败血症新生儿外周血中性粒细胞CD64表达的意义

目的检测败血症新生儿外周血中性粒细胞表面CD64（Fcγ-RⅠ）表达水平,探讨CD64对新生儿败血症的诊断价值。方法将60例败血症新生儿和20例无感染症状的新生儿进行外周血中性粒细胞CD64及血清CRP检测。根据血培养结果分为血培养阳性组（24例）、血培养阴性组（36例）。结果血培养阳性组CD64为（6681.95±2074.89）分子数/细胞,血培养阴性组为（3306.89±962.43）分子数/细胞,非感染组为（2065.45±841.68）分子数/细胞,血培养阳性组CD64水平显著高于血培养阴性组和非感染组,3组比较有极显著性差异（P〈0.001）。当CD64取临界值为5141分子数/细胞,其诊断新生儿败血症的敏感度为92%,特异度为97%。血培养阳性组CRP为（34.06±19.60）mg/L,血培养阴性组为（13.24±7.95）mg/L,非感染组为（7.44±2.62）mg/L,血培养阳性组CRP水平显著高于血培养阴性组和非感染组,3组比较有极显著性差异（P〈0.001）。当CRP取临界值为17.1 mg/L时,其诊断新生儿败血症的敏感度为88%,特异度为81%。结论败血症新生儿外周血中性粒细胞表面CD64表达及血清CRP水平均显著增加,可作为早期诊断新生儿败血症的实验室指标,且中性粒细胞表面CD64表达较血清CRP有更高的敏感度和特异度。     

氧化应激在新生大鼠常压高体积分数氧致脑损伤发生中的作用

目的探讨氧化应激在7日龄新生大鼠高体积分数氧（高氧）性脑损伤发生中的作用。方法体质量12～18g的7日龄SD大鼠42只，随机分为空气组和高氧组。高氧组与其乳母一起置于氧箱中，调节氧流量（3L／min），使箱内氧体积分数维持（800±50）mL／L，用数字式测氧仪进行监测。空气组置于同一室内空气中，氧体积分数为210mL／L，饲养条件与高氧组相同。高氧／空气开始暴露30min后，各取3只大鼠，麻醉后采血，行动脉血气分析。高氧／空气暴露12h后2组大鼠各处死8只，化学比色法检测其脑组织还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）、GSSG／GSH、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。高氧／空气暴露12h后2组各处死10只大鼠，取其脑组织常规脱水、包埋、切片（经海马），脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法观察脑组织细胞凋亡指数。结果空气组平均动脉血氧分压[pa（O2）]为（87．0±2．71）mmHg（1mmHg=0．133kPa），高氧组为（219．0±10．7）mmHg，高氧组明显高于空气组[（87．0±2．71）mmHg]（P〈0．05）。高氧组暴露12h脑细胞凋亡指数[（39．20±7．59）％]较空气组[（4．50±1．87）％]显著增加（P〈0．01）。高氧暴露12h组GSH[（0．994±0．230）μmol／g]较空气组[（1．210±0．210）μmoL／g]明显下降（P〈0．05），高氧组暴露12h SOD[（124．60±4．14）×10^3 U／g]也较空气组[（145．0±6．62）×10^3 U／g]明显下降（P〈0．01）；高氧组GSSG[（0．0283±0．0043）μmol／g]、GSSG／GSH（0．0296±0．0045）、MDA[（5．21±0．41）μmol／g]均较空气组[（0．0212±0．0029）μmol／g，0．0181±0．0031，（4．85±0．25）μmol／g]显著升高（Pa〈0．05）。结论常压高氧可引起新生大鼠脑细胞的凋亡及氧化应激，氧化应激与高氧性脑损伤密切相关。     

