肾虚质大鼠免疫相关因子含量变化与肾藏象理论的相关性研究

目的:研究肾虚质大鼠血清细胞因子IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α变化情况,探讨其与肾藏象理论的相关性。方法:采用惊恐方法,建立惊恐致肾虚质的动物模型,研究肾虚质大鼠血清IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α变化情况及补肾药的干预作用。结果:与空白组相比,模型组IL-10、IFN-γ的含量均降低,IL-6、TNF-α含量升高,其中IFN-γ的降低和TNF-α的升高有统计学意义(P<0.05)。用补肾中药干预后其血清IL-10、IFN-γ的含量均升高,IL-6、TNF-α含量降低,均无统计学意义。结论:惊恐致肾虚质的动物模型,具有中医理论特色和操作的可行性。肾虚质大鼠存在着免疫稳态失衡,外周血清中细胞因子IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α的含量变化与肾虚质有一定的相关性。     

肾虚质大鼠学习记忆与BDNF表达的实验研究

目的:通过肾虚质大鼠学习记忆与海马BDNF及其相关分子的表达变化,揭示肾藏志理论的物质基础与神经生物学机制。方法:采用\"猫吓鼠\"经典造模法造成先天不足加后天失养复合型肾虚质模型仔鼠,分为模型组、左归丸、右归丸组,空白组产自正常孕鼠。选用补肾中药进行调理,Morris水迷宫实验观察学习记忆功能变化,免疫印迹法检测肾虚质大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶B(TrkB)、钙/钙调素依赖蛋白激酶2(CaMK2)和cAMP反应原件结合蛋白(CREB)表达。结果:Morris水迷宫实验:与空白组比较,肾虚组大鼠潜伏期、总路程以及第一次穿越目标区时间均有所增加;补肾药物干预后潜伏期、总路程以及第一次穿越目标区时间均有所降低。与空白组相比,模型组BDNF表达水平显著下降,药物干预后BDNF表达均显著高于模型组。结论:肾虚质模型大鼠学习记忆能力明显退化且海马BDNF蛋白表达下降,受体TrkB、CaMK2、CREB亦出现一定程度的降低,补肾药物可上调其表达水平从而纠正其异常变化。     

肾虚体质大鼠细胞因子的实验研究

目的:研究肾虚质大鼠细胞因子IL-2、IL-6外周血含量变化情况。方法:以猫吓孕鼠方法造成肾虚动物模型研究子代"先天不足"造成的肾虚质大鼠与空白组、药物组免疫水平的差异。结果:肾虚质大鼠在外周血的IL-2水平低于空白对照组(P<0.05);IL-6水平高于空白对照组(P<0.05),结论:大鼠的外周血IL-2水平降低和IL-6水平升高是形成肾虚体质的免疫学基础之一。     

肾虚体质大鼠生理指标变化的实验研究

目的:研究肾虚质大鼠生理指标的变化规律。方法:以猫吓孕鼠造模肾虚质,观测母鼠及其子代鼠在饮食、大便、活动、生长发育等生理方面的变化情况。结果:母鼠的大便、子代鼠的生长发育等生理情况有着明显的变化,而母鼠饮食量无明显改变。结论:肾虚质大鼠的生理指标有显著性改变。     

大鼠肾虚模型的唾液免疫学研究

从免疫学角度研究大鼠肾虚模型唾液指标的变化，探讨涎唾与肾的免疫相关性，并拟通过免疫指标的检测，寻找疾病微观辨证的量化指标和检测方法，以丰富中医藏象理论。采用大鼠肾虚模型，观察大鼠唾液腺白细胞介素-6(IL-6)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和唾液溶菌酶的含量变化，并与空白对照组、肾虚模型 右归饮治疗组相对照，实验发现，大鼠肾虚证的IL-6、唾液溶菌酶增高，SIgA降低，说明大鼠肾虚证存在着免疫功能紊乱的现象，初步表明大鼠肾虚与唾液免疫有一定的关系；大鼠肾虚模型经过右归饮治疗后，紊乱的免疫功能恢复正常，萎缩及破坏的唾液腺有所恢复，说明右归饮具有调节唾液免疫功能的作用。结果显示：大鼠肾虚模型唾液腺白细胞介素-6(IL-6)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、唾液溶菌酶值发生了各自不同的变化，提示大鼠肾虚证与唾液免疫具有一定的关系。     

