人参皂甙Rh2对C6胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

观察人参皂甙Ｒｈ２对Ｃ６胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,并在分析分子水平探讨其作用机理,方法：细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡。结果：①Ｒｈ２２,４．８μＭＯＬ／ｌ对Ｃ６胶质瘤细胞有增殖抑制作用,且呈明显量效关系;②Ｒｈ２作用７２ｈ后,４μｍｏｌ／Ｌ浓度对Ｃ６胶质瘤细胞诱导凋亡作用最为明显;③Ｒｈ２作用后,Ｇ０／Ｇ１期细胞百分率明显下降,而Ｓ期细胞百分率显著增加。,结论：     

人参皂甙Rh_2对C_6胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

目的 :观察人参皂甙 Rh2 对 C6胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用 ,并在分子水平探讨其作用机理。方法 :细胞计数法检测细胞增殖 ,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡。结果 :1 Rh2 2 ,4,8μmol/L对 C6胶质瘤细胞有增殖抑制作用 ,且呈明显量效关系 ;2 Rh2 作用 72 h后 ,4μmol/L浓度对 C6胶质瘤细胞诱导凋亡作用最为明显 ;3 Rh2 作用后 ,G0 /G1期细胞百分率明显下降 ,而S期细胞百分率显著增加。结论 :Rh2 对 C6胶质瘤细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡作用 ,且这种作用有周期特异性。     

NPPB对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的：探讨氯通道阻断剂5-硝基-2-（3-苯丙胺）苯甲酸（NPPB）对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用,并阐明其可能的机制。方法：体外培养脑胶质瘤SHG-44细胞,分为对照组及50、100和200 μmol·L^-1 NPPB组。采用MTT法检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用免疫组织化学法和蛋白免疫印记法分别检测SHG-44细胞中凋亡蛋白的表达水平。结果：MTT检测,与对照组比较,作用24和48 h,100和200 μmol·L^-1 NPPB组SHG-44细胞活力明显降低（P < 0.01）。流式细胞术检测,100和200 μmol·L^-1 NPPB组细胞凋亡率分别为24.64%和41.85%,高于对照组（4.17%）（P < 0.01）。免疫组织化学和蛋白免疫印记法检测,100 μmol·L^-1 NPPB组SHG-44细胞中caspase-3和Bax蛋白表达水平升高（P < 0.05或P < 0.01）,Bcl-2蛋白表达水平降低（P < 0.05）。结论：NPPB可以通过下调Bcl-2的表达、上调Bax的表达,使caspase-3活化,进而引起SHG-44细胞凋亡。     

人参皂甙与LAK细胞联合治疗恶性脑胶质瘤的实验研究

目的：探索提高恶性脑胶质瘤治疗效果的新途径。方法：用人参皂甙（Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ,ＧＳ）与白细胞介素２（ＩＬ－２）协同诱导人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）制成ＧＣ－ＬＡＫ细胞,用ＭＴＴ法测定其对恶性脑胶质瘤细胞（ＢＴ３２５）的杀伤活性,并与ＬＡＫ细胞相比较;结果：效应细胞ＧＳ－ＬＡＫ在增殖数量和杀伤恶性脑胶质瘤细胞活性等方面均优于ＬＡＫ细胞,且ＩＬ－２用量减少;     

人参皂甙Rg3抗肿瘤作用的实验研究进展

目的 探讨人参皂甙Rg3抑制肿瘤的作用及机制。方法参阅国内外相关文献就人参皂甙Rg3抗肿瘤的作用作一综述。结果人参皂甙Rg3作为中药抗肿瘤药物具有抑制肿瘤生长、抗肿瘤转移和浸润的作用,同时,具有与化疗药物联合应用的减毒增效,提高机体免疫力等作用。结论充分发掘祖国传统药物的新作用,具有较大的应用价值。     

人参皂甙Rh2诱导黑色素瘤细胞树突生成的机制研究

目的 探讨人参皂甙Rh2诱导黑色素瘤细胞树突生成的机制.方法 在培养的B16黑色素瘤细胞中加入Rh2,记录其诱导细胞树突生成的时间及细胞数.加入甲基-β-环糊精预处理清除胆固醇后,再次观察对Rh2诱导细胞树突生成的影响.用荧光偏振测量仪检测Rh2对反映膜流动性的DPH(1,6-二苯基1,3,5-已三烯)及TMA-DPH(1-[4-(三甲铵)苯基]-6-苯基1,3,5-已三烯)两种荧光探针的影响.结果 在B16黑色素瘤细胞中,Rh2(18.5 μmol/L)在2h内诱导了树突的生成,而用10 mmol/L的甲基-β-环糊精预处理清除胆固醇后即可抑制Rh2的这种作用.加入Rh2后2min内,Rh2即改变了DPH的荧光偏振,但对TMA- DPH却没有影响.结论 Rh2影响了胆固醇调节的膜脂质双层的生理特性,从而可能进一步导致细胞功能的改变.     

