PCR检测新生儿尿液人类巨细胞病毒DNA

我们对新生儿重度黄疸患儿尿液进行了ＨＣＭＶＤＮＡ检测，结果如下。１对象与方法１．１标本１２例重度黄疸患儿，日龄３～１５天。用婴儿一次性尿袋随机收集尿液５～１０ｍｌ待用。１．２模板的制备取被检尿液１ｍｌ１５０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，弃上清用生理盐...     

套式PCR检测尿液中的人类巨细胞病毒DNA

用套式ＰＣＲ方法检测ＨＣＭＶ，并与一次ＰＣＲ进行比较。同时对两种尿样品ＤＮＡ提取方法进行了初步探讨，以期在临床检验中减少假阴性，提高ＨＣＭＶ的检出率和准确率。１材料与方法１．１材料ＨＣＭＶＡＤ－１６９株由解放军３０２医院病毒室提供。引物位于ＨＣＭＶＩ...     

巨细胞病毒PCR检测中实验条件比较

人巨细胞病毒(HCMV)是先天性感染中最常见的病毒，是导致儿童智力低下及先天畸形的主要原因。应用PCR技术检测HCMV—DNA具有高度灵敏性及特异性，检出率高．重复性好的优点。为寻求更为理想的实验条件，我们进行了对比试验，现将结果报告如下。     

荧光定量PCR检测血清巨细胞病毒DNA的临床应用

目的建立一种区分巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)潜伏性感染与活动性感染并适于临床大量标本CMV DNA检测的常规检测方法。方法利用血清作为待检标本,通过优化实验方案,建立血清CMV DNA的荧光定量PCR(fluorogenic quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测方法;并利用FQ-PCR技术对54例疑似CMV感染的患儿(1个月～15岁,抗CMV IgM阳性或IgM与IgG双阳性)及32例患非感染性疾病的患儿(3个月～14岁,抗CMV IgM检查均阴性,部分患儿抗CMV IgG阳性)血清CMV DNA进行检测。结果54例CMV疑似感染患儿中,CMV DNA检测大于1×10~3拷贝/ml者占40.74%,而32例非感染性疾病患儿中,CMV DNA检测大于1×10~3拷贝/ml者只占18.75%,两者比较有显著性差异(P<0.05)。采用FQ-PCR技术,在LightCycler和Rotor-Gene检测仪上检测具有相同的灵敏度,且具有可比性。结论FQ-PCR定量检测血清CMV DNA的方法能够更灵敏地反映CMV活动性感染,假阴性率低,重复性好,结果可靠。FQ-PCR定量检测血清内CMV DNA的方法可作为临床CMV DNA的检测的常规方法。     

免疫组化检测尿中巨细胞包涵体细胞内的巨细胞病毒

巨细胞病毒（ＣＭＶ）是造成全身性感染的一种病毒，是引起巨细胞包涵体病（ＣＩＤ）的病原。而许多文献均是将巨细胞包涵体细胞（ＣＣＩＣ）作为诊断ＣＩＤ的主要依据［１］。我们对尿中巨细胞包涵体细胞阳性患者，留尿样作细胞免疫组化检测，证明患者尿中巨细胞包涵体细胞内存在ＣＭＶ，现将４２例结果报道如下。１材料和方法１．１材料ＣＭＶ免疫组化试剂由迈新生物技术开发公司提供。１．２ 临床资料 ４２例中，男２７例，女１５例，年龄１岁～１０岁１５例，２０岁～５０岁１２例，＞５０岁１５例。临床症状多样。其中有咳嗽、咳痰、发…     

应用PCR和ELISA法检测新生儿不同标本中的巨细胞病毒

为了解新生儿感染巨细胞病毒检测方法的可靠性，本文用ＥＬＩＳＡ法筛１８１８例孕妇，查出ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性４６例，并以５０例ＣＭＶ－ＩｇＭ阴性作为对照组，在其分娩时用ＰＣＲ检测脐血、新生儿血、新生儿尿中ＣＭＶ－ＤＮＡ，用ＥＬＩＳＡ法测血清ＤＣＭＶ－ＩｇＭ。结果显示对照组两种方法均为阴性，实验组ＥＬＩＳＡ法阳性率５％，ＰＣＲ法阳性率２７％有显著差异。两种方法比较ＰＣＲ法具有高度特异性和敏感性。并提出先天     

