山蜡梅叶化学成分及活性研究(1)

目的分析山蜡梅叶石油醚萃取物的成分及其对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。方法采用乙醇浸提法、液液萃取法得到山蜡梅叶石油醚萃取物,用气质联用法对其进行组成分析并用面积归一化法测定各化学成分的相对百分含量。使用改进了的Ellman比色法检测山蜡梅叶石油醚萃取物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。结果从山蜡梅叶石油醚萃取物中共检出47个化学成分,占其总组成总量的86.456%,其主要成分是9,12,15-十八碳三烯酸乙酯(27.370%);棕榈酸乙酯(17.340%);植醇(11.616%);9,12-十八碳二烯酸乙酯(9.089%)。山蜡梅叶的石油醚萃取物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性较弱,且呈剂量依赖关系。结论该研究为山蜡梅叶的综合开发利用提供了科学依据。     

药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物的生物活性研究

目的：从4种植物的内生真菌中筛选对单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶具有抑制活性的提取物。方法：用组织块法分离4种植物中的内生真茵;对分离出的纯内生真菌用液体培养基发酵培养,用等体积乙酸乙酯萃取发酵液并用乙醇对茵丝体进行回流提取,得到各组分提取物;用酶标法测定提取物的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果：共分离出36株内生真菌,其中有16种内生真菌提取物有不同程度的抑制单胺氧化酶活性,其中GT-7茵液萃取物抑酶活性最强。2种内生真菌提取物有乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论：药用植物中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性,可作为筛选单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制剂的新资源。     

药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物抗乙酰胆碱酯酶活性研究

目的:从4种植物的内生真菌中筛选对乙酰胆碱酯酶具有抑制活性的提取物。方法:用组织块法分离4种植物中的内生真菌;对分离出的纯内生菌用液体培养基发酵培养,用等体积乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取发酵液并用乙醇对菌丝体进行索氏提取,得到各组分提取物;用改良的Ellman法测定提取物的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果:共分离出53株内生真菌,其中有7种内生真菌萃取物有不同程度的抑制乙酰胆碱酯酶活性,其中以XX-10的正丁醇组份的抑酶活性最强。结论:药用植物中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的抗乙酰胆碱酯酶活性,可作为筛选乙酰胆碱酯酶抑制剂的新资源。     

藏药中乙酰胆碱酯酶抑制剂的筛选

目的:从8种藏药中筛选对乙酰胆碱酯酶具有高抑制活性的提取物。方法:药材经乙醇提取、酸碱处理、氯仿和正丁醇萃取后,得到氯仿部分和正丁醇部分。各部分用薄层色谱生物自显影法初步筛选其乙酰胆碱酯酶抑制活性,再用改良的Ellman法进一步测定抑制率及半数抑制浓度(IC50)。结果:8种藏药生物碱提取物的氯仿部分有不同程度的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中止泻木Holarrhena antidysenterica、秦艽花Gentiana straminea、山莨菪Anisodus tanguticus抑制活性最强,IC50分别为6.32,28.20,34.80 mg·L-1。正丁醇部分中,山莨菪的抑制活性显著,IC50为51.70 mg·L-1。结论:止泻木、秦艽花、山莨菪具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性,说明其含有抑制乙酰胆碱酯酶的成分,为进一步跟踪分离活性成分奠定基础。     

阳荷提取物体外抗菌作用研究

目的:研究姜科姜属植物阳荷根茎乙醇提取物的体外抗菌活性.方法:运用乙醇渗漉法提取得到阳荷总提取物,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到不同极性部位;用滤纸片法对乙醇提取物及各萃取物进行体外抗菌活性测定,有抑菌作用的萃取物进一步用微量肉汤稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC).结果:阳荷根茎乙醇提取物、石油醚和氯仿萃取物具有抑制金黄色葡萄球菌等3种革兰阳性菌和大肠埃希菌等3种革兰阴性菌生长繁殖的活性,MIC值在312.5 ～1250 mg·L-1.总提取物对地衣芽孢杆菌、无乳链球菌和大肠埃希菌的MBC均为1250 mg· L-;石油醚和氯仿萃取物对6种测试菌株均有杀灭作用,MBC值在625～1250 mg·L-1.结论:阳荷根茎乙醇提取物及石油醚和氯仿萃取物能显著抑制金黄色葡萄球菌、地衣芽孢杆菌、无乳链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌的生长繁殖,具有明显的灭活作用.     

