黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2表达的影响

目的:观察黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤的抑瘤效果及瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白和基因表达的影响。方法:选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌原位癌动物模型,分为模型组,阳性对照组(顺铂),黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍(按照2∶1)高、中、低剂量组,监测抑瘤效果。用免疫组化和Real time-PCR检测移植瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白和基因的表达情况。结果:阳性对照组,黄芪组,黄芪、莪术配伍高剂量组,黄芪、莪术配伍低剂量组平均肿瘤质量明显小于模型组(P0.05);各组MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白表达与模型组相比无统计学差异(P0.05);黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍组高、中、低剂量组肿瘤组织中的MMP-2、FGF-2、BCL-2 mRNA表达明显低于模型组(P0.05)。结论:黄芪、莪术配伍使用在实验周期内对人卵巢癌HO-8910具有抑制作用(P0.05),其作用机制可能与下调移植瘤中MMP-2、FGF-2、BCL-2基因表达相关。     

黄芪甲苷配伍姜黄素对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤转移的抑瘤作用

目的:研究黄芪甲苷配伍姜黄素对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤出现转移的抑瘤作用,探讨两者配伍对抗肿瘤是否有协同增效作用。方法:选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌动物模型,设G1模型组,G2顺铂组,G3黄芪甲苷组,G4姜黄素组,G5黄芪甲苷+姜黄素配伍组,每组8只。称瘤重并计算抑瘤率;免疫组化法检测肿瘤组织基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2),B细胞淋巴瘤/白血病-2(apoptosis regulator,Bcl-2)的蛋白表达;实时荧光定量PCR(Realtime PCR)法检测MMP2,Bcl-2及miR21,miR15a,miR200a基因表达。结果:荷瘤鼠经治疗后,与模型组比较,瘤重均有所减小,配伍组瘤重明显低于其他组(P0.05)。免疫组化结果显示,与模型组比较,顺铂组、单体组MMP2,Bcl-2蛋白表达均降低,配伍组明显降低(P0.05);Real-time PCR结果显示,与模型组比较,中药组MMP2,Bcl-2,miR21基因表达均降低,配伍组明显下调(P0.05),miR15a,miR200a基因表达均增强,配伍组明显上调(P0.05)。结论:黄芪甲苷配伍姜黄素对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤出现转移后有抑瘤作用,其作用机制可能与抑制MMP2,Bcl-2,miR21表达,上调miR15a,miR200a表达有关,黄芪甲苷配伍姜黄素确有协同增效作用。     

黄芪、莪术单药及配伍通过影响上皮间质转化抑制Lewis荷瘤小鼠肺转移的研究

目的通过观察黄芪、莪术及其配伍应用对Lewis荷瘤小鼠肺转移灶数目及肿瘤上皮间质转化的影响,研究其基于上皮间质转化机制抑制肿瘤转移的作用,并分析黄芪、莪术配伍应用的意义。方法将50只C57 Lewis荷瘤小鼠模型随机分为模型组、顺铂组、黄芪单药组、莪术单药组及黄芪-莪术配伍组,接种后次日开始连续15 d,分别给予相应药物干预,处死后解剖取出肺脏,解剖显微镜下观察双肺表面超过2 mm结节数目;剥离腋下种植瘤体,EnVision法检测肿瘤组织中E-cad、MMP-2、MMP-9表达。结果顺铂组和配伍组肺转移结节数量少于模型组(均P0.05),单药组肺转移灶数量虽均少于模型组但差异无统计学意义(P0.05);各中药组均不及顺铂组(P0.05),配伍组少于黄芪、莪术单药组,但差异无统计学意义(P0.05)。E-cad表达,与模型组相比,顺铂组、配伍组升高(均P0.05),单药组与模型组比差异均无统计学意义(P0.05);各中药组低于顺铂组(均P0.05),配伍组高于莪术组(P0.05),与黄芪组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-2表达,各组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-9表达,顺铂组、配伍组、莪术单药组低于模型组(均P0.05),黄芪组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);各中药组高于顺铂组(均P0.05),配伍组低于黄芪组(P0.05),与莪术单药组接近,差异无统计学意义(P0.05)。结论黄芪-莪术配伍抑制肿瘤转移的效果优于单用黄芪、莪术,其作用机制为提高E-cad蛋白表达、降低MMP-9表达;黄芪、莪术配伍使用在提高E-cad表达上优于单用黄芪、莪术,在降低MMP-9表达上与莪术相近、优于单用黄芪。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响

