肾阳虚证与尿石形成相关性及温肾化石汤调节

目的研究肾阳虚证与含钙尿石形成相关性。方法 60例含钙尿石症肾阳虚型30例,其它证型30例,测定尿pH值、24 h尿量、尿石形成促进物与抑制物含量,肾阳虚证组服中药温肾化石汤,其它证型组服用相应辨证方药。结果肾阳虚组尿pH值、24 h尿量、尿石形成促进物———尿钙、磷、草酸含量高于其它证型组,尿石形成抑制物———尿镁、柠檬酸、甘胺聚糖含量低于其它证型组,差异显著。肾阳虚证组服中药温肾化石汤后,可提高含钙尿石形成抑制物水平,降低含钙尿石形成促进物含量。结论肾阳虚是含钙尿石形成与复发的中医病因病机。     

温肾化石汤防治草酸钙尿石形成的实验研究

目的：通过观察温肾化石汤对含钙尿石形成相关指标的影响,探讨该方防治含钙尿石形成的机理,为防治含钙尿石复发开创新思路,提供新方法。方法：SD雄性大鼠40只,随机分为4组：A空白对照组,B模型组,C1温肾化石汤高剂量组,C2温肾化石汤低剂量组。除A组外,其它各组喂标准鼠料,饮用含0.75？乙二醇和0.75-氯化铵的自来水。温肾化石汤按30g/kg、15g/kg剂量给C组灌胃。A组、B组灌自来水。各组均饲养6周。检测各组大鼠的肾功能、尿草酸、钙的含量,并观察肾组织结构的变化及草酸钙晶体的分布。结果：＂温肾化石汤＂可以显著降低尿中钙、草酸等尿石形成促进物的含量;增加的尿石形成抑制物镁的含量（P〈0.01）,草酸钙晶体形成程度、肾组织细胞的损伤程度明显减轻。结论：温肾化石汤可以保护肾脏组织结构,对草酸钙晶体形成有明显的抑制作用。     

温肾化石汤对草酸钙尿石模型大鼠肾功能的影响

目的:通过观察温肾化石汤对肾组织结构及BUN、Cr含量的影响,探讨该方对草酸钙尿石模型大鼠肾功能的影响。方法:SD雄性大鼠40只,随机分为4组:空白对照组、模型组、温肾化石汤高剂量组、温肾化石汤低剂量组。各组喂标准鼠料,除空白对照组外,其它各组饮用含0.75℅乙二醇和0.75℅氯化铵的自来水。温肾化石汤按30g/kg、15g/kg剂量给灌胃。各组均饲养6周。检测各组大鼠的肾功能,肾组织SOD、MDA的含量。并观察肾组织结构的变化及草酸钙晶体的分布。结果:温肾化石汤可明显升高肾组织SOD,降低MDA的含量,显著降低BUN、Cr含量,保护肾脏组织结构。结论:温肾化石汤可以保护肾脏组织结构,改善肾功能。     

温肾化石汤防治含钙尿石复发的临床研究

[目的]通过观察温肾化石汤对含钙尿石形成相关指标的影响,探讨该方防治含钙尿石复发的机制,为防治含钙尿石复发开创新思路,提供新方法.[方法]选择符合条件的尿石症患者40例,随机分为两组,治疗组20例,服用"温肾化石汤",1剂/d,水煎服,分早晚两次服用.对照组20例,服用双氢克尿噻50mg/次,2次/d.两组均以14d为1个疗程,观察治疗前后各相关指标的变化.[结果]"温肾化石汤"可以显著降低新鲜晨尿pH值、尿中钙、磷.草酸等尿石形成促进物的浓度;增加24 h总尿量、尿中镁、柠檬酸、GAGs含量尿石形成促进物的浓度(P<0.05).[结论]温肾化石汤既可降低尿石形成促进物的浓度,又能提高尿石形成抑制物的浓度.这可能是本方防治含钙尿石形成与复发的重要作用机制之一.     

