甲基化抑制剂对CEM细胞EphB4基因表达及细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2'脱氧胞苷（5-aza-2'-deoxycytidine,5aza-CdR）对人急性淋巴细胞白血病细胞株CEM中抑癌基因EphB4的转录调控作用及对CEM细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据。方法：采用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测EphB4基因甲基化水平,荧光定量PCR法(Q-PCR)和Western blot方法检测5-aza-CdR处理前后EphB4基因mRNA及蛋白表达水平;MTS法检测不同剂量(1.0、2.5、5.0 μmol/L) 的5-aza-CdR作用于CEM细胞0 h、24 h、48 h、72 h、96 h对CEM细胞存活率的影响,流式细胞仪分析5-aza-CdR作用96 h对CEM细胞周期及凋亡的影响。结果：CEM细胞中存在EphB4基因的甲基化,甲基化水平为31.4%;不同浓度5-aza-CdR作用后CEM细胞甲基化水平均下降。5-aza-CdR作用使CEM细胞中EphB4 基因的mRNA和蛋白表达上升;5-aza-CdR明显抑制CEM细胞增殖,并与药物浓度及作用时间呈正相关。5-aza-CdR处理 96 h后,早期凋亡由4.1%上升为24.8%。用药96 h后,CEM细胞G1期由62.4% 降至46.8%,G2期由2.1%升至16.2%,细胞阻滞于G2期。结论：特异性甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR能使CEM细胞中沉默的EphB4基因重新表达,并可抑制白血病细胞增殖和诱导其凋亡。     

p38丝裂原活化蛋白激酶调节急性淋巴细胞性白血病CEM细胞株糖皮质激素受体功能的分子机制研究

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）对地塞米松（DEX）诱导急性淋巴细胞性白血病CEM细胞株凋亡过程中糖皮质激素受体α（GRα）功能的影响。方法台盼蓝拒染法绘制增殖曲线;流式细胞仪解析细胞凋亡;Western blot检测糖皮质激素受体蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白表达。结果（1）p38MAPK特异阻滞剂SB203580预处理后继续培养24-72h,细胞的增殖率分别由单用DEX时的62．3％、35．5％、11．6％升至82．8％、54．7％和48．1％（P〈0．01）;（2）5μmol／LDEX处理CEM细胞36h时,亚二倍体细胞为26．2％,显著高于对照组（P〈0．01）。SB203580预处理后,亚二倍体细胞由26．2％降至7．1％（P〈0．01）;（3）5μmol／L的DEX处理CEM细胞后,GRα总蛋白的表达水平从12h开始分别上调至117％（12h）、121％（24h）、122％（36h）、125％（48h）。未与DEX结合的GRα主要存在于细胞浆中,细胞核GRα与细胞浆GRα之比为0．27。从6-48h,GRα的胞核与胞浆之比分别为0．48、0．59、0．95、2．16、4．08;（4）5μmol／LDEX处理CEM细胞后,p-p38MAPK蛋白在15min时即隐约可见,1h开始表达增强并持续增强至6h,之后减弱至48h仍可见。SB203580预处理后,未检测到p-p38MAPK蛋白的表达;（5）SB203580预处理后,GRα的核浆比例由4．08降至0．43（P〈0．05）,GRα总蛋白无明显变化。结论DEX在诱导CEM细胞凋亡时上调GRα的蛋白表达水平并促进转位人核。p38MAPK信号转导通路的活化促进了GRα转位人核。     

survivin反义寡核苷酸抑制HL-60细胞增殖并诱导细胞凋亡

目的：探讨survivin反义寡核苷酸(ODN)对人白血病细胞系HL-60细胞增殖和凋亡的影响。方法：人工合成survivin基因反义和正义ODN,并进行硫代磷酸化修饰,通过脂质体途径分别转染HL-60细胞;应用RT-PCR和W estern B lot检测survivin mRNA和蛋白表达;应用MTT法检测survivin反义ODN对HL-60细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡比率。结果：体外培养的HL-60细胞可表达较强的survivinmRNA和蛋白;survivin反义ODN可呈浓度依赖性地抑制survivin mRNA和蛋白表达,1 000 ng/mL AS-ODN几乎完全抑制survivin mRNA和蛋白表达。MTT研究结果表明,survivin反义ODN可呈浓度依赖性地抑制HL-60细胞增殖,1 000 ng/mL AS-ODN对细胞生长的抑制率可达78.14%;诱导细胞凋亡,使细胞阻滞于G2/M期。survivin正义ODN对survivin mRNA和蛋白以及HL-60细胞的增殖和细胞周期无明显的抑制作用。结论：脂质体介导转染survivin反义寡核苷酸可抑制细胞增殖、诱导细胞发生G2/M期阻滞而促进细胞凋亡。     