肺炎患儿血清一氧化氮和锌水平变化及其相关性

目的探讨肺炎患儿血清一氧化氮（NO）与锌水平的变化及临床意义。方法2005年10月-2006年5月本院儿科住院的符合肺炎诊断标准的患儿48例。其中有充血性心力衰竭的重症肺炎17例,轻症肺炎31例。本院儿科门诊同期健康体检者20例为健康对照组。抽取2组儿童晨起空腹静脉血3mL,其中26例肺炎患儿采集恢复期血液。应用UV-2100分光光度计545nm对肺炎患儿（包括恢复期）及健康对照组血清采用比色法测血清NO水平,采用原子吸收分光光度分析法用P-E503型原子吸收分光光度计直接测出肺炎患儿（包括恢复期）及健康对照组血清锌水平,分析血清NO与锌水平相关性,统计学处理采用SPSS10.0软件进行处理。结果肺炎患儿急性期肺炎血清NO水平[（57.76±19.41）μmol/L]较健康对照组[（25.09±5.51）μmol/L]、肺炎恢复期[（30.08±8.05）μmol/L]明显升高（Pa〈0.01）;重症组[（80.26±11.72）μmol/L]较轻症组[（45.77±12.58）μmol/L]明显升高（P〈0.01）;急性期患儿血清锌水平[（77.61±10.95）μmol/L]较对照组[（115.18±12.66）μmol/L]、肺炎恢复期患儿[（88.08±9.82）μmol/L]显著降低（Pa〈0.01）,重症组[（70.38±6.61）μmol/L]较轻症组[（81.47±10.90）μmol/L]显著降低（P〈0.01）。肺炎患儿急性期NO与锌水平呈显著负相关（r=-0.327P〈0.01）。结论血清NO、锌水平变化与肺炎的发生发展和病情严重程度有关,在肺炎治疗过程中,阻断NO的过多分泌、及时补锌有一定临床意义。     

窒息新生儿血清肌钙蛋白I和磷酸肌酸激酶

目的探讨血清肌钙蛋白I（cTnI）和磷酸肌酸激酶同工酶（CK—MB）对窒息新生儿心肌损伤的早期诊断价值。方法选择轻度窒息新生儿29例（轻度组）、重度窒息新生儿18例（重度组）。采用ELISA法和酶动力法检测新生儿血清cTnI水平和CK—MB活性。结果出生d1窒息新生儿血清cTnI和CK-MB水平在轻度组[（2．25±0．54）μg／L、（223．4±23．5）U／L]和重度组[（4．25±0，83）μg／L、（256．3±21．8）U／L]均显著高于对照组（Pα〈0．01）；重度组血清cTnI和CK-MB水平均显著高于轻度组（Pα〈0．01）。治疗后d7窒息新生儿血清cTnI和CK—MB水平均明显下降，轻度组[（0．69±0．18）μg／L、（151．4±18．4）U／L]与对照组均无显著差异（Pα〉0．05），重度组[（1．54±0．72）μg／L、（188．9±21．5）U／L]显著高于轻度组和对照组（Pα〈0．01）。结论窒息新生儿伴心肌损伤时血清cTnI和CK—MB水平升高；动态观察可用于窒息新生儿微小心肌损伤的早期诊断。     

新生儿脐血铅水平与骨代谢指标变化的相关性研究

目的探讨新生儿脐血铅水平与骨代谢指标间的相关性。方法采集80例正常新生儿脐静脉血5ml,分别检测血铅、血清骨钙素（OC）、骨碱性磷酸酶（ALP）及25-（OH）D3。结果脐血铅水平与胎儿OC、25-（OH）D3呈显著负相关,与ALP呈显著正相关。以P50（50.45μg/L）为界,较高脐血铅组血清OC[（10.0±5.84）ng/ml]、25-（OH）D3[（47.52±28.82）μg/L]均显著低于较低脐血铅组血清OC[（19.26±4.32）ng/ml,P〈0.001]、25-（OH）D3[（56.62±26.80）μg/L,P〈0.05];高血铅组骨ALP水平[（182.64±44.67）U/L]显著高于低血铅组[（126.43±62.05）U/L,P〈0.05）]。结论胎儿期低水平铅暴露可能影响骨形成过程,阻碍正常骨矿化过程。     

