仙鹿活骨丸的中药毒理学研究

目的：检测仙鹿活骨丸的长期毒理。方法：连续给大鼠灌胃仙鹿活骨丸90天,测定大鼠体重、主要脏器质量指数、血常规、肝肾功能及心、肝、脾、肺、肾的病理改变。结果：仙鹿活骨丸的长期毒理性实验结果表明,连续给大鼠灌胃仙鹿活骨丸90天,对大鼠体重、主要脏器质量指数、血常规、肝肾功能无明显影响,心、肝、脾、肺、肾亦无明显病理改变。结论：表明该药毒性低微,可长期使用。     

仙鹿活骨丸治疗股骨头坏死60例

我们以补肾壮骨、活血化瘀、祛风除湿止痛为治疗原则,制成仙鹿活骨丸,治疗股骨头坏死60例.现报告如下. 1 临床资料 1.1 一般资料 120例均为我院骨伤科就诊患者.采用查随机表法随机分为治疗组60例和对照组60例.治疗组,男36例,女24例;年龄18～65岁,平均45.2岁.对照组中,男39例,女21例;年龄19～62岁,平均46.1岁.     

仙鹿活骨丸治疗股骨头坏死60例

[方术来源]天津大学精仪学院临证效验【师彬,孙国栋,王平,等．中医杂志,2009,（05）：363】[适应病症]股骨头坏死。[方术内容]①仙鹿活骨丸（淫羊藿、鹿角胶、龟甲、丹参、三七、当归、穿山甲、骨碎补等）②用法：口服,每日3次,每次6～8g。治疗3个月为1个疗程,疗程间隔1周后进行下1个疗程治疗。③配合“特色三步疗法”：雅拿手法（松解髋关节及相应腰臀部软组织以改善股骨头血运）;正骨手法（调整相应腰椎和骨盆以恢复髋关节的力学平衡）;     

仙鹿活骨丸对大鼠股骨头缺血性坏死的干预治疗作用

目的考察仙鹿活骨丸对大鼠股骨头缺血性坏死的干预治疗作用,并探讨其作用机制。方法给大鼠通过灌胃维甲酸造成股骨头缺血性坏死模型,通过骨密度观察、血液流变学检测和光镜观察仙鹿活骨丸治疗股骨头坏死的疗效。结果仙鹿活骨丸能明显改善股骨头部位的骨密度水平和血液流变学,改善软骨表面凹陷,降低软骨细胞变性坏死度。结论仙鹿活骨丸具有活血化瘀作用,可以降低股骨头缺血性坏死程度,改善坏死部位的组织形态学以治疗股骨头坏死。     

仙鹿活骨丸对激素性股骨头坏死细胞凋亡影响的实验研究

目的 从微观结构变化考察仙鹿活骨丸对激素性股骨头坏死细胞凋亡影响,为临床应用提供参考.方法 给大鼠臀肌注射醋酸强的松龙造成激素型股骨头坏死模型,通过原位细胞凋亡检测、光镜和电镜考察仙鹿活骨丸对激素性股骨头坏死细胞凋亡影响.结果 原位细胞凋亡检测分析,发现模型大鼠给仙鹿活骨丸后细胞凋亡数量明显减少;光镜观察可以发现,仙鹿活骨丸可以减少空缺骨陷窝数,降低股骨头组织坏死程度.电镜观察可以发现,仙鹿活骨丸治疗后的骨细胞细胞核染色质和染色体相对均匀,线粒体、高尔基体、内质网等细胞器增多,而糖原溶解与脂肪空泡均较模型对照组减少,因而可提高成骨细胞骨形成的功能,有助于股骨头缺血性坏死修复过程.结论 仙鹿活骨丸可以减少激素性股骨头坏死细胞凋亡,改善坏死部位的组织形态学,治疗股骨头坏死.     

仙鹿活骨丸治疗股骨头缺血性坏死178例疗效观察

目的：观察仙鹿活骨丸对治疗股骨头缺血性坏死的作用;方法：在临床上对符合病例选择标准的178例病人,用仙鹿活骨丸进行治疗,并按照临床疗效判定标准观察其疗效;结果：通过临床观察,仙鹿活骨丸治疗股骨头缺血性坏死的总有效率为92.16%;结论：仙鹿活骨丸具有促进死骨吸收,加快新骨生长作用,是治疗股骨头缺血性坏死很好的有效纯中药制剂.     