叶酸对人T淋巴细胞性白血病细胞体外的作用

目的探讨叶酸对人T淋巴细胞性白血病细胞株(CEM)细胞的作用。方法1.四氮甲基唑蓝(MTT)法检测叶酸不同浓度.不同作用时间对CEM细胞增殖影响;2光镜下观察不同浓度叶酸作用于CEM细胞24、48、72 h细胞形态变化;3.流式细胞术检测叶酸持续作用于CEM细胞48 h细胞凋亡率、细胞周期分布及细胞表面凋亡相关蛋白Bcl-2、C-myc表达;4.DNA 电泳分析凋亡细胞DNA片段化的生化改变;5.MTT法检测叶酸对甲氨蝶呤(MTX)抗肿瘤作用影响。结果1叶酸对CEM 的增殖有明显抑制作用,在(0 4～3.0)×10-4μg/L时抑制作用最明显,抑制率30%～40%;2.叶酸分别作用于CEM细胞24、48、72 h后,光镜下可见CEM细胞出现典型的细胞凋亡各阶段的变化,在浓度为(0 2～6.0)×10-4 μg/L均可见到凋亡细胞, 尤其在(0 4～3.0)×10-4 μg/L凋亡率较高;3流式细胞术分析,叶酸浓度为3 0×10-4 μg/L时诱导凋亡作用最强,凋亡率为6.19%,CEM细胞经叶酸处理后细胞周期无明显变化规律,但叶酸作用于CEM细胞48 h,在Pl荧光的直方图上可见凋亡细胞在G1/G0期前出现一亚二倍体峰,细胞表面凋亡相关蛋白Bcl-2、C-myc表达率均明显下降;4.CEM细胞经0 4×10-4 μg/L和3.0×10-4 μg/L 叶酸处理48h,提取DNA电泳,可见典型的梯状条带;5.叶酸在浓度为(0.2～12.0)×10-4 μg/L 不影响     

黄芪注射液对U937细胞增殖与凋亡的影响及相关机制的探讨

目的 研究不同浓度黄芪注射液对白血病细胞株U937增殖、凋亡的影响,并初步探讨其相关分子机制。方法 白血病细胞株U937随机分为实验组（分别采用不同浓度黄芪注射液62.5、125、250、500、1 000 μg/mL处理 U937细胞）和对照组（不加黄芪注射液）。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖能力,FITC-PI双染法流式细胞术检测各组细胞的凋亡,Hoechst33258染色后荧光显微镜下观察各组细胞形态学变化;U937细胞加入1 000 μg/mL黄芪注射液后0 h、12 h、24 h、48 h,采用RT-PCR法检测c-myc、p27 mRNA的表达。结果 与对照组相比,不同浓度黄芪注射液均能抑制U937细胞增殖,差异均具有统计学意义（P<0.05）;不同浓度黄芪注射液均能诱导U937细胞凋亡,较对照组显著增多（P<0.05）,黄芪注射液浓度为1 000 μg/mL时凋亡率可达（63±4）%;黄芪注射液作用于U937细胞,随时间延长,c-myc mRNA表达逐渐下降,p27 mRNA表达逐渐增强,差异均具有统计学意义（P<0.01）。结论 黄芪注射液体外可有效抑制白血病细胞株U937增殖,并诱导其凋亡,其相关分子机制可能与下调c-myc基因和上调p27基因表达有关。     