藏药中乙酰胆碱酯酶抑制剂的筛选

目的：从8种藏药中筛选对乙酰胆碱酯酶具有高抑制活性的提取物。方法：药材经乙醇提取、酸碱处理、氯仿和正丁醇萃取后,得到氯仿组份和正丁醇组份。各组份用薄层色谱生物自显影法初步筛选其乙酰胆碱酯酶抑制活性,再用改良的Ellman法进一步测定抑制率及半数抑制浓度（IC50）。结果：8种藏药生物碱提取物的氯仿组份有不同程度的乙酰胆碱酯酶抑制活性, 其中止泻木（Holarrhena antidysenterica）、秦艽花（Gentiana straminea）、山莨菪（Anisodus tanguticus）抑制活性最强,IC50分别为6.32 μg.mL-1,28.20 μg.mL-1,34.80 μg.mL-1。正丁醇组份中,山莨菪的抑制活性显著, IC50为51.70 μg.mL-1。结论：止泻木、秦艽花、山莨菪具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性,说明其含有抑制乙酰胆碱酯酶的成分,为进一步跟踪分离活性成分奠定基础。     

锦鸡儿属和杜鹃属植物抗乙酰胆碱酯酶活性研究

目的:从产自甘肃的锦鸡儿属和杜鹃属植物中筛选出对乙酰胆碱酯酶具有高抑制活性的植物提取物。方法:锦鸡儿属植物经乙醇提取,碱酸处理,乙酸乙酯萃取后,得到多酚提取物。杜鹃属植物经乙醇提取,硅胶柱层析进行粗分后,得到粗分离组分。总多酚组分和粗分离组分采用薄层色谱生物自显影法初步筛选其乙酰胆碱酯酶抑制活性,再用改良的Ellman法进一步测定其对乙酰胆碱酯酶的抑制率。结果:锦鸡儿属中柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii)的抑制活性最强,在终浓度为100μg.mL-1时,抑制率超过50%。杜鹃属中,头花杜鹃(Rhododendron capitatum),千里香杜鹃(Rhododendron thymifolium),烈香杜鹃(Rhododendron anthopogonoides)的抑制活性最强,它们的粗分离组分在终浓度为100μg.mL-1时,抑制率大于60%。结论:柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii),头花杜鹃(Rhododendron capitatum),千里香杜鹃(Rhododendron thymifolium),烈香杜鹃(Rhododendron anthopogonoides)提取物的抑制活性最强,说明其含有抑制乙酰胆碱酯酶的成分,为进一步跟踪分离得到活性化合物奠定基础。     

鹿茸玛咖配伍抑制乙酰胆碱酯酶活性部位的HPLC-DAD-ESI-MS/MS分析研究

目的对鹿茸玛咖提取物各萃取部位的体外乙酰胆碱酯酶抑制作用进行研究,并对其活性部位进行化学成分分析。方法以鹿茸玛咖提取物的各极性溶剂萃取部位为研究对象,以体外抑制乙酰胆碱酯酶活性为指标,研究鹿茸玛咖提取物各萃取部位对乙酰胆碱酯酶的体外抑制作用;采用高效液相色谱-质谱联用技术对鹿茸玛咖抑制乙酰胆碱酯酶的活性部位化学成分进行分析。结果鹿茸玛咖乙酸乙酯萃取部位能够抑制乙酰胆碱酯酶活性,具有抗老年痴呆的潜在作用,经液质联用分析推测出乙酸乙酯萃取部位中的6个玛咖酰胺和2个鹿茸寡肽类的结构。结论鹿茸玛咖乙酸乙酯萃取部位为鹿茸玛咖抑制乙酰胆碱酯酶活性部位,其中含有的玛咖酰胺类成分和鹿茸寡肽类成分是鹿茸玛咖提取物体外抑制乙酰胆碱酯酶的主要物质基础。     

金银花体外抑制乙酰胆碱酯酶活性部位筛选及液质联用分析研究

目的筛选金银花体外抑制乙酰胆碱酯酶的活性部位,并对其化学成分进行分析。方法金银花提取物经反相C_(18)填料进行固相萃取(SPE)制备不同浓度甲醇梯度洗脱部位,以体外抑制乙酰胆碱酯酶能力评价其抗阿尔兹海默症作用,采用高效液相色谱-质谱联用技术对金银花化学成分进行分析。结果金银花提取物的30%甲醇洗脱部位的乙酰胆碱酯酶酶抑制活性明显强于其他洗脱部位,并存在明显的量效关系,为其体外抑制乙酰胆碱酯酶的活性部位,经液质联用分析共鉴定出14种化合物成分。结论金银花具有体外抑制乙酰胆碱酯酶活性,其主要有效部位为30%甲醇洗脱部位,具有一定的抗阿尔兹海默症的作用。     

