大鼠慢性酒精性肝损伤及肝纤维化改变观察

本文通过实验每日予大鼠灌食白酒建立了慢性酒精性肝损伤模型 ,并系统地观察大鼠慢性酒精中毒时肝脏病理变化及肝纤维化情况。资料与方法一、实验动物取SD大鼠 48只 ,雌雄各半 ,体重 15 0～ 2 5 0 g。由浙江大学湖滨校区动物中心提供。二、实验方法(一 )分组及慢性酒精染毒造模　 48只大鼠随机分为 2组 ,均为雌雄各半。观察组 3 6只 ,用红星牌二锅头 (北京酿酒总厂生产 ,约为 10 .2mol/L酒精溶液 )平均以 1.5ml/10 0 g的剂量每日早晨灌注 1次 ;对照组 12只则以等量 0 .9%氯化钠灌注。实验期间各组大鼠均予以饮用水及全价营养颗粒饲料喂养…     

秋水仙碱抗大鼠慢性肝损伤及肝纤维化的实验研究

观察秋水仙碱对四氯化碳等复合因素所致慢性肝损伤及肝纤维化的影响,发现秋水仙碱能显著降低ALT(173.6±90.7u/L)、AST(167.8±58.4u/L),升高白蛋白水平(28.1±5.2g/L),病理对照组ALT、AST、白蛋白分别为236.1±69.4u/L、261.5±51.4u/L、19.8±3.7g/L,P<0.01。肝组织羟脯氨酸含量显著下降(22.78±2.75μg/mg肝组织),病理对照组为28.79±1.65μg/mg肝组织,P<0.01。但在降低实验大鼠死亡率和病理损害方面,与病理组比较无显著性差异(P>0.05)。     

肝损伤及肝纤维化的保护作用研究进展

各种致病因子作用于肝组织后，可直接导致肝细胞不同程度的损害，引起肝细胞的损伤、再生、肝纤维化等，最终导致肝功能不全，晚期则发展为肝功能衰竭。关于肝损伤和肝纤维化机制及对其防治的研究，近年来已成为国内外生物学、医学研究的热点之一。本文从对肝损伤保护作用和肝纤维化保护作用两个方面的国内外研究现状进行探讨，以期达到对肝损伤和肝纤维化保护作用的目的。     

RNA干扰与抗肝纤维化治疗前景

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来兴起的一项新技术,它可高效阻抑靶基因表达,不仅可用于研究基因功能,更是一种高效、特异的治疗手段。现就RNAi现象的发现、RNAi机制、意义及抗肝纤维化治疗前景作一简介。     

吡喹酮对日本血吸虫病肝纤维化的治疗作用及宿主miRNA表达变化

目的研究吡喹酮对日本血吸虫虫卵引起的肝纤维化的治疗作用及其可能的机制。方法选用BALB/c小鼠建立日本血吸虫感染小鼠模型,实验组以250 mg/(kg·d)吡喹酮连续用药3 d进行杀虫,再以600 mg/(kg·d)连续给药30 d进行抗纤维化治疗;对照组仅进行吡喹酮杀虫。以肝组织羟脯氨酸含量等指标评定小鼠肝纤维化的程度,并通过实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测各组肝组织中某些微小RNA(microRNA,miRNA)的表达水平。各组检测结果以t检验进行统计学分析。结果经过吡喹酮治疗后,小鼠肝脏羟脯氨酸含量等肝纤维化指标明显降低,小鼠肝脏羟脯氨酸含量:感染后第75天,感染组、杀虫组、治疗组依次为(0.86±0.07)、(0.66±0.06)、(O.25±0.05)mg/g肝湿重,治疗组低于感染组和杀虫组(t=12.86,P0.01)。同时小鼠肝脏的部分miRNA表达水平发生了明显改变,治疗组与杀虫组相比较,Col I、miR-223、miR-146b、miR-142-5p、miR-199a-5p、miR-34c*、miR-195依次下调了62%、38%、75%、77%、40%、54%和56%。结论吡喹酮对日本血吸虫病肝纤维化有一定的治疗作用,其作用可能与调节某些宿主miRNA的表达水平有关。     

微小RNA与脏器纤维化的研究进展

微小RNA（miRNA）是一类长18～24个核苷酸的内源性非编码小RNA,在转录后水平调控靶基因的表达。miRNA参与细胞增殖、分化、凋亡及肿瘤形成等生物学过程。近年来发现,miRNA也参与心肌、肾脏和肝脏的纤维化过程,该文对miRNAs生物学特征及其在脏器纤维化过程中的作用的相关研究进展作一综述。     

