IGF-Ⅰ受体单克隆抗体对甲状腺乳头状癌

目的研究胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)单克隆抗体对甲状腺乳头状癌细胞株(CGTH W-3)的增殖活性及细胞凋亡的影响,以及其对原代培养的甲状腺癌细胞及正常滤泡细胞增殖的影响.方法四甲基偶氮唑兰(MTT)法检测细胞增殖活性;TUNEL法检测细胞凋亡指数.结果随着IGF-ⅠR单克隆抗体浓度的升高、作用时间的延长,其对CGTH W-3细胞增殖活性的抑制作用增强;50 nmol/L的IGF-ⅠR单克隆抗体即可明显诱导CGTH W-3细胞凋亡;100 nmol/L IGF-ⅠR单克隆抗体可抑制原代培养的甲状腺乳头状癌细胞和正常滤泡上皮细胞的增殖,但对癌细胞的抑制程度明显高于正常滤泡细胞(P＜0.001).结论 IGF-ⅠR单克隆抗体可抑制CGTH W-3细胞增殖,其作用呈浓度、时间依赖性;IGF-ⅠR单克隆抗体可诱导CGTH W-3细胞凋亡,其作用呈浓度依赖性;IGF-ⅠR单克隆抗体可有效地抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖,而对正常滤泡上皮细胞伤害较小.     

茶多酚抑制人甲状腺乳头状癌细胞生长

目的通过体外细胞培养,观察茶多酚对人甲状腺乳头状癌细胞(CGTHW3)的增殖、侵袭能力及凋亡的影响。方法用MTT法检测细胞增殖活性,观察不同浓度茶多酚对CGTHW3细胞增殖活性的影响;并通过培养板划痕法观察茶多酚对CGTHW3细胞侵袭能力的影响;应用流式细胞仪检测各浓度茶多酚诱导CGTHW3细胞凋亡的作用。结果茶多酚(50～400mg/L)抑制CGTHW3细胞增殖,其作用呈浓度、时间依赖关系。茶多酚对CGTHW3细胞的半量抑制浓度(IC50)为第1天240mg/L,第3天229mg/L,第5天200mg/L,第7天118mg/L。在细胞侵袭实验中,茶多酚可使反映细胞侵袭能力的无细胞带增宽。经茶多酚作用48h后,CGTHW3细胞凋亡百分比明显增加,对照组凋亡百分比为3.51%,100mg/L茶多酚组为12.61%,200mg/L茶多酚组为52.97%,400mg/L茶多酚组为70.79%(P<0.01)。结论茶多酚抑制CGTHW3细胞增殖。茶多酚对CGTHW3细胞的侵袭能力有一定的抑制作用。茶多酚可诱导CGTHW3细胞凋亡。     

胰岛素样生长因子-1促血管平滑肌细胞增殖的信号转导机制

目的：探讨胰岛素样生长因子—l(IGF—1)促血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的细胞内信号转导机制及雷帕霉素干预作用。方法：免血管平滑肌细胞分6组处理，以细胞计数、噻唑盐比色法测定细胞增殖能力，Western Blot测定蛋白激酶B(PKB)表达水平，免疫沉淀、特异底物组蛋白H2Bβγ^32P掺人量测定PKB活性。以磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂渥漫青霉素处理细胞间接反映PI3K作用。结果：IGF—l使细胞增殖增加至2．8—3．8倍，IGF—l对PKB活性的影响呈浓度(1-l00μg／L)依赖性增加及时间(10min一24h)依赖性降低，lμg／L刺激l0min即使PKB活性增至2倍，l00μg／L时增至近60倍，l00μg／L刺激24hPKB活性增加仍达4倍以上。雷帕雷素在浓度为l0—l00nmol／L范围内使PKB活性进行性降低25％-73％，渥漫青霉素和雷帕霉素使VSMC增殖至少降低30％，并完全逆转IGF—1的上述作用。结论：雷帕霉素可抑制IGF—1促VSMC增殖及对生长信号PI3K／PKB的活化。     