活络骨康丸对成骨细胞作用的研究

为了观察活络骨康丸对成骨细胞的直接刺激作用.采用酶消化法分离培养人成骨细胞,加入不同浓度的活络骨康丸药液,测定AKP、BGP、PYD的含量.结果AKP、BGP水平随药物浓度增加而升高,PYD反而减少(P《0.05).表明活络骨康丸对成骨细胞有直接刺激作用;对破骨细胞也有抑制作用.     

健骨二仙丸对成骨细胞IGF-ImRNA表达的影响

目的:探讨健骨二仙丸含药血清调节成骨细胞增殖、分化以及防止成骨细胞凋亡的机制。方法:采用原代成骨细胞培养,定量 RT-RCR 和 Northern 印迹杂交等方法观察成骨细胞胰岛素样生长因子(in-sulin-like growth factor-1)IGF-ImRNA 的表达。结果:健骨二仙丸能显著增加成骨细胞 IGF-ImRNA 的表达。结论:健骨二仙丸促进成骨细胞 IGF-ImRNA 的表达,从而进一步促进成骨细胞的增殖、分化,改善成骨细胞功能,调节骨重建偶联。表明健骨二仙丸不仅能增加成骨细胞胶原蛋白的合成,而且能促进非胶原蛋白地表达。促进骨的形成是健骨二仙丸防治骨质疏松症的主要机制。     

菟丝子总黄酮对成骨细胞骨代谢的影响

目的:探讨菟丝子总黄酮(TFCC)对体外培养大鼠成骨细胞骨代谢的影响。方法:取新生SD大鼠的颅盖骨,采用改良的组织块法培养成骨细胞。应用MTT法、对硝基苯二钠基质动力学法(PNPP),放射免疫法及ELISA法分别测定TFCC0.01,0.1,1,10,100μg.L-1对成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素(BGP)含量及Ⅰ型胶原(COL-I)分泌的影响。结果:TFCC在48 h和72 h能显著促进成骨细胞增殖并提高ALP活性;48 h时TFCC可促进细胞上清液中BGP和COL-I的分泌。结论:TFCC能够明显促进大鼠成骨细胞的增殖与分化,并通过提高COL-I的分泌影响骨代谢。     

骨愈1号药物血清对成骨细胞增殖分化功能的影响

目的：观察中药骨愈1号药物血清对成骨细胞增殖、分化以及矿化的影响。方法：从新生SD大鼠颅骨获取成骨细胞进行培养,取第3代成骨细胞进行试验,将其分为4组,在各组培养液中分别加入不灌胃骨愈1号的新西兰兔血清（对照组）和灌胃骨愈1号浓度分别12.5、25、50g/kg的新西兰兔血清（高、中、低剂量组）。用MTT法测定细胞增殖功能;用对硝基苯基磷酸二钠法测定碱性磷酸酶（ALP）活性;用茜素红染色法,在40倍光镜下作矿化结节计数。结果：与对照组比较,骨愈1号药物血清高、中、低剂量组在MTT显色的OD值、ALP活性和矿化结节数均明显升高（P〈0.01或者P〈0.05）,且高剂量组优于低剂量组（P〈0.01或者P〈0.05）,在提高ALP活性方面,高剂量组优于中剂量组（P〈0.05）。结论：骨愈1号具有促进成骨细胞增殖、分化及矿化作用,且其作用呈剂量相关性。     

巴戟天对成骨细胞生物学特性影响的实验研究

目的:观察巴戟天对体外培养成骨细胞(OB)增殖及其活性的影响,探讨巴戟天补肾壮骨作用的实质.方法:取新生SD大鼠头盖骨提取成骨细胞,进行生长曲线分析,测定巴戟天对细胞增殖及分泌ALP、BGP、TGF-β1的影响.结果:巴戟天能显著刺激OB增殖;巴戟天与密钙息均可促进分化中的OB分泌ALP和骨钙素,促进OB表达TGF-β1.结论:巴戟天具有与密钙息相同的作用,即促进OB分泌ALP和骨钙素,促进OB表达TGF-β1mRNA,从而大量分泌Ⅰ型胶原,以利钙盐沉积.     