siRNA抑制K562细胞survivin基因的初步研究

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术,以survivin为靶基因,设计针对survivin的siRNA,通过Hiperfect介导转染K562细胞,研究survivin基因在白血病发生发展中的作用,为以survivin为靶点的白血病治疗奠定基础.方法 体外化学合成抑制survivin基因的siRNA片段,通过Hiperfect转染到K562细胞内,以无关siRNA、Hiperfect和未转染的细胞为对照,采用SYBR Green荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR方法检测siRNA的抑制效果,利用流式细胞仪Annexin Ⅴ-FITC/PI法检验细胞凋亡率,用四氮唑盐(MTT)法观察转染后48 h,72 h对细胞增生的影响.结果 siRNA转染K562细胞后,SYBR Green荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR结果显示survivin mRNA的表达量48 h、72 h分别比空白组下降了85.21%、94.35%,细胞生长受抑制,增殖能力减弱,其增殖抑制率于转染后48 h、72 h分别为45.02%和50.88%,细胞的凋亡率升高,分别为12.28%、21.55%.结论 靶向survivin的siRNA能特异性下调目的基因的表达、并能在体外抑制白血病细胞株的生长.survivin将成为白血病基因治疗的一个新靶点.     

二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞凋亡及其对Fas、FasL及caspase-8表达的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（DADS）诱导白血病 K562 细胞凋亡的作用及其机制。方法：采用 Hoechst 33258 染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术分析不同浓度及不同作用时间 DADS 对 K562 细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR法检测DADS作用48 h后 Fas、FasL、caspase-8 mRNA的表达。结果：DADS可诱导K562 细胞凋亡。DADS(作用细胞24 h)浓度从10 mg/L增至40 mg/L时,其对K562细胞的凋亡率由（11.60±0.83）%增至（37.94±0.87）%;DADS(40 mg/L浓度组)作用时间从24 h增至72 h,其对K562细胞的凋亡率由（37.94±0.87）% 增至（47.02±0.66）%,各实验组随时间、浓度增加凋亡率明显增加 (P<0.05)。DADS作用48 h后,Fas、caspase-8 mRNA 表达水平较对照组上调;FasL mRNA 较对照组下调（P＜0.05）。结论：DADS 呈时间和浓度依赖性诱导白血病K562 细胞凋亡,其凋亡机制可能与上调 Fas、caspase-8,下调 FasL有关。     

survivin在儿童急性白血病细胞中的定位表达及与化疗的关系

目的：探讨survivin在急性白血病中的表达、细胞中的定位及与临床疗效的关系,并从细胞水平说明survivin定位表达与化疗疗效的关系。方法：应用免疫组织化学链霉亲和素、生物素、过氧化物酶复合物方法,检测62例急性白血病患儿和40例同期住院患儿(排除急性白血病)骨髓细胞survivin的表达,survivin在细胞中的定位。同时用SABC法检测不同浓度柔红霉素作用的Molt-4细胞中survivin定位表达的变化,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：在62例急性白血病患儿中,survivin蛋白表达阳性率为41.9%(26/62),明显高于非急性白血病骨髓5.0%(2/40)(χ2=16.66,P<0.01);survivin在胞浆中的表达为46.2%(12/26),在胞核中的表达为53.9%(14/26),差异无统计学意义(χ2=0.3077,P>0.05),但二者第19天缓解率差异有显著性(P<0.05),sur-vivin胞核表达阳性者缓解率高于胞浆阳性表达者。DNR处理的Molt-4细胞survivin表达降低,呈时间和剂量依赖性,而且survivin从胞浆移位到胞核,流式细胞术显示细胞凋亡率也呈剂量和时间依赖性。结论：①survivin在儿童急性白血病中表达率为41.9%,提示其在儿童急性白血病发生、发展和预后中的意义;②survivin在胞浆和胞核的不同表达与临床化疗疗效有关,可作为判断预后的指标;③DNR可以降低白血病细胞中survivin表达,并使其从胞浆移位到胞核,诱导细胞凋亡。     

糖皮质激素对急性淋巴细胞白血病Puma表达的影响

目的：糖皮质激素可通过调节某些基因的表达而诱导细胞凋亡,但在治疗白血病过程中对促凋亡蛋白Pum a表达的影响尚不清楚,该实验试探讨糖皮质激素在诱导体外培养的急性淋巴细胞白血病细胞凋亡过程中对Pum a表达的影响。方法：利用人急性淋巴细胞白血病细胞移植到免疫缺陷小鼠体内建立的细胞系,地塞米松处理后MTT比色法进行药物敏感性实验、W estern印迹及实时荧光定量PCR检测Pum a蛋白及mRNA的表达。结果：来源于临床疗效好的病例样本,其体外培养的白血病细胞对地塞米松敏感,来源于临床疗效差的病例样本,其体外培养的白血病细胞对地塞米松耐药,耐药组与敏感组白血病细胞间对地塞米松的体外敏感性有显著差异(P<0.05)。地塞米松处理后耐药组及敏感组均未见Pum a蛋白及mRNA的表达上调。结论：糖皮质激素在诱导体外培养的白血病细胞凋亡过程中,不能引起Pum a表达的上调。     

