Akt2抑制剂促进大鼠根尖周炎症微环境中巨噬细胞的极化：基于降低miR-155-5p的表达

目的 通过构建大鼠慢性根尖周炎模型,探讨Akt2抑制剂对根尖周组织巨噬细胞极化的影响及其相关因素。方法 随机选取32只健康SD大鼠,其中28只作为实验组,通过髓腔开放法建立大鼠根尖周炎模型,在模型构建过程中分别在下颌第一磨牙左右侧髓腔内注射生理盐水和Akt2抑制剂。另外4只为健康对照组,不做任何处理。于开髓后第7、14、21、28天随机处死7只实验组和1只健康对照组大鼠后,分离下颌骨获取样本。X线和苏木精-伊红（HE）染色观察根尖周组织炎症浸润情况;免疫组织化学（IHC）染色观察Akt2、巨噬细胞及炎症介质的表达与定位,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）观察Akt2、CD86、CD163、炎症介质（IL-6、IL-10）、miR-155-5p及C/EBPβ的m RNA表达,分析对巨噬细胞极化的影响。结果 X线和苏木精-伊红染色结果显示：髓腔开放21 d后大鼠根尖周表现明显的慢性炎症,确认慢性大鼠根尖周炎模型构建成功。IHC染色和RT-PCR结果表明：与健康对照组相比,髓腔开放21 d后实验组大鼠根尖周炎组织中Akt2、CD86、CD163、miR-155-5p、C/EBPβ、及IL-...     

转化生长因子-β1在实验性根尖周炎病

目的：探讨转化生长因子-β₁(TGF-β₁)在实验性根尖周病炎症反应和预防中的可能作用。方法：30只Wistar大鼠于上颌1、2磨牙制备根尖周炎动物模型（实验组），下颌1、2磨牙作自身对照组。按开髓后1~10周不同时间点随机分成10组(n=3)，采用组织病理学及免疫组织化学方法观察TGF-β₁在根尖周炎病变不同阶段中的定位及分布。结果：实验组炎症早期的牙髓（第1~2周）和根尖周（第4~6周）组织中均可见TGF-β₁阳性表达，表达细胞多为巨噬细胞、淋巴细胞和成纤维细胞；其染色强度随炎症的发展而改变；牙髓坏死及根尖周炎慢性期（第7周）TGF-β₁阳性表达消失。自身对照组下颌第1、2磨牙不同时间点牙髓及根尖部组织均未见TGF-β₁阳性染色。结论：TGF-β₁在实验性根尖周病变的炎症反应和防御反应中具有一定的调节作用。     

血小板衍生生长因子-B的表达与根尖周骨吸收的关系

目的：观察血小板衍生生长因子B链（PDGF-B）在大鼠根尖周炎中的表达情况,探讨PDGF-B与根尖周骨吸收的关系。方法：将24只SD大鼠开髓,分别于术后7,14,21,28 d取下颌骨,制备组织切片,用免疫组织化学的方法测定PDGF-B在大鼠根尖周炎中的表达,酶组织化学方法检测抗酒石酸酸性磷酸酶,观察破骨细胞。结果：在根尖周炎的急性期,即术后7 d和14 d,PDGF-B阳性细胞和破骨细胞都增多,二者存在明显正相关;在根尖周炎的慢性期,即术后21 d和28 d,PDGF-B表达继续增高,而破骨细胞数却迅速下降,二者为负相关。结论：PDGF-B在根尖周炎早期可能主要发挥促骨吸收作用,而在慢性期,PDGF-B可能主要与根尖周炎的修复相关。     

