埃克特注射液体内外抗肝癌作用研究

目的:观察埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞及小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用。方法:用MTT法、细胞生长曲线实验研究不同浓度的埃克特注射液作用48h对SMMC-7721细胞的生长抑制作用,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,以了解该药物对肝癌细胞的体外增殖作用;同时建立小鼠H22肝癌移植性实体瘤模型研究埃克特注射液对肝癌的体内抑制作用。结果:埃克特注射液对SMMC-7721具有抑制作用,呈明显的量效关系,IC50为2.325mg/L;生长曲线提示埃克特注射液对SMMC-7721细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;Hoechst 33258染色后,给药组出现明显的细胞凋亡形态学变化;腹腔注射0.5、1、2mg/kg埃克特注射液对小鼠移植性肿瘤H22的抑制率分别为34.37%、42.36%、57.99%,呈剂量依赖性。结论:埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞具有明显体外抗增殖作用,对小鼠移植性肿瘤H22有一定的抑制作用。     

氧化白藜芦醇体内外抑制肝癌细胞增殖的研究

目的:研究氧化白藜芦醇对肝癌SMMC-7721细胞以及小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用及其抗肝癌作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测氧化白藜芦醇对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖的抑制效果。流式细胞术测定肝癌SMMC-7721细胞的凋亡率。建立小鼠H22肝癌细胞移植瘤模型,分为对照组、环磷酰胺组、氧化白藜芦醇80、40、20 mg/kg剂量组,以实体瘤瘤块生长曲线及抑瘤率为指标评价氧化白藜芦醇对小鼠移植瘤生长的抑制作用;取用不同剂量组作用后的瘤块组织,采用免疫组织化学法检测Bax,bcl-2,Caspase-3蛋白表达情况。结论:MTT结果显示,氧化白藜芦醇对肝癌7721肿瘤细胞的IC50值为58.13μg/ml,抗肿瘤活性良好;流式细胞术结果显示氧化白藜芦醇促进肝癌7721细胞凋亡;体内试验显示氧化白藜芦醇对移植瘤的抑制作用明显,80、40、20 mg/kg三个剂量组对H22移植瘤抑制率为76.88%、65.90%和45.99%,呈一定量效关系,氧化白藜芦醇增加caspase-3表达量及Bax/Bcl-2比值。结论:氧化白藜芦醇具有明显的体内外抑制肿瘤作用,作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

桑黄提取物的抗肿瘤作用研究

目的 研究桑黄提取物对小鼠S180实体瘤、H22肝癌和Lewis肺癌实体瘤的生长抑制作用,体外对人瘤细胞的直接抑制作用.方法 建立小鼠S180实体瘤、H22肝癌和Lewis肺癌实体瘤模型,观察桑黄提取物高(1000mg/kg)、中(500mg/kg)、低(250mg/kg)剂量组体内抑制肿瘤生长作用,MTT法检测桑黄提取物抑制人肿瘤细胞增殖的作用.结果 ①桑黄提取物高、中、低剂量对小鼠S180实体瘤的抑制作用分别为27.9%、75%、31.2%;对小鼠H22肝癌的抑制率分别为46%、63%、57%;对小鼠肺癌Lewis的抑制率分别为57.1%、54.5%、45.9%.②体外对人瘤细胞的抑制作用:桑黄提取物给药剂量(20 μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160 μg/ml)对人卵巢癌细胞(A2780)的抑制率分别为16.9%、18.5%、25.8%、31.5%;对人乳腺癌(MCF7)细胞的抑制率分别为19.9%、28.1%、32.25%、30.8%.结论 桑黄提取物各剂量组对小鼠H22、S180、Lewis实体型肿瘤的生长均有抑制作用,体外对人肿瘤细胞MCF7,OVCA278有直接杀伤作用.     