目的探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15d,免疫组织化学染色及Real-time RT-PCR检测肿瘤组织中CD147、iNOS蛋白及mRNA的表达。结果与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP、L+DDP组CD147、iNOS蛋白及mRNA表达均显著下降(P0.05或P0.01),并与剂量呈一定的正相关性。与DDP组相比,H+DDP组CD147、iNOS蛋白表达降低(P0.05或P0.01)。结论黄芪、莪术配伍可能是通过下调CD147、iNOS蛋白及mRNA表达对肿瘤新生血管生成产生影响。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠原位移植瘤内微血管的影响

目的:探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)抗肝癌新生血管生成的作用机制。方法:构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15 d,检测肿瘤新生微血管密度计数(CD34)、MMP-2、bFGF。结果:与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP组移植瘤组织微血管数目均减少(P0.05或P0.01),血清中bFGF、MMP-2含量均明显降低(P0.01)。与DDP组相比,H、M、H+DDP、M+DDP组移植瘤组织微血管数目均减少(P0.05或P0.01),H、H+DDP组血清中bFGF、MMP-2含量均明显降低(P0.01)。结论:黄芪、莪术配伍可能是通过下调MMP-2、bFGF的表达对新生血管生成产生抑制作用。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠TF、HGF、FVⅡ表达的影响

目的探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)影响肿瘤新生血管生成的作用机制。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15 d,Western Blot及Real-time RT-PCR检测肿瘤组织中TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA的表达。结果与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP组TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA表达均显著下降(P<0.01),并与剂量有一定的正相关性。与DDP组相比,H+DDP组TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA表达降低(P<0.01)。结论黄芪、莪术配伍可能是通过下调TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA表达对肿瘤新生血管生成产生影响。     

黄芪莪术配伍对人肝癌裸鼠原位移植瘤新生血管生成的影响

目的探讨补气活血药黄芪、莪术配伍对人肝癌裸鼠原位移植瘤新生血管生成的影响。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为5组:模型对照组、顺铂组(DDP)(2mg/kg DDP腹腔注射)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)[12g/(kg·d)灌胃]、黄芪莪术配伍中剂量组(M)[6g/(kg·d)灌胃]、黄芪莪术配伍低剂量组(L)[3g/(kg·d)灌胃],每组8只。观察黄芪、莪术配伍对原位移植瘤的作用,免疫组化SP法检测肿瘤组织HIF-1α、VEGF的表达。结果H、M、L组的瘤重抑制率为41.55%、26.48%、24.66%,瘤体积抑制率为42.91%、25.05%、23.95%,能抑制原位移植瘤的生长,H组与模型对照组比较有极显著差异(P0.01)。免疫组化结果提示,H、M、L组HIF-1α、VEGF阳性表达IOD值均下降,与模型对照组比较有显著性差异(P0.05,P0.01)。结论黄芪、莪术配伍对人肝癌裸鼠原位移植瘤的生长有抑制作用,并能抑制肿瘤新生血管生成,其机制可能与对HIF-1α、VEGF表达的抑制有关。     

冬凌草甲素对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制。方法通过大剂量冲击法,诱导制备耐紫杉醇的人卵巢癌HO-8910PM细胞株(HO-8910PM/PIX),用不同浓度冬凌草甲素处理HO-8910PM/PIX细胞;或在冬凌草甲素作用HO-8910PM/PIX细胞前以NF-κB激活剂TPA进行预处理。给药后,细胞经DAPI染色,荧光显微镜下观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blotting检测卵巢癌细胞中NF-κB蛋白的表达。建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。接种后8周,观察冬凌草甲素对裸鼠皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中NF-κB的阳性表达。结果与对照组相比,冬凌草甲素呈浓度相关性抑制卵巢癌HO-8910PM/PIX细胞增殖,显著诱导细胞凋亡,而TPA可显著削弱冬凌草甲素诱导细胞凋亡的作用。与HO-8910PM细胞相比,NF-κB在HO-8910PM/PIX细胞中表达显著上调,冬凌草甲素可抑制HO-8910PM/PIX细胞中NF-κB的表达。冬凌草甲素可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长,明显减弱移植瘤组织中NF-κB的阳性表达。结论冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性具有拮抗作用,该作用可能通过抑制NF-κB的表达而实现。     