PCR检测子宫内膜组织中巨细胞病毒核酸

本文用改良套式ＰＣＲ即“一管单次扩增套式ＰＣＲ”扩增了１０个新鲜子宫内膜癌组织标本和１１个石蜡切片中ＨＣＭＶＤＮＡ，总阳性一率为８０．９５％，而对照组１０个正常子宫内膜组织阳性率为４０％。     

荧光定量PCR检测巨细胞病毒DNA试剂盒的性能验证及评价

目的 对实验室新开展项目巨细胞病毒核酸(CMV-DNA)进行性能验证.方法 采用荧光定量PCR仪检测CMV-DNA含量,对精密度、检出限、正确度、线性范围进行验证及评价.结果 CMV的高浓度和低浓度样本批内与批间精密度的变异系数(CV)平均值均<5％,符合规定标准.检出限验证时,重复检测浓度为(1.00E+03)cop...     

聚合酶链反应检测尿内人巨细胞病毒

２７例尿标本同时采用超速离心法，酚氯仿法抽提法、及原尿直接法、然后分别用于人类巨细胞病毒的聚合酶链反应检测。其阳性检出率分别为８５．１９％，５１．８５％和４８．１５％。经配比资料统计学分析表明，超速离心处理的阳性检出率显著高于抽提法和直接法。实验表明，原尿直接法的假阴性十分明显；而酚氯仿抽提处理亦无实际应用价值。唯有超速离心处理法可显著地提高尿巨细胞病毒的检测敏感性。     

聚合酶链反应检测尿内人巨细胞病毒

２７例尿标本同时采用超速离心法，酚氯仿法抽提法、及原尿直接法，然后分别用于人类巨细胞病毒的聚合酶链反应检测。其阳性检出率分别为８５．１９％，５１．８５％和４８．１５％。经配比资料统计学分析表明，超速离心处理的阳性检出率显善高于抽提法和直接法。实验表明，原尿直接法的假阴性十分明显；而酚氯仿抽提处理亦无实际应用价值。唯有超速离心处理法可显著地提高尿巨细胞病毒的检测敏感性。     

血液和尿液中巨细胞病毒DNA的检测研究

目的探讨血液和尿液不同类型标本中巨细胞病毒(CMV)-DNA的检测研究。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对52例患者4种不同类型的血液标本和85例患者3种不同类型的尿液标本的CMV-DNA载量进行检测,比较血液和尿液不同类型标本的CMV-DNA检出率和病毒载量的差异。结果 52例患者血清、全血、血浆和外周血单个核细胞(PBMC)的CMV-DNA检出率分别为48.08%、71.15%、57.69%和69.23%;全血和PBMC的CMV-DNA检出率较高,差异有统计学意义(P0.05)。PBMC的定量结果较高。85例患者混合尿、尿上清和尿沉渣的CMV-DNA检出率分别为72.94%、62.35%和84.71%,尿沉渣的CMV-DNA检出率较高,混合尿的定量结果较高。结论血液和尿液标本CMV-DNA的检测结果差异较大,在CMV感染的临床诊疗和监测中使用同一标本类型检测具有重要的临床意义。     

标本处理方法对荧光定量PCR检测HBV DNA的影响

目的为提高标本检出率,比较煮沸法、Chelex 100树脂法和核酸纯化法等3种不同标本处理方法对荧光定量聚合酶链反应（FQPcR）技术检测乙型肝炎（简称乙肝）病毒（HBV）DNA的影响。方法收集36例乙肝确诊患者和14例非乙肝患者的血标本,分别经煮沸法、Chelex 100树脂法和核酸纯化法平行处理后,采用FQ-PCR进行检测。结果经3种方法处理的标本HBVDNA的检出率分别为52．78％、55．56％和100．00％。核酸纯化法的检出率明显高于其他2种方法（P〈0．01）。结论标本处理质量对进行HBVDNAFQ-PCR检测十分重要,煮沸法和Chelex 100树脂法不适用于临床标本检测,用核酸纯化法处理标本可保证FQ-PCR检测结果的准确性。     