大鼠肾虚模型的唾液免疫学研究

从免疫学角度研究大鼠肾虚模型唾液指标的变化,探讨涎唾与肾的免疫相关性,并拟通过免疫指标的检测,寻找疾病微观辨证的量化指标和检测方法,以丰富中医藏象理论.采用大鼠肾虚模型,观察大鼠唾液腺白细胞介素-6(IL-6)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和唾液溶菌酶的含量变化,并与空白对照组、肾虚模型 右归饮治疗组相对照,实验发现,大鼠肾虚证的IL-6、唾液溶菌酶增高,SIgA降低,说明大鼠肾虚证存在着免疫功能紊乱的现象,初步表明大鼠肾虚与唾液免疫有一定的关系;大鼠肾虚模型经过右归饮治疗后,紊乱的免疫功能恢复正常,萎缩及破坏的唾液腺有所恢复,说明右归饮具有调节唾液免疫功能的作用.结果显示:大鼠肾虚模型唾液腺白细胞介素-6(IL-6)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、唾液溶菌酶值发生了各自不同的变化,提示大鼠肾虚证与唾液免疫具有一定的关系.     

肾气丸与右归丸对肾虚大鼠肾功能损伤恢复的实验研究

目的:观察肾气丸与右归丸对实验肾功损伤大鼠影响的比较研究。方法:雄性wistar雄鼠40只,随机分成4组,空白组常规喂养。余3组造劳倦过度加庆大霉素肾虚模型。2周后,造模成功后,B组(右归丸组),C组(肾气丸组)给予灌药。观察大鼠一般情况。取颈静脉血检测血清尿素氮(BUN),血清肌酐(Cr)变化情况及病理变化。结果:造模成功,用药后,Cr检验4组对比不明显(P0.05),但模型组、右归丸组与肾气丸组均有恢复趋势,肾气丸组较其他组更具优效性。实验后Bun有恢复趋势,且前后对比有统计学意义(P0.01),肾气丸组恢复明显。病理切片显示:模型组,右归丸组,肾气丸组均有病理损伤,模型组右归丸损伤严重,肾气丸损伤相对轻。该实验从对比角度,研究肾气丸,右归丸对模型大鼠的肾功能恢复的机制,为进一步研究打下实验基础。     

雌性大鼠肾虚血瘀模型初探

目的 建立雌性大鼠肾虚血瘀模型.方法 选择雌性未孕SPF级健康SD大鼠40只随机分为模型组的20天组、40天组与对照组的20天组、40天组4组,每组10只.模型组大鼠进行去势手术,对照组大鼠进行假手术,分别观察20、40天,通过观察大鼠表征靶点、血液流变学、炎症靶点及神经-内分泌-免疫系统(NIM网络)靶点等的变化情况进行评价.结果 造模后动物出现了形体逐渐肥胖、活动不灵活、皮毛无光泽、喜背光、大便溏、舌质淡暗、舌下脉络增粗增长的表现.以及血液黏度增高,红细胞压积、聚集性增高,变形性降低,血小板聚集性增强等血流缓慢、循环障碍特点,同时出现认知能力下降,性激素降低,性器官萎缩,脾脏淋巴细胞亚群的比例失常,免疫功能紊乱,表现为NIM网络平衡失调.结论 初步建立了雌性大鼠肾虚血瘀模型.     

三黄凝胶对耳郭痤疮模型大鼠血清IL-17、IL-23水平的影响

目的 观察三黄凝胶对大鼠耳郭痤疮模型血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)水平的影响,探究外涂三黄凝胶治疗痤疮的作用机制.方法 从50只Wistar大鼠中随机选取8只作为空白组,其余大鼠采用煤焦油涂抹于右耳郭耳导管开口处方法建立耳郭痤疮模型,将造模成功的40只大鼠随机分为模型组、维A酸乳膏组...     

复元胶囊抑制骨关节炎大鼠软骨及血清白细胞介素-6的实验研究

目的 观察复元胶囊对大鼠骨关节炎(OA)软骨及血清白细胞介素(IL-6)的影响,探讨其抗OA的作用机制.方法 Hulth法建立OA模型,随机分为模型组,复元胶囊高、中、低剂量组,同时设对照组.于治疗第4,8,12周取软骨及血清标本,大体观察、Mankin's评分、免疫组化测定软骨中IL-6表达、酶联免疫吸附法测定血清中IL-6水平,并将软骨及血清IL-6含量与Mankin's评分指数进行相关分析.结果 复元胶囊各组关节软骨Mankin's评分、软骨及血清中IL-6水平均低于模型组(P﹤0.01);复元胶囊各组Mankin's评分差异具有显著性(P﹤0.05);模型组及复元胶囊各组软骨及血清中IL-6水平第8周高于4周(P﹤0.01)、12周高于8周(P﹤0.05);软骨及血清中IL-6水平与Mankin's评分指数呈正相关,相关系数分别为r=0.98(P﹤0.01),r=0.96(P﹤0.01).结论 复元胶囊对大鼠OA软骨及血清中IL-6具有剂量依赖的抑制作用;软骨及血清中IL-6水平与关节病理改变的Mankin's评分指数呈正相关.     

