铁皮石斛快繁技术体系研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale带芽茎段为材料,对铁皮石斛的组织培养进行系统研究,以期建立铁皮石斛的快繁技术体系。方法采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根及瓶苗移栽等进行研究。结果铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为75%乙醇消毒30 s,再用0.1%HgCl2消毒10 min;铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+2 g/LAC,诱导率达到34.98%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.8 mg/L 2,4-D+2 g/LAC,增殖率达到89.6%;原球茎分化的最佳培养基为MS+1.2mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+2 g/L AC,分化率达到89.6%;幼苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS+2.5 mg/L NAA+15%土豆汁+2 g/LAC,生根率达到90.4%～92.8%;瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加0.03 mg/L赤霉素,并接种适量菌根真菌Epulorhiza sp.。结论建立了铁皮石斛的快繁技术体系,为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。     

铁皮石斛带节茎段的组培快繁体系研究

目的：建立铁皮石斛带节茎段为外值体的快速繁殖体系,保护和合理利用铁皮石斛资源.方法：以铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的带节茎段作外植体,比较不同培养基、激素等因素对铁皮石斛诱导、增殖及生根的影响.结果：最适茎段诱导腋芽的培养基为1/2MS＋ 2.0mg L-1 6-BA＋ 0.2mgL-1 NAA,腋芽诱导率可达93.3％;最适丛生芽增殖的培养基为1/2MS＋ 1.5mgL-1 6-BA ＋0.5mgL-1 NAA,平均增殖系数达到5.46;最适的生根培养基是1/2MS＋0.5mgL-1 IBA ＋0.5mgL-1 NAA＋ 0.2％ AC,组培苗生根多,生根率达到72％.以上各种培养基琼脂粉浓度均为0.8％,蔗糖浓度均为2％,pH5.6 ～5.8.同时研究发现,组培苗的移栽基质以细木屑为优,具有疏松透气、排水良好等优点,成活率可达88％.结论：利用带节茎段能够实现铁皮石斛快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

铁皮石斛快繁及多糖含量测定

目的测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。方法对铁皮石斛进行组织培养,用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。结果铁皮石斛组培苗的多糖含量为25.09%。结论铁皮石斛组培苗的多糖含量达到2010版《中华人民共和国药典》的规定标准,具有一定的药用价值。     

天门冬组培快繁体系研究

目的 建立天门冬组培快速繁殖体系,保护和合理利用天门冬资源.方法 采用不同基本培养基和不同种类及质量浓度的植物生长调节剂对天门冬不同外植体进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及生根培养研究.结果 愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,pH 5.8;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+ 1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L LAA,pH 5.8;生根的适宜培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,其中培养基中铁盐的质量浓度降低到6.95 mg/L,蔗糖的质量浓度降低至20 g/L,pH值为5.8.结论 天门冬不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中嫩芽诱导愈伤率最高,为天门冬最适组织培养的外植体;利用组织培养技术能够实现天门冬快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

GC-MS法分析不同部位仿野生与组培快繁铁皮石斛中的挥发性成分

目的分析仿野生与组织培养快速繁殖(组培快繁)铁皮石斛茎、根和叶中的挥发性成分。方法铁皮石斛茎、根和叶液氮研磨成粉,气质联用(GC-MS)仪分析提取液中的成分和其相对含有量。结果铁皮石斛中共鉴定出90种挥发成分,主要为醛类、醇类、酯类、萜烯类、酮类、烷烃与芳香烃及其衍生物。其中,仿野生鉴定出72种,茎中24种、根中29种、叶中19种;组培快繁鉴定出68种,茎中23种、根中29种、叶中16种。其共有成分在茎中有11种,根中有10种,叶中有5种。此外,萘在铁皮石斛不同部位中的含有量都较高。结论仿野生与组培快繁铁皮石斛不同部位中挥发性成分的差异很大。     

臭参组培快繁体系研究

目的:建立臭参腋芽增殖和不定丛芽快速繁殖体系,筛选适宜高效的离体再生途径。方法:选取无菌实生苗高位带芽茎段为腋芽增殖材料、基茎不定休眠芽为丛芽增殖材料,采用不同种类和质量浓度的植物激素对外植体增殖及植株再生进行研究。结果:2种外植体中,基茎不定休眠芽是最理想的增殖材料,其继代增殖适宜的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L,增殖系数21.0以上;高位带芽茎段是腋芽增殖的适宜材料,在MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L培养30 d后,腋芽增殖系数为4.55;生根的适宜培养基为30%蔗糖的1/2 MS培养基,30 d后即可获得完整的再生植株,不定根发生率为90.33%;将生根苗炼苗移栽至腐殖质土壤中,成活率达到100%。结论:成功建立了臭参2种离体再生途径。     