重度高胆红素血症新生儿苍白球磁共振成像特征及其临床意义

目的探讨苍白球MRI信号改变与高胆红素血症的严重程度及其相关因素关系,为胆红素脑病诊断与预后判定提供客观依据。方法36例高胆红素血症新生儿（TSB〉342μmoL／L）在生后[10±6（2～34）]d接受头部MRI检查。场强1．5～3．0Tesla,扫描序列为T1WI,T2WI和DWI。2名不知被检者病史的放射科医师分析MRI结果。结果首次MRI有20例苍白球T1WI呈对称性高信号。有苍白球信号改变组的TSB、B／A及UCB均显著高于无改变组[（605．28±89．19）μmoL／L vs．（438．19±67．89）μmoL／L,（1．08±0．18）vs．（0．77±0．16）,（555．49±92．3）μmoL／L vs．（412．01±54．8）μmoL／L,P=0．000],所有MRI-DWI均未见信号改变;TSB在342．0～427．5μmoL／L者9例,未见苍白球信号改变,427．5～513．0μmoL／L者7例,有改变者3例,超过525．0μmoL／L 20例,有改变者17例,黄疸程度与苍白球信号改变有密切关系（χ^2=15．000,P=0．000）;15例ABE苍白球T1WI均呈对称性的高信号（χ^2=17．601,P=0．000）,同时3例T2WI苍白球也呈对称性稍高信号（TSB分别为,745．3μmoL／L,735．7μmoL／L,707．6μmol/L）。7日内入院的25例中,16例苍白球有改变,平均入院时间显著晚于9例无改变者[（121．5±39．9）h vs．（68．9±35）h,P〈0．03]。6例接受了第2次MRI,其中3例ABE有2例苍白球信号转为T2WI高信号,临床均表现脑瘫,另1例苍白球信号正常,但有听力异常;余3例非ABE患儿,2例苍白球信号转为正常,1例两次均无苍白球信号异常,目前发育正常。结论MRI T1WI苍白球对称性高信号,与高胆红素血症的严重程度及暴露时间密切关系,是新生儿ABE的重要表现特征。T1WI高信号转变为T2WI高信号可能提示预后不良。     

川崎病患儿血清可溶性血管细胞黏附分子-1、肿瘤坏死因子-α水平变化的意义

目的探讨可溶性血管细胞黏附分子-1（sVCAM-1）与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在川崎病（KD）发病中的意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）分别测定确诊为KD34例患儿急性期血清sVCAM-1、TNF-α水平,测定其中32例恢复期患儿血清sVCAM-1、TNF-α水平,26例健康儿童为健康对照组。结果KD组血清急性期sVCAM-1、TNF-α[（97.8±35.6）、（73.9±21.7）μg/L]均高于健康对照组[（41.2±8.9）、（2.7±1.8）μg/L],差异有显著性（Pa〈0.01）;KD患儿恢复期血清sVCAM-1、TNF-α水平[（46.9±16.8）、（4.3±2.9）μg/L]下降显著与急性期比较差异有显著性（Pa〈0.01）;而KD恢复期患儿与健康对照组无显著差异（P〉0.05）,且sVCAM-1与TNF-α呈正相关（r=0.798P〈0.001）。结论sVCAM-1、TNF-α可能参与KD发病的病理过程,血清sVCAM-1、TNF-α检测有助于对KD病情发展作出判断。     

Toll样受体2和4在新生儿感染时的变化及其临床意义

目的观察Toll样受体2和4在新生儿不同感染时的变化,探讨它们在新生儿抗感染免疫中的作用。方法收集200例不同胎龄（26—43周）新生儿外周血,分为败血症组、细菌性肺炎组、细菌性脑膜炎组、尿路感染组、先天性梅毒组和非感染组。采用荧光定量PCR法测定TLR2和4mRNA转录水平（与β—actin拷贝数比值）,流式细胞仪检测外周血单核细胞表面TLR2和TLR4蛋白表达水平（荧光强度）以及TLR2和TLR4阳性细胞百分比。结果 1．TLR2mRNA在败血症组明显增加（6．14±0．80）,在G^＋菌败血症组表达最为显著（6．43±0．74）,细菌性肺炎组（5．49±0．62）、细菌性脑膜炎组（5．61±0．60）和先天性梅毒组（5．89±0．38）增加也很显著。细胞表面TLR2蛋白表达与mRNA变化一致。2．TLR4mRNA在G-菌败血症组表达最高（6．78±0．79）。在细菌性肺炎组（5．33±1．07）、细菌性脑膜炎组（5．87±0．70）和尿路感染组（5．38±0．91）也明显增高。TLR4阳性细胞百分比在各感染组显著增加。3．G^＋菌败血症组TLR2mRNA显著高于TLR4mRNA的表达,G-菌败血症组TLR4mRNA显著高于TLR2mRNA的表达。TLR2阳性细胞百分比水平各组均明显高于TLR4。结论新生儿感染时TLR2 mRNA／蛋白和TLR4 mRNA显著增高,特别是在严重感染败血症组。提示TLR2和TLR4信号传导途径参与新生儿抗感染免疫机制,为进一步深入了解新生儿感染免疫机制提供实验基础。     