粪肠球菌再感染根尖周炎病程进展分析

目的构建粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)再感染大鼠根尖周炎模型,通过观察实验牙根尖区骨质破坏面积、根尖区炎症状态及TNF-α表达,分析E.faecalis再感染大鼠根尖周炎的病程进展。方法 SD大鼠30只,采用双侧上颌第一磨牙开髓后置入细菌内毒素脂多糖并自然暴露于口腔正常菌群4周的方法建立混合菌初次感染慢性根尖周炎模型,建模成功后对实验牙行根管预备、封药消毒2周,其后去除填充物,根管内注入E.faecalis菌悬液,封闭洞口1周建立E.faecalis再感染大鼠根尖周炎模型,之后连续观察3周。E.faecalis再感染根尖周炎组大鼠在建模成功后1周、2周、3周时,以及混合菌初次感染慢性根尖周炎组正常培养6周后、慢性根尖周炎氢氧化钙治疗组经氢氧化钙治疗6周后,各组随机处死6只大鼠,通过X线测量法、H-E染色和免疫组化染色分别检测实验牙根尖周区骨质破坏面积、根尖周区炎症状态及炎症因子TNF-α的表达量。结果 (1)E.faecalis再感染大鼠根尖周炎建模成功后连续观察3周发现根尖周骨质破坏面积持续增加,骨破坏边界仍不清晰,而根尖周炎症1～2周时达重度炎症,在3周时已转为慢性炎症状态,TNF-α表达量在2周后下降。(2)混合菌初次感染慢性根尖周炎组根尖周骨质破坏面积较小,骨破坏边缘清晰,根尖炎症程度低,TNF-α表达量少。(3)慢性根尖周炎氢氧化钙治疗组根尖周骨质破坏面积最小,炎症消退,可见根尖周牙骨质和牙槽骨新生明显,TNF-α极少量表达。结论 E.faecalis具有较强的破坏根尖周组织的能力,在慢性炎症时,根尖周组织仍有进行性溶骨破坏的现象。     

血管内皮生长因子在实验性根尖周炎中的表达

目的：通过检测正常根尖周组织和实验性根尖周炎进展过程中根尖周组织血管内皮生长因子（VEGF）免疫组化表达的分布情况及规律，探讨其在根尖周组织炎症进展中的作用。方法：HE染色与VEGF免疫组化染色，光镜观察大鼠根尖周炎进展情况和VEGF在根尖周组织的表达部位与程度，检测VEGF表达阳性部位的平均积分光密度值。结果：根尖孔周围炎性浸润区、根尖周内芽组织及吸收程度严重的根尖周骨组织中，VEGF表达较正常组强，并有随牙髓暴露时间增长而逐渐增高趋势。结论：VEGF参与根尖周炎症的进展及肉芽组织形成，可能参与调节根尖骨吸收。     

血小板衍生生长因子-B的表达与根尖周骨吸收的关系

目的:观察血小板衍生生长因子B链(PDGF-B)在大鼠根尖周炎中的表达情况,探讨PDGF-B与根尖周骨吸收的关系。方法:将24只SD大鼠开髓,分别于术后7,14,21,28 d取下颌骨,制备组织切片,用免疫组织化学的方法测定PDGF-B在大鼠根尖周炎中的表达,酶组织化学方法检测抗酒石酸酸性磷酸酶,观察破骨细胞。结果:在根尖周炎的急性期,即术后7 d和14 d,PDGF-B阳性细胞和破骨细胞都增多,二者存在明显正相关;在根尖周炎的慢性期,即术后21 d和28 d,PDGF-B表达继续增高,而破骨细胞数却迅速下降,二者为负相关。结论:PDGF-B在根尖周炎早期可能主要发挥促骨吸收作用,而在慢性期,PDGF-B可能主要与根尖周炎的修复相关。     

免疫组织化学方法测定TGF-β1在鼠根尖周炎中的表达

目的了解TGF-β1与大鼠急性根尖周炎的关系.方法取16只SD大鼠建立鼠根尖周炎动物模型,制作根尖周组织切片,用免疫组织化学方法测定TGF-β1在根尖周炎中的表达.结果免疫组化研究显示TGF-β1阳性表达细胞分布于根尖周和牙槽骨缺损处,在急性期(1～3周)根尖炎症阶段有高表达,表达细胞多为巨噬细胞、淋巴细胞和成纤维细胞;而在急性期和慢性期(第4周)均未见成骨细胞TGF-β1表达.结论在早期(1～4周)根尖炎症阶段未见成骨细胞TGF-β1表达,推测此物质在该阶段主要起促炎症作用.     