壮药“复方铁草胶囊”抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察壮药"复方铁草胶囊"的抗肿瘤作用。方法:采用肝癌H22移植性实体瘤小鼠为动物模型,以瘤重为评价指标观察复方铁草胶囊体内抗肿瘤作用;采用MTT法测定复方铁草胶囊含药血清对肝癌H22细胞的生长抑制率,研究复方铁草胶囊的体外抗肿瘤作用。结果:复方铁草胶囊20,10,5g/kg剂量组均能明显抑制肝癌H22移植性实体瘤生长,与空白对照组比较有显著性差异(P0.05或P0.01);复方铁草胶囊20%含药血清组H22细胞的生长抑制率为29.51%,与空白对照组比较,差异有显著性意义(P0.01)。结论:复方铁草胶囊对肝癌H22细胞株体内外生长均具有明显抑制作用。     

姬松茸多糖抗肿瘤作用研究

目的:研究姬松茸多糖(ABP)对肝癌细胞生长的抑制作用。方法:采用MTT法检测ABP体外与肝癌细胞Bel-7402作用48小时的直接细胞毒作用、ABP与小鼠脾细胞共培养上清(ABP-SL-CM)体外与Bel-7402细胞作用48小时的抑制作用;用流式细胞仪分析诱导肿瘤细胞凋亡情况;腹腔注射给药观察对移植性H22小鼠腹水型肝癌模型的抑瘤率。结果:ABP体外无直接细胞毒作用;不同浓度的ABP-SL-CM体外对Bel-7402细胞生长均有抑制作用,其中低剂量组(ABP-SL-CM-L)作用最显著,抑制率为39.65%;诱导Bel-7402细胞凋亡率为21.68%,DNA直方图上可见到亚二倍体峰;体内实验对肿瘤的生长的抑瘤率为45.83%。结论:姬松茸多糖对肝癌细胞生长有一定的抑制作用,其作用机制不是直接的细胞毒作用,而是通过增强小鼠的细胞免疫功能诱导肿瘤细胞凋亡实现的。     

双苓扶正抗癌胶囊对小鼠肝癌的影响

目的：研究双苓扶正抗癌胶囊对小鼠肝癌的抑制作用及作用机制。方法：建立小鼠肝癌（Heps）实体瘤及腹水癌模型，观察抑瘤率和生长延长率，并用流式细胞术（FCM）检测小鼠肝癌实体瘤的细胞周期及癌细胞凋亡率。结果：双苓扶正抗癌胶囊在15g和30g/kg剂量下，对小鼠肝癌实体瘤有显著抑制作用，也能延长荷腹水型肝癌小鼠的生存期；还可引起小鼠肝癌瘤细胞S期及G2-M期细胞减少，G0-G1期细胞及凋亡细胞增加。结论：双苓扶正抗癌胶囊对小鼠移植性肝癌具有抑制作用，其作用机制可能与抑制细胞周期中S期DNA合成、干扰细胞的分裂增殖速度及诱导癌细胞凋亡有关。     

钩吻素子抗肿瘤作用研究

目的:研究钩吻素子(koum ine,Kou)的抗肿瘤作用。方法:对体外培养肿瘤细胞的作用采用MTT检测法,并观察Kou对小鼠移植性肿瘤的抑制作用。结果:Kou能抑制多种常见细胞株的增殖,并对数种小鼠移植性肿瘤具有明显的抑制作用,对体外Bel7402细胞、A549细胞、Lovo细胞最高抑制率分别为59.52%、61.89%和64.51%;对荷Bel7402实体瘤、H22实体瘤和Lew is实体瘤小鼠的抑制率分别为58.3%、50.2%和47.8%。结论:Kou在体内外均对肿瘤有明显抑制作用。     

β-榄香烯抗肝癌的促凋亡机制研究

目的：研究中药莪术提取物β-榄香烯对人肝癌HepG2 细胞增殖抑制及诱导凋亡,以及小鼠肝癌H22 荷瘤小鼠凋亡相关蛋白表达的作用。方法:体外培养人肝癌HepG2 细胞,MTT 法检测β-榄香烯对细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡。通过建立H22 小鼠肝癌荷瘤模型,观察β-榄香烯对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及凋亡相关蛋白的表达。结果：β-榄香烯对HepG2 细胞具有抑制增殖的作用,呈剂量和时间的依赖性;Annexin V-FITC/PI 法检测到早期凋亡细胞。不同实验组对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用程度不同,各药物浓度组Caspase-3 蛋白均上调（P<0.05）,P65 蛋白均下调。结论：β-榄香烯可有效抑制人肝癌HepG2 细胞的增殖,其抑制癌细胞增殖的途径是通过诱导细胞发生凋亡,并且与上调凋亡相关蛋白Caspase-3、下调NF-κB P65 相关。     