黄芩素通过激活Caspases和Bcl-2家族蛋白诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡

目的研究黄芩素对卵巢癌HO-8910细胞凋亡的调控作用及其可能的作用机制。方法选取人卵巢癌细胞系HO-8910细胞,经黄芩素不同浓度及不同时间处理后,分别采用噻唑蓝(MTT)法测定对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;采用Westernblotting法检测Bcl-2家族蛋白表达情况。结果黄芩素对HO-8910细胞有明显的增殖抑制作用,呈浓度-时间依赖性。与对照组比较,黄芩素组细胞凋亡率明显升高(P0.05、0.01)。黄芩素上调Bax/Bcl-2值,上调cleaved Caspase-3及cleaved Caspase-9的蛋白表达量,呈浓度依赖性。结论黄芩素通过激活Caspase和Bcl-2家族蛋白对卵巢癌HO-8910细胞发挥抗增殖及诱导凋亡活性。     

复方丹参滴丸靶向调节JAK2/STAT3途径抑制卵巢癌大鼠的机制研究

目的:复方丹参滴丸靶向调节JAK2/STAT3途径抑制卵巢癌大鼠的机制研究。方法:大鼠荷卵巢癌模型制备采取大鼠右腋窝皮下注射接种NUTU-19卵巢癌细胞悬液的方法,随机分为对照组,模型组、治疗组和阳性组,每组20只。观察大鼠肿瘤生长情况并计算抑瘤率;通过四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法测定各组大鼠脾淋巴细胞转化率;HE染色观察肿瘤组织病理性形态学变化。取卵巢癌组织,以免疫组化方法检测VEGF表达。Western Blot法检测磷酸化p-JAK2、p-STAT3、JAK2、和STAT3的蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组、治疗组和阳性组肿瘤瘤体质量、瘤体体积显著增多,大鼠脾淋巴细胞转化率显著提高(P0.05);模型组、治疗组和阳性组大鼠卵巢癌组织内VEGF表达显著增多(P0.05);VEGF、p-JAK2、p-STAT3、JAK2、和STAT3表达明显升高(P0.05)。与模型组相比,治疗组和阳性组大鼠皮毛松散、饮食差状况减轻,卵巢癌组织呈现片状坏死、瘤细胞皱缩等病理性形态学变化,瘤体减小,肿瘤抑制率显著升高(P0.05);治疗组和阳性组大鼠卵巢癌组织内VEGF表达显著降低(P0.05);VEGF、p-JAK2、p-STAT3、JAK2、和STAT3表达明显降低(P0.05)。与阳性组相比,治疗组大鼠瘤体质量、瘤体体积、抑瘤率、脾淋巴细胞转化率比较无显著差异,VEGF、p-JAK2、p-STAT3、JAK2、和STAT3表达无显著差异(P0.05)。结论:复方丹参滴丸靶向抑制VEGFJAK2/STAT3途径产生抗大鼠卵巢癌细胞的作用。     

益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤血管拟态相关因子的影响

目的探讨益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌移植瘤血管拟态相关因子表达的影响。方法瘤细胞接种建立人肝癌移植瘤模型,随机分为益气化瘀解毒方组(全方组)、黄芪组、莪术组、重楼组、壁虎组、顺铂组及模型组,除模型组外,各给药组予相应药物干预。21d后,采用免疫组化法检测瘤组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、E-钙黏附蛋白(E-cad)表达,免疫荧光法观察血管生成拟态结构,实时荧光定量PCR检测瘤组织Twist1、Bcl-2表达。结果与模型组比较,给药后各给药组瘤体积减小(P0.05),全方组优于黄芪组、重楼组、壁虎组(P0.05);各组血管生成拟态结构荧光表达稀少,模型组、顺铂组最为明显;除黄芪组外,各给药组HIF-1α及MMP-9、MMP-2表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),全方组最为明显;全方组、黄芪组E-cad表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);全方组、重楼组、壁虎组与模型组比较Bcl-2表达明显降低(P0.05),其中全方组Bcl-2表达明显优于其他给药组(P0.05);全方组、莪术组、重楼组、顺铂组Twist1表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气化瘀解毒方及其单味药通过下调HIF-1α、Twist1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9及上调E-cad表达,从而抑制血管生成拟态形成。     