MMP-8在粪肠球菌再感染根尖周炎大鼠根尖周组织中的表达

目的：观察基质金属蛋白酶-8（MMP-8）在SD大鼠根尖周组织中的表达水平变化,探讨MMP-8与粪肠球菌再感染根尖周炎病程发展的关系。方法：42只SD大鼠采用第一磨牙开髓置入细菌内毒素脂多糖（LPS）棉球并暴露于口腔环境的方法建立初次感染根尖周炎模型,大鼠随机分为慢性根尖周炎组（不做特殊处理）、氢氧化钙消毒组（根管预备消毒后封氢氧化钙糊剂）、甲醛甲酚（FC）消毒组（经根管预备消毒后封FC棉球）和粪肠球菌再感染根尖周炎组（FC消毒2周后导入粪肠球菌）。慢性根尖周炎组在6周、氢氧化钙消毒组在6周、FC消毒组在2周和粪肠球菌再感染根尖周炎组在1、2、3和4周的时间点分别处死6只大鼠,取其上颌骨,制作组织切片,测定各组根尖周组织中MMP-8的免疫组织化学积分吸光度（IA）值。结果：MMP-8在FC消毒组（4.49±1.08） 与氢氧化钙消毒组（14.84±2.60）中表达水平均明显低于慢性根尖周炎组（27.76±2.60）（P<0.01）,且FC组MMP-8表达水平低于氢氧化钙组（P<0.01）。粪肠球菌再感染根尖周炎组1周时MMP-8表达水平（42.08±4.19）高于慢性根尖周炎组,并于1周、2周（61.32±5.81）、3周（79.45±7.40）和4周（114.67±10.40）MMP-8表达水平逐渐升高,呈时间依赖关系（P<0.05）,且均高于其他3组(P<0.05)。结论：在SD大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎炎症破坏过程中,MMP-8表达水平与病损扩展情况有关联,且MMP-8表达水平越高,病程扩展越严重。     

TGF-β/Smad与Wnt/β-catenin在博莱霉素致大鼠肺纤维化中的表达及相互作用

目的观察TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达,探讨两条通路对肺纤维化的影响及其相互作用。方法取Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,每组18只。采用气管内注入博来霉素(BLM)建立Wistar大鼠肺纤维化模型,每组分别于第14、21和28天处死大鼠各6只;取肺组织称重,测定肺组织中HYP、IL-1β水平,观察肺组织Col-I、IL-1β、TGF-β1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-catenin、LEF-1 mRNA的表达,并进行HE染色和Masson胶原染色。结果 (1)与正常对照组比,造模后14~28 d大鼠肺指数均明显升高(P0.01);肺组织HE染色呈现明显的肺纤维化病理改变,Masson染色结果可见造模后14~28 d肺间质蓝色胶原呈渐进性增加。(2)造模后第14天,肺组织IL-1β含量、IL-1βmRNA相对含量均显著升高(P0.01),随后逐渐降低,至造模后第28天IL-1β表达量接近正常水平(P0.05)。(3)造模后14~28d大鼠肺组织HYP含量、Col-I mRNA相对表达量均明显升高(P0.01)。(4)与正常组相比,模型组中TGFβ1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-Catenin、LEF-1 mRNA表达显著增加(P0.01),且TGFβ1、Smad3 mRNA分别与Wnt1、LEF-1、β-catenin mRNA的表达呈显著正相关。结论 TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在博来霉素致大鼠肺纤维化中表达上调,两条通路对肺纤维化可能有促进作用且它们间可能存在一定联系。     

根尖周病变中破骨细胞分化因子的免疫组化定位

目的:观察大鼠根尖周病变过程中破骨细胞分化因子(osteoclast differentiation factor, ODF)的表达,探讨ODF与破骨细胞及根尖周骨吸收的关系。方法:将25只 SD大鼠开髓,分别于术后 0,7,14,21,28 d取下颌骨,制备组织切片,分别用免疫组织化学和酶组织化学的方法检测 ODF及破骨细胞在根尖周病损中的表达与分布。结果:在正常根尖周组织中偶见 ODF表达阳性细胞和前破骨细胞;术后 7 d根尖周有炎症细胞浸润,可见较多的ODF阳性细胞和少量破骨细胞;术后14 d根尖周表现为急性炎症反应,ODF阳性细胞及破骨细胞的数量上升至高峰;术后21~28 d根尖周病损进入慢性炎症期,ODF表达迅速下降,破骨细胞数量明显减少。结论:ODF表达于根尖周病损中,可能诱导了破骨细胞的分化,导致牙槽骨的吸收。     