卡托普利抑制胃癌细胞生长的体外研究

背景:胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对多种肿瘤具有抑制作用,但在胃癌中尚无研究。目的:探讨卡托普利对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭力的影响。方法:以不同浓度卡托普利作用于人胃癌细胞株AGS。采用CCK-8法检测细胞增殖率;采用DAPI染色法检测细胞凋亡表现;采用Annexin V-FITC/PI双染法、TUNEL法检测细胞凋亡率;采用Transwell法检测细胞侵袭力。结果:卡托普利作用后,AGS细胞增殖抑制,凋亡增加,细胞侵袭力降低,均呈浓度和(或)时间依赖性(P0.05)。结论:卡托普利可抑制胃癌细胞株AGS增殖,诱导细胞凋亡,降低细胞侵袭力,效应呈浓度和(或)时间依赖性。     

甲氨蝶呤调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡和分化的机制

目的研究抗癌药物甲氨蝶呤(MTX)对人低分化鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖、凋亡和分化的影响,并探讨其可能的作用机制。方法以不同浓度的MTX处理人NPC细胞CNE-2和人正常的鼻咽上皮细胞NP69,培养24 h采用细胞计数试剂盒(CCK)-8检测MTX对NPC细胞增殖的影响,确定MTX作用浓度;采用流式细胞术检测NPC细胞凋亡率,采用Western印迹法检测NPC细胞中凋亡相关蛋白剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3和p53的表达水平,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NPC细胞中与分化相关的基因环氧合酶(COX)-2和γ-catenin mRNA表达。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液上清中Notch信号通路相关蛋白Notch1和Notch2含量。结果不同浓度的MTX处理NP细胞后,对NPC细胞增殖有不同程度的抑制作用,呈浓度依赖性,差异具有统计学意义(P0.05);MTX对人正常鼻咽上皮细胞增殖抑制作用影响不大;MTX能够诱导NPC细胞凋亡,与MTX的浓度存在依赖关系,差异具有统计学意义(P0.05);MTX处理后,NPC细胞中Cleaved Caspase-3和p53表达减少,COX-2和γ-catenin表达量下降;Notch1和Notch2含量降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 MTX可抑制NPC细胞增殖和分化,诱导细胞凋亡,其可能的作用机制与抑制Notch信号通路的激活有关。     

幽门螺杆菌对胃上皮细胞及胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)对正常胃上皮细胞、胃癌细胞的形态、增殖、细胞周期以及细胞凋亡的影响.方法 倒置显微镜下观察经Hp作用24小时、48小时后,人胃上皮细胞GES-1、人胃腺癌细胞株SGC-7901、人低分化胃腺癌细胞株MGC-803、人胃癌细胞株BGC-823的形态学变化,并应用噻唑蓝比色法(MTT)检测Hp对上述细胞增殖活性的影响.采用流式细胞仪检测4类细胞增殖周期及细胞凋亡情况,Western-blot方法检测凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达以及增殖周期相关蛋白P53、P21及E2F-1表达情况.结果 4种细胞与Hp共同培育后细胞正常形态发生改变,且随着细菌数目增加,细胞形态失常更加明显.MTT细胞增殖活性检测显示4种细胞株经Hp处理后,细胞增殖活性受到不同程度抑制.流式细胞术(FCM)检测4种细胞株呈不同比例的S期细胞增多,G1期细胞减少现象.Western-blot检测显示经Hp细菌处理后4种细胞株凋亡蛋白及增殖蛋白呈不同程度变化.结论 Hp对正常胃上皮细胞及不同类型的胃癌细胞在细胞增殖和细胞凋亡上存在不同程度的影响.     

不同浓度葡萄糖对小鼠胰岛β细胞株NIT-1增殖、分泌功能和凋亡的影响

目的探讨小鼠胰岛β细胞株NIT-1呈最佳增殖和分泌功能培养环境的葡萄糖浓度。方法将NIT-1细胞随机分为1、2、3、4、5、6组,分别用含5.6、7.8、11.1、16.7、22.5、27.6 mmol/L葡萄糖浓度的10%胎牛血清RP-MI1640培养基培养5 d。MTT法检测各组NIT-1细胞增殖情况;放射免疫分析法检测各组NIT-1细胞胰岛素分泌水平;免疫荧光染色法检测细胞凋亡率。结果 3组细胞呈最高增殖状态,之后4组～6组呈浓度依赖性抑制细胞增殖并促进细胞凋亡,且呈时间依赖性;3组胰岛素呈最高分泌状态,之后4组～6组呈浓度依赖性抑制细胞分泌,且呈时间依赖性。结论 11.1 mmol/L葡萄糖浓度是小鼠NIT-1细胞具有最佳增殖和分泌功能的培养环境;葡萄糖浓度〉11.1 mmol/L可抑制小鼠NIT-1细胞的增殖和分泌功能,并呈时间浓度依赖效应诱导细胞凋亡。     