黄芪配伍莪术对小鼠结肠癌细胞CT26黏附和迁移能力的影响

目的探讨黄芪配伍莪术在体外对小鼠结肠癌细胞CT26黏附和迁移能力的影响及作用机制。方法体外培养CT26细胞,设对照组,分别以0.00625、0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2g/ml的黄芪、莪术药物浓度处理24h和48h后,采用CCK-8法检测黄芪配伍莪术对CT26细胞存活率的影响以选择合适的给药浓度。采用划痕实验检测黄芪配伍莪术对CT26细胞迁移能力的影响,采用细胞黏附实验检测黄芪配伍莪术对CT26细胞与细胞及与细胞外基质间黏附能力的影响。药物处理24h后采用Western blot法和RT-PCR法检测CT26细胞中黏附相关因子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、抗癌1号蛋白(KAI1)、抑癌基因张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)、基质蛋白酶诱导因子(CD147)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白和mRNA表达。结果选择0.0125、0.025、0.05g/ml浓度进行后续实验。与对照组比较,24h时黄芪配伍莪术组0.025、0.05g/ml浓度及48h时0.0125、0.025、0.05g/ml浓度CT26细胞的迁移率均明显降低;与黄芪配伍莪术组0.0125g/ml浓度比较,24、48h 0.025、0.05g/ml浓度CT26细胞迁移率均明显降低;与黄芪配伍莪术组0.025g/ml浓度比较,24、48h 0.05g/ml浓度CT26细胞迁移率均明显降低;除黄芪配伍莪术组0.05g/ml浓度外,各组48h CT26细胞迁移率较本组24h均明显增加(P0.05或P0.01)。与对照组比较,黄芪配伍莪术组0.0125、0.025、0.05g/ml浓度与细胞外基质黏附率均明显下降;与黄芪配伍莪术组0.0125g/ml浓度比较,0.025、0.05g/ml浓度与细胞黏附率明显升高,0.05g/ml浓度与细胞外基质黏附率明显下降;与黄芪配伍莪术组0.025g/ml浓度比较,0.05g/ml浓度与细胞黏附率明显升高(P0.05或P0.01)。与对照组比较,黄芪配伍莪术组0.025、0.05g/ml浓度CT26细胞的E-cadherin、KAI1、PTEN蛋白及mRNA表达水平显著升高,CD147蛋白表达显著降低;与黄芪配伍莪术组0.0125g/ml浓度比较,0.025g/ml浓度E-cadherin蛋白及mRNA表达明显升高,0.05g/ml浓度E-cadherin、KAI1、PTEN蛋白及mRNA表达显著升高,CD147蛋白及mRNA表达下降;与黄芪配伍莪术组0.025g/ml浓度比较,0.05g/ml浓度的KAI1、PTEN蛋白及mRNA表达明显升高,CD147蛋白及mRNA表达下降(P0.05或P0.01)。结论黄芪配伍莪术可以增强CT26细胞间黏附,减弱与细胞外基质黏附能力,并抑制其迁移能力,其作用机制可能与促进同源性黏附相关因子E-cadherin、PTEN、KAI1表达,抑制异源性黏附相关因子CD147、MMP-9、HIF-1α表达有关。     

抑瘤一号方对HO-8910人卵巢癌细胞细胞活力及MMP-2、MMP-9mRNA表达的影响

目的:观察抑瘤一号方对HO-8910人卵巢癌细胞增殖及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9mRNA表达的影响,从而为其抑制卵巢癌进展提供依据。方法:在体外用不同浓度(0%、5%、15%、20%)抑瘤一号方含药血清处理HO-8910人卵巢癌细胞后,检测细胞活力及细胞内MMP-2、MMP-9m RNA表达。结果:空白组HO-8910人卵巢癌细胞胞体相对光滑,核膜尚完整,细胞器正常,染色质呈现均匀;抑瘤一号方含药血清处理后的HO-8910人卵巢癌细胞胞体发生皱缩,胞质可见多发空泡形成,核染色质出现固缩,形成多个团块状,或边界较分明的类似新月形小体,凋亡特征明显。作用12、24h后,5%、10%组细胞活力与同期空白组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组细胞活力依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05);作用48h后,5%组与空白组、5%组与10%组细胞活力比较,差异均无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组细胞活力均低于同期空白组,且15%、20%组均低于10%组,差异均有统计学意义(P<0.05);作用72h后,5%组与空白组细胞活力比较,差异无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组细胞活力均低于同期空白组、5%组,且15%、20%组细胞活力均低于10%组,差异均有统计学意义(P<0.05)。5%组、空白组MMP-2mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组MMP-2mRNA表达水平均低于空白组,且15%、20%组均低于5%组,20%组低于10%组,差异均有统计学意义(P<0.05);空白组、5%组、10%组MMP-9mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);15%、20%组MMP-9mRNA表达水平均低于空白组和5%组,20%组低于10%、15%组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:抑瘤一号方在体外能明显降低HO-8910人卵巢癌细胞活力,抑制肿瘤细胞基质金属蛋白酶的表达。     