人参皂甙Rg3抗肿瘤作用研究进展

人参皂甙Rg3作为中药抗肿瘤药物具有诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长,抗肿瘤细胞黏附、侵袭和转移,抑制肿瘤新生血管形成作用;其抗肿瘤浸润、转移作用与人参皂甙Rg3抑制细胞内Ca2+浓度的升高,降低细胞的侵袭能力有关。Rg3与化疗药物联合应用具有增效减毒作用,可逆转肿瘤细胞的多药耐药性,提高机体免疫力,延长生存期,改善患者生活质量。     

人参茎叶皂甙对LAK细胞抗肿瘤活性的正向调节作用

体外实验,79例正常人PBL诱生的LAK细胞分别对13例新鲜急性白血病细胞和K562细胞的杀伤活性,较7例未经IL—2激活的PBL对同样靶细胞的杀伤活性明显高。适宜浓度的人参茎叶皂甙可明显增强LAK细胞抗肿瘤活性。提示人参茎叶皂甙对辅助LAK细胞联合IL—2过继输入治疗恶性肿瘤有潜在的使用价值。     

人参皂甙Rg3抗肿瘤作用机制研究进展

人参属植物含有的主要化学成分就是人参皂甙,种类繁多。目前已经从人参中成功分离出来,并通过权威机构鉴定的人参皂甙单体包括四十多种[1]。其中20(R)-人参皂甙Rg3单体对肿瘤具有治疗作用,受到广大医护人员及医学研究人员的重视[2]。其抗肿瘤作用与其能够有效降低血管内皮生长因子表达及碱性成纤维生长因子表达的活性,降低金属基质蛋白酶在机体内的分泌量,进而对瘤体内新生血管是否形成及形成过程进行有效控制,减少肿瘤复发     

人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究

目的　探讨人参单体皂甙Rh2对体外培养的人喉癌细胞株Hep - 2的抗增殖作用及其作用机制。方法　采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)实验、流式细胞技术及免疫组织化学S -ABC法分别检测人参单体皂甙Rh2对喉癌细胞株Hep - 2的增殖、细胞周期的影响。 结果　 (1)人参单体皂甙Rh2可明显抑制Hep - 2细胞的生长 ,并呈剂量、时间依赖性作用。 (2 )人参单体皂甙Rh2 (30 μg/ml)处理细胞 2 4h :G1期细胞由 6 0 0 9%增加至6 8 86 % (P <0 0 1) ,S期细胞由 18 89%减少至 12 30 % (P <0 0 1) ,G2 /M期细胞及凋亡细胞无明显变化 (P>0 0 5 ) ,细胞阻滞于G1期。结论　人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep - 2具有明显的生长抑制作用 ,并可导致其G1期细胞周期阻滞。G1期细胞周期阻滞可能是人参单体皂甙Rh2抗肿瘤作用的机制之一     

人参皂苷Rh2对胶质瘤细胞的体外抑制作用

目的:比较人参皂苷Rh₂、榄香烯与阿霉素对胶质瘤细胞的体外抑制及凋亡诱导作用,以及药物杀伤的时效关系。 方法:体外培养胶质瘤细胞, 用MTT肿瘤体外药敏法比较人参皂苷Rh₂、榄香烯与阿霉素对胶质瘤细胞系C6、SHg-44、U-251的抑制作用,并绘制细胞存活率-时间曲线。用流式细胞术检测3种药物作用后细胞凋亡情况。 结果：3种药物对胶质瘤细胞系C6、SHg-44、U-251的抑制作用呈明显的剂量依赖性,随浓度的增加而增强。人参皂苷Rh₂对胶质瘤细胞系的抑制作用明显高于榄香烯和阿霉素,与后两者比较差异有显著性(P<0.01)。3种药物对胶质瘤细胞的抑制作用均呈时间依赖关系,随时间延长而增强,且低浓度的人参皂苷Rh₂短时间（12 h）就有生长 抑制作用,而榄香烯和阿霉素的起效时间较缓慢。3种肿瘤细胞经低浓度的3种药物作用后均可出现凋亡,其中人参皂苷Rh₂凋亡细胞比率明显高于其他两组,差异有显著性(P<0.01)。 结论:人参皂苷Rh₂对胶质瘤具有较好的生长抑制和凋亡诱导作用,起效时间早于榄香烯和阿霉素。人参皂苷Rh₂良好的抑瘤效果和迅速的起效时间具有应用于胶质瘤治疗的潜在价值。 神经胶质瘤,人参皂苷,榄香烯,阿霉素,细胞凋亡     