温肾化石汤对草酸钙结石模型大鼠脂质过氧化的影响

目的探讨温肾化石汤对草酸钙结石模型大鼠脂质过氧化的影响。方法 SD雄性大鼠40只,随机分为4组:空白对照组、模型组、温肾化石汤高剂量组和温肾化石汤低剂量组,每组10只。除空白对照组外,其它各组大鼠喂标准鼠料,饮用含0.75%乙二醇和0.75%氯化铵的自来水。温肾化石汤高剂量组大鼠予温肾化石汤提取液10mL/kg(30 g/kg),每日灌胃1次,温肾化石汤低剂量组予温肾化石汤提取液稀释1倍后10 mL/kg(15 g/kg),每日灌胃1次。空白对照组、模型组按体质量灌胃等容积自来水每日1次。各组均饲养6周。处死大鼠,检测各组大鼠肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,并观察肾组织结构的变化及草酸钙晶体的分布。结果温肾化石汤可明显升高肾组织SOD含量,降低MDA含量。草酸钙晶体形成程度、肾组织细胞的损伤程度明显减轻。结论温肾化石汤可以增强抗脂质过氧化的作用,保护肾脏组织结构,对草酸钙晶体形成有明显的抑制作用。     

防石合剂对肾草酸钙结石模型大鼠骨桥蛋白表达的影响

目的:测定应用防石合剂前后草酸钙模型大鼠肾组织OPN表达和尿中尿钙及尿尿酸的浓度变化,探讨防石合剂预防肾结石复发的作用机制。方法:用乙二醇+氯化胺法构建草酸钙肾结石大鼠模型,同时给予防石合剂1.50g生药材/1.5mL/100g、3g生药材/1.5mL/100g、6g生药材/1.5mL/100g,各组均给药7周。实验结束后检测各组大鼠24h尿量、尿PH、尿尿酸、尿钙,免疫组化法检测OPN蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测大鼠肾骨桥蛋白mRNA的表达。结果:模型组大鼠肾OPN mRNA及蛋白的表达明显增加,为对照组的2倍,防石合剂各剂量组均能进一步增加大鼠肾组织OPN mRNA及蛋白的表达,为对照组的3.5倍;且防石合剂各剂量组能显著降低大鼠尿中尿钙和尿尿酸含量,增加排尿量。结论:防石合剂可能通过增强草酸钙模型大鼠肾组织OPN的表达,从而抑制结石形成。     

温肾活血化湿方对肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-β_1、smad7蛋白表达的影响

目的:观察温肾活血化湿方对单侧输尿管梗阻(UUO)法致肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-β1、smad7蛋白表达的影响,初步揭示该方防治肾间质纤维化的作用机制。方法:将雄性SD大鼠(120只)随机分为假手术组、UUO组、氯沙坦组和温肾活血化湿方组,每组30只。采用UUO建立大鼠肾间质纤维化模型(假手术组只分离但不结扎输尿管),于造模后第2天开始灌胃,假手术组、UUO组给予生理盐水,氯沙坦组灌胃氯沙坦(10 mg·kg-1·d-1),温肾活血化湿方组灌温肾活血化湿方(9.8 g·kg-1·d-1)。于造模后第7、14、21天留取梗阻侧肾组织HE、Masson染色,观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织TGF-β1、smad7蛋白的表达。结果:造模后第14天温肾活血化湿方较模型组明显降低尿蛋白定量(P0.05),第21天温肾活血化湿方与模型组比较有极显著降低(P0.05)。温肾活血化湿方组与模型组相比较TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.05)。温肾活血化湿方组与模型组相比较smad7蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:温肾活血化湿方通过抑制TGF-β1,上调smad7蛋白表达,从而延缓肾间质纤维化的进程。     

肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达变化

目的 :探讨肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达情况。方法 :将实验动物分为二组 :(1)正常对照组 ;(2 )肾阳虚证大鼠模型组 ,于第 12周留取尿标本。肾组织病理学检查、用Northernblot杂交检测皮质Ⅲ型胶原基因表达。结果 :肾阳虚证大鼠模型组 ,肾病理损伤 ,肾皮质Ⅲ型胶原mRNA表达上调。结论 :肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达明显上调。     

肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达变化

目的：探讨肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达情况。方法：将实验动物分为二组：(1)正常对照组；(2)肾阳虚证大鼠模型组，于第12周留取尿标本。肾组织病理学检查、用Northern blot杂交检测皮质Ⅲ型胶原基因表达。结果：肾阳虚证大鼠模型组，肾病理损伤，肾皮质Ⅲ型胶原mRNA表达上调。结论：肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达明显上调。     