药用植物中乙酰胆碱酯酶抑制活性和抗氧化活性的筛选

目的:对24种药用植物醇提物的乙酰胆碱酯酶抑制活性和抗氧化活性进行筛选研究。方法:70%乙醇回流提取植物粗提物;目标粗提物采用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,得到氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水部位;乙酰胆碱酯酶抑制活性测定采用改良的Ellman法和薄层色谱(TLC)生物自显影法相结合的方法;抗氧化活性采用清除DPPH自由基能力进行评价。结果:结合改良Ellman法和TLC生物自显影法对24种植物的醇提物的抗乙酰胆碱酯酶抑制活性进行评价,结果表明红毛七、金不换、飞龙掌血、白花映山红和八角枫5种植物粗提物具有显著的抑制活性,在终浓度为1 g.L-1时,其抑制率分别为(88.72±1.47)%,(82.25±1.32)%,(77.71±1.61)%,(77.00±1.38)%,(75.22±1.28)%,其清除DPPH自由基IC50分别为153.75,74.95,50.00,10.87,24.40 mg.L-1。在这5种植物粗提物不同萃取部位中,红毛七和金不换氯仿部位对乙酰胆碱酯酶抑制活性最强,其IC50为33.97,38.79 mg.L-1,其清除DPPH自由基的IC50为302.95,79.45 mg.L-1。结论:金不换和红毛七粗提物氯仿部位具有较强的乙酰胆碱酯酶抑制活性和抗氧化活性,可进行进一步的追踪分离研究。     

白芷提取物对酪氨酸酶的抑制作用

目的:研究白芷提取物对酪氨酸酶的抑制作用。方法:将白芷的95%乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,并用曲酸作阳性对照、以酪氨酸作底物来测定石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部分及萃取后水部分对酪氨酸酶的抑制作用。将白芷乙酸乙酯部分进一步用正相硅胶柱和Sephadex LH-20凝胶柱分离纯化得到四个单体化合物,分别为丁二酸、反式咖啡酸、水合氧化前胡素和白当归脑,并对4个单体化合物进行酪氨酸酶抑制试验。结果:经酪氨酸酶活性测定,白芷乙酸乙酯萃取部分对酪氨酸酶的活性抑制作用较强,其半数抑制浓度IC50为1.25 mg/mL,白芷石油醚部分和萃取后水部分均无抑制作用,而白芷正丁醇部分相反有激活酪氨酸酶活性作用。除反式咖啡酸有较弱的酪氨酸酶活性抑制作用外,其它3个单体化合物均无抑制作用。结论:白芷乙酸乙酯部分有较明显的酪氨酸酶抑制作用。本研究没有获得具有明显抑制酪氨酸酶活性的单体化合物,有待于进一步分离纯化研究。     

中药提取物乙酰胆碱酯酶抑制活性的研究

目的研究中药水提物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。方法选取24味中药做研究对象。应用传统的水提的方法制备中药提取物。使用改进了的Elman比色法检测24种中药的水提物对兔大脑乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果黄柏的水提物有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性,在50μg/ml浓度下抑制率达75.58%,IC50值为20.03μg/ml。厚朴的水提取物在50μg/ml浓度下抑制率为43.95%,其IC50值为127.17μg/ml。益智仁的水提物有较弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论黄柏等中药提取物对乙酰胆碱酯酶具有很好的抑制活性。     

22种藏药材抗氧化活性研究

目的:考察22种藏药材乙醇提取物抗氧化活性,对具有显著活性的药材进一步筛选其抗氧化活性部位。方法:取22种藏药材95%乙醇提取物,通过总抗氧化能力、抑制脂质氧化能力、清除羟基自由基能力、清除DPPH.能力四个体系筛选其抗氧化活性。对筛选到具有显著抗氧化活性的藏药材分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取得到不同极性部位后,通过上述四个体系考察其抗氧化活性部位。结果:筛选到金缕梅、美丽棱子芹、岩白菜、塔黄、刚毛杜鹃、柳兰、蕨麻、普通鹿蹄草8种藏药材乙醇提取物具有显著抗氧化活性;对这8种药材的极性部位进行抗氧化活性筛选,其中尤以岩白菜的乙酸乙酯萃取物和柳兰的正丁醇萃取物活性最强。     

海杧果根的挥发性成分分析

目的:对海杧果根的挥发性成分进行研究。方法:用95%乙醇冷浸,减压回收乙醇,得到乙醇粗提物;再用石油醚萃取,得到石油醚萃取物。将这两种提取物用GC-MS进行分离测定,结合计算机检索技术对分离化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:海杧果的乙醇粗提物中分离出27个化学成分,鉴定出15个化学成分,占挥发性成分总量的55.694%;海杧果根的石油醚萃取物中分离出35个化学成分,鉴定出24个化学成分,占挥发性成分总量的68.049%。海杧果根的这两种提取物中挥发性成分有10种相同成分,即从海杧果根的挥发性成分中鉴定出29种化学成分。结论:海杧果根的挥发性成分含量较高,种类也较多,为海杧果的综合利用提供参考依据。     