脑胶质瘤SHG-44细胞动力学特征的实验研究

目的　探讨脑胶质瘤潜在倍增时间 (Tpot)实验条件。方法　采用荷脑瘤动物模型 ,溴脱氧尿嘧啶核苷(BudR)掺入法测定Tpot。结果　所建立的Wistar脑胶质瘤大鼠模型实用、可靠。在体潜在倍增时间、有效倍增时间 (Teff)分别为 8.15天和 18.4 6天。BudR掺入率、细胞标记指数 (LI)均在BudR掺入后 8h达最高 ,>6Gy辐射其潜在倍增时间明显缩短。结论　在体、离体BudR掺入标记率存在明显差异。辐射吸收剂量 >12Gy,其实际倍增时间、潜在倍增时间、有效倍增时间降至最低点。提示脑胶质瘤放疗过程中存在细胞加速再增殖 ,宜连续治疗     

丁酸钠对人脑胶质瘤细胞系SHG-44增殖分化的影响

目的 研究丁酸钠对培养人脑胶质瘤SHG-44细胞的增殖抑制和分化诱导。方法 以2mmol／L丁酸钠处理SHG-44细胞，用MTT比色、核仁组成区银染观察细胞增殖抑制，用流式细胞术、电镜观察超微结构、免疫组织化学染色、凝集试验鉴定细胞分化。结果 SHG-44细胞经丁酸钠处理后：①细胞增殖受到明显抑制，并具有时间、剂量依赖性；②细胞周期受阻，S期细胞比例减少；③电镜观察发现细胞核变规则，异染色质增多，胞浆中线粒体、粗面内质网等细胞器增多并趋于正常；④胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein，GFAP)表达增强，改型蛋白(Vimentin)表达减弱；⑤细胞凝集度明显变低。结论 丁酸钠能抑制人脑胶质瘤SHG-44细胞的增殖，2mmol／L丁酸钠能诱导SHG-44细胞发生明显分化。     

Study of apoptosis induced by nordihydroguaiaretic acid in human ma-lignant glioma cell line SHG-44

Objective: To investigate the effect and mechanism of nordihydroguaiaretic acid (NDGA) on apop-tosis in human malignant glioma cell line SHG-44. Methods: Cell growth inhibition was measured with MTT assay. Cell apoptosis was observed with light and electron microscopy and TUNEL. Expression of bcl-2 gene was measured with immunohistochemistry, in situ hybridization and image analyses. Results: NDGA at the concentration of 100 μmol/L inhibited the proliferation of SHG-44 cells and induced apoptosis in a time-de-pendent manner. The expression of Bcl-2 protein in SHG-44 cells was decreased in the present of 100 μmol/L NDGA along with the duration of treatment in a negative correlation with the degree of cell apoptosis. The bcl-2 mRNA expressed in SHG-44 cells was reduced after treatment with 100 μmol/L NDGA, apparently consistent with the immunohistochemical results. Conclusion.- NDGA can induce apoptosis of human malig-nant glioma cells probably by down-regulating expression of bcl-2 gene, though the exact mechanism needs further study.     

人恶性胶质瘤细胞系CHG-5和SHG-44细胞骨架的比较研究

目的：比较人恶性肿瘤胶质瘤细胞系CHG－5和SHG－44的细胞骨架系统成分,以进一步了解胶质瘤细胞骨架特征与其分化程度的关系。方法：利用免疫荧光细胞化学染色结合激光共聚焦显微镜观察两种细胞系微管、微丝、中间丝的含量及分布,并比较几种常用固定剂和缓冲液对各骨架成分检测的影响。结果：除微管和微丝均被染色外,所有细胞表达Vimentin(波形蛋白）,而只有部分细胞呈胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性。微管及中间丝在两种细胞胞质中的分布特征基本相似,但两种相细胞微丝的定位、分布及荧光强度有一定差异。Vimentin型中间丝在SHG－44细胞中表达较强,而GFAP在CHG－5细胞中表达较强。丙酮、75％酒精和4％多聚甲醛对微管的固定效果较好;用醛类固定后中间丝（尤其是Vimentin）染色极弱。结论：CHG－5分化程度较SHG－44高,两种细胞系细胞骨架状态的差异可能是二者生物学特性差异的结论基础。     