扶正抑瘤颗粒对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞P53、 BCL-2蛋白表达的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠肿瘤细胞凋亡相关基因P53、BCL-2蛋白表达的影响。方法:将48只小鼠分成FYK大剂量组、FYK小剂量组、天仙胶囊阳性对照组和荷瘤模型组,造模形成实体瘤后分别灌胃FYK、天仙胶囊、生理盐水18天,取瘤组织用流式细胞仪检测P53、BCL-2蛋白表达。结果:FYK组肿瘤细胞P53蛋白表达升高、BCL-2蛋白表达下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:FYK具有促进肿瘤细胞P53表达和抑制BCL-2表达作用。     

三棱-莪术有效组分配伍液对慢性盆腔炎大鼠盆腔粘连的影响

目的研究三棱-莪术有效组分配伍液对慢性盆腔炎模型大鼠盆腔粘连的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药(妇科千金片)组、配伍液高剂量组(40 g/kg)、中剂量组(20 g/kg)、低剂量组(10 g/kg)。除假手术组外,各组大鼠均采用机械损伤联合植入菌种法制备慢性盆腔炎模型。造模后,除假手术组、模型组外,各组大鼠灌胃给药20 d。末次给药后,采用Verco评价标准对各组大鼠盆腔粘连进行评分,子宫组织HE染色后观察,并进行病理评分,ELASA法测定血清中IL-1β、TNF-α水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测子宫组织FGF-2、IGF-1蛋白表达水平。结果与模型组比较,配伍液高剂量组大鼠盆腔粘连Verco评分明显降低(P0.05);配伍液高、中剂量组大鼠子宫上皮变性坏死、慢性炎症浸润、上皮细胞增生的评分均明显降低(P0.01,P0.05);配伍液高剂量组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平显著降低(P0.01);配伍液高、中剂量组子宫中FGF-2、IGF-1蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论三棱-莪术有效组分配伍液能明显抑制慢性盆腔炎模型大鼠的盆腔粘连,改善病理状态,其作用机制可能与抑制炎症介质IL-1β、TNF-α释放,下调FGF-2及IGF-1的蛋白表达有关。     

矢车菊素-3-葡萄糖苷抑制体内外卵巢癌生长的作用

目的:探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷对体内外卵巢癌生长的影响及其机制。方法:矢车菊素-3-葡萄糖苷作用人卵巢癌细胞株HO-8910PM后,CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测卵巢癌细胞中Mucin-4蛋白表达;建立起裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,观察矢车菊素-3-葡萄糖苷对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和Mucin-4的阳性表达。结果:与对照组相比较,矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制体外卵巢癌HO-8910PM细胞生长,并明显诱导细胞凋亡;可显著下调卵巢癌细胞中Mucin-4的表达。矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长;可明显降低卵巢癌肿瘤组织中Ki-67和Mucin-4的阳性表达。结论:矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制体内外卵巢癌生长,该作用可能通过抑制Mucin-4蛋白表达而实现。     

黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立人鼻咽癌CNE2裸鼠多植瘤模型,随机分为对照组,顺铂组,黄芪注射液高、中、低剂量组,分别ip生理盐水,顺铂,10.40、5.20、2.60 g/kg黄芪注射液,4周后处死CNE2荷瘤裸鼠。通过移植瘤生长曲线、终末瘤质量,计算黄芪注射液的抑瘤率;采用HE染色,于光镜下观察各组移植瘤组织细胞病理形态学变化;采用免疫组化法检测黄芪注射液对各组裸鼠移植瘤组织中凋亡相关蛋白p53、Bcl-2和Bax表达的影响。结果黄芪注射液高、中剂量组移植瘤体积明显低于对照组(P0.05),瘤质量明显低于对照组(P0.01),抑瘤率分别为39.90%、30.77%;黄芪注射液高、中剂量组移植瘤组织中p53、Bcl-2蛋白的表达低于对照组(P0.01);各组移植瘤组织中Bax蛋白表达均呈阴性。结论黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植瘤具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡,降低肿瘤组织中p53和Bcl-2蛋白的表达有关。     

