类孟买血型FUT1、FUT2基因突变及家系遗传分析

目的：分析1个罕见类孟买血型FUT1、FUT2 基因突变及家系遗传机制。方法：选取2019年12月22日就诊于苍南县人民医院的1例类孟买血型患者,采用试管凝集法鉴定ABO、H血型,采用吸收放散试验鉴定红细胞上ABO弱抗原,采用PCR-SBT法鉴定ABO血型基因型并对FUT1、FUT2 基因进行测序分析,同时抽取其妻子、女儿静脉血液待检。结果：先证者和女儿血型为Amh型、H抗原阴性,直接测序FUT1 c.551-552delAG,FUT2 c.357C＞T、c.385A＞T;其妻子血型为A型、H抗原阳性;ABO血型基因型3人均为ABO*A1 .02/O.01.02。结论：先证者FUT1、FUT2 基因遗传给其女儿。     

类孟买血型鉴定流程及输血方案探讨

目的 通过AB型类孟买血型的血清学检测和基因检测,探讨准确鉴定该血型的方法和输血治疗策略。方法 采用微柱法和试管法进行ABO血型鉴定,使用试管法鉴定H、Rh和Lewis抗原,通过吸收放散实验和唾液血型物质实验检测A/B抗原,结合分子生物学方法进行基因测序,综合判定血型。采用血清学方法进行交叉配血。结果 血清学上证实为ABmh分泌型,ABO基因型为A1/B型,FUT1直接测序发现有以下纯合突变：881-882delTT,确认基因型为h2h2型。FUT2基因测序发现有以下突变：390C>T。390位C>T的突变是同义突变。结论 血清学方法可初步鉴定类孟买血型,结合分子生物学方法可准确鉴定该血型。类孟买血型个体输血时应根据不同患者具体情况,选择最合适的输血方案。     

类孟买血型OHmB的血型血清学及家系调查

目的：发现类孟买血型OHm^B先证者家系中其他表现型个体,为紧急输血时寻找相合供者．方法：对类孟买血型OHm^B先证者家系成员进行ABO血型正反定型、Lewis血型鉴定、吸收放散试验检测红细胞表面的ABH抗原及血清中抗-A、抗-B及抗-H,中和抑制试验检测唾液中血型物质．结果：类孟买血型OHm^B先证者及其2位同胞兄弟均被鉴定为类孟买血型OHm^B,其中2例检出抗-H抗体,1例未检出抗-H抗体,先证者及其兄弟的子女中均未发现类孟买血型OHm^B表现型个体．结论：类孟买血型符合隐性遗传规律,对于罕见的类孟买型个体的家系,尤其是同胞兄妹进行血型血清学调查,有发现新的相同表现型个体的可能,需输血时可互为供者．     

一例罕见AB类孟买血型的鉴定分析

目的：对一例AB类孟买血型的先证者进行血型血清学鉴定和分子生物学机制研究。方法：采用血型血清学技术分别对先证者红细胞上ABH抗原、唾液中ABH血型物质、红细胞上Lewis抗原及血浆中红细胞不规则抗体进行检测;采用PCR技术分别扩增先证者ABO基因第6、第7外显子及FUT1、FUT2基因全部编码区域,PCR产物纯化后直接测序,通过Chromas软件与人类红细胞血型基因数据库进行基因序列比对,查找突变位点。结果：血清学实验结果表明,先证者红细胞上检到弱A抗原、Leb抗原,未检到B抗原、H抗原及Lea抗原,唾液中检到A、B、H血型物质,血浆中检到IgM类抗HI抗体。DNA测序结果显示先证者ABO基因型为*A1.02/*B.01;FUT1基因存在c.551＿552delAG杂合缺失突变及c.881＿882delTT杂合缺失突变,FUT2基因存在c.357C>T纯合多态性。结论：FUT1基因双杂合缺失突变是导致先证者为AB类孟买血型的主要原因。     

40例疑难ABO血型鉴定临床分析

目的:鉴定并且分析了40例的疑难ABO血型的红细胞抗原以及血清的抗体特异性。方法:采用血型血清学方法进行盐水介质正、反定型;对盐水介质正、反定型不合者使用聚凝胺法检测和不规则抗体检测;采用吸收试验和放散试验进行,对40例疑难患者的血型抗原进行了基因的分型,并且应用了血型血清的学术对造成血型的正反定型的不符合原因进行了分析。结果:结合血型血清学的技术可以为患者提供了一些安全血液的制品。结论:ABO血型基因型的技术可以弥补血型血清学方法的缺点以及不足,并且运用了血型的基因分型技术,进而可以解决血清方法学鉴别不了的血型抗原。     