芳香化酶对胶质瘤细胞系SHG-44细胞生长及分化的作用

目的 在人胶质母细胞瘤细胞系SHG－44细胞中检测到芳香化酶细胞色素P450（AROM）表达的基础上探讨AROM对胶质瘤细胞生长增殖及分化的作用。方法 通过构建反义AROM真核表达载体，转染SHG－44细胞，利用流式细胞仪、MTT法、免疫荧光染色及激光共聚焦扫描显微镜（CLSM）等技术观察封闭AROM基因表达后细胞生长曲线、细胞周期及中间丝蛋白GFAP和Vimentin表达的变化。结果 成功构建了反义AROM真核表达载体PCI／as-AROM并使AROM的表达封闭达50％以上。SHG－44细胞在转 染了PCI／as-AROM和空载体PCI－neo后，生长曲线、细胞周期无明显变化，但GFAP免疫荧光强度减弱而Vimentin免疫荧光强度增强。结论 反光AROM可能对SHG－44细胞增殖无明显影响但对神经胶质瘤细胞的分化有一定的抑制作用。     

外源性p16基因稳定转染对胶质瘤细胞周期和增殖的影响

目的：研究外源性ｐ１６基因对胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４的抑制作用,探索胶质瘤基因治疗的新途径。方法：利用携带４９０ｂｐ的人ｐ１６全长ｃＤＮＡ真核表达载体,采用脂质体介导法将其导入人恶性胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４中,用Ｇ４１８筛选阳性克隆,以原位杂交,免疫组化方法检测ｐ１６基因在细胞转染前后的表达情况。,应用流式细胞仪,电子显微镜,生长曲线测定等方法研究ｐ１６基因对胶质瘤细胞周期,形态,生长等的影响.     

去甲二氢愈创木酸对SHG-44胶质瘤细胞GFAP基因表达的影响

目的：探讨去甲二氢愈创木酸（NDGA）诱导恶性胶质瘤细胞分化过程中中对GFAP基因表达的影响及其意义。方法：用免疫组织化学和原位杂交方法定性、定量检测人恶性胶质瘤细胞系SHG－44细胞GFAP基因的表达水平。结果：NDGA处理后,瘤细胞GFAP蛋白及mRNA表达水平明显增高（P＜0.01）。结论：NDGA具有诱导恶性胶质瘤细胞GFAP基因表达的作用,推测GFAP基因表达上调可能是NDGA诱导胶质瘤细胞分化的作用机制之一。     

survivin反义核酸抑制胶质瘤细胞增殖的实验研究

目的 探讨survivin反义核酸对胶质瘤细胞增殖的影响.方法 用脂质体介导法将survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-SVVas转染入人胶质瘤SHG-44细胞系中,G418筛选阳性克隆后,用Immunoblot检测survivin蛋白表达,光、电镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期分布.结果 pIRES2-EGFp-SVVas质粒转染SHG-44胶质瘤细胞后细胞survivin蛋白表达水平降低,而细胞由卵圆形变为长梭形,细胞突起明显增多、增长,细胞增殖活性明显降低,细胞生长受到抑制.结论 survivin反义核酸能通过抑制SHG-44细胞survivin蛋白表达,抑制该细胞增殖.     

顺铂对鼠胶质瘤SHG-44细胞的增殖抑制和辐射增敏作用

目的:观察顺铂对鼠胶质瘤SHG-44细胞的抑制及放射增敏作用,并探讨其作用机制。方法:不同浓度紫杉醇(0、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml和5μg/ml)作用于SHG-44细胞,MTT法检测顺铂对SHG-44细胞的增殖抑制作用;克隆形成法检测细胞辐射敏感性变化,流式细胞术检测细胞凋亡百分率变化。结果:顺铂有明显的抑制SHG-44细胞增殖和提高其放射敏感性的作用,顺铂可提高3 Gy、6 Gy照射24 h后SHG-44细胞的凋亡率。结论:顺铂对人胶质瘤SH-44细胞具有杀伤及放射增敏作用。其可能机制是加强射线对肿瘤细胞的诱导凋亡效应,增加其杀伤肿瘤作用。