金匮肾气丸对肾阳虚证COPD大鼠瘦素水平影响的实验研究

目的根据肾阳虚COPD大鼠发病机制,研究瘦素与COPD肾阳虚证的发生相关性,论证金匮肾气丸治疗COPD肾阳虚证治疗作用。方法采用运用烟雾联合脂多糖及注射氢化可的松进行肾阳虚证COPD大鼠造模。将大鼠分为空白组,模型组,中药中剂量组、高剂量组。中药高、中剂量组灌服金匮肾气丸混悬液。光镜下检测大鼠肺叶肺组织病理变化;血清瘦素表达水平;RT-PCR法检测脂肪组织瘦素受体mRNA表达及Western Blot法检测肺组织瘦素受体蛋白表达。结果模型组大鼠肺组织可见大量淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等炎症细胞浸润,支气管柱状上皮细胞剥脱,纤毛倒伏、粘连,支气管壁,部分肺泡壁破坏、融合,肺大泡架构消失;与模型组比较,金贵肾气丸中、高剂量组大鼠肺组织病理损伤有所减轻。血清瘦素水平,模型组大鼠血清瘦素含量升高(P0.01),给予金贵肾气丸高、中剂量治疗后血清瘦素含量有明显降中(P0.01)。Western印迹检测肺组织瘦素受体蛋白表达,模型组大鼠平均灰度值显著降中(P0.01),金贵肾气丸干预后,高剂量组平均灰度值显著升高(P0.05)。大鼠肺瘦素受体mRNA含量检测,模型组大鼠肺瘦素受体mRNA表达明显增高(P0.01),干预组中瘦素受体mRNA表达强度明显降中(P0.05)。结论瘦素水平与COPD肾阳虚证的发生负相关;采用金匮肾气丸,温补肾阳,对实验模型大鼠进行干预血清瘦素、脂肪组织瘦素受体蛋白含量均有所下降,对瘦素蛋白进一步的研究将为COPD的发病机制阐明和防治提供新研究方向。     

中药内外治结合法对糖尿病肾损害大鼠肾组织TGF-β1的影响

目的:观察并探讨具有补肾气、温肾阳作用的中药内服结合外治疗法对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子(TGF-β1)含量的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养结合链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)诱导糖尿病肾损害大鼠模型(肾阳虚证型),应用具有补肾温阳作用的中药汤剂和敷灸药物分别在造模成功及成模后的两周给药。采用Western Blot法检测大鼠肾组织中TGF-β1的表达情况。结果:与模型对照组比较,中药内外治结合的方法可降低大鼠肾重/体重比值,抑制模型大鼠肾组织中TGF-β1表达,结合法治疗组疗效优于单纯药物内服组和单纯药物外治组。结论:中药内外治结合法能够防治大鼠糖尿病早期肾损害,其机制可能与降低TGF-β1的表达含量有关。     

清浊安中汤对慢性胃炎脾胃湿热证大鼠模型环氧合酶-2的影响

目的:探讨清浊安中汤治疗脾胃湿热证作用机制及脾胃湿热证大鼠模型的建立.方法:50只大鼠随机分为正常对照组、胃炎脾虚证组、胃炎湿热证组、清浊安中汤高、低剂量防治组,不同组用不同药物灌胃,连续20 d.采用“病证结合”方法,以2％水杨酸钠+高脂高糖+人工气候箱复制脾胃湿热证大鼠模型,并用清浊安中汤对脾胃湿热证大鼠模型防治,常规HE胃黏膜病理组织染色、免疫组化(SABC)法检测环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达.结果:脾胃湿热证组10只大鼠均有轻-重度炎症,COX-2蛋白表达为0.289±0.036;脾胃湿热证大鼠模型表现出的症状、体征与临床相符,胃黏膜炎症较正常组重而与脾虚证组无差异,COX-2蛋白表达大于脾虚组与正常组(P＜0.05),COX-2蛋白表达与炎症程度呈正相关,相关系数为0.662,P＜0.01,清浊安中汤防治组对此有改善治疗作用.结论:大鼠模型符合脾胃湿热证属性,调节COX-2蛋白表达可能是清浊安中汤治疗脾胃湿热证作用机制之一.     