葛根素对牙周炎大鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响

目的 探究葛根素对牙周炎大鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)/调节性T细胞（Regulatory T cell, Treg）免疫平衡及相关转录因子的影响。方法 采用分离牙龈、丝线结扎配合龈下注射大肠杆菌内毒素（ELPS）法建立大鼠牙周炎模型。将大鼠随机分为正常对照组（A组）、牙周炎模型组（B组）、200 mg/（kg·d）葛根素组（C组）。HE染色观察牙周组织病理形态学变化。通过Micro-CT对骨生物学参数定量分析牙槽骨吸收情况。流式细胞术、免疫印迹法（western blot,WB）分别检测牙周组织中Th17、Treg细胞比例、白介素-17(IL-17)、视黄酸相关孤儿受体（RORγt）、IL-10、叉头状转录因子-3(Foxp3)蛋白表达。结果 HE染色中葛根素组大鼠牙根部可见明显新生骨细胞增生,牙周膜可见少量炎症细胞聚集,牙槽骨结构较整齐。Micro-CT显示治疗组大鼠牙槽骨较模型组骨量略有下降,骨质量及强度有所上升。流式细胞术检测全血细胞发现葛根素组的TH17、Treg细胞比例均下降,且TH17/Treg的细胞比例也下降。IL-10、Foxp3在...     

异基因造血干细胞移植后aGVHD与调节性T细胞、IL-35的相关性

目的   探索异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后发生急性移植物抗宿主病（aGVHD）的患者外周血中调节性T细胞及其相关转录因子、细胞因子的水平,以期获得能够有效预测患者发生aGVHD的生物学指标。方法   外周血样品采自接受造血干细胞移植术的患者和健康人,其中aGVHD阳性组13例,aGVHD阴性组10例,正常对照组21例。采用流式细胞术检测各组外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比,应用实时定量PCR检测外周血单个核细胞中Foxp3转录因子的相对表达量,应用酶联免疫吸附试验检测外周血血浆中Treg相关细胞因子IL-35的表达水平。结果   aGVHD阳性组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、单个核细胞中Foxp3转录因子的相对表达量、血浆中IL-35的表达水平较aGVHD阴性组和正常对照组明显降低（P<0.05）,且经有效治疗后各指标显著升高。在aGVHD阳性组中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、Foxp3的相对表达量与aGVHD的危险度分级呈负相关（P<0.05）。配对样本资料分析显示,aGVHD发生时外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、Foxp3 mRNA的相对表达量与aGVHD发生前1~2周相比明显下降（P<0.05）。结论   异基因造血干细胞移植后患者发生aGVHD时CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的百分比、其转录因子的表达量及IL-35水平均发生明显降低,且在治疗后明显升高,可以为临床预测aGVHD的发生发展及预后提供理论依据和实验基础。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17/Treg和Th1免疫失衡研究

目的：探讨Th17、Treg和Th1细胞免疫失衡在慢性乙型肝炎（CHB）发病中的作用。方法：采用荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Th17、Treg和Th1细胞的特异性转录因子RORC、Foxp3和T-bet的mRNA表达,ELISA分析CHB患者PBMCs培养上清液中白细胞介素（IL）-17、IL-21和血清IL-6、IL-1β的水平,PCR检测外周血HBV DNA;生化分析仪检测谷丙转氨酶（ALT）。结果：与正常对照组相比,CHB患者PBMCs中RORC mRNA、IL-17、IL-21水平明显升高（P〈0.01）;RORC mRNA与ALT呈正相关,与T-bet mRNA呈负相关;T-betmRNA与ALT呈负相关,外周血中IL-6、IL-1β水平也明显增高（P〈0.01）;Foxp3 mRNA与HBV DNA正相关。结论：Th17和Treg、Th1细胞免疫功能失衡与CHB病情密切相关。     

