血小板活化因子受体拮抗剂的神经保护作用

目的：探讨血小板活化因子(platelet-activating factor，PAF)所致的神经元损伤是否通过PAF受体而起作用，PAF受体拮抗剂对神经元损伤是否具有保护作用。方法：实验于2003-05／2004-05在南京大学医学院附属鼓楼医院神经科研究室和美国约翰霍普金斯大学Dr．Tao实验室完成。使用原代野生型小鼠皮质神经元细胞培养系统；不同剂量PAF处理神经元细胞24h，并经PAF拮抗剂5μmol／L BN52021预处理；碘化物／钙黄绿素染色检测细胞凋亡，MTT法测定神经元生存能力。结果：0．3和0．6μmol／L PAF明显增加神经元细胞死亡率，0.01和0．10μmol／L增加死亡率不明显；PAF受体拮抗剂5μmol／L BN52021明显地抑制0．3μmol／L PAF所致的神经毒性。结论：PAF介导的神经元损伤是通过其受体而作用的，PAF受体拮抗剂对神经元损伤具有保护作用。     

脑卒中病理变化的机制:PSD93在血小板活化因子性神经元损害中的作用

目的:探讨PSD93基因是否参与血小板活化因子所致的神经元毒性损伤,以研究血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)神经性损伤的分子学机制。方法:实验于2003-05/2004-05在南京鼓楼医院神经科研究室和美国约翰霍普金斯大学Dr.Tao实验室进行。用原代神经元细胞培养系统,PAF处理wildtype(野生型)和PSD93Knockout(基因敲除)小鼠皮质神经元;propidiumiodide/calceinAM染色进行细胞凋亡测定。荧光显微镜下数码相机拍照。结果:0.10,0.30和0.60μmol/LPAF对野生型和PSD93基因敲除型两种皮质神经元细胞具有明显的神经元毒性P<0.05)。基因敲除型(型的小鼠皮质神经元细胞凋亡明显低于野生型(P<0.01)。结论:PSD93基因敲除型可抑制PAF所致的神经元损害。     

脑卒中病理变化的机制：PSD93在血小板活化因子性神经元损害中的作用

目的：探讨PSD93基因是否参与血小板活化因子所致的神经元毒性损伤，以研究血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)神经性损伤的分子学机制。方法：实验于2003-05／2004-05在南京鼓楼医院神经科研究室和美国约翰霍普金斯大学Dr．Tao实验室进行。用原代神经元细胞培养系统，PAF处理wild type(野生型)和PSD93 Knockout(基因敲除)小鼠皮质神经元；propidium iodide／calcein AM染色进行细胞凋亡测定。荧光显微镜下数码相机拍照。结果：0．10，0．30和0．60μmol／LPAF对野生型和PSD93基因敲除型两种皮质神经元细胞具有明显的神经元毒性(P&;lt;0．05)。基因敲除型型的小鼠皮质神经元细胞凋亡明显低于野生型(P&;lt;0．01)。结论：PSD93基因敲除型可抑制PAF所致的神经元损害。     

脑损伤保护作用的基础研究:神经元兴奋性氨基酸损伤保护模型的建立

目的:建立体外培养神经细胞N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)损伤及地佐环平(MK-801)保护作用模型。方法:采用原代培养的大鼠皮质神经细胞模型,给予NMDA直接损伤,加入MK-801,在不同时间窗测定不同剂量时神经细胞损伤的形态学,及生化改变。结果:NMDA100μmol/L组细胞死亡率和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率分别为(54.30±3.79)%,(67.13±5.90)%,NMDA的损伤作用具有明显的浓度时间依赖性,至NMDA1000μmol/L组细胞死亡率和LDH漏出率分别为(97.74±7.28)%,(94.10±6.31)%,MK-801具有明显的保护作用。结论:NMDA和其拮抗剂MK-801具有明显的剂量和时间依赖损伤和保护作用,LDH测定是检测其变化的良好指标,此实验可以作为神经元兴奋性氨基酸毒性损伤保护因素的检验模型。     

血小板活化因子受体拮抗剂对缺血再灌注脑损伤的作用

目的血小板活化因子(platelet activatingfactor,PAF)与缺血再灌注脑损伤有密切关系.利用PAF受体拮抗剂WEB2086有助于对PAF、炎性细胞浸润及一氧化氮在脑缺血再灌注损伤中的作用和机制进行深入研究.方法采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,研究PAF对缺血再灌注脑损伤的影响.结果PAF受体拮抗剂WEB2086对缺血再灌注脑组织一氧化氮的产生有明显的影响,且可明显改善缺血再灌注脑组织的局部脑血流量(regional cerebral blood flow,rCBF)和显著降低髓过氧化物酶(myeloperoxidase of leukocytes,MPO)活性[缺血再灌注24 h一氧化氮浓度从3.94μmmol/L下降到1.62μmmol/L;rCBF从85.8mL/(min·100 g)上升到93.8mL/(min·100 g);MPO从3.24U/g下降到2.32U/g],最终减轻局部缺血再灌注脑损伤.结论PAF受体拮抗剂WEB2086对缺血再灌注脑组织的保护作用与一氧化氮有关.     