半夏组培快繁体系的建立

目的建立半夏组培快繁体系。方法以半夏茎尖、叶柄和叶片为外植体,研究不同消毒方法和激素组合对半夏组织培养的影响。结果以75%酒精30s+(2%次氯酸钠+1.67g/L头孢拉定)15min处理外植体为宜;茎尖有利于不定芽的诱导;不定芽诱导最佳培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.6 mg/L KT;高浓度6-BA和低浓度NAA有助于半夏不定芽和块茎的形成;生根培养以1/2MS+0.5 mg/L IBA为最佳。结论建立了半夏组培快繁体系,为利用生物反应器生产半夏小块茎提供了理论依据。     

球花石斛的离体快繁体系研究

目的建立球花石斛离体快繁研究体系。方法利用球花石斛种子为外植体,采用种子培养方式开展繁育试验研究。结果球花石斛种子接种MS+香蕉泥13%的培养基上,可成功诱导其原球茎;MS+0.1mg/L NAA+1.5mg/L 6-BA+香蕉汁13%为球花石斛增殖的最佳培养基,增殖系数为7.9;无根苗生根的适宜培养基为1/2 MS+0.1mg/L NAA+2mg/L 6-BA+香蕉汁13%+土豆汁10%+活性炭2mg/L,生根率达到95%,平均根数为6.3条;组培养移栽到松树皮+水苔(3∶1)的栽培基质上,成活率为100%,且植株长势良好。结论寻找到球花石斛离体繁育研究中各阶段最佳培养基,建立了该植物的离体快繁体系。     

水半夏组培快繁体系的建立

目的建立水半夏的组培快繁体系,为快速、大量生产水半夏种苗提供基础。方法利用不同植物激素配比的培养基,以水半夏块茎为外植体进行试验。结果愈伤培养基MS+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L可成功诱导水半夏愈伤组织;丛生芽培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L诱导不定芽效果较好,增殖倍数高;生根培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.4 mg/L+KT 0.2 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L+AC 0.3 g/L,有利于水半夏不定根的快速形成,12～14周即可获得再生水半夏植株。培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L为诱导水半夏分化一次性成苗的最佳激素配比,5～6周可形成试管苗,10周后可用于炼苗。结论建立的水半夏组培快繁体系为水半夏优良品种的快速繁殖奠定基础,且可应用于工厂化生产水半夏种苗。     

铁皮石斛组培驯化种苗质量标准

为确定铁皮石斛进行仿野生种植组培驯化种苗的分级标准,测定了组培驯化苗的各项农艺性状指标,对茎长、茎粗、叶片数、叶片长、叶片宽、节间数进行分析,建立分级标准,并对分级后移栽的组培苗生长情况进行评价,并进行表型性状差异评价和相关分析。结果表明:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级种苗成活率均达到了100%,且茎长、茎粗等数据均有所增长,Ⅰ级种苗的各项指标均高于其他,差异显著,其中茎长的变异系数最大为52.6%。     

金线莲组培快繁技术研究

目的 建立金线莲快繁体系.方法 以茎段为外植体,开展了茎段不同部位、培养基、激素、有机物和活性炭对不定芽增殖、幼苗生长的影响研究,并进行了移栽试验.结果 外植体以不含顶芽和长根的中间段茎节为好;不定芽增殖最佳培养基配方为MS(或B5)+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L,两个月增殖倍数达5.0以上;壮苗最适培养基为1/2MS+NAA3.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+香蕉提取物20%(或椰子汁20%);试管苗移栽适宜的基质为菜园土1份+2～3 mm粗砂2份(或1份)+木屑1份(或2份),3个月成活率均达100%,且生长良好.结论 采用上述方法,能实现金线莲幼苗的快速繁殖.     

广西地不容组培快繁研究

目的研究广西地不容的组培快繁技术,为大量生产种苗提供方法和技术。方法以嫩茎节段为外植体,以MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,选择出最佳的诱导、继代增殖和生根培养基配方。结果MS NAA0.1mg/L BA1.0mg/L利于诱导出芽,可用于初代培养。继代增殖则以MS IBA0.4mg/L NAA0.2mg/L GA0.5~1.0mg/L、MS NAA0.1mg/L GA1.0mg/L和MS IBA0.2mg/L BA0.4~0.8mg/L GA0.5~1.0mg/L3种培养基交替培养,繁殖系数6.0倍/50d。1/2MS IBA0.8mg/L适宜诱导生根获得再生植株,生根率75%。生根苗春夏之交移栽最好,成活率90%。结论本研究得出的方法可用于工厂化生产广西地不容种苗。     

丹参组培快繁技术研究

选择不同外植体研究丹参组织培养中,不同激素水平对组织生长、分化、试管苗生根等的影响.结果表明:以叶片为外植体,接种在MS 6-BA 0.8～1.0 mg/L培养基上,丛生芽分化率为98%～100%,且所需时间较短;茎尖接种用MS 6-BA0.2～1.0 mg/L培养基,成苗率达95%以上;试管苗生根以MS IBA1.0 mg/L KT 1.0 mg/L最好,高达99%.     