献血者巨细胞病毒DNA的检测及意义

人巨细胞病毒(human　cylomegalovirus，HCMV)属疱疹病毒科，为双链DNA。人感染HCMV后，一般表现为亚临床症状，HCMV呈潜伏状态存在于体内，在感染者免疫力低下时被激活，整合到宿主细胞的DNA中，从而导致多种临床症状，如孕妇感染可致胎儿畸形、脑积水等先天缺陷，神经系统受损可致耳聋等后遗症，是器官移植失败和艾滋病患者并发症死亡的主要原因。对非免疫缺陷患者可引发长期感染而致感染细胞的转化、畸形和癌变。近年来资料表明，输血是传播HCMV的途径之一。在欧美、日本及我国台湾等地均发生免疫抑制或免疫缺陷患者因输血感染HCMV而死亡的例子。因此对献血者作HCMV的筛选很有意义。笔者选用灵敏度高的PCR法对212例献血者进行HCMV DNA的检测，其结果如下。     

实时定量PCR检测外周血中的巨细胞病毒

目的建立定量检测外周血中巨细胞病毒的实时定量PCR方法,并对骨髓移植病人进行巨细胞感染监测。方法构建基于LightCycler-TaqMan探针的实时定量PCR方法,对其进行方法学评价,并抽提外周血DNA,检测正常人与骨髓移植病人巨细胞病毒感染状况。结果经反应条件的优化,该方法的敏感性在10个拷贝数以上,批内与批间差异分别控制在较小范围,对骨髓移植病人巨细胞病毒感染的监测发现病毒拷贝数与病程进展和恢复呈较好的相关关系。结论实时定量PCR方法检测巨细胞病毒感染可为临床对移植患者的感染提供一种有效的监测手段。     

献血员巨细胞病毒DNA的检测及意义

目的 检测献血员血液中巨细胞病毒DNA，了解献血员感染巨细胞病毒的情况，防止由于输血而发生医源性感染。方法 采用快速，敏感，特异的聚合酶链反应（PCR）电泳法及PCR-ELISA法对212例献血员进行人类巨细胞病毒9HCMV）DNA的检测。结果 18例HCMV-DNA阳性，占被检对象的8.49%(18/212)；同时显示HCMV-DNA阳性率与献血员性别，年龄段差异无显著性相关。结论 由于献血者中存在着HCMV感染的情况，故在临床治疗用血时，应对献血者进行HCMV的检测，以保证受血者生命安全。     

巨细胞病毒PCR和血清学检测脐血的比较

背景脐血(UCB)移植受害者对机会性感染十分敏感,包括巨细胞病毒(CMV)。为预防经供者UCB传播CMV,当母亲为IgM抗-CMV阳性时,多数实验室同时检测母亲样品和隔离检疫脐血单位。研究设计和方法对两个脐血库的UCB和相关标本(UCB血浆和红细胞、母亲全血和血清)用两种有效的     

献血员中巨细胞病毒感染的PCR检测

采用快速、敏感和特异性的聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１０８名献血员进行了人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）检测。结果表明，有８４例表现为ＨＣＭＶ阳性，占被检测对象的７７．８％。说明人群中ＨＣＭＶ的感染率是较高的。同时，从本文的ＨＣＭＶ的ＰＣＲ敏感性和待异性试验表明，ＰＣＲ技术可以检测样品中少到２０个拷贝的ＨＣＭＶ模板ＤＮＡ。因此，ＰＣＲ技术是可以替代或弥补目前繁琐的细胞培养技术及血清学方法而用于临床检测的。     

定量PCR检测巨细胞病毒在肾移植中的应用

巨细胞病毒（CMV）感染是肾移植受者发病和死亡的重要原因。本文就定量PCR在预测肾移植受者CMV感染的症状发作期及监测更昔洛韦的疗效等方面的价值进行阐述。     

2451份不同类型标本中人巨细胞病毒DNA的检出情况分析

目的 对孕妇和婴儿不同类型标本中人巨细胞病毒(HCMV)DNA的检出情况进行回顾性分析,为尽早有效地检出HCMV DNA提供参考依据.方法 收集2017年5月至2020年7月在该院检验科采用荧光定量PCR法进行HCMV DNA检测的临床标本共2451份,对不同标本来源人群、不同类型标本的HCMV DNA检出率进行回顾性...     

定量PCR检测巨细胞病毒在肾移植中的应用

巨细胞病毒 (CMV)感染是肾移植受者发病和死亡的重要原因。本文就定量PCR在预测肾移植受者CMV感染的症状发作期及监测更昔洛韦的疗效等方面的价值进行阐述。