC患者,采用随机数字表法分为单纯三维适形放疗组(对照组)和阿米福汀+三维适形放疗组(试验组).试验组每次放疗前15～30 min给予阿米福汀300 mg/m2,静脉滴注.每周放疗5次,持续6周.放疗结束后6周评价两组患者的近期疗效.放疗期间每周记录1次放射性食管炎、放射性肺炎的发生率.结果 两组共44例患者完成了预定试验,对照组23例,试验组21例.对照组完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)11例,客观有效率为52%;试验组CR 2例,PR 12例,客观有效率为67%,两组客观有效率比较差异无统计学意义(χ2=0.95,P＞0.05).对照组累计发生放射性食管炎15例(65%),放射性肺炎16例(70%);试验组累计发生放射性食管炎和放射性肺炎各5例(24%),两组放射性食管炎和放射性肺炎累计发生率比较,差异均有统计学意义(P值分别为0.017和0.003).结论 阿米福汀可以降低 NSCLC放疗中放射性食管炎和放射性肺炎的发生率,但不降低放疗的近期疗效.     

Modulation of TLR9 on anti-tumor immune responses of peripheral blood mononuclear cells from patients with non-small-cell lung cancer

OBJECTIVE: To assess the modulation of TLR9 on anti-tumor immune responses in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from patients with non-small-cell lung cancer (NSCLC). METHODS: PBMCs were isolated from 36 NSCLC patients. Lung cancer cells were isolated from these patients and further enriched. PBMCs were cultured in RPMI-1640 medium (blank control group), and medium with cytosine guanine oligodeoxynucleotide (CpG ODN, an TLR9 agonist) or control ODN for 72 h; and then flow cytometry was used to examine the expression of CD69 antigen on the surface of CD3 cells, [3H]-thymidine incorporation method was used to examine the cell proliferation, and the IFN-alpha level in the supernatant was measured. Another PBMCs were cultured in medium with interleukin (IL)-1 and then CpG ODN, control ODN, and CpG ODN + chloroquine or inhibitory ODN were added respectively for 24-48 h. Then the IFN-alpha in the supernatant was measured. Subsets were assessed by flow cytometry and the expression of TLR9-mRNA in freshly isolated PBMC was detected by RT-PCR. The production of interferon (IFN)-alpha in the PBMCs was measured by ELISA. The proliferation of the PBMCs was determined by [3H]-thymidine incorporation. The PBMCs co-cultured with CpG ODN and autologous lung tumor cells treated with mitomycin C were used as effector cells, and K562 cells and autologous tumor cells were used as target cells flow cytometry was used to detect the capacity of PBMCs to kill autologous lung tumor cells and K562 cells. Meanwhile we investigated the intracellular expression of IFN-gamma and IL-4 in CD8+ T. RESULTS: The expression level of TLR9 of the PBMCs from patients was not significantly different from that of the PBMCs from the healthy donors. The proportion of CD69 antigen expressing CD3+ T cells of the CpG ODN group was (39.5 +/- 8.9)%, significantly higher than those of the blank control group [(8.8 +/- 1.2)%, t = 40.30, P = 0.00] ands control ODN group [(10.6 +/- 1.0)%, t = 41.85, P = 0.00]. Examination with beta liquid scintillation counter showed that the cpm value of the CpG ODN group was (1.61 +/- 0.20) x 10(4), significantly higher than those of the blank control group [(0.27 +/- 0.14) x 10(4), t = 20.43, P = 0.00] and control ODN group [(0.34 +/- 0.13) x 10(4), t =20.20, P = 0.00]. Chloroquine and inhibitory ODN dose-dependently inhibited the IFN-alpha levels in the supernatant. The CD4 + T/CD8 + T of the CpG ODN group was (3.44 +/- 0.20), significantly higher than those of the control ODN group (1.73 +/- 0.27, t = 19.85, P = 0.00) and blank control group (1.69 +/- 0.13, t = 29.32, P = 0.00). The IFN-gamma positive CD8 + T cells of the CpG ODN group was (18.5 +/- 4.2)%, significantly higher than those of the control ODN group [(4.2 +/- 1.0)%, t = 24.12, P = 0.00] and blank control group [(3.1 +/- 1.2)%, t = 25.1, P = 0.00]. There was no significant differences in the proportion of IL-4 positive CD8 + T cells among different groups. When the E/T was 40:1 the killing capacity of PBMCs against the K562 cells was (19.5 +/- 1.0), significantly higher than those of the control ODN group (7.9 +/- 1.1, t = 19.9, P = 0.00) and blank control group (5.1 +/- 1.6, t = 21.9, P = 0.00), and the killing capacity of PBMCs against the autologous lung tumor cells was (29.8 +/- 2.1), significantly higher than those of the control ODN group (8.1 +/- 0.9, t = 36.9, P = 0.00) and blank control group (5.7 +/- 1.6, t = 35.7, P = 0.00). CONCLUSION: TLR9 signal takes part in the immunomodulation of PBMCs. The activation of TLR9 results in enhanced anti-tumor response in the PBMCs against autologous lung cancer cells and K562 cells.     