水砷暴露大鼠肝损伤和肝纤维化模型的建立

目的:建立水砷暴露致大鼠肝损伤及肝纤维化的动物模型,为砷中毒致肝损伤及肝纤维化的机制研究和防治提供较好的实验平台.方法:80只大鼠被随机分成正常对照组和模型组,对照组给予普通饲料和自来水,模型组给予普通饲料和砷水(100 mg/L).分别于第1、2、3、4月末各随机处死10只,检测血清样本中谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)的含量;取部分肝组织处理后于光镜和电镜观察,了解肝组织病理改变:并应用图像分析法进行Masson染色纤维化面积半定量分析.结果:砷暴露1 mo.大鼠肝组织HE染色可见细胞水样变性、脂肪变性及气球样变性.汇管区见炎症细胞浸润,部分肝细胞坏死.但肝小叶结构尚完整.砷暴露3、4 mo后大鼠肝组织损伤明显加重,并可见汇管区纤维组织增生,纤维条索形成,肝纤维化趋势明显.电镜下可见砷暴露组大鼠肝脏组织细胞核形状改变,核膜扩张并且不完整,线粒体肿胀,边界不清,极消失.砷暴露大鼠血清ALT、AST的结果比正常对照组增高,ALT雀3、4 mo后增高更明显(69.36±15.70 U/L,104.49±16.86 U/Lvs50.68±4.31 U/L,均P<0.05).模型组纤维化面积明显增大,造模2、3、4 mo后肝组织纤维化面积与正常对照组比较差异有统计学意义(0.48±0.15,0.57±0.11,1.07±0.22vs0.21±0.13,均P<0.05);造模4 mo后肝组织纤维化面积与造模1、2、3 1310后比较差异也有统计学意义(P<0.05).结论:成功建立了水砷暴露致肝损伤、肝纤维化的动物模型,为砷暴露致肝损伤、肝纤维化的研究提供了较理想的模型.     

大黄Zhe虫丸抗慢性肝损伤及肝纤维化作用的实验研究

本文以ＣＣｌ４等因素所致大鼠肝损伤、肝纤维化为模型，以血清ＡＬＴ活民生、Ａｌｂ含量、肝Ｈｙｐ含量、肝组织ＨＥ和胶原染色光镜观察等为观察内容，分预防和治疗实验观察大黄Ｚｈｅ虫丸的防治作用，并设西药秋水仙碱组对照。结果表明：大黄Ｚｈｅ虫丸有较显著的抗慢性肝损伤作用及一定的抗肝纤维化作用。在抗肝损伤，保护肝功能产秋水仙碱为优；但在抗肝纤维化方面，高不及秋水仙碱作用强。     

双环醇治疗慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化的临床研究

目的研究双环醇对慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)肝纤维化的治疗作用。方法以双环醇治疗慢性乙肝患者20例,疗程6个月。分别于治疗前后检测患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)及血清纤维化指标层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)和透明质酸(HA)水平。同时经皮肝活检观察治疗前后肝脏组织病理学变化。结果双环醇可以显著降低慢性乙肝患者血清ALT和GGT水平,复常率分别达95%和70%,同时可以明显降低慢性乙肝患者血清LN、CⅣ和PⅢP水平,尤其PⅢP和CⅣ水平与肝组织纤维化程度呈明显正相关(相关系数分别为0.653和0.530,P<0.01)。结论双环醇可以减轻慢性乙肝患者肝脏炎症反应,保护肝细胞和抑制肝纤维化。     

FibroScan对慢性药物性肝损害肝纤维化的诊断价值研究

目的 探讨FibroScan对于慢性药物性肝损害(drug-induced liver injury,DILI)肝纤维化的诊断准确性.方法 选择2009年4月-2011年1月在我院住院的经肝脏穿刺病理诊断的慢性DILI患者49例,进行FibroScan检测得到肝脏硬度测量(liver stiffness measurement,LSM)值.以肝脏活体组织检查病理结果为“金标准”绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(area under the receiver operating characteristic curve,AUROC),以评价FibroScan对慢性DILI肝纤维化的诊断价值.结果 LSM值与肝脏病理分期呈正相关,Kendall相关系数为0.607,P＜0.001.FibroScan诊断慢性DILI肝纤维化≥S2期、≥S3期、S4期的AUROC分别为0.878、0.944、0.993.结论 FibroScan对诊断慢性DILI肝纤维化程度有较好的准确性.     

慢性乙肝患者脯氨酸肽酶与肝纤维化的关系分析

目的了解血清脯氨酸肽酶（prolidase,PLD）与乙型病毒性肝炎肝纤维化程度的关系。方法测定191例乙型肝炎患者血清中PLD水平,利用ROC曲线分析ALT、AST、AST/ALT和PLD的面积,判断PLD的最优截断点并计算不同标准的灵敏度、特异度、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）、Youden指数。结果慢性乙型肝炎患者PLD值随着肝纤维化严重程度升高,S2-4期（明显肝纤维化）明显高于S0-1期（无明显肝纤维化）（P〈0.01）。ALT、AST、AST/ALT和PLD的ROC曲线下面积分别为0.614、0.648、0.655和0.807。PLD的最优截断点约为1 250 U/L,灵敏度和特异度分别为75.6%和75.2%。结论血清PLD测定对于慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度判定有一定的临床价值。     