白头翁皂苷D抗肝癌作用的药效学研究

目的研究白头翁皂苷D(毛茛科植物白头翁Pulsatilla chinensis(Bge.)Regel的干燥根)体内抗小鼠H22肝癌细和体外的抗人肝癌SMMC-7721作用。方法在体外实验中,采用MTT法考察白头翁皂苷D对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;在体内实验中,采用小鼠H22实体瘤进行体内抑瘤实验,测定肿瘤生长抑制率,利用光镜(HE染色)、电镜等方法进行形态学观察。结果白头翁皂苷D处理人肝癌SMMC-7721细胞24、48、72h后,给药组均出现了不同程度的细胞增殖抑制。白头翁皂苷D(4.5、6.0 mg/kg)对小鼠H22肝癌细胞实体瘤的生长有明显的抑制作用,抑瘤率分别为38.67%和41.59%(P<0.01,与模型组比较)。组织学观察显示,肿瘤细胞大量变性坏死,电镜下可见凋亡细胞和凋亡小体。结论白头翁皂苷D具有一定的体内、外抗肿瘤作用。     

复方苦参注射液对肺癌和肝癌细胞抑瘤作用研究

目的 通过观察复方苦参注射液对肺癌LAC、Lewis细胞,肝癌Hep、H22肿瘤细胞体内、外的抑瘤效果,探讨其在治疗恶性肿瘤中的药理作用.方法 采用MTT法检测复方苦参注射液对肺癌LAC细胞的体外抑制率;以实体瘤模型观察该药对Lewis肿瘤细胞和H22肿瘤细胞的抑瘤作用;以腹水瘤模型观察其对肝癌HEP肿瘤细胞生长的影响.结果 复方苦参注射液对LAC细胞生长的抑制与含药血清的浓度及作用时间呈一定的相关性;复方苦参注射液高、中、低剂量组对Lewis肺癌的抑瘤率分别为46%、32.8%和22.3%(P＜0.01),对H22肿瘤细胞的抑瘤率分别为37.9%、30.6%和24.2%(P＜0.01);对Hep腹水型肝癌的抑瘤率分别为34.8%、17.5%和15.6%(P＜0.01),与血清对照组比较,均具有显著性差异.结论 复方苦参注射液对LAC细胞体外生长具有抑制作用;对实体瘤Lewis肺癌、H22肿瘤的生长均能产生明显的抑制作用;对Hep肝腹水癌细胞的生长亦有一定的抑制作用.     

黑粒子胶囊对小鼠肝癌H22移植性实体瘤生长的影响

目的：研究黑粒子胶囊对小鼠肝癌H22移植性实体瘤的生长及细胞增殖周期和凋亡的影响。方法将肝癌细胞H22细胞接种于小鼠皮下,接种后24 h将已接种的癌瘤细胞小鼠按体重随机分为空白对照组,阳性对照组,黑粒子胶囊低、中、高剂量组,每组12只。阳性对照组腹腔注射环磷酰胺溶液30 mg/kg,黑粒子胶囊低、中、高剂量组分别灌胃黑粒子胶囊混悬液400、800、1600 mg/kg,空白对照组灌胃等体积生理盐水,给药1次/d,连续给药7 d,末次给药后24 h颈椎脱臼处死小鼠,计算抑瘤率,并使用流式细胞仪检测H22实体瘤的细胞增殖周期和凋亡情况。结果黑粒子胶囊高剂量组对实体瘤生长有明显抑制作用,雄性组抑瘤率为38.78%,雌性组抑瘤率为43.57%。与空白对照组比较,黑粒子胶囊低、中、高剂量组肿瘤细胞G0～G1期[(58.06±9.65)%、(55.10±5.89)%、(61.36±15.95)%比(74.47±2.63)%]缩短、S 期[(33.96±11.90)%、(32.67±4.04)%、(33.89±9.82)%比(14.37±4.92)%]延长,细胞凋亡率[(31.12±1.85)%、(31.89±2.16)%、(40.64±0.55)%比(21.75±2.64)%]增高。结论黑粒子胶囊可抑制小鼠肝癌H22移植性实体瘤的生长,其抑瘤作用机制可能与影响细胞增殖周期特别是与诱导细胞凋亡有关。     