miR-424靶向IGF1R调控高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡和氧化应激的机制

目的研究miR-424是否通过靶向胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)影响高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡和氧化应激。方法随机将大鼠肾小球系膜细胞(HBZY)-1分为正常糖浓度组、高糖组和高糖+转染组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-424和IGF1R mRNA表达,Western印迹检测细胞中IGF1R、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,比色法检测细胞上清培养液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,酶标法检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因实验检测miR-424对IGF1R转录活性的影响。结果与正常糖浓度组比较,高糖组人肾小球系膜细胞中miR-424及Bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05),IGF1R mRNA、蛋白及Bax蛋白表达明显升高,细胞凋亡率明显升高(P0.05),细胞中LDH、MDA活性明显增强(P0.05),SOD活性明显降低(P0.05);上调miR-424和沉默IGF1R后,均明显抑制了高糖诱导的细胞凋亡和氧化应激水平;双荧光素酶报告基因实验证实miR-424靶向负调控IGF1R的表达;过表达IGF1R逆转上调miR-424对高糖诱导的细胞凋亡和氧化应激的抑制作用。结论 miR-424靶向负调控IGF1R的表达,抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡和氧化应激。     

淫羊藿提取物IC163对K562白血病细胞增殖抑制和凋亡诱导效应观察

目的:观察淫羊藿提取物IC163对K562白血病细胞是否具有增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:用MTT实验观察不同浓度的IC163对K562细胞增殖抑制率的影响,用Hochest33258染色法和Annexin V-FITC和PI染色法检测凋亡细胞的百分率,用Western印迹检测药物干预下的K562细胞Caspase-3蛋白表达。结果:IC163以浓度依赖性方式有效地抑制K562细胞增殖,其抑制K562细胞增殖的IC50为18.1μmol/L;IC163以浓度依赖性方式诱导K562细胞凋亡并伴有Caspase-3蛋白表达上调和裂解激活。结论:IC163能够以浓度依赖性方式有效地抑制K562细胞增殖并诱导K562细胞凋亡,其诱导K562细胞的机制可能与Caspase-3凋亡信号启动有关。     

茶多酚对肺癌SPC-A1细胞增殖的影响

目的 探讨茶多酚对人肺癌SPC-A1细胞增殖的影响.方法 体外培养人肺腺癌SPC-A1细胞,以50～300 mg/L茶多酚作用12、24、36 h后,MTT法测定细胞的增殖活性,琼脂糖凝胶电泳、透射电镜观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测对细胞周期的阻滞作用.结果 茶多酚可抑制肺癌细胞的增殖活性,其抑制作用随时间的延长而增强,以36 h抑制作用最强.浓度50～150 mg/L,抑制作用随浓度增高而增强;浓度＞150 mg/L,抑制作用随浓度增高反而减弱.茶多酚可使肺癌细胞阻滞于G1期,以150 mg/L阻滞作用24 h最强.结论 茶多酚可诱导人肺癌SPC-A1细胞的凋亡,并使细胞周期阻滞于G1期,抑制肺癌细胞的增殖.     

氯化三乙基锡抑制C6胶质瘤细胞增殖及机制

目的探讨氯化三乙基锡(TETC)对C6胶质瘤细胞体外增殖抑制作用的机制。方法采用MTT法、荧光原位末端标记方法和Western印迹方法,分别检测不用浓度TETC作用C6胶质瘤细胞48 h后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果 TETC对C6胶质瘤细胞具有抑制增殖作用,增殖抑制率呈剂量依赖性;TETC可诱导C6胶质瘤细胞凋亡,细胞凋亡率呈剂量依赖性上升;TETC可下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达水平。结论 TETC可抑制C6胶质瘤细胞体外增殖并诱导其凋亡,机制可能与其下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达有关。     