内质网及氧化应激在大鼠慢性肝损伤中的变化

目的研究内质网应激相关基因、氧化应激指标在四氯化碳诱导的大鼠慢性肝损伤中的变化。方法四氯化碳制备大鼠慢性肝损伤模型,通过测定大鼠血清ALT、AST水平,采用HE染色和TUNEL法观察肝组织病理形态和肝细胞凋亡改变,评价成模效果。检测大鼠肝脏葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、GRP94、血红素加氧酶（HO）-1 mRNA表达及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）变化。结果四氯化碳成功诱导了大鼠慢性肝损伤,与对照组相比,大鼠肝脏GRP78、GRP94、HO—1的表达量、MDA含量均明显增加,SOD活性、还原型GSH显著降低。结论四氯化碳诱导大鼠慢性肝损伤时,内质网应激相关基因的表达增加,氧化应激指标亦发生改变,表明内质网应激、氧化应激共同参与了大鼠慢性肝损伤过程。     

Overexpression of NK2 promotes liver fibrosis in carbon tetrachloride‐induced chronic liver injury

Background/Aims: Hepatocyte growth factor (HGF) inhibits liver fibrosis induced by carbon tetrachloride (CCl₄) in animal models. NK2 is a natural splice variant of HGF, but its in vivo function remains to be elucidated. We investigated the in vivo effects of NK2 on CCl₄‐induced liver fibrosis. Methods: NK2 transgenic mice and wild‐type (WT) mice were injected intraperitoneally with CCl₄ twice a week. The extent of hepatic fibrosis was evaluated by Azan–Mallory staining. Expression levels of mRNAs of transforming growth factor‐β1 (TGF‐β1) and matrix metalloproteinase‐13 (MMP‐13) were examined by real‐time polymerase chain reaction. The protein levels of α‐smooth muscle actin (α‐SMA), c‐Met and its phosphorylation were determined by Western blot analysis. Results: Liver fibrosis was significantly more severe in NK2 transgenic mice than in WT mice. CCl₄ administration increased the expression levels of TGF‐β1 mRNA and α‐SMA protein, and decreased the expression of MMP‐13 mRNA in livers of NK2 transgenic mice compared with those of WT mice. c‐Met protein expression in the liver was compatible with the degree of fibrosis. As for c‐Met activation, no difference was found between NK2 and WT livers. Conclusion: Overexpression of NK2 acts as an antagonist of HGF and promotes liver fibrosis in CCl₄‐induced chronic liver injury.     

Non-invasive assessment of liver fibrosis in chronic liver diseases： Implementation in clinical practice and decisional algorithms

Chronic hepatitis B and C together with alcoholic and non-alcoholic fatty liver diseases represent the major causes of progressive liver disease that can eventually evolve into cirrhosis and its end-stage complications, including decompensation, bleeding and liver cancer. Formation and accumulation of fibrosis in the liver is the common pathway that leads to an evolutive liver disease. Precise definition of liver fibrosis stage is essential for management of the patient in clinical practice since the presence of bridging fibrosis represents a strong indication for antiviral therapy for chronic viral hepatitis, while cirrhosis requires a specific follow-up including screening for esophageal varices and hepatocellular carcinoma. Liver biopsy has always represented the standard of reference for assessment of hepatic fibrosis but it has some limitations being invasive, costly and prone to sampling errors. Recently blood markers and instrumental methods have been proposed for the non-invasive assessment of liver fibrosis. However, there are still some doubts as to their implementation in clinical practice and a real consensus on how and when to use them is not still available. This is due to an unsatisfactory accuracy for some of them,and to an incomplete validation for others. Some studies suggest that performance of non-invasive methods for liver fibrosis assessment may increase when they are combined. Combination algorithms of non-invasive methods for assessing liver fibrosis may represent a rational and reliable approach to implement non-invasive assessment of liver fibrosis in clinical practice and to reduce rather than abolish liver biopsies.     

大鼠非酒精性脂肪性肝纤维化形成过程中骨桥蛋白的表达及其意义

目的 通过观察非酒精性脂肪性肝纤维化形成过程中肝组织内骨桥蛋白(OPN)的变化规律,探讨OPN在非酒精性脂肪性肝纤维化形成过程中的作用. 方法选用纯系Wistar雄性大鼠56只,体质量180～200g,随机分为正常对照组和高脂饮食4、8、12,16、20、24周组(其中每组各8只).肝组织常规进行HE及Masson三色胶原染色,免疫组织化学染色检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白的表达,RT-PeR、Western blot观察肝组织中OPN动态变化.结果 与正常对照组相比,高脂饲料组大鼠肝脏内OPN含量明显升高,随着脂肪肝程度的加重,OPN表达逐渐增强,mRNA及蛋白质表达比较,F值分别为7.30和7.15,尸值均<0.01;与α-平滑肌肌动蛋白表达及肝组织胶原纤维面积百分比呈显著正相关(r值分别为0.94和0.82,P值均<0.01).结论 在非酒精性脂肪性肝纤维化形成过程中,OPN在肝组织中表达显著上调,可能在非酒精性脂肪性肝纤维化的形成过程中发挥重要作用.