巴戟天药物血清对成骨细胞生物学特性的影响

目的:通过观察巴戟天药物血清对体外培养成骨细胞(OB)增殖及其活性的影响,探讨巴戟天壮骨作用的实质。方法:取新生SD大鼠头盖骨提取成骨细胞,给巴戟天药物血清,测定巴戟天对成骨细胞(OB)增殖、分泌碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)及转化生长因子(TGF-β1)的影响。结果:巴戟天醇提物及巴戟天正丁醇部位能显著刺激OB增殖;巴戟天中正丁醇部位低剂量组可促进分化中的OB分泌ALP和OC,并可促进OB表达TGF-β1。结论:巴戟天中正丁醇部位低剂量组能够促进OB分泌碱性磷酸酶、表达TGF-β1mRNA,从而促进骨的生长。     

骨疏灵对骨质疏松症大鼠成骨细胞增殖的影响

目的:观测具有温阳、益气、活血功效的纯中药制剂“骨疏灵”对细胞数目增殖的影响,并探讨骨疏灵对成骨细胞作用的机制及其量效关系。方法:选用雌性Wistar大鼠随机分为6组,治疗后采用原代细胞培养技术,通过形态学观察、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)细胞化学染色、细胞内环磷酸腺苷(cAMP)浓度的测定等方法对培养细胞进行观察。结果:骨粒植入10d后,即见有细胞自骨粒周围长出。氟化钠三个浓度组、骨疏灵高、低两个剂量组,均能使成骨细胞[3H]-TdR掺入值升高,与氟化钠两组和骨松宝组比较,差异均有显著性意义,且效应随浓度的递增而加强。结论:骨疏灵能明显促进成骨细胞的增殖,且其效应有浓度量效关系。     

骨仙丸加减治疗骨质增生病14O例

笔者从1994～2000年,以自拟骨仙丸并随证加减治疗骨质增生140例,收效明显,报告如下. 1临床资料 140例中,男56例,女84例;年龄最小41岁,最大75岁;干部87例,工人29例,农民24例;腰椎48例,颈椎46例,膝关节42例,跟骨骨刺4例;病程6个月以上108例,10年以上32例. 诊断标准按《中医伤科学》有关诊断治疗标准[1]. 2治疗方法 自拟骨仙丸;狗脊、骨碎补、川断、木瓜、萆各15g,淫羊藿、独活、木香、制川乌、制草乌、川牛膝、当归、秦艽各10g,鸡血藤5g,白芍20g,细辛3g. 用法:上药共为细粉,炼蜜为丸,每丸为9g,每次1丸,1日2次,温开水或清酒服下.也可改汤剂,加开水1500ml,熬至300～450ml,每次100～150ml,1日3次内服,30天为一疗程.药渣可加白酒炒热外敷患部,1日1～2次,每次20～30分钟更佳.     

人脐静脉内皮细胞与成骨细胞共培养对成骨细胞功能的影响

目的:建立人脐静脉内皮细胞与人成骨细胞共育系,观察人脐静脉内皮细胞在共育系中对人成骨细胞功能的影响,进一步探讨人脐静脉内皮细胞对成骨细胞骨形成能力的影响。方法:采用二维共培养模型建立人内皮细胞/成骨细胞(1∶1)共育系,运用噻唑蓝比色法(MTT),分别在1d、3d、5d、7d时观察人脐静脉内皮细胞与成骨细胞单体培养以及共育系中的增殖情况;同时,运用蛋白免疫印迹方法(In cell western blot)分别测定人成骨细胞单体培养和共育系中骨保护素/破骨细胞分化因子配体(OPG/RANKL)蛋白的表达情况。采用方差分析比较不同状态下细胞增殖能力和蛋白表达的差异性。结果:从第3天开始,共育系中人成骨细胞的增殖能力明显优于成骨细胞单体培养;两者比较差异有统计学意义(P<0.05);于细胞培养第8天时分别测定人成骨细胞单体培养组和共育系中OPG/RANKL蛋白的表达,观察到共育系中(10.82±1.08)OPG蛋白表达量明显优于人成骨细胞单体培养组(6.65±0.43),两者比较差异有统计学意义(P<0.05);而共育系中(7.33±0.22)RANKL蛋白的表达含量与人成骨细胞单体培养(7.37±0.85)时表达无差异。结论:人脐静脉内皮细胞与人成骨细胞具有良好的相容性,两种细胞之间具有相互协同效应;人脐静脉内皮细胞可能通过促进OPG蛋白的表达来促进成骨细胞骨形成的作用。     

穿骨益髓丸对小鼠造血系统等功能的影响

通过骨髓细胞培养发现穿骨益髓丸体外可促进骨髓有核细胞和网织红细胞的生长。对６０Ｃｏ辐射及环磷酰胺１２０ｍｇ／ｋｇｉ．ｐ．所致小鼠贫血模型，穿骨益髓丸２．６ｇ／ｋｇ和５．２ｇ／ｋｇ剂量可明显增加贫血小鼠ＲＢＣ、ＨＢ、ＷＢＣ及ＢＰＣ数量。另外，该药还能增强小鼠抗疲劳、耐缺氧能力，并增进小鼠免疫功能。     