血清肿瘤标志物联合检测对非小细胞肺癌早期诊断的临床价值

采用电化学发光法和酶联免疫法检测111例非小细胞肺癌、103例肺部良性疾病、97例正常人糖类抗原125（CA125）、血清细胞角蛋白19（CYFRA21-1）、组织多肽抗原（TPA）、人鳞状细胞癌相关抗原（SCC-Ag）的水平.非小细胞肺癌患者CA125、CYFRA21-1、SCC、TPA水平明显高于正常人和肺部良性疾病患者（P＜0.01）;四项联合检测的敏感性及特异度均明显高于单项检测;其测定水平与临床分期、病理类型和分化程度相关.     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗老年晚期非小细胞肺癌临床分析

对2006年2月至2010年9月收治的70例年龄≥65岁接受厄洛替尼或吉非替尼治疗的晚期非小细胞肺癌患者的疗效及安全性进行回顾性分析。总有效率31．4％（22／70）,控制率84．3％（59／70）,中位无进展生存期8．0个月,中位生存期13．5个月（P〈0．05）,1年生存率54．3％（38／70）;女性的有效率（42．8％）和控制率（94．3％）优于男性（20．0％和74．3％）（P〈0．05）,非吸烟和体力状况〈2分者预后好;不良反应主要为轻度皮疹及腹泻。     

非小细胞肺癌患者淋巴结分子分期的临床病理研究

目的探讨逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测非小细胞肺癌淋巴结微转移的可行性。方法术中将每枚淋巴结平均分成两半,一半淋巴结进行HE染色病理检查;另一半淋巴结,按区域混合,用于RT-PCR。如果一枚淋巴结HE染色证实有显性转移,该患者同一区域的其他淋巴结不再接受RT-PCR。结果（1）25例肺癌患者中共195枚淋巴结接受了HE染色检查,9例共30枚淋巴结中发现有显性转移,无一枚淋巴结检出微转移。（2）39组HE染色阴性的区域淋巴结混合组织中,11组RT-PCR呈阳性。（3）16例常规病理PN现了0期患者中,6例肺门淋巴结出现了微转移;另9例常规病理PN1期患者中,5例出纵隔淋巴结的微转移,差异有统计学意义（x^2=54．063,P=0．0043）。结论（1）HE染色病理能准确地检测出非小细胞肺癌淋巴结中的显性转移灶,而不易发现隐匿性微转移灶。（2）RT-PCR能提高非小细胞肺癌淋巴结微转移的检出率,并可对部分Ⅰ、Ⅱ期患者重新进行分子分期。     

蛋白酪氨酸磷酸酶1B在非小细胞肺癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶IB(PTP1B)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其对预后的预测价值.方法 运用免疫组织化学EnVision法,检测2000年6月至2006年10月南京军区南京总医院手术切除的经常规病理证实的63例NSCLC肺癌组织和9例肺炎组织中PTP1B的表达并进行统计学分析,探讨其与临床病理特征和预后的关系.结果 PTP1B在肺炎组织中均为阴性表达,在NSCLC组织中的表达阳性率为50.8％(32/63),显著高于肺炎组(x2=8.229,P=0.004);PTP1B在NSCLC组织中的表达与性别、年龄、吸烟、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移及化疗与否无明显相关,而与pTNM分期显著相关(X2=6.426,P=0.040).Kaplan-Meire生存分析显示,PTP1B表达与肺癌患者的总生存期明显相关(Log-rank,P=0.047).多因素Cox回归分析显示PTP1B的表达是影响NSCLC预后的独立因素(HR=2.050,P=0.044),pTNM分期也是影响NSCLC独立预后因素(HR =3.631,P=0.000).结论 PTP1B在肺癌发生发展中起重要的作用,PTP1B及pTNM分期是NSCLC独立的预后因素.     

