牛蒡子苷元通过调节Hippo-YAP信号通路对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的研究牛蒡子苷元调节Hippo-YAP信号通路对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 将人子宫颈鳞癌细胞SiHa分为对照组、低浓度牛蒡子苷元组（5.0μmol/L）、中浓度牛蒡子苷元组（10.0μmol/L）、高浓度牛蒡子苷元组（20.0μmol/L）和高浓度牛蒡子苷元（20.0μmol/L）+TDI-011536组（3μmol/LHippo信号通路抑制剂）。分组处理后,集落形成实验检测细胞活性;Transwell实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;免疫荧光技术检测细胞中Vimentin和E-Cadherin;蛋白质免疫印迹技术检测p-YAP、YAP、PCNA、MMP-2蛋白表达。结果 与对照组比较,低浓度牛蒡子苷元组、中浓度牛蒡子苷元组、高浓度牛蒡子苷元组SiHa的细胞存活率、细胞侵袭数、细胞迁移愈合率、细胞中Vimentin荧光强度、YAP、PCNA、MMP-2蛋白表达均降低,而E-Cadherin荧光强度和p-YAP蛋白表达升高（P<0.05）;与高浓度牛蒡子苷元组比较,高浓度牛蒡子苷元+TDI-011536组SiHa细胞存活率、细胞侵袭数、细胞迁移愈合率、...     

HOXA10基因敲低对非小细胞肺癌安罗替尼敏感性的影响

目的 探讨同源异型盒基因A10 (HOXA10)对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞安罗替尼敏感性的影响。方法 采用实时定量PCR检测HOXA10在NSCLC细胞中的表达。应用小干扰RNA在A549和PC-9细胞中敲低HOXA10表达,并用不同浓度安罗替尼处理细胞。Western blotting检测HOXA10蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖活性,以明确安罗替尼的细胞毒性,并计算半数抑制浓度（IC50）;克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 HOXA10在NSCLC细胞中呈高表达;敲低HOXA10能够降低安罗替尼在A549和PC-9细胞中的IC50;敲低HOXA10能够增强安罗替尼对肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭的抑制能力;敲低HOXA10能够促进安罗替尼诱导的细胞凋亡。结论 敲低HOXA10能够增加NSCLC细胞对安罗替尼的敏感性。     

基于线粒体凋亡通路探讨防己诺林碱对前列腺癌PC3细胞的生物学行为的影响

目的 基于线粒体凋亡通路探究防己诺林碱（fangchinoline, FAN）对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响。方法 将前列腺癌PC3细胞按照FAN处理浓度分为4组,分别为FAN 0μmol/L组、FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组,各组依次采用FAN 0μmol/L (DMSO替代)、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L进行处理,孵育48 h后进行实验。CCK-8法检测PC3细胞增殖,平板克隆法检测PC3细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测PC3细胞凋亡,Transwell实验检测PC3细胞侵袭,划痕实验检测PC3细胞迁移,Western blot检测PC3细胞自噬相关蛋白和线粒体凋亡通路蛋白。结果 与FAN 0μmol/L组相比,FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组的PC3细胞增殖能力、克隆形成能力、侵袭和迁移能力明显降低（P<0.001）,凋亡率明显升高（P<0.001）;与FAN 5μmol/L组和FAN 10μmol/L组相比,FAN 20μmol/L组的PC3...     