Bad在地塞米松抑制嘌呤霉素诱导足细胞凋亡中的表达及意义

目的 观察嘌呤霉素(PAN)诱导和地塞米松(DEX)干预后足细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Bad表达的变化.方法 体外培养小鼠足细胞,将其分为对照组、PAN组和DEX组.对照组用含二甲基亚砜的RPMI-1640培养液培养;PAN组加入PAN;DEX组同时加入PAN和DEX.处理8 h、24 h和48 h后,用实时荧光定量聚合酶链式反应及Western blot分别检测各时间点Bad mRNA和蛋白的表达;用Annexin V-FITC/PI双染色法结合流式细胞仪检测足细胞凋亡率的变化.结果 1.PAN组各时间点Bad mRNA的表达均较对照组升高,并呈上升趋势,24 h和48 h时均显著升高(Pa<0.01);8 h时Bad蛋白表达与对照组比较无明显差异(P>0.05),24 h和48 h时均较对照组明显升高(Pa<0.05);各时间点足细胞凋亡率均较对照组升高,48 h时显著升高(P<0.01).2.DEX组Bad mRNA和蛋白的表达8 h时与PAN组比较无明显差异,但24 h时明显降低(P<0.05),各时间点足细胞凋亡率均较PAN组降低,24 h时显著降低(P<0.01).结论 PAN诱导足细胞后其凋亡率明显升高,可能与Bad mRNA及蛋白的表达增高有关,而DEX可能通过降低Bad mRNA及蛋白的表达减少足细胞的凋亡而抑制PAN的诱导,起到保护足细胞的作用.     

地塞米松对脂多糖诱导的急性肺损伤幼鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的影响

肺泡Ⅱ型上皮细胞对维持肺表面活性物质的动态平衡和肺免疫功能具有极其重要的意义。地塞米松对急性肺损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的影响目前仍不清楚。该研究探讨急性肺损伤时及应用地塞米松干预后肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的动态变化。方法：72只21 d SD幼鼠随机分为对照组、急性肺损伤组和地塞米松治疗组。肺损伤组的幼鼠腹腔注射脂多糖(LPS)（4 mg/kg）以建立急性肺损伤模型。对照组注射等量生理盐水。地塞米松治疗组在注射LPS 1 h后腹腔注射地塞米松（5 mg/kg）。每组随机选取8只幼鼠分别于注射LPS或生理盐水后24、48、72 h处死。取左肺下1 mm3的肺组织固定于2.5% 戊二醛中待透射电镜检查。结果：注射LPS 24 h后，肺损伤组大鼠AT II细胞微绒毛消失，板层小体数量增加。24 及48 h 板层小体呈指环状绕核排列。48 h出现巨大空泡变性样的板层小体。细胞核形态不规则，部分核边界不清。72 h 板层小体数目明显减少,核仁从细胞核消失,一些细胞核出现核溶解。注射LPS 后24 h地塞米松治疗组板层小体聚集在AT II细胞内同侧，并于该侧发生“胞吐”现象。48 h线粒体肿胀、聚集，脊断裂， 板层小体数目减少。72 h板层小体数目增多，并重新呈指环状绕核排列。结论：LPS诱导的急性肺损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的一系列变化呈时间依赖性。地塞米松能减轻急性肺损伤中肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤和促进肺泡Ⅱ型上皮细胞的功能恢复。［中国当代儿科杂志，2007，9（6）：521-525］     