IgM抗-M抗体引起血型定型困难1例

无偿献血者夏某,女,20岁,无输血史。在对其进行ABO血型定型时出现正反定型不符现象,经进一步血型血清学检查,结果报告如下。1血型血清学检查1.1ABO血型鉴定正定型该献血者红细胞与抗-B和抗-A、B标准血清均呈4+凝集,与抗-A无凝集,红细胞正定型为B型;反定型该血清与A、B、O标准红细胞均出现凝集,凝集强度分别为4+、1+、2+,与自身细胞不凝集,反应结果提示该献血者血清中可能存在ABO以外的抗体。1.2唾液中A、B、H物质测定未检出A物质,B和H物质效价为64和16。1.3红细胞吸收放散试验将效价为1∶128的抗-A和抗-B血清与献血者红细胞吸收后…     

红细胞（微）嵌合体血型鉴定新方法的建立及初步应用

目的：建立红细胞（微）嵌合体血型鉴定的新方法并对其进行初步应用。方法建立4℃吸收56℃放散盐水介质试管法用于检测 A/O 、B/O 体外模拟红细胞微嵌合体和 ABO 血型不合异基因造血干细胞移植后患者红细胞微嵌合体血型,同时将其与常规盐水介质试管法结果进行对比分析。结果4℃吸收56℃放散盐水介质法 A/O 嵌合体模型组中 A 型红细胞、B/O 嵌合体模型组中 B 型红细胞最低检测限均为1∶12800,ABO 血型不合异基因造血干细胞移植后患者标本检到 B 抗原;常规盐水介质试管法 A/O 嵌合体模型组中 A 型红细胞以及 B/O 嵌合体模型组中 B 型红细胞最低检测限均为1∶100,ABO血型不合异基因造血干细胞移植后患者未检到 B 抗原。结论4℃吸收56℃放散盐水介质试管法对红细胞（微）嵌合体血型的最低检测限明显小于常规盐水介质试管法,可用于 ABO 血型不合异基因造血干细胞移植后红细胞血型的动态监测。     

抗-M致ABO血型正反定型不符一例

目的探讨ABO血型正反定型不一致的原因。方法所有血型及抗体鉴定按《中国输血技术操作规程》采用进口微柱凝胶卡进行检测。结果发现1例患者血型正定型为A型RhD阳性，反定型与B红细胞（Bc）呈4＋凝集状态，与A红细胞（Ac）、O红细胞（Oc）均为弱凝集状态。患者红细胞直接抗人球蛋白试验（抗IgG＋C3d）阴性。患者血清抗体筛查与Ⅰ、Ⅲ号筛选细胞反应阳性。患者红细胞与抗M试剂反应阴性。结论患者血型为A型RhD阳性，其血型正反定型不符的原因是血清中含有抗M抗体。     

IgM/IgG型抗P1致正反定型不符1例

1临床资料 无偿献血者,女性,29岁,首次献血.初检以血型正定型为B型,反定型中与A、B和O型试剂红细胞凝集(强度分别为4+、1+和±),与自身红细胞不凝集送检. 按照《全国临床检验操作规程》[1]复检,结果同上.该献血者红细胞其他血型表型:CcDee,MN.直抗:阴性.反定型中与O型试剂红细胞凝集,提示血清中可能存在ABO血型外不规则抗体.以10个0型谱细胞进行抗体鉴定试验,该献血者血清与1、2、3、4、5、7和8号P1型谱细胞在盐水及抗人球蛋白介质中均出现凝集,而与6、9、10号非P1型谱细胞不凝集,该反应格局表明献血者血清中存在IgM及IgG型抗P1.     

Bx亚型伴抗-B抗体产生的血型血清学特性分析与输血策略

目的分析Bx亚型伴抗-B抗体产生的血型血清学特性,并探讨其输血治疗方案。方法对ABO血型鉴定正反定型不符的样本进行吸收—放散试验、唾液血型物质凝集—抑制试验等血型血清学分析。对符合Bx亚型伴抗-B抗体产生血型血清学特性的患者,采取配合性血液输注,并观察输血疗效。结果血型血清学试验结果提示患者为Bx亚型伴抗-B产生,给予O型红细胞、AB型血浆、AB型血小板输注后,无输血不良反应,输血治疗效果良好。结论Bx亚型伴抗-B抗体产生的血型血清学特性由于B抗原表达减弱,在血型鉴定时导致正反定型不一致。与抗-AB凝集反应可增强,或不反应。H抗原表达强度与O细胞相似,同时产生低反应活性抗-B。分泌型个体唾液中可缺乏B物质,仅有H物质。此类患者在病情紧急,无法找到同型血液时,可采用配合性血液输注。     