血小板活化因子受体拮抗剂对内毒素血症幼年大鼠肠黏膜上皮细胞间连接蛋白的影响

目的观察血小板活化因子（PAF）对内毒素血症大鼠肠黏膜上皮细胞间连接蛋白β-连环蛋白（β-catenin）的影响，探讨PAF受体拮抗剂对肠上皮屏障完整性的保护作用机制。方法采用腹腔注射脂多糖（LPS）制备内毒素血症大鼠模型。于注射LPS前和注射后30min腹腔注射PAF受体拮抗剂BN52021 5mg／kg作为预防组和治疗组；腹腔注射等量生理盐水作为对照组。分别于注射LPS后1．5、3、6、24、48和72h取各组大鼠回肠，用免疫组化及逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测肠上皮细胞β-catenin蛋白及mRNA表达。结果对照组β-catenin均匀分布于上皮细胞间细胞膜的表面；内毒素组细胞膜表面β-catenin蛋白明显减少，分布不均。免疫组化和RT—PCR检测均可见内毒素组β-catenin蛋白及mRNA水平明显低于对照组，3～24h内降低非常明显（P均〈0．01）；预防组及治疗组变化趋势同内毒素组，各时间点β-catenin蛋白及mRNA水平均较内毒素组高，但差异无显著性。结论PAF在内毒素血症肠黏膜的机械屏障功能损伤中发挥一定作用，预防和治疗性应用PAF受体拮抗剂BN52021可减轻肠损伤。     

血小板活化因子参与血小板-中性粒细胞活化的研究

本研究的目的是探讨全血中血小板活化因子(platellet-activating factor，PAF)参与血小板-中性粒细胞相互作用的病理-生理机制，为PAF受体拮抗剂的临床应用提供理论依据。将PAF受体拮抗剂银杏内酯B(ginkgolides B，GB BN52021)加入全血中，以阻断PAF对血小板．中性粒细胞的活化作用；将已知的PAF及二磷酸腺苷(ADP)分剐加入全血中，用流式细胞术(FCM)检测血小板cD62P的表达；将已知的PAF及ADP分剐加入全血中，用FCM检测中性粒细胞细胞CD11b的表达；将PAF及ADP分别加入全血中，用FCM检测血小板-白细胞聚集物(PLA)，即PLA/L包括百分率及CD42b中位荧光浓度(MFI)。结果表明：PAF及ADP均增加CD62P、CD11b、PLA的表达：PAF受体拮抗剂(银杏内酯B)明显抑制PAF诱导的CD62P、CD11b的表达及PLA的形成，但不能完全抑制血小板、中性粒细胞的活化及血小板-白细胞之间的相互作用；银杏内酯B也抑制ADP诱导的CD62P、CD11b的表达，但不能完全抑制血小板、中性粒细胞活化；银杏内酯B对ADP诱导的血小板-白细胞的聚集无明显抑制作用。结论：血小板-中性粒细胞的相互作用机制复杂，有多种细胞因子、化学介质参与其中，有多种配基-受体介导血小板-中性粒细胞的交互作用。PAF受体拮抗剂-银杏内酯B有明显拮抗PAF的作用，在防治血栓形成与炎症过程中可能具有广泛的应用前景。     