CD64、降钙素原在新生儿败血症诊断中的价值

目的探讨CD64、血清降钙素原(PCT)在新生儿败血症诊断中的价值。方法败血症组36例在入院初及恢复期采空腹静脉血,应用流式细胞术测定CD64、应用固相免疫色谱法测定PCT,同时行外周血C-反应蛋白(CRP)测定,并在入院接受抗生素治疗前作血培养。非感染组22例和健康对照组26例一次性采血测定CD64、PCT和CRP。结果败血症组CD64水平为(60.37±22.70)平均荧光强度(MFI),明显高于对照组的(23.14±5.10)MFI(P<0.01);败血症组PCT水平为(24.12±20.37)μg/L,明显高于对照组的(0.30±0.19)μg/L(P<0.01);恢复期CD64、PCT水平均明显下降(P均<0.01)。以CD64≥35 MFI、PCT≥0.5μg/L、CRP≥8 mg/L为阳性标准,三项指标对诊断新生儿败血症的敏感度分别为95.7%、94.4%、69.6%,特异度分别为95.8%、84.6%、75.0%。结论 CD64、PCT可作为新生儿败血症早期诊断、判断病情的重要指标。     

N-乙酰半胱氨酸对新生小鼠肝细胞内毒素损伤的保护作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸对新生小鼠肝细胞内毒素损伤时的保护作用,为新生小鼠内毒素肝损伤的防治研究提供理论依据。方法采用胶原酶消化组织块法分离新生小鼠的肝细胞,将细胞分内毒素处理组（LPS组）及N-乙酰半胱氨酸预处理组（NAC组）。LPS组培养基中加入LPS 10μg／ml;NAC组先在培养基中加入N-乙酰半胱氨酸5mmol／L,孵育1h后再加入LPS 10μg／ml。分别于加入LPS 0、6和12h收集各组肝细胞上清和肝细胞,每组12例,以生化法检测培养上清的丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和一氧化氮（nitric oxide,NO）的水平,并以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组细胞诱导型一氧化氮合成酶（induced nitric oxide synthase,iNOS）mRNA的表达。结果LPS组在0、6、12h的ALT值分别为（21．1±4．78）U／L、（59．8±8．59）U／L、（89．6±15．30）U／L,NO水平分别为（1．6±0．31）μmol／L、（6．6±0．81）μmol／L、（7．8±1．01）μmol／L,iNOS mRNA水平分别为0．17±0．023、0．71±0．091、0．71±0．097。LPS组的ALT和NO、iNOS mRNA水平在6、12h较0h明显升高,差异有极显著统计学意义（P〈0．01）;NAC组上清中ALT和NO水平在0、6、12h分别为（20．6±5．98）U／L、（40．8±7．30）U／L、（55．4±5．48）U／L和（1．7±0．26）μmol／L、（3．2±0．71）μmol／L、（4．0±0．71）μmol／L,肝细胞iNOS mRNA的表达水平在0、6、12h分别为0．18±0．026、0．41±0．060、0．40±0．067。经NAC预处理后,在6、12h上清中ALT的水平与LPS组比较明显降低,而且NO水平以及肝细胞iNOS mRNA的表达与LPS组比较也明显降低,差异均有极显著统计学意义（P〈0．01）。结论NAC对新生小鼠肝细胞内毒素损伤有保护作用,NAC可能通过抑制LPS激活iNOS而发挥保护作用。