肾虚质大鼠免疫相关基因表达谱与肾藏象理论相关性研究

目的:研究肾虚质大鼠脾脏淋巴细胞免疫相关基因表达谱的状况,筛选差异表达的免疫基因谱,探索用现代免疫及基因芯片技术研究肾藏象理论的新方法。方法:采用"猫吓鼠"的方法,造成先天不足、后天失养的复合型肾虚质动物模型,提脾脏淋巴细胞总RNA,经标记、杂交、芯片扫描、图象采集与数据分析等过程获得基因表达谱。结果:模型组与空白组大鼠脾脏淋巴细胞mRNA杂交得到了149条差异表达基因;药物干预后与模型组杂交得到了45条差异表达基因,有20条基因在两次杂交中均有差异。结论:肾虚质大鼠脾脏淋巴细胞存在差异表达的免疫基因谱,补肾中药可以通过调控某些基因的表达而发挥改善肾虚质的作用。     

蒙医温针对炎症大鼠血清白介素和肿瘤坏死因子α含量的影响

目的 观察蒙医温针对疼痛模型大鼠IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α的调节作用.方法 将Wistar大鼠随机分为3组,每组10只.正常组:不造模,不治疗;模型组:大鼠右后足掌皮下注射弗氏完全佐剂0.1mL造模;温针组:于造模当天,取大鼠蒙医脏腑总穴(位于第三腰上凹正中),用特制银针斜刺后,接MYL-Ⅰ型蒙医疗术温针仪,电流强度100mA,温度40C,持续15min.3d治疗1次,连续7次.结果 模型组IL-6和TNF-α含量明显升高,IL-2含量明显降低,与正常组相比有显著差异;与模型组相比,温针组炎症大鼠(AA大鼠)血清中IL-6和TNF-α的含量明显下降,IL-2含量明显升高,有显著差异.结论 蒙医温针能明显降低AA模型大鼠血清中IL-2、IL-6和TNF-α的含量,从而改善AA模型大鼠免疫功能.     

肾气丸与右归丸对肾虚大鼠肾脏细胞凋亡及肾组织内Bcl-2、fas表达的影响

目的:研究肾气丸与右归丸对劳倦过度、房室不节加庆大霉素所致大鼠肾脏细胞凋亡及肾组织内Bcl-2、fas基因表达的影响,探讨两方不同补肾机制。方法:复制肾虚模型大鼠,用肾气丸和右归丸治疗。结果:模型组细胞凋亡阳性数明显高于空白组,药物干预组明显低于模型组。免疫组化检测结果显示fas表达从高到低依次为模型组、右归丸组、肾气丸组、空白组;而Bcl-2表达从高到低依次为空白组、肾气丸组、右归丸组、模型组。结论:肾气丸与右归丸均能抑制肾组织细胞凋亡、改善大鼠肾脏病理改变,但肾气丸组优于右归丸组(P<0.05)。     

捏脊疗法对大鼠血清中IL-2和免疫球蛋白的影响

目的：观察捏脊疗法对大鼠血清中白细胞介素-2（IL-2）和免疫球蛋白的影响,探讨捏脊刺激强度的量效关系和作用机理。方法：将健康SD大鼠40只（雌雄各半）,随机分为空白对照组、捏脊3遍组、捏脊6遍组、捏脊9遍组各10只,各组于相应处理21天后,采用ELISA法和全自动生化分析仪分别检测大鼠血清中IL-2和免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量。结果：捏脊6遍组、捏脊9遍组大鼠血清中IL-2和IgG、IgA、IgM含量明显高于空白对照组,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论：捏脊疗法可提高大鼠血清中IL-2和免疫球蛋白的含量,从而提高机体免疫力,且不同刺激强度存在一定的量效正相关。     

补肾中药对肾虚黄体抑制流产大鼠的实验研究

探讨助孕3号方拆方补肾组方及其补肾君药菟丝子对妊娠大鼠肾虚黄体抑制病证结合模型的治疗作用.结果提示:本模型成功地模拟了临床患者肾虚自然流产的各种基本病理变化;助孕3号方拆方补肾组方及君药菟丝子均具有补肾助孕,改善肾虚症状,提高孕激素水平,上调蜕膜孕激素受体的基因表达进而增加孕激素受体的含量,降低流产率等作用;补肾组方更可增强黄体功能,促进胚胎发育,作用较菟丝子显著.     