我国濒危药用植物铁皮石斛种苗快繁技术有重大突破

浙江健丰生物科技开发有限公司为研发铁皮石斛种苗快速繁殖及工厂化栽培技术建立的一项科研项目，近日通过了中国工程院、国家药典委员会专家的验收。这表明中国濒危药用植物铁皮石斛种苗快繁技术有了重大突破。     

川芎茎尖组培快繁体系的建立

目的:筛选茎尖外植体生根的最佳培养基,建立川芎组培快繁体系。方法:以川芎茎尖为外植体,分析不同种类和浓度的植物激素(IBA、NAA和IAA)处理下川芎茎尖的根再生情况,并对组培苗进行移栽试验。结果:植物激素IBA对川芎茎尖再生不定根效果最好,其次为NAA。在不同激素配比中,IBA 0.25 mg/L+NAA 0.25 mg/L组合处理下川芎茎尖生根数量最多,根系最发达,生根率达到96.2%;移栽后幼苗健壮,叶色浓绿,成活率高达90%以上。结论:1/2 MS+IBA 0.25 mg/L+NAA 0.25 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L作为最佳的生根培养基,可建立高效的川芎茎尖组培快繁体系。     

对叶百部组培快繁技术体系的优化

目的 筛选获得一套便捷高效的对叶百部组培快繁技术体系以应用于生产。方法 以带芽茎段为试验材料,优化了外植体的灭菌方法,不同植物激素种类及其质量浓度对丛生芽诱导、增殖、生根等环节的影响,并对无菌苗进行了炼苗移栽。结果 以2%次氯酸钠溶液处理外植体12min效果最佳,萌芽率77.77%,污染率5.57%,褐化率16.66%; MS+6-BA 2.5mg/L+KT 0.2mg/L+IAA 1.0mg/L为初代诱导的最佳培养基,诱导出的丛生芽数量较多,且叶绿、植株长势良好;MS+6-BA 2.0mg/L+KT 1.5mg/L+IAA 0.2mg/L为最佳的继代增殖培养基,增殖系数为5.3,显著高于其它处理,且丛生芽的长势良好,数量多,叶片大;不定芽生根最适的培养基为1/4MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+活性炭500mg/L,生根率可达77%,显著高于其它处理;以泥炭土+蛭石为试管苗移栽的最佳基质,移栽30 d后成活率为100%。结论 研究结果成功构建了对叶百部的组培快繁技术体系,符合工厂化育苗的要求,可为对叶百部健康种苗的产业化生产提供技术支持。     

灯台叶树的组培快繁研究

用灯台叶树茎尖为材料进行离体培养，在5种不同培养基上诱导愈伤组织发生和芽的分化过程，结果证明在MS培养基上附加2.4-D2mg/L,NAA2mg/L,6-BA3mg/L时，愈伤指数最高（92.3%)。在另5种不同浓度培养基上诱导芽的形成时，于MS为基本培养基，添加NAA0.25mg/L,Kt2mg/L时，芽的分化率最高（86.7%)，当激动素的浓度提高或降低时，均引起芽的分化数目下降。     

鸦胆子茎节组培快繁体系的建立

目的：建立鸦胆子茎节组培快繁体系。方法：选用鸦胆子嫩枝为外植体,探讨基本培养基和外源激素对其离体再生的初代培养、继代增殖、生根培养的影响,并进行移栽试验。结果：鸦胆子的不定芽增殖、壮苗、生根的最佳培养基分别为MS＋6-BA1．0mg·L^-1＋IBA0.1mg·L^-1,1／2MS＋香蕉汁20g·L^-1;1／2NS＋IBA0．1mg·L^-1＋NAA0．1mg·L^-1。炼苗基质为细沙时,成活率最高。     

栝楼的组培快繁技术研究

目的:探讨栝楼组织培养及种苗快速繁殖技术。方法:通过茎尖、带芽茎段、茎段和叶片诱导丛生芽及愈伤组织。结果:栝楼2年生块茎幼苗的茎尖和带芽茎段在MS 2 mg/L BA 0.5~0.05 mg/L NAA培养基上可诱导丛生芽,并在生根培养基MS 0.1 mg/L NAA 0.2 mg/L IBA中生根,经驯化移栽可实现快速繁殖。无芽茎段和叶片用含4 mg/L BA和0.5 mg/L NAA的MS培养基可诱导愈伤组织,由茎段来的愈伤组织经6周后分化为无根苗。结论:栝楼茎尖和带芽茎段的组织培养,可在短期内大量繁殖栝楼雌雄种苗,具有成本低,效益高的特点。     

铁皮石斛培养的产业化研究

目的　筛选适宜的铁皮石斛不定芽增殖与生根培养基 ,选择适合继代扩繁的不定芽高度。方法　在相同培养条件下 ,不同高度的不定芽在不同的增殖与生根培养基中生长 ,对结果所产生的不同生长状况 ,进行显著性差异检验及综合分析。结果　不同高度的不定芽之间有显著差异 ,不同的增殖与生根培养基之间有显著差异。结论　铁皮石斛继代以 (1.2± 0 .1) cm高的不定芽为宜 ,增殖培养基以 MS添加 BA1.0 m g/ L、NAA0 .2 mg/ L 为佳 ,生根培养基以 1/ 2 MS添加 NAA 0 .2 mg/ L为佳。