急性胰腺炎患者外周血单核细胞 TLR9 mRNA 的表达及意义

目的：观察急性胰腺炎（AP）患者外周血单核细胞（PBMCs）Toll样受体9（TLR9）mRNA的表达情况。方法收集52例发病24 h内的AP患者,采集第1、3、5天外周乙二胺四乙酸二钾（EDTAK2）抗凝静脉血,提取血浆低温冻存,用于成批检测胰弹性蛋白酶、促炎细胞因子、抗炎细胞因子等。同法采集其治愈后2～3个月的外周EDTAK2抗凝静脉血行上述检测,作为相应指标的基准水平值。分离外周血单核细胞用于随后成批作逆转录聚合酶链反应（RT‐PCR）检测 TLR9 mRNA的表达变化规律。同法采集其治愈后3个月的外周EDTAK2抗凝静脉血行上述检测,作为相应指标的基准水平值。最终将成功采得治愈后3个月血液标本的前36例患者纳入最终研究。结果 AP患者的外周血PBMCs TLR9 mRNA相对含量高于其痊愈后3个月的基线水平（P＜0．05）。AP患者的外周血PBMCs TLR9 mRNA相对含量表达改变与胰弹性蛋白酶、促炎细胞因子水平呈正相关,与抗炎细胞因子无相关性。结论 AP患者的外周血PBMCs TLR9 mRNA表达显著升高并与促炎细胞因子表达同步上调,提示AP的发生、发展可能通过TLR9介导。     

非小细胞肺癌中MMP-9、TIMP-1的表达与临床病理关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理学特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测41例NSCLC标本及19例癌旁组织中MMP-9、TIMP-1的表达水平,并探讨其与NSCLC的临床病理学特征之间的关系。结果:41例NSCLC中,MMP-9和TIMP-1的阳性表达率分别为65.9%和58.5%,MMP-9和TIMP-1的高表达与淋巴结转移、病理类型显著相关(P<0.05)。结论:MMP-9、TIMP-1与NSCLC侵袭转移密切相关。     

非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体与磷酸化Akt蛋白的表达及其意义

目的 评价非小细胞肺癌(NSCLC)标本中表皮生长因子受体(EGFR)与其信号传导通路下游的磷酸化Akt(p-Akt)蛋白质表达的意义.方法 制作189例非小细胞肺癌标本的组织微阵列,运用免疫组织化学方法检测肺癌组织中的EGFR和p-Akt蛋白质的表达,分析该两种蛋白表达与患者预后生存之间的关系.结果 EGFR在NSCLC中的阳性表达率为54.5%(103/189),单因素分析提示其表达程度与性别(x2=4.267,P=0.039),病理类型(x2=14.749,P=0.002),分化程度(x2=6.295,P=0.043)以及病理分期(x2=9.318,P=0.025)相关,而Logistic多因素回归分析显示EGFR表达仅与病理类型之间的相关性具有统计学意义(P=0.047).p-Akt在NSCLC中的阳性表达率为51.3%(97/189),其阳性表达率与各临床病理特征无关(P＞0.05).二者阳性表达均与预后无关(P值分别为0.972和0.903).结论 NSCLC中EGFR和p-Akt蛋白质阳性表达率对患者预后无提示意义,尚不能以EGFR或p-Akt蛋白质表达作为NSCLC分子分期或判断预后的指标.     

非小细胞肺癌外周血中CK19mRNA与LUNXmRNA检测的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血细胞角蛋白19(CK19)及肺特异性蛋白X(LUNX)的表达,探讨其对检测NSCLC微转移的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测30例NSCLC患者及15例健康人外周血CK19mRNA及LUNXmRNA的表达。结果:NSCLC患者外周血中CK19mRNA及LUNXmRNA的阳性表达率分别为30%及13.3%,而对照组外周血中均无表达,外周血CK19mRNA及LUNXmRNA的表达与临床分期密切相关,与病理类型无关。结论:CK19及LUNX均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为敏感的分子标志物,联合检测有助于提高检测结果的阳性率。