补肾中药对肾虚骨质疏松症大鼠肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达影响研究

目的:通过研究摘除卵巢致肾虚骨质疏松症大鼠肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白的表述,揭示摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究补肾中药防治疗效及其作用机制.方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用具有补肾壮骨益精作用的补肾中药(高、低剂量)对实验大鼠治疗12周,以骨疏康颗粒剂、盖天力片作为阳性对照组,正常大鼠、假手术组作为标准对照组,模型大鼠作为空白对照组,并与补脾中药作疗效的比较.用RT-PCR法、Western印迹法检测肾虚骨质疏松症大鼠肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达.结果:RT-PCR及Western方法检测,正常大鼠肾组织中存在Smurf2的mRNA和蛋白表达;与正常组、假手术组比较,模空组Smurf2 mRNA和蛋白的表达水平在肾组织中明显降低.用药12周后,与模空组比较,补肾高、低剂量组、盖天力组可明显上调Smurf2 mRNA和蛋白在肾组织中的表达水平.其中补肾高剂量组上调幅度大于补肾低剂量组.结论:①正常大鼠肾组织中Smurf2可以在基因、蛋白水平表达;②骨质疏松症的发生,可能与肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达的异常变化有关;③补肾中药通过调控肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达,对于骨质疏松症有一定的防治作用.     

镇肝熄风汤对帕金森病大鼠易激惹程度和结膜充血及NQO-1,TH的影响

目的:观察镇肝熄风汤对帕金森病肝大鼠易激惹程度和结膜充血的影响及可能机制。方法:将105只Wistar大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,司来吉兰组(0.9 mg·kg~(-1)·d~(-1)),镇肝熄风汤低、中、高剂量组(8,16,32 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组15只。采用附子汤ig联合6-羟基多巴胺单侧损毁黑质法复制帕金森病肝阳上亢型病证结合大鼠模型,灌胃4周。蛋白质免疫印迹(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测酪氨酸羟化酶(TH)和醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白和mRNA表达。结果:与假手术组比较,帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血显著升高,中脑组织NQO-1蛋白和mRNA表达增加,而TH蛋白表达明显降低(P0.05)。与帕金森病肝阳上亢证模型组比较,镇肝熄风汤组大鼠易激惹程度和结膜充血显著降低,TH蛋白表达显著增加,NQO-1蛋白和mRNA表达均明显增加(P0.05),而司来吉兰组大鼠易激惹程度、结膜充血和中脑组织NQO-1蛋白表达无显著性差异。结论:镇肝熄风汤能显著改善帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血,其机制可能与上调大鼠中脑组织TH和NQO-1分子表达有关。     

肾衰方及其拆方对MMP7、α-SMA调节作用的探讨

目的:观察中药肾衰方及其拆方对大鼠肾间质纤维化肾组织基质金属蛋白酶7(MMP7)、α平滑肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达的调节及其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:将72只大鼠随机分为假手术组、模型组、肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、苯那普利组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,术后第7天、第14天分别观察梗阻侧大鼠肾组织病理改变,以及肾组织MMP7、α-SMA蛋白的表达。结果:第7天、第14天,模型组与假手术相比大鼠肾组织MMP7表达下降,α-SMA表达增强,而经治疗后,肾衰方及其拆方组和苯那普利组大鼠较模型组大鼠肾组织MMP7蛋白表达提高,α-SMA蛋白表达下降;第14天肾衰方组大鼠较苯那普利组大鼠肾组织MMP7表达更强,且MMP7表达与α-SMA蛋白表达呈明显负相关。结论:肾衰方可能是通过诱导MMP7蛋白表达,抑制α-SMA蛋白表达,抑制肾间质纤维化进展,且肾间质纤维化属于本虚标实之证。     

健脾温肾汤治疗肾病综合征脾肾阳虚证30例临床研究

目的 探讨自拟健脾温肾汤治疗肾病综合征脾肾阳虚证的临床疗效.方法 将60例肾病综合征脾肾阳虚证患者按照随机的原则分为2组,治疗组30例采用自拟健脾温阳汤治疗,对照组采用真武汤治疗,配合常规治疗.疗程均为8周.结果 治疗组总有效率86.66％,对照组总有效率73.33％,2组总有效率比较具有显著差异性（P＜0.05）,治疗组优于对照组.结论 健脾温肾汤是治疗肾病综合征脾肾阳虚证安全有效的中药汤剂.     