白血病患者ABO血型抗原减弱的原因分析及血型鉴定方法

目的:分析因罹患白血病而造成患者红细胞ABO血型抗原减弱的原因,确定白血病患者的血型鉴定方法,以降低白血病患者血型鉴定发生错误的机率。方法:对我院收治的一例出现红细胞ABO血型抗原减弱的白血病患者进行ABO血型抗原的血清学正反定型试验、吸收放散试验和唾液血型物质检测。结果:该例白血病患者为A抗原减弱且抗B水平下降,最终ABO血型鉴定为A型。结论:采用血清学正反定型试验、吸收放散试验和唾液血型物质检测的方法可以更为准确对ABO血型抗原减弱的个例进行血型鉴定。     

ABO疑难血型鉴定1例

在输血前,一定要鉴定出受血者的血型后,才能进行交叉配血试验.ABO血型鉴定常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原(正定型)以及血清中存在的血型抗体(反定型),依据抗原抗体存在的情况判定血型.当正定型和反定型实验结果不符时,呈现疑难血型现象,增大了血型鉴定难度.笔者近日遇到1例ABO疑难血型患者,通过一些相关的血型血清学实验,确定出了ABO血型,现报道如下.     

ABO血型基因突变导致正反定型不符分析

目的对临床检测中1例ABO血型正反定型不符病人进行血清学及分子生物学研究,明确病人ABO血型,阐述其正反定型不符原因及分子生物学机制。方法采用血清学及分子生物学技术,鉴定正反定型不符病人血型及血清中意外抗体,并对病人样本进行ABO血型基因直接测序,PCR扩增编码ABO基因第6、第7外显子编码区序列,以公认的A101（ABO*A1.01）等位基因序列做为参考序列比对,分析待测样本DNA序列,明确样本ABO表型及基因型。结果病人样本血清学结果正定型为A型,样本红细胞与单克隆抗-A反应弱阳性,但其红细胞与抗-A1抗体反应阴性;样本反定型为O型,血清与A1试剂红细胞反应弱阳性、与A2试剂细胞反应阴性,其血清不规则抗体筛查阴性,证实样本血清存在抗-A1意外抗体;样本测序结果显示病人在ABO基因第6外显子出现c.297A>G（ACA>ACG）、第7外显子出现c.771C > T（CCC > CCT）及c.646T > A（AGT > AGA）的等位基因突变。结论血清学试验检测病人ABO血型为A亚型,血清中产生抗-A1意外抗体,导致病人正反定型不符。病人ABO基因6号外显子的c.297A>G及7号外显子的c.771C>T突变,氨基酸编码并无改变,属于无义突变。而通过比对血型抗原基因突变资料库注册的ABO表型,分析病人为Ax/Aweak表型,该表型基因ABO*AW.30.01第7外显子的c.646T>A突变（导致氨基酸Phe216Ile改变）正是其表型形成的分子基础。     

血液病患者ABO血型正反定型不合的原因分析

目的分析因罹患血液病而造成患者红细胞ABO血型正反定型不合的原因,寻找解决问题的方法。方法对我院收治的10例血液病患者出现ABO正反定型不合的标本,分别选用洗涤、改变反应温度、吸收放散,抗人球蛋白等试验检测。结果 2例抗体减弱,4例冷凝集,4例抗原减弱。结论 ABO血型正反定型不合时,根据具体情况和临床资料设计血清学检测的方法,可以对ABO血型进行更为准确的血型鉴定。     

22例疑难ABO血型鉴定临床分析

目的分析鉴定疑难ABO血型的红细胞抗原、血清抗体特异性。方法选取我院收诊的疑难ABO血型鉴定患者22例,采取血型血清学方法对其进行盐水介质正反定型实验,对于不合格者,给予聚凝胺法检测,或者不规则抗体检测,采取吸收和放散试验对血型抗原进行基因制品。结果本组22例疑难ABO血型鉴定患者,采用盐水试管法正反定型不符合患者有18例。结论 ABO血型基因型技术可以对血型血清学方法的不足及缺点进行弥补,运用血型基因分型技术,可解决血清方法学无法鉴别的血型抗原。     