健骨二仙丸对成骨细胞分化及IGF-ImRNA表达的影响

目的:在临床研究和动物实验的基础上,进一步探讨健骨二仙丸对成骨细胞分化的影响及其作用机制.方法:分离、培养人的原代成骨细胞,采用PNPP法、RIA法、茜素红染色法以及定量RT-PCR法分别检测碱性磷酸酶活性、骨钙素含量、矿化结节形成和I型前胶原mRNA的表达,从而了解健骨二仙丸对成骨细胞分化的影响.定量RT-PCR和Northern印迹杂交等方法交观察成骨细胞胰岛素样生长因子(insulin-likegrowth factor-I)IGF-I mRNA的表达.结果:健骨二仙丸中、高剂量能显著增加碱性磷酸酶的活性,及矿化结节形成的数量,促进成骨细胞骨钙素的释放(P＜0.01,P＜0.05),与雌激素(倍美力)组比较差异无显著性.显著增加成骨细胞Ⅰ型前胶原mRNA和IGF-I mRNA的表达.结论:健骨二仙丸促进成骨细胞IGF-I mR-NA的表达,从而进一步促进成骨细胞的增殖、分化,改善成骨细胞功能,调节骨重建偶联.表明健骨二仙丸不仅能增加成骨细胞胶原蛋白地合成,而且能促进非胶原蛋白地表达.促进骨的形成是健骨二仙丸作用的主要机制.     

左归丸、右归丸对成骨细胞骨硬化蛋白的影响

目的:观察左归丸、右归丸对体外培养的成骨细胞骨硬化蛋白(Sclerostin)及β连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法:成年SD大鼠灌胃法获得左归丸、右归丸含药血清。体外培养SD乳鼠颅骨成骨细胞,取第3代细胞分对照组、左归丸组、右归丸组,各组含药血清培养后分别测细胞增殖、Sclerostin和β-catenin蛋白表达。结果:与对照组比较,右归丸组在5d、7d、9d时细胞明显增殖,左归丸组在7d、9d时细胞显著增殖(P<0.01),与左归丸组比较,右归丸组在5d时细胞明显增殖(P<0.05)。右归丸组在24h、48hSclerostin蛋白表达较对照组增高(P<0.05),左归丸组在24h较对照组减少(P<0.05)。与右归丸组相比,左归丸组在24h、48h Sclerostin蛋白表达显著下降(P<0.01)。右归丸组β-catenin蛋白表达在48h时较对照组有显著增高(P<0.05),左归丸组β-catenin蛋白表达在24h、48h均显著高于对照组(P<0.01)和右归丸组(P<0.05)。结论:右归丸、左归丸对成骨细胞均具有显著的促增殖作用,而右归丸较左归丸作用更明显。左归丸可能是通过抑制Sclerostin蛋白的表达发挥促成骨作用,右归丸无抑制Sclerostin蛋白表达作用。     

丹仙康骨胶囊对培养成骨细胞增殖分化的影响

目的 :为了解补肾活血中药丹仙康骨胶囊对体外培养成骨细胞的作用。方法 :应用MTT ,对硝基苯磷酸盐法及骨钙素含量放免测定法 ,观察丹仙康骨胶囊对成骨细胞增殖与分化作用的影响。结果 :丹仙康骨胶囊刺激成骨细胞增殖 ,提高ALP活性及骨钙素含量。结论 :丹仙康骨胶囊具有刺激体外成骨细胞增殖分化的功能     

仙骨宁对卵巢切除后骨质疏松大鼠骨代谢的影响

1　材料方法1 1　材料选取 80只雌性大白鼠 (由黑龙江中医药大学实验动物中心提供 ) ,平均月龄 4个月 ,体重 2 0 0± 3 0ｇ。尼尔雌醇由北京四环制药厂生产 ,批号 :970 3 2 4。仙骨宁由黑龙江中医药大学妇科实验室提供。1 2　方法将 72只雌性ｗｉｓｔａｒ大鼠双侧卵巢切除 1ｗ后将大鼠随机分为 8组即 :中药 1组 (给予低剂量中药 0 8ｍｌ/鼠 /ｄ)。中药 2组 (给予高剂量中药 2 4ｍｌ/鼠 /次 /ｄ)。中药 3组 (给予高剂量中药 4 8ｍｌ/鼠 /次 /ｄ)。尼尔雌醇组 (给予尼尔雌醇片稀释液 0 0 1ｍｇ/鼠 /ｗ)。预防保健组 (去势后即给中药 2ｍｌ/…