肾虚质大鼠学习记忆能力与海马NMDA受体表达的实验研究

目的观察肾虚质大鼠学习记忆能力与海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体表达变化,探讨"肾藏志"中医学理论的物质基础与神经生物学机制。方法将40只SD大鼠随机分为模型组、左归丸、右归丸组及空白组(产自正常孕鼠),每组10只,采用"猫吓鼠"经典造模法制备先天不足加后天失养复合型肾虚质仔鼠模型。对仔鼠恐吓同时开始给药,左归丸、右归丸组分别给予左归丸混悬液0.1875 g/mL、右归丸混悬液0.0938 g/mL灌胃,空白组及模型组给予等量生理盐水灌胃,每日1次,每周用药5天,连续2个月。通过Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化法检测海马组织NMDA受体亚基NR2A、RN2B蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组Morris水迷宫实验潜伏期及总路程增加(P0.05);与模型组比较,左归丸及右归丸组上述指标均降低(P0.05)。与空白组比较,模型组海马组织NMDA受体亚基NR2A、NR2B蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,左归丸、右归丸组NR2A及NR2B蛋白表达明显升高(P0.05)。结论肾虚质大鼠学习记忆能力退化且海马NMDA受体表达低下,补肾药物左归丸、右归丸可上调NMDA受体表达,提高其学习记忆能力,从而改善肾虚质脑功能退化状态。     

关于肾虚质实验动物模型相关问题的研究与思考

肾虚质实验动物模型的构建,有助于推动辨体论治和治未病基础研究的深入开展。通过长期对体质和辨体论治研究的积累,对肾虚质形成的主要因素、体质和证候的区别与联系、肾虚质和肾虚证的动物模型等相关问题进行了探讨,特别是对肾虚证动物造模中出现证质混用现象的原因进行了剖析,强调肾虚质实验动物模型的构建,关键是明晰肾虚质形成的主要因素,把握病理体质与证候的区别。     

不同月龄大鼠血清IL-2、IL-4、IL-6含量比较

目的：比较不同月龄大鼠免疫功能及抗氧化能力的差异。方法：选择15、25月龄健康雄性SD大鼠各10只，以3月龄青年鼠10只为对照组。采用放免法测定血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)含量，并计算大鼠胸腺体重指数；采用化学法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力，丙二醛(MDA)含量。结果：衰老大鼠胸腺体重指数及IL-2、IL-4明显下降，IL-6水平升高SOD、GSH-PX活力下降，MDA含量增高，并且变化与月龄有关。结论：不同月龄大鼠衰老状况各有特点，不同年龄阶段应采用不同方法延缓衰老。     

益气养血、固肾安胎法对肾虚流产免疫因素影响的实验研究

目的 通过观察益气养血,固肾安胎法中药治疗大鼠肾虚型流产的作用。探讨该法调节造模后紊乱的免疫功能的机理。方法：实验选用SD大鼠80只（雌雄比例为3：1）,采用羟基脲加米非司酮法制备大鼠肾虚流产模型。实验共分6组,除空白对照组外,每组灌饲相应药物的水煎剂或蒸馏水溶液,给药时间为10天,结果：肾虚型流产模型制备成功：模型对照组体内存在明显的免疫功能异常,中药各治疗组大鼠均具有一定的治疗作用;治疗效果以中药中剂量组明显优于其它各治疗组,益气养血,固肾安胎中药疗效明显优于中药对照组,能够显著改善模型大鼠异常改变的抗滋养细胞抗体及IL-2水平等,实验数据具有统计学差异。结论：采用益气养血,固肾安胎法中药治疗肾虚型流产能够显著改变造模后异常的免疫功能,并可能通过此途径达到治疗作用;调整体内血清抗滋养细胞抗体IL-2等的含量,该法该方能够显著提高模型大鼠的妊娠功能,益气养血,固肾安胎中药疗效显著优于中药对照组。     

芳香化浊方对大鼠心肌缺血-再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:研究芳香化浊方(FH)对急性心肌缺血-再灌注损伤的作用机制。方法:利用结扎冠状动脉左前降支的方法造成大鼠急性心肌缺血-再灌注损伤,对模型大鼠血中肌酸磷酸激酶(CK)、血管内皮素(ET)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α)进行观测。结果:中药能明显降低CK、ET、TNF-α及IL-6的含量,与模型组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论:芳香化浊方对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用可能与影响中性粒细胞浸润相关。