地瓜藤提取物对酪氨酸酶的激活作用

目的：探讨地瓜藤提取物对酪氨酸酶活性的影响。方法：以采集自四川周边地区的地瓜藤药用植物为材料,用70％乙醇提取有效成分,并对其浓缩物用极性由小到大的溶剂再进行萃取。利用多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶活性,衡量地瓜藤乙醇提取物及各萃取物对酪氨酸酶的激活作用,并用动力学分析激活机理。结果：5个浓度的地瓜藤提取物对酪氨酸酶均有激活作用,其中,浓度为1mg·mL^-1的地瓜藤提取物对酪氨酸酶的激活调控最为显著,达64．58％,较相同浓度补骨脂阳性对照组激活率高;4种萃取物对酪氨酸酶均有激活作用,其中乙酸乙酯萃取物对酪氨酸酶的激活率最高,达84．30％;酶动力学测定结果显示,地瓜藤萃取物中含有的活性物对酪氨酸酶具非竞争性激活和混合型激活多重激活作用。结论：地瓜藤提取物对酪氨酸酶活性在体外有显著激活作用,为色素减退或色素脱失性皮肤病的治疗提供了实验证据。     

桑叶不同溶剂萃取物抗氧化活性研究

目的:比较桑叶不同溶剂萃取物抗氧化能力。方法:桑叶乙醇提取物依次经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到四相,测定各相浸膏总酮含量、ABTS清除率及细胞内ROS的清除率。结果与结论:乙酸乙酯萃取物的抗氧化活性高于其它几项,石油醚部分抗氧化活性最低。     

海杧果茎的挥发性成分研究

目的 对海杧果茎的挥发性成分进行研究.方法 用95%乙醇冷浸,减压回收乙醇,继用石油醚萃取,得到石油醚萃取物.将石油醚萃取物用GC-MS进行分离测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各化合物的相对百分含量.结果 海杧果茎的石油醚萃取物中检出44个色谱峰,鉴定出28个化合物,占挥发性成分总量的63.900%.结论 海杧果茎的挥发性成分以脂肪酸、烯醇、烯酸类、甾醇类和烷烃类为主,主要脂肪酸有棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸等.     

文冠果果壳提取物抗氧化活性和抑菌活性研究

目的:研究文冠果果壳95%乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物以及正丁醇萃取物体外抗氧化及抑菌活性。方法:抗氧化活性测定包括清除DPPH自由基、清除羟基自由基以及总还原力试验。牛津杯法测定文冠果果壳提取物抑菌活性。结果:乙酸乙酯萃取物具有较好的抗氧化活性及抑菌活性,浓度0.75 mg/mL时对DPPH自由基清除率达97.245%。乙酸乙酯萃取物对肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌以及地衣芽胞杆菌最低抑菌浓度为2.5 mg/mL。结论:文冠果果壳提取物具有较好的抗氧化及抑菌活性。     

地锦草提取物对体外α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究

目的研究地锦草(Euphorbia humifusa Willd.)提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性及其体外抗氧化活性。方法从地锦草40%、70%、95%乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性中选择最适乙醇体积分数,再对该提取物用乙醚、氯仿、水饱和正丁醇和水相进行萃取分离,比较对α-葡萄糖苷酶的抑制活性、自由基清除能力、铁离子还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力。结果地锦草95%乙醇提取物的抑制活性较优,再经乙醚萃取获得萃取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性最强,IC_(50)值为78.8μg/m L,化学成分分析显示其含有较多的酚性成分。乙醚萃取物具有较好的抗氧化能力,其自由基清除能力EC_(50)值为132.9μg/m L,铁离子还原能力EC_(50)值为76.9μg/m L,羟自由基清除能力EC50值为182.7μg/m L,超氧阴离子清除能力EC_(50)值为31.3μg/m L。结论地锦草95%乙醇提取物的乙醚萃取物具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,同时具有一定的抗氧化活性。     

海南五层龙根乙醇提取物中抗糖尿病组份的筛选

目的筛选海南五层龙根乙醇提取物中抗糖尿病的组份。方法采用萃取和色谱技术,对海南五层龙根乙醇提取物进行组份分离;然后对分离所得的各组份进行体外α-糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性测定。结果海南五层龙根乙醇提取物用有机溶剂萃取后的水层上D101大孔吸附树脂吸附后5,0%乙醇洗脱物具有明显的α-糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性,其浓度为100μg/ml时,对两种酶的抑制率分别为(74.1±1.8)%和(81.0±1.9)%,效果明显优于阳性对照药阿卡波糖和槲皮素。结论 50%乙醇洗脱物对α-糖苷酶和醛糖还原酶具有明显的抑制活性,为海南五层龙根乙醇提取物抗糖尿病活性成分集中的组份。