人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白诱导大鼠海马神经元损伤的保护

目的:观察人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白25～35诱导的海马神经元细胞损伤是否具有保护作用,并分析其作用机制。方法:实验于2004-03/2005-03在广州中医药大学临床药理研究所DME中心完成。①取新生24h清洁级SD大鼠,无菌环境下取出海马组织进行贴壁培养并以B27无血清培养基添加剂抑制非神经元细胞的生长。②海马神经元形态及细胞活力观察:细胞培养7d至分化成熟状态,然后被随机分为3组:人参皂苷Rg1预处理组(分为1,2,4,8,16μmol/L5个浓度组),首先每加入各浓度的Rg1(中国药品生物制品检定所提供,批号:0703-200221)预作用24h后,再加入40μmol/L淀粉样β蛋白25～35共孵育24h;模型组:每孔加入40μmol/L淀粉样β蛋白25～35作用24h;空白组:正常细胞培养用液;每组均为8孔。运用倒置显微镜进行海马神经元形态学观察,四甲基偶氮唑盐比色法法检测细胞活力,即吸光度(A值),该值越高说明细胞活力越强。③检测核因子κB活性:调整细胞悬液密度为2×108L-1,接种于6孔板(内置已用多聚赖氨酸包被的盖玻片),1mL/孔。随机分为5组(3孔/组):正常组,模型组,2,4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组。细胞培养7d后,2,4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组加终浓度为2,4,8μmol/L的人参皂甙Rg1预作用24h后,与模型组一起加40μmol/L淀粉样β蛋白,作用24h。激光共聚焦显微镜检测核因子κB在细胞内的激活程度,以图像分析仪计算核区荧光与胞浆区荧光比值,比值越高说明核因子κB活性越高。④计量结果差异比较采用单因素方差分析。结果:①神经元细胞形态:相差显微镜下可见人参皂甙Rg1预处理组细胞损伤相对较模型组轻,但较正常组严重。②海马神经元细胞活力:正常组和2,4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组(P<0.05),以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高;1,8,16μmol/L人参皂甙Rg1预处理组虽然也高于模型组,但差异不明显(P>0.05)。③神经元细胞核因子κB活性:正常组和2,4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组(P<0.01),以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高;4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于正常组(P<0.01)。结论:人参皂甙Rg1对淀粉样β蛋白25～35诱导的大鼠海马神经元损伤具有保护作用,尤以4μmol/L人参皂甙Rg1作用效果最明显。核因子κB信号通路可能是人参皂甙Rg1对抗淀粉样β蛋白25～35细胞毒性作用的重要途径之一。     

血小板活化因子受体拮抗剂对缺血再灌注脑损伤的作用

目的：血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)与缺血再灌注脑损伤有密切关系。利用PAF受体拮抗剂WEB2086有助于对PAF、炎性细胞浸润及一氧化氮在脑缺血再灌注损伤中的作用和机制进行深入研究。方法：采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，研究PAF对缺血再灌注脑损伤的影响。结果：PAF受体拮抗剂WEB2086对缺血再灌注脑组织一氧化氮的产生有明显的影响，且可明显改善缺血再灌注脑组织的局部脑血流量(regional cerebral blood flow,rCBF)和显著降低髓过氧化物酶(myelopemxidase of leukocytes，MPO)活性[缺血再灌注24h一氧化氮浓度从3．94μmmol／L下降到1．62μmmol／L；rCBF从85．8mL／(min&;#183;100g)上升到93．8mL／(min&;#183;100g)；MPO从3．24U／g下降到2．32U／g]，最终减轻局部缺血再灌注脑损伤。结论：PAF受体拮抗剂WEB2086对缺血再灌注脑组织的保护作用与一氧化氮有关。     

氯胺酮、咪达唑仑对谷氨酸致神经元样PC12细胞损伤的影响

目的在谷氨酸损伤模型中探讨氯胺酮、咪达唑仑及两药合用对细胞损伤的作用。方法将分化好的神经元样PC12细胞以5×104/孔接种于96孔板内,培养18 h后,细胞随机分成正常对照组(N组);10 mmol/L谷氨酸损伤组(G组);氯胺酮+谷氨酸处理组(K组):分别为0.05、0.1、0.25、0.5、1.0 mmol/L氯胺酮+10 mmol/L谷氨酸;咪达唑仑+谷氨酸处理组(M组):分别为0.3、1、3、10、30μmol/L咪达唑仑+10 mmol/L谷氨酸。MTT比色法检测细胞活力。浓度效应曲线计算两药IC50,等效线图分析法分析两药合用相互作用。结果与G组相比,0.05~1.0 mmol/L氯胺酮对细胞活力有明显保护作用(P<0.05),且呈剂量依赖性;0.3~30μmol/L范围内咪达唑仑有保护作用(P<0.05),且呈剂量依赖性。等效线图法分析提示氯胺酮联合应用咪达唑仑对细胞保护有相加作用,两药合用组的最大保护效果小于单独应用氯胺酮或咪达唑仑时的最大保护效果。结论氯胺酮、咪达唑仑对谷氨酸损伤的神经元样PC12细胞具有保护作用。小剂量咪达唑仑与氯胺酮的神经保护有相加作用。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护士选择性应用静脉留置针现状分析

[目的]了解护士选择性应用留置针的现状以及主要影响因素,为指导临床留置针合理应用提供理论依据。[方法]采用自设问卷对138名护士留置针选择性使用情况及其影响因素进行调查。[结果]约1／4的护士并不知道应选择性使用留置针,近60％的护士在实际工作中选择留置针的意识较差;护士选择性应用留置针的决策受多因素影响;不同科室、职称及是否具有带教资格选择性应用留置针的影响因素不尽相同;绝大部分护士希望参加选择性应用留置针相关内容的培训。[结论]临床护士操作前考虑留置针选择的意识有待加强。建议实施有针对性的培训以提高护士选择性应用留置针的能力。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。