香青兰乙醇提取物对溃疡性结肠炎大鼠AhR/I-κB相关通路蛋白及炎症因子表达的影响*

目的: 分析香青兰乙醇提取物对硫酸葡聚糖钠盐(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)芳香烃受体(AhR)、核转录因子-κb抑制蛋白(I-κB)通路蛋白及相关炎症因子表达的影响。方法: 雄性SD大鼠30只,随机分为空白组、模型组和香青兰组,每组10只。除空白组外,其他各组大鼠饮用5 % DSS溶液7 d后,香青兰组大鼠灌胃给予400 mg/kg香青兰乙醇提取物,模型组、空白组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,连续给药7 d。记录小鼠体重、粪便性状及便血情况,HE染色观察结肠组织病理学变化。采用实时荧光定量PCR法检测AhR、IL-1β、IL-6和IL-8的mRNA水平,采用Western Blot检测结肠组织p-I-κB蛋白的表达。结果: 与空白组比较,模型组大鼠体重减轻,出现黏液脓血便,结肠组织黏膜下水肿、出血、大量炎性细胞浸润, IL-1β、IL-6、IL-8表达升高(P＜0.05),AhR表达降低(P＜0.05),p-I-κB表达升高(P＜0.05)。与模型组比较,香青兰组DAI评分降低,结肠病理改善, IL-1β、IL-6、IL-8表达明显降低(P＜0.05),AhR表达升高(P＜0.05),p-I-κB表达降低(P＜0.05)。结论: 香青兰乙醇提取物可调节AhR/I-κB信号通路,抑制促炎因子释放,减轻肠道炎症反应,从而对溃疡性结肠炎发挥保护作用。     

哮喘患者外周血调节性T细胞和Th17细胞数量及其转录因子的变化

[摘要] 目的： 观察哮喘患者外周血CD4+CD25+Foxp3+、CD4+IL-17+细胞的百分比和Foxp3、白介素-17(IL-17)、RORγt mRNA的表达水平的变化与哮喘发病的关系。方法： 分别取23例哮喘缓解期患者、25例哮喘急性发作期患者和20例健康人（对照组）的外周血单个核细胞（PBMC）,免疫磁珠阴选CD4+T细胞,采用Foxp3、IL-17胞内染色的方法,通过流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+以及CD4+IL-17+细胞的百分比,应用RT-PCR检测Foxp3、IL-17、RORγt mRNA水平。结果： 免疫磁珠阴选CD4+T细胞纯度达90％以上。急性发作组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+细胞百分比以及Foxp3 mRNA水平较对照组和缓解组明显降低（P＜0.01）,而缓解组和对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;急性发作组CD4+IL-17+细胞比例以及IL-17、RORγt mRNA表达较对照组和缓解组明显增高（P＜0.01）,而缓解组亦明显高于对照组（P＜0.05）。结论： Treg/Th17失衡可能和哮喘发病密切相关。     

二十二碳六烯酸对创伤性颅脑损伤后神经功能恢复的作用及机制

目的：探讨二十二碳六烯酸（DHA）对小鼠创伤性颅脑损伤（TBI）后神经功能恢复的作用及其可能机制。方法：采用控制性皮层撞击建立小鼠TBI模型。45只C57BL/6N雄性小鼠按照随机数字法分成Sham组、TBI组、TBI+DHA组，每组15只。TBI+DHA组于TBI后30 min内按照10 mg/（kg·d）剂量腹腔注射DHA，持续3 d,Sham组和TBI组注射等体积0.9%氯化钠溶液。采用Garcia神经行为学评分评估各组小鼠运动和感觉功能的恢复情况。采用HE染色观察各组大脑皮层组织的缺损情况。采用蛋白质印迹（Western blot）法及实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）测定各组炎症相关因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）蛋白及mRNA表达水平。结果：与Sham组相比，TBI组小鼠的Garcia神经行为学评分显著下降（P ＜0.05），而DHA给药后其Garcia评分升高（P ＜0.05）。与Sham组相比，TBI组的大脑皮层组织缺失明显，DHA治疗能够减少TBI后大脑皮层组织的丢失，促进修复。Western blot及RT-qPCR结果显示，与Sham组比，TBI小鼠大脑皮层的促炎因子TNF-α、IL-6蛋白及mRNA表达增加，抗炎因子IL-10蛋白及mRNA表达减少（均P ＜0.01）；与TBI组比，DHA干预后小鼠大脑皮层的TNF-α、IL-6蛋白及mRNA表达量显著下降，IL-10蛋白及mRNA表达量显著升高（均P ＜0.01）。结论：DHA可以促进小鼠TBI的神经功能修复，其机制可能是通过调节TNF-α信号通路实现的。     