反义Survivin对血管瘤内皮细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨脂质体转染Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对体外培养的增生期血管瘤内皮细胞增殖、凋亡的影响.方法 人工合成Survivin ASODN,通过脂质体转染到体外培养的增生期血管瘤内皮细胞,光镜和倒置相差显微镜观察转染后细胞形态变化;用四氮唑盐(MTT)法观察转染后48 h不同浓度Survivin ASODN对细胞生长抑制的影响;RT-PCR、Western-blot及免疫组化法检测转染后内皮细胞Survivin mRNA水平、蛋白水平表达及Caspase-3蛋白表达.结果 不同浓度的Survivin ASODN作用后内皮细胞多数变圆、变小、脱落,胞膜皱褶、卷曲,细胞核固缩、碎裂,核被染成深蓝色或蓝黑色,以600 nmol/L作用72 h改变最明显.细胞生长受到明显抑制,600 nmol/LSurvivin ASODN时细胞生长抑制率最高,可达70.5%.与对照组相比,实验组Survivin mRNA、蛋白水平表达均明显下调,Caspase-3蛋白表达明显上调.结论 在体外RNA干扰靶向抑制Survivin基因可以显著抑制增生期血管瘤内皮细胞增殖,促进细胞凋亡;Survivin可能是控制血管瘤内皮细胞增殖或凋亡的关键基因之一.

Abstract：

Objective To evaluate the effects of survivin on cell proliferation and apoptosis in proliferative hemangioma endothelial cells. Methods Hemangioma endothelial cells were cultured in vitro and transfected with Survivin antisense oligonucleotides. The morphological changes were assessed with light microscopy and inverted phase contrast microscopy and electron microscopy. MTT assay was carried out to determine cell proliferation in proliferative hemangioma endothelial cells treated with antisense compounds. By using RT-PCR and Western blot, the expression levels of survivin mRNA and proteins were quantified. Active caspase-3 was evaluated by immunohistochemistry. Results Some morphological changes (e. g. round endothelial cells, reduced cell volume, folded cell membrane and condensed nuclei ) were revealed after transfection with increasing concentration of survivin ASODN, and these changes were most significant at the dose of 600nM at 72 hours. Endothelial cell growth was suppressed at the concentration of 600nmol/L Survivin ASODN. Survivin mRNA, protein were down-regulated significantly and Caspase-3 was up-regulated significantly in the experimental groups. Conclusions Down-regulation of survivin expression induced by the antisense compounds reduces cell growth potential, promotes apoptosis in proliferative hemangioma endothelial cells. Survivin protein is a key molecule associated with proliferation and apoptosis,and antisense oligonucleotides targeting survivin could be used as a potential therapy of proliferative hemangioma.     

亚低温减轻新生大鼠缺氧缺血脑细胞凋亡的作用及机制研究

目的：细胞凋亡在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的发病机制中起重要作用,亚低温治疗是HIE最有前途的治疗方法之一。通过观察缺氧缺血后凋亡通路上关键成分的变化,探讨亚低温减轻新生大鼠脑细胞凋亡的作用及机制。方法：采用7日龄SD清洁级大鼠, 建立新生大鼠HIBD标准模型。模型动物随机分为常温缺氧缺血组 (IN, 肛温=37℃)和亚低温缺氧缺血组 (IH,肛温=33℃)。采用TUNEL结合苏木素-伊红染色、神经元Nissl染色等方法检测脑细胞凋亡;Western blotting加免疫组织化学法观察线粒体及胞浆细胞色素C蛋白改变;分别用RT-PCR和显色底物法检测caspase-3 mRNA表达及其酶活性改变。结果：IN组海马CA1区TUNEL阳性锥体细胞明显增多,DNA电泳梯状条带明显;72 h亚低温治疗显著降低脑细胞凋亡发生率,与常温比较差异有显著性（6.4±1.7 vs 25.3±1.5,P<0.01）。IN组胞浆Cyt c水平6 h开始明显升高,72 h达高峰,而线粒体内Cyt c水平则出现相应的下降;亚低温治疗组胞浆Cyt c水平降低和对应线粒体Cyt c水平的升高,以24 h、48 h和72 h最为明显,与IN组比较差异有显著性（P＜0.05）。HIBD后24 h组结扎侧脑组织caspase-3 mRNA表达明显增加,亚低温治疗显著降低caspase-3 mRNA表达水平,以48 h、72 h 治疗组最明显（P＜0.05）,而caspase-3酶活性却在24 h达高峰,亚低温治疗可明显降低HIBD 后24 h 的caspase-3酶活性,与常温比较差异有显著性（2.42±0.5 RFU vs 34.7±3.2 RFU ,P＜ 0.01)。结论：亚低温治疗能够显著降低HIBD后细胞凋亡发生率,其机制可能作用于凋亡通路的多个部位：减少Cyt c释放,减轻或抑制caspase-3表达及其蛋白酶活性等。［中国当代儿科杂志,2007,9（1）：37-41］     