TM7SF4对人甲状腺乳头状癌细胞IHH-4增殖、凋亡和侵袭的作用研究

目的 探讨树突表达特异性7跨膜蛋白(TM7SF4)的低表达对人甲状腺乳头状癌细胞IHH-4增殖、凋亡和侵袭的作用及其相关机制.方法 选取甲状腺乳头状癌患者的手术标本(癌组织及癌旁组织)及甲状腺乳头状癌细胞系IHH-4为对象.qRT-PCR法检测病理组织和细胞系IHH-4中TM7SF4的mRNA表达量.分别用MTT法、流式细胞分析和Transwell法检测TM7SF4表达量对IHH-4细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.Western印迹检测IHH-4细胞中磷酸化与非磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕酶素靶蛋白(mTOR)的表达.结果 与癌旁组织相比,甲状腺癌组织中TM7SF4的mRNA表达水平显著升高(t=52.31,P＜0.05).与正常甲状腺细胞系Nthy-ori 3-1相比,IHH-4细胞系中TM7SF4的表达水平也显著上升(t=34.35,P＜0.05).与对照组细胞相比,沉默TM7SF4的表达后,可诱导IHH-4细胞凋亡,而细胞增殖和侵袭能力受到显著抑制(F=8.32,7.55,846.40;P均＜0.05).此外,沉默TM7SF4的表达后可显著降低磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTORmRNA及蛋白的表达(F=1014.88,1121.29,985.22,720.14,854.63,4 563.12;P均＜0.05).结论 低表达的TM7SF4可能通过下调PI3K/Akt/mTOR通路而抑制IHH-4细胞增殖、诱导凋亡并抑制侵袭.     

siRNA干扰膜联蛋白A1基因对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖的影响

目的通过小干扰RNA(siRNA)干扰膜联蛋白(ANX)A1基因在甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中的表达,探讨ANXA1对甲状腺乳头状癌细胞生物学特性的影响。方法设计并筛选使用高效的siRNA在甲状腺乳头状癌TPC-1细胞株中特异性干扰ANXA1的表达,然后用CCK8法观察ANXA1干扰后对TPC-1细胞增殖能力的影响。结果筛选的siRNA可高效沉默ANXA1在TPC-1细胞中的表达,显著抑制甲状腺乳头状癌的增殖。结论 siRNA干扰ANXA1表达,可抑制甲状腺乳头状癌的增殖,提示ANXA1可能是甲状腺乳头状癌治疗的一个重要的生物学靶标。     

黄芩素对SCC15口腔癌细胞增殖和Caspase-3活性的影响

目的探讨黄芩素(BAI)对人口腔癌细胞株SCC15增殖和半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3活性的影响。方法以噻唑蓝比色法(MTT)检测BAI在不同浓度(终浓度的50、100、200μg/ml)不同作用时间(0、12、24、36、48、60、72 h)条件下对SCC15口腔癌细胞增殖活性的影响。比色法检测Caspase-3活性的变化,通过流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 BAI在体外对SCC15细胞株具有直接抑制增殖作用,并呈时间和剂量依赖性,对SCC15细胞的IC50是153.20μg/ml。不同浓度BAI处理细胞后,SCC15细胞被阻止于G0/G1期,抑制SCC15细胞分裂而降低其增殖能力。结论 BAI可对人SCC15口腔癌细胞株的凋亡具有促进作用,并且促凋亡作用呈时间-剂量依赖性。BAI体外具有增加He La细胞Caspase-3活性的作用,能明显上调SCC15细胞中Caspase-3活性,且呈时间与浓度依赖性。     

Flavopiridol通过调节CDK4/CDK6/cyclinD1复合物表达抑制肝癌细胞增殖

目的研究flavopiridol对肝癌细胞Huh7增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法Flavopiridol处理Huh7细胞后,检测细胞增殖和凋亡,进行细胞周期分析。Westernblot检测flavopiridol对cDK4／cDK6／cyclinD1复合物表达的影响。结果Flavopiridol可显著抑制Huh7细胞增殖;Flavopiridol可剂量依赖性导致Huh7细胞发生凋亡,空白对照组凋亡细胞2．65％,550nmol／L剂量处理组凋亡细胞14．17％;Flavopiridol可剂量依赖性引起Huh7细胞G1期阻滞,空白对照组G1期细胞51．06％,550nmol／L剂量处理组G1期细胞57．53％;Flavopiridol可抑制Huh7细胞Gl期相关的蛋白细胞周期素依赖激酶（CDK）4,CDK6,细胞周期素D1（cyclinD1）的表达。结论Flavopiridol通过抑制肝癌细胞G1期cDK4／cDK6／cyclinD1蛋白复合物表达,引起细胞G1期阻滞并发生凋亡,从而抑制细胞增殖。     