半枝莲含药血清对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用

目的：探讨中药半枝莲提取物（ESB）对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用。方法：体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶组。应用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡;流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况。结果：ESB高、中剂量含药血清组有一定的抑制H22肝癌细胞增殖的作用,且呈明显的时效关系。荧光显微镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示：细胞周期各时相中,ESB高、中、剂量含药血清组S期细胞所占的比例明显减少,G1期细胞增多,有明显的诱导凋亡作用。其中空白对照、ESB低、中、高剂量组、5-氟尿嘧啶组H22细胞凋亡率分别为0.51%、1.07%、3.15%、7.83%、11.26%。结论：ESB含药血清不仅可直接抑制小鼠H22肝癌细胞生长,而且可有效诱导细胞凋亡。     

芍药软肝合剂对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对Bax、Survivin表达的影响

目的：观察芍药软肝合剂对H22肝癌小鼠的抑瘤效应,并初步探讨芍药软肝合剂对bax及survivin等蛋白表达的影响,以期明确芍药软肝合剂治疗原发性肝癌的作用机制.方法：采用细胞接种的方法建立小鼠H22肝癌动物模型,随机分为正常组、模型组、环磷酰胺组、芍药软肝合剂低、中、高剂量组,观察各组动物的整体情况,测定各组小鼠肿瘤生长抑制率,行免疫组化染色实验对肿瘤组织中Bax、Survivin等蛋白表达进行检测.结果：①成功建立小鼠H22肝癌动物模型;②芍药软肝合剂能改善肝癌小鼠整体情况;③芍药软肝合剂中、高剂量组有较好的抑瘤作用,抑瘤率分别为47.69％、35.56％;④芍药软肝合剂能降低H22肝癌小鼠肿瘤组织中Survivin的表达水平,能上调Bax的表达水平.结论：芍药软肝合剂对H22小鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,其抗肿瘤机制可能与抑制荷瘤小鼠中Survivin蛋白的表达、增加Bax蛋白的表达有关.     

藤茶双氢杨梅树皮素抗肝癌H22的实验研究

目的:探讨双氢杨梅树皮素(Ampelopsin,APS)的抗肿瘤作用。方法:以MTT法观察APS及其含药血清体外对肝癌H22细胞及对小鼠肝癌H22实体瘤的抑瘤作用。结果:APS及其含药血清均能明显抑制体外培养的H22细胞的生长,APS的IC50为18.65μg/mL,20%、10%含药血清的抑瘤率分别为35.04%、30.91%;APS灌胃给药对荷瘤H22小鼠的肿瘤生长有明显的抑制作用,600mg/kg剂量组的抑瘤率为27.38%。结论:APS对体外H22细胞和体内肝癌H22实体瘤均有抑制作用。     

扶正抑瘤颗粒含药血清对小鼠肝癌H22细胞 p53和Caspases-3蛋白表达的影响

目的检测扶正抑瘤颗粒(FYK)含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡过程中对其野生型p53和caspases-3蛋白表达的影响.方法选用小鼠肝癌H22细胞作为实验的细胞株,应用血清药理学方法制备FYK低、中、高剂量实验组含药血清和对照组天仙胶囊含药血清,用上述含药血清与H22细胞在体外共同孵育24h、48h、72h后,应用MTT法检测细胞生长抑制率,TUNEL法检测细胞凋亡,用免疫细胞化学技术检测H22细胞野生型p53和caspases-3蛋白表达水平.结果FYK含药血清可诱导H22细胞凋亡,处理48h和72h凋亡率明显高于对照组(P＜0.05),并有大量野生型p53和caspases-3蛋白表达,天仙胶囊含药血清处理后caspases-3蛋白表达上调,而野生型p53蛋白表达水平没有增强.结论FYK含药血清在诱导H22细胞发生凋亡过程中野生型p53和caspases-3蛋白表达水平均增强,这可能是其抗肿瘤作用的分子机制之一,而天仙胶囊含药血清仅上调caspases-3蛋白表达,二者诱导细胞凋亡的机制有所不同.     

辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的:研究辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的效果,初步探讨其体内抑瘤作用机制。方法:采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验,测定肿瘤生长抑制率,利用光镜、电镜等方法进行形态学观察,是否产生凋亡小体。结果:辽东楤木叶总皂苷对小鼠的H22实体瘤生长具有明显的抑制作用,形态学观察显示,治疗组与对照组比较,肿瘤团块较小,异型性不明显,病理性核分裂和间质血管较少,淋巴细胞浸润明显。电镜下可见凋亡小体形成,其中以总皂苷组最明显。结论:辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠具有较强的体内抗肿瘤作用,作用机制可能与其能够抑制肿瘤细胞分裂、增殖及能够诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

中药复方四味肝泰对荷瘤小鼠和HepG2肝癌细胞的影响

目的：阐明中药复方四味肝泰对肝癌荷瘤小鼠和人体肝癌细胞（HepG2）的抗肝癌作用。方法：首先对昆明小鼠腋下注射小鼠肝癌细胞H22,建立肝癌荷瘤小鼠模型,并检测给药后荷瘤小鼠的肿瘤抑制率,对药物的抗肝癌作用进行评价;然后采用实时荧光定量PCR对荷瘤小鼠实体瘤中凋亡基因（Bax和Bcl-2）的表达进行分析。并用高通量药物筛选仪测定给药培养的人体肝癌细胞（HepG2）的细胞增殖与细胞周期。结果：四味肝泰能够抑制荷瘤小鼠实体瘤的生长,其抑瘤率为47.79%,瘤组织中Bax/Bcl-2的基因表达比值高于模型对照组;四味肝泰能够抑制肝癌细胞的增殖;当作用浓度大于500 μg·mL-1时,四味肝泰使细胞周期停滞在G2/M期。结论：四味肝泰具有较好的抗肝癌作用,其可能通过Bax/Bcl-2调控肝癌细胞凋亡,阻滞细胞周期,从而达到抑制肝癌细胞恶性增殖的目的。     

抑癌丸抑制小鼠移植性肿瘤肝癌H22生长及对P53表达影响

目的:探讨抑癌丸对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的作用机制.方法:抑癌丸是我国大西北干旱沙漠地区特殊环境下生存的植物中提取的特殊成分,依据中华人民共和国药典规定制成的可贵抑癌药物.主治原发性中晚期肝癌.将带有H22小鼠分成四组给药几天后,根据瘤重计算抑瘤率,用免疫组化SP法计算P53、细胞数.结果:以对照组为基数,大剂量组对小鼠移植性肿瘤H22有较明显抑制率(P<0.05)和程度不同的P53蛋白、细胞数的表达均低于对照组.结论:抑癌丸对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的生长具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制突变型P53蛋白的表达有关.     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22凋亡的影响

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响.方法:扶正抑瘤颗粒含药血清温育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,利用光镜、电镜、流式细胞仪、原位末端标记(TUNEL)等方法观察其诱导小鼠肝癌H22细胞的凋亡作用.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可明显诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡,随着培养时间的延长和用药剂量的增加,细胞凋亡率随之增加,与空白对照组比较P＜0.01或0.05.结论:扶正抑瘤颗粒药物血清可诱导肝癌H22细胞凋亡.     

冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用

目的研究冬凌草甲素自微乳对H22移植性肿瘤模型小鼠的肿瘤抑制作用。方法采用昆明小鼠接种肝癌H22瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型,以实体瘤模型小鼠的瘤重、抑瘤率观察冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用;以胸腺指数、脾脏指数为指标观察冬凌草甲素自微乳对免疫器官的影响;以小鼠平均生存时间观察冬凌草甲素自微乳对腹水瘤模型小鼠的生命延长作用。结果冬凌草甲素自微乳能有效地抑制实体瘤模型荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,低、中、高(67,100,150 mg.kg-1)3个剂量组的抑瘤率分别为:43.94%、54.65%、59.57%;冬凌草甲素自微乳给药组小鼠胸腺指数和脾脏指数与荷瘤对照组相比,无显著性差异;中剂量(100 mg.kg-1)冬凌草甲素自微乳对腹水瘤肿瘤模型小鼠的生存时间具有延长作用,与荷瘤对照组相比具显著性差异。结论冬凌草甲素自微乳对荷瘤小鼠肿瘤生长具有一定的抑制作用,抑制作用强于冬凌草甲素,并有剂量依赖性。