Survivin在白血病中表达及其与CasPase、Fas相关性研究

目的　研究Survivin在白血病中表达的临床意义及其在白血病细胞凋亡中的作用。方法　应用蛋白印迹法检测1 8例白血病患者和 1 0例正常对照组患儿外周血中单个核细胞Survivin的表达 ;采用免疫组化法测定Fas和Caspase表达 ;运用四格表的确切概率法进行Survivin表达与白血病患者临床特点和Fas、Caspase表达的进行相关性分析。结果　 1 .白血病患者1 8例中 1 3例Survivin表达阳性 (72 .2 % ) ,正常对照组 1 0例Survivin检测均为阴性。Survivin表达在不同白血病类型、WBC组间有显著差异 (P <0 .0 5)。 2 .白血病患者 1 8例中 ,9例Fas表达阳性。经统计学分析 ,Survivin表达与Fas表达无相关性(P =0 .1 1 6)。 3 .白血病患者 1 8例中 5例Caspase 3表达阳性 ,两者比较 (P =0 .0 0 2 ) ,有显著性差异。结论　Survivin基因可选择性的在白血病患者外周血单个核细胞中表达 ,而在对照组中无Survivin表达 ,表明Survivin表达与白血病的发生有一定关系。Survivin表达情况可能成为白血病临床诊断、预后判断的有效指标。Survivin的作用位点可能不在Fas水平 ,而主要通过抑制Caspase 3表达 ,在凋亡途径的下游发挥抗凋亡作用。     

幼年大鼠内毒素血症时小肠上皮细胞凋亡及Caspase-3的表达

目的：儿科危重症中胃肠功能障碍的常见病因是严重感染,其发病机制与内毒素血症导致肠黏膜屏障功能破坏密切相关。该研究探讨幼年大鼠内毒素血症时肠黏膜屏障损伤的细胞凋亡情况及其可能的信号转导通路,为寻求新的治疗途径提供依据。方法：40只18日龄Wstar大鼠腹腔注射4mg/kg内毒素(大肠杆菌O55∶B5脂多糖1mg/mL)制成内毒素血症模型,对照组大鼠(n=40)腹腔注射1mL/kg生理盐水。两组分别在注射后2, 4, 6, 24, 72h处死8只大鼠,取4cm远端回肠,行苏木精伊红染色,光镜下观察小肠绒毛的病理变化,原位末端标记法(TUNEL)检测小肠上皮的细胞凋亡,免疫组织化学测定Caspase 3的表达。结果：光镜下对照组各时点小肠绒毛结构正常,内毒素组注射后4 ~ 72h可见少量炎症细胞浸润。注内毒素后2h上皮细胞凋亡和Caspase 3的表达明显增加,分别于24h和6h达高峰, 72h开始下降。内毒素组各时间点小肠绒毛上皮细胞凋亡指数和Caspase 3的表达均明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01或P<0. 001)。结论：幼年大鼠内毒素血症时小肠上皮细胞凋亡增加,Caspase 3表达是其信号转导途径之一。细胞凋亡可能是严重感染时肠黏膜屏障破坏机制。     

Survivin在柔红霉素与长春新碱诱导白血病细胞凋亡中的作用

目的探讨Survivin在柔红霉素(DNR)与长春新碱(VCR)作用机制中的作用。方法2005年在武汉同济医院儿科血液实验室,选用高表达Survivin的Molt-4细胞,流式细胞术检测DNR、VCR作用后Molt-4细胞的凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DNR、VCR作用后Survivin mRNA的表达,免疫组化(SABC)方法检测DNR、VCR作用后Survivin蛋白的表达。结果DNR诱导白血病细胞凋亡的能力较VCR强(P<0.05),Sur-vivin mRNA和蛋白表达在DNR组明显低于VCR组,呈时间和剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Survivin在DNR作用机制中发挥重要作用,在VCR作用机制中没有重要作用。