酶处理红细胞检测白血病致抗体减弱血型定型1例报告

患者男,35岁,临床诊断为T细胞性淋巴母细胞白血病,无输血史。因鉴定ABO血型时发现正反定型不符,送我室进行血型鉴定。正反定型:采用试管法做ABO血型正反定型,菠萝酶处理试剂红细胞[1]前后患者ABO正反定型结果见表1。吸收放散试验[1]:患者红细胞放散液与试剂红细胞室温15min反应均阴性,4℃15min反应均阴     

不规则抗体对血型反定型鉴定的影响

用微柱凝胶法对8例患者ABO血型进行分析鉴定,通过血清学试验、抗体筛查、吸收放散试验、稀释血清测定反定型对ABO血型正反不符进行综合分析,探讨由于患者产生不规则抗体在用微柱凝胶法鉴定血型时对反定型结果的影响及对临床血型鉴定和安全输血的意义。微柱凝胶法ABO血型正反定型不符,正定型结果为A型3例、B型4例、AB型1例;反定型结果均为O型或待定。吸收放散试验表明,8例患者红细胞上含有A或B抗原,抗体筛查试验和谱细胞红细胞血型抗体鉴定2例产生抗-e抗体,1例产生抗-C抗体,1例产生抗-D抗体,2例产生抗-M抗体,1例产生自身抗体,1例是非特异性凝集。8例患者都产生了不同性质的蛋白质从而影响了微柱凝胶法对ABO血型反定型的鉴定。在临床输血中通过血清学试验、抗体筛查、吸收放散试验,稀释血清测定反定型综合进行血型分析,确保临床输血安全。     

配血不合发现类孟买血型Bmh1例

孟买和类孟买血型在人类血型系统中为罕见的血型,常因交叉配血不合和正反定型不符时检出,笔者在经与同型多人交叉配血不合,返回血站做血型血清学鉴定时发现1例类孟买血型,现报道如下。     

B(A)血型的血清学和分子生物学定型及患者临床输血策略研究

目的 对B(A)血型进行血清学和分子生物学定型,并对B(A)血型患者的血样进行分析,研究此类血型患者的输血策略.方法 对58例正反定型不符的医院送检样本和本中心的献血员血样采用试管法鉴定ABO血型,同时采用PCR-SSP方法进行ABO基因分型;采用盐水介质和Liss-coombs卡交叉配血,分析论证38例该血型患者输注B型红细胞的可行性.结果 58例血样经血清学和分子生物学定型为B(A),其中39例为B(A)04,19例为B(A)02.38例临床医院送检的B(A)病例,与随机选择的100位B型献血员交叉配血,除1例有高效价抗-A的献血员与2例患者次侧盐水介质W+外,其余均相合.结论 B(A)血型有明确的血清学特异性,分子生物学定型B(A)02和B(A)04较常见,B(A)患者优先考虑输注0型洗涤红细胞和AB型血浆、AB型血小板,亦可输注配血相合的B型红细胞,抗-A效价低于128的B型血浆和B型血小板也可考虑输注.     

免离心试管法批量鉴定ABO血型

目的 免离心试管法批量鉴定红细胞ABO血型方法的建立和效果评价.方法 批量鉴定ABO血型时,根据被检样本数,标记一次性试管,在标记好的试管中加样,使被检者红细胞分别与单克隆抗-A、抗-B试剂反应(正定型),血浆分别与A、B、O型试剂红细胞反应(反定型),免离心静置60min后肉眼观察结果,根据反应格局,正反定型相符者直接判定其ABO血型.结果 采用免离心试管法鉴定ABO血型71200例,结果正反定型相符者71172例,正反定型不符和(或)出现弱凝集者28例.正反定型不符和(或)出现弱凝集的28例各反应试管离心后,反应格局和凝集强度与离心前均一致,经综合分析临床资料及不规则抗体、红细胞ABH抗原、唾液血型物质、红细胞吸收放散试验检测结果,确定为ABO亚型15例(不包括A2和A2B),红细胞不规则抗体阳性影响ABO血型检测结果者7例,疾病引起抗原减弱者3例,低球蛋白血症引起ABO血型抗体减弱1例,异基因骨髓移植术后1例,OHmA 1例.13618例需输血患者离心试管法复检ABO血型结果与免离心试管法结果均一致.结论 免离心试管法鉴定ABO血型,结果准确性与试管离心法一致,批量鉴定ABO血型时,可采用免离心试管法代替离心试管法,从而省略繁杂的离心步骤,减少技术操作环节可能出现的差错.