补肾中药对去势大鼠肾组织中钙结合蛋白-D9K中mRNA和蛋白表达的影响

目的:研究补肾中药对去势大鼠肾中钙结合蛋白-D9K(CaBP-D9K)基因和蛋白表达的影响.方法:将雌性Wistar大鼠随机分为7组:正常组、模型组、补肾中药低剂量组、中剂量组、高剂量组、骨疏康组、牡蛎碳酸钙组.采用大鼠去势的方法复制骨质疏松症模型,应用补肾中药防治12周后取材,并用RT-PCR法和West-ern杂交法检测大鼠肾组织CaBP-D9K基因和蛋白表达.结果:大鼠肾组织可以在基因、蛋白水平表达钙结合蛋白CaBP-D9K;大鼠骨质疏松症的发生与肾组织中CaBP-D9K的基因和蛋白表达的变化有关.结论:补肾中药通过调节大鼠肾组织中钙结合蛋白CaBP-D9K基因和蛋白表达,促进钙的吸收,防治骨质疏松症.     

碎石清对大鼠利尿排石作用的研究

目的通过实验观察碎石清的利尿排石作用。方法采用大鼠水负荷实验代谢笼法观察碎石清的利尿作用;采用乙二醇和氯化铵喂饲法诱发的大鼠肾结石模型,观察碎石清防治结石的作用,检测各组大鼠尿液PH值、尿钙和尿草酸的含量,肾组织钙、草酸和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,以及肾组织中结晶沉积或结石形成的情况。结果碎石清能明显促进大鼠排尿,降低肾组织中草酸和钙离子浓度,升高尿草酸和尿钙量,对大鼠肾结石的形成具有显著的抑制作用,尤以高剂量组明显;碎石清高、低剂量组均能明显升高肾组织SOD活性,高剂量组还能明显减少MDA产生。结论碎石清具有良好的促进排尿和防治结石作用,其机制与抗氧化、减少草酸钙结晶沉积有关。     

积芎解毒方对糖尿病肾病大鼠肾组织NF-кB、AngⅡ表达的影响

目的:观察积芎解毒方对糖尿病肾病大鼠肾组织NF-кB、AngⅡ表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、福辛普利组。除正常对照组外采用STZ腹腔注射制作糖尿病肾病大鼠模型,8周后检测大鼠24 h UTP,Real time PCR及Western Blot法检测大鼠肾组织NF-кB、AngⅡmRNA和蛋白的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠肾组织NF-кB、AngⅡmRNA和蛋白的表达显著升高;与模型对照组比较,各治疗组24 h UTP明显下降,NF-кB、AngⅡ和蛋白表达均明显降低。结论:积芎解毒方高剂量对糖尿病肾病大鼠的肾保护作用可能与通过降低炎症反应从而延缓肾功能发展有关。     

益气活血排石饮防治大鼠肾结石作用机制的实验研究

目的:探讨益气活血排石饮对肾结石大鼠血清Ca2 、Mg2 、P3 、尿酸及肾组织草酸以及尿Ca2 、Mg2 、P3 与尿尿酸含量的影响。方法:随机将大鼠分为正常组、模型组、排石冲剂对照组和益气活血排石饮组,除正常对照组外,以1.25%乙二醇合1%氯化铵灌胃制作大鼠草酸钙肾结石模型,观察各组大鼠血清Ca2 、Mg2 、P3 、尿酸及肾组织草酸以及尿Ca2 、Mg2 、P3 与尿尿酸的含量。结果:排石冲剂对照组和益气活血排石饮组均能显著降低肾结石大鼠血清Ca2 、Mg2 、P3 、尿酸及肾组织草酸以及增加尿Ca2 、Mg2 、P3 与尿尿酸排泄含量,且以益气活血排石饮组疗效为好。结论:益气活血排石饮对1.25%乙二醇合1%氯化铵灌胃制作草酸钙结石大鼠模型有肯定的疗效,通过降低血清Ca2 、Mg2 、P3 、尿酸及肾组织草酸的含量以及增加尿Ca2 、Mg2 、P3 与尿尿酸的排泄,发挥该方的治疗作用。