槲皮素对卵巢癌细胞HO-8910增殖的抑制作用及机制

目的观察槲皮素体外对卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制作用,并探讨其机制。方法将体外培养卵巢癌HO-8910细胞用0、10、20、40、80、160μmol／L的槲皮素处理。用MTF法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率,细胞免疫化学染色法检测细胞内Fas及HSP70的表达,分光光度计法检测细胞内Caspase-3和Csapase-8的活性。结果浓度10～160μmol／L的槲皮素均能抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,并有明显的时间和剂量依赖性（P〈0．05）。不同浓度的槲皮素作用48h后各组细胞凋亡率随槲皮素浓度增高,HSP70表达下调,FAS表达增强,Caspase-3、8活性上调,均呈剂量依赖性（P均〈0．05）。结论槲皮素能抑制卵巢癌细胞的增殖。其机制可能与槲皮素通过提高细胞内Fas的表达,降低HSP70的表达及诱导Caspase-3、8的活化及诱导卵巢癌细胞凋亡有关。     

紫杉醇对耐阿霉素膀胱癌细胞株T24/ADM增殖的影响及机制

目的观察紫杉醇对耐阿霉素（ADM）人膀胱癌细胞株（T24/ADM）增殖的影响,并探讨其机制。方法用阿霉素浓度梯度递增法诱导培养人膀胱癌T24/ADM多药耐药细胞。用1、10、102、103nmol/L紫杉醇培养T24/ADM细胞12、24、48、72 h,用MTT法测算T24/ADM细胞增殖抑制率,用流式细胞仪PI单染法测定培养24、48 h时T24/ADM细胞凋亡率,并进行形态学观察。结果紫杉醇可抑制T24/ADM细胞生长,且在一定剂量范围内具有时间和浓度依赖性。实验组细胞凋亡率较对照组高,且随作用时间的延长,细胞凋亡率明显增高。紫杉醇组T24/ADM细胞镜下可见凋亡。结论紫杉醇可抑制膀胱癌T24/ADM细胞株生长,这种作用呈浓度时间依赖性,其机制可能与紫杉醇诱导T24/ADM细胞凋亡有关。     

茶多酚对肺癌SPC-A1细胞增殖的影响

目的探讨茶多酚对人肺癌SPC—Al细胞增殖的影响。方法体外培养人肺腺癌SPC—A1细胞，以50—300mg／L茶多酚作用12、24、36h后，MTT法测定细胞的增殖活性，琼脂糖凝胶电泳、透射电镜观察细胞凋亡情况，流式细胞仪检测对细胞周期的阻滞作用。结果茶多酚可抑制肺癌细胞的增殖活性，其抑制作用随时间的延长而增强，以36h抑制作用最强。浓度50～150mg／L，抑制作用随浓度增高而增强；浓度〉150mg／L，抑制作用随浓度增高反而减弱。茶多酚可使肺癌细胞阻滞于G1期，以150mg／L阻滞作用24h最强。结论茶多酚可诱导人肺癌SPC-Al细胞的凋亡，并使细胞周期阻滞于G1期，抑制肺癌细胞的增殖。     

秦皮乙素对人肝癌HepG2细胞体外增殖的影响及机制探讨

目的探讨秦皮乙素对人肝癌HepG2细胞体外增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法采用不同浓度的秦皮乙素干预人肝癌HepG2细胞。采用MTT比色法观察细胞增殖率;流式细胞仪分析细胞凋亡及线粒体膜电位;分光光度法检测细胞Caspase 3、Caspase 8、Caspase 9活性;免疫荧光法检测Bax、Bcl-2、Caspase 9蛋白表达。结果秦皮乙素干预后人肝癌细胞HepG2增殖抑制,凋亡增加;线粒体膜电位降低,Caspase 3、Caspase 9活性增强,均呈剂量依赖性;Caspase 8活性无明显变化。Bax蛋白表达上调的同时Bcl-2蛋白表达下调,亦呈剂量依赖性。结论秦皮乙素可抑制人肝癌HepG2细胞体外增殖;作用机制可能为通过线粒体途径诱导细胞凋亡。     

对3株抗甲状腺球蛋白单克隆抗体的免疫生物学特性分析

应用体外细胞结合试验方法研究了125Ⅰ-标记甲状腺球蛋白单克隆抗体(~(125)Ⅰ-抗Tg-McAb)与不同类型甲状腺癌特异结合能力。结果表明:~(125)Ⅰ-抗Tg-McAb与甲状腺滤泡型、乳头状型的结合率分别为27.8％和29.7％,与正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和其他肿瘤无特异结合,结合率<5％。