西格列汀对2型糖尿病合并颈动脉硬化患者氧化应激指标和内皮素的影响

目的: 检测芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)在原因不明自然流产患者蜕膜组织中的表达,探讨其表达与蜕膜中调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)/Th17细胞因子平衡之间的关系。方法: 选择原因不明复发性流产患者23 例作为观察组,另选择正常早孕妇女30例作为对照组;采用实时荧光定量PCR法检测两组蜕膜组织中AhR、叉头样转录因子p3 (forkhead box p3,Foxp3)、IL-10及维甲酸孤独核受体γ(retinoic acid receptor-related orphan receptors γ,ROR-γ)等 mRNA表达,并对AhR mRNA表达与Foxp3、IL-10、ROR-γ mRNA表达作相关分析。结果：观察组蜕膜中AhR mRNA、ROR-γ mRNA表达明显高于对照组,但Foxp3 mRNA、IL-10 mRNA则明显低于对照组(P均<0.05)。两组蜕膜中AhR mRNA表达与ROR-γ mRNA 表达呈正相关(P均<0.05),与Foxp3 mRNA以及IL 10 mRNA表达则无明显相关性(P均＞0.05)。结论：原因不明自然流产患者蜕膜中AhR mRNA及Th17细胞因子表达均升高,而Treg细胞因子表达下降,Treg/Th17细胞比例下降。AhR表达增高与Th17细胞因子上调相关。     

益生菌对卵巢摘除致雌激素缺乏小鼠牙周组织中IL-17表达的影响及其意义

目的：探讨益生菌干预对雌激素缺乏小鼠牙周组织中白细胞介素17（IL-17）表达的影响,阐明雌激素缺乏与牙周炎关联性的可能机制。方法：选取8周龄健康雌性C57BL/6J小鼠15只,随机分为假手术组、卵巢摘除组和益生菌干预组（卵巢摘除术后行益生菌灌服）,每组5只。采用平均骨密度测量技术检测实验前后小鼠骨矿物质密度（BMD）,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测小鼠骨髓细胞和牙龈组织中IL-17mRNA表达水平,流式细胞术检测小鼠骨髓中辅助性T细胞17（Th17）占CD4⁺ TCRβ⁺细胞的百分率。结果：与假手术组比较,卵巢摘除组小鼠BMD明显降低（P<0.05）,骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）,Th17细胞占骨髓CD4⁺TCRβ⁺细胞百分率明显升高（P<0.05）;与卵巢摘除组比较,益生菌干预组小鼠BMD明显增加（P<0.05）,骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）,Th17细胞占骨髓CD4⁺TCRβ⁺细胞百分率明显降低（P<0.05）;与假手术组比较,益生菌干预组小鼠股骨BMD、骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平及Th17细胞占骨髓CD4⁺TCRβ⁺细胞百分率差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：益生菌干预能阻止雌激素缺乏导致的小鼠牙周组织中IL-17水平升高,对雌激素缺乏引起的牙周炎具有预防作用。     

成人微小病变肾病患者外周血CD4~＋Foxp3~＋调节性T细胞的研究

目的研究CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋Foxp3＋Treg）及亚群在成人微小病变肾病（MCD）患者外周血CD4＋T细胞中的分布,探讨CD4＋Foxp3＋Treg参与MCD发病的可能机制。方法以27例经肾穿刺活检确诊为MCD的初发成人患者作为研究对象,采用Foxp3-FITC/CD45RA-PE/CD3-ECD/CD4-PC7抗体组合经流式细胞仪检测外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4＋Foxp3＋Treg及亚群占CD4＋T细胞的百分比。Real-Time PCR检测PBMCs中Foxp3、Th17转录因子RORc以及细胞因子TGF-β1、IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达。设立正常对照。结果流式细胞检测显示CD4＋Foxp3＋Treg分成3个细胞群体,分别为CD45RA＋Foxp3low（Ⅰ区,静息期Treg）、CD45RA-Foxp3high（Ⅱ区,活化Treg）和CD45RA-Foxp3low（Ⅲ区）。MCD组Ⅰ区＋Ⅱ区细胞和Ⅱ区细胞占CD4＋T细胞的百分比显著低于对照组（P〈0.01）。MCD组PBMCs中Foxp3mRNA表达较对照组下调（P〈0.05）,RORcmRNA表达较对照组上调（P〈0.05）,IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达均显著高于对照组（P〈0.05和P〈0.01）。相关性分析显示,MCD组IL-17A mRNA表达与Ⅱ区细胞占CD4＋T细胞的百分比呈显著负相关（r=-0.81,P〈0.05）。结论成人MCD患者外周血Treg及其活化功能亚群减少,同时伴有Th17转录基因及其相关细胞因子表达的异常升高。提示Treg Foxp3 mRNA表达下调及Treg/Th17细胞比例失衡可能与MCD的发病有关。