复方红豆杉胶囊对人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型抗肿瘤活性及其作用机制的研究

目的观察复方红豆杉胶囊对人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型抗肿瘤活性及其作用机制。方法将40只清洁级BALB/c A-nude小鼠随机分为模型对照组、环磷酰胺组、红豆杉高剂量组及红豆杉低剂量组,对各组小鼠接种SKOV3卵巢癌细胞进行造模,造模成功后对小鼠进行给药处理,环磷酰胺组给予环磷酰胺(0.031 g/kg),红豆杉高剂量组及红豆杉低剂量组分别给予0.74 g/kg和0.369 g/kg的复方红豆杉胶囊,均每日1次,连续给药14 d。末次给药24 h后,观察小鼠肿瘤体积、质量与肿瘤生长抑制率。对小鼠肿瘤组织进行病理组织学观测,并采用荧光免疫组化法检测肿瘤组织中C型-半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(C-caspase-3)、多重肿瘤抑制因子(MTS)、B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)及细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK4)的阳性表达情况,比较相对表达量。结果与模型对照组比较,环磷酰胺组、红豆杉高剂量组及红豆杉低剂量组小鼠肿瘤体积与质量均明显降低(P0.05),肿瘤生长抑制率分别为73.6%、61.1%及50.9%。病理学观察结果显示,与模型对照组比较,环磷酰胺组、红豆杉高剂量组及红豆杉低剂量组中均可见不同程度的癌细胞出现坏死与凋亡。免疫荧光染色结果表明,环磷酰胺组、红豆杉高剂量组及红豆杉低剂量组中BCL-2及CDK4的阳性表达均显著弱于模型对照组,而C-caspase-3及MTS阳性表达则均显著强于模型对照组(P0.05),半定量分析结果表明,与模型对照组比较,环磷酰胺组、红豆杉高剂量组及红豆杉低剂量组BCL-2及CDK4相对表达量均明显降低,而C-caspase-3及MTS相对表达量均明显增高(P0.05)。结论复方红豆杉胶囊对人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型具有较好的治疗作用,其主要机制可能与该药物能够促进肿瘤细胞凋亡有关,值得进行深入研究。     

黄芪莪术配伍抑制MKN-45裸鼠人原位胃癌模型肿瘤生长、转移及COX-2表达的增效研究

目的通过研究黄芪与莪术配伍的抗肿瘤作用及对COX-2的抑制作用,探讨二者配伍后对于抗肿瘤是否具有增效作用。方法采用MKN-45裸鼠人原位胃癌模型,设黄芪与莪术的配伍组、黄芪组、莪术组、塞来昔布组和空白组,以电子天平检测各药物组的裸鼠原位移植瘤的质量,肉眼数取肝脏转移灶数量,RT-PCR和Western blot检测COX-2表达水平。结果各组于第3周对肿瘤生长、COX-2的表达具有抑制作用,并随时间延长而加强,于第6周表现出对肝转移的抑制作用。其中以配伍组和塞来昔布组的作用显著优于黄芪组和莪术组(P<0.01),且至第6周时配伍组对肿瘤肝转移和COX-2表达的抑制作用显著优于塞来昔布组(P<0.05)。结论黄芪与莪术配伍后可以显著提高抗肿瘤作用,并且对COX-2的抑制作用也显著增强。     

莪术醇对结直肠癌细胞裸鼠移植瘤生长及其VEGF和COX-2表达的影响

目的:观察莪术醇对人结直肠癌Lo Vo细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其可能的机制。方法:建立人结直肠癌Lo Vo细胞裸鼠移植瘤模型,成瘤后将其随机分为莪术醇高、中、低剂量(80,40,20 mg·kg-1)组,模型组,空白组,每天ig给药1次,给药21 d。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫组化方法(IHC)检测瘤组织中血管生成因子(VEGF)、环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果:与模型组比较,莪术醇高、中、低剂量组能明显降低肿瘤的瘤体积、瘤重及VEGF,COX-2的表达,均呈剂量依赖性。莪术醇高、中、低剂量组抑瘤率分别为66.88%,42.08%,25.73%;模型组VEGF表达量与莪术醇各组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组COX-2表达量与莪术醇中、高剂量组比较,差异具有统计学意义(P0.05),VEGF和COX-2表达具有明显相关性(r=0.874,P0.01)。结论:莪术醇抑制结直肠癌Lo Vo细胞裸鼠移植瘤生长的机制可能与下调VEGF和COX-2表达有关,并且可能通过COX-2/前列腺素E2(PGE2)/VEGF信号通路发挥抑制结直肠癌生长的作用。