吉非替尼通过促进H3K27甲基化水平抑制恶性周围神经鞘瘤细胞的增殖

目的:研究表皮生长因子受体（EGFR）抑制剂吉非替尼（gefitinib）对恶性周围神经鞘瘤（MPNST）细胞增殖、迁移的影响。方法:选择STS26T细胞、ST88-14细胞,分为对照组和给药组（10 μmol/L）,其中药物IC50实验、蛋白印迹实验给药组浓度分为5、10、15 μmol/L。CCK-8法检测吉非替尼对STS26T、ST88-14的半数抑制浓度并绘制药物IC50曲线;平板克隆形成实验检测吉非替尼对细胞增殖能力的影响;划痕实验检测吉非替尼对细胞迁移能力的影响;实时荧光定量PCR检测加药后各组细胞Kras、SUZ12、EED、EZH2 mRNA的表达情况;蛋白印迹实验检测加药后Kras、组蛋白H327位赖氨酸三甲基化蛋白（H3K27me3）的表达。结果:STS26T、ST88-14细胞的药物IC50曲线显示半数抑制浓度均为10 μmol/L（t=11.42、16.51,均P＜0.05）;与对照组比较,吉非替尼给药组（10 μmol/L）STS26T、ST88-14细胞增殖能力显著降低（t=5.48,P＜0.05;t=4.89,P＜0.01）、细胞迁移能力显著降低（t=4.94,P＜0.01;t=4.75,P＜0.01）;与对照组比较,吉非替尼给药组（10 μmol/L）STS26T细胞中Kras mRNA表达显著降低（t=4.87,P<0.01）,SUZ12、EED、EZH2表达显著升高（t=11.36、15.54、13.19,均P＜0.05）;与对照组比较,吉非替尼给药组（10 μmol/L）ST88-14细胞中Kras mRNA表达显著降低（t=13.75,P<0.05）,SUZ12、EED、EZH2表达水平显著升高（t=12.56、7.48,16.33,均P＜0.05）;与对照组比较,吉非替尼给药组（5、10、15 μmol/L）STS26T、ST88-14细胞Kras蛋白表达显著降低（t=13.70、15.21,均P<0.05）;与对照组比较,吉非替尼给药组（5、10、15 μmol/L）STS26T、ST88-14细胞H3K27me3蛋白表达显著增加（t=14.31、12.40,均P<0.05）。结论:EGFR抑制剂吉非替尼通过促进MPNST中PRC2的表达,提高表观遗传学标志物H3K27me3的表达,降低MPNST细胞株增殖、迁移的能力。     

DMDD对射频消融不完全肝癌细胞的抑制作用研究

目的：研究杨桃根提取物2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮（DMDD）对射频消融不完全人肝癌细胞HuH-7、Hep3B模型的抑制作用。方法：经47℃水浴处理人肝癌细胞HuH-7、Hep3B构建射频消融不完全细胞模型，采用细胞增殖实验（CCK-8）检测野生型HuH-7,Hep3B细胞（对照组）和射频消融不完全模型细胞（模型组）的增殖能力，划痕实验检测细胞迁移能力，细胞侵袭实验（Transwell）检测细胞侵袭能力。CCK-8实验检测DMDD对射频消融不完全肝癌细胞HuH-7,Hep3B的半数抑制浓度。选取3种DMDD浓度梯度，分别为DMDD高浓度组（10μmol/L,DMDD H组）、DMDD中浓度组（5μmol/L,DMDD M组）和DMDD低浓度组（2.5μmol/L,DMDD L组），检测DMDD干预后射频消融不完全肝癌细胞模型的增殖、迁移、侵袭能力；蛋白质印迹法（western blotting）检测DMDD干预前后射频消融不完全肝癌细胞模型的METTL3蛋白表达水平。结果：与对照组野生型HuH-7,Hep3B细胞比较，射频消融不完全肝癌细胞HuH-7,Hep...     

DMDD与索拉非尼联合应用协同抑制肝癌细胞恶性生物学行为的实验研究

目的：探讨中药杨桃根提取物DMDD单体（2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2,5-diene-1,4-dione与索拉非尼联合应用对人肝癌Huh7细胞恶性生物学行为的影响及可能的机制。方法：实验分4组：Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组及DMDD与索拉非尼联合应用组（简称联合应用组）。CCK-8法检测Huh7细胞活力，以金氏公式判定协同效应；平板克隆实验检测Huh7细胞的集落形成能力；划痕实验、Transwell迁移实验和侵袭实验检测Huh7细胞的迁移能力和侵袭能力；流式细胞术检测Huh7细胞周期；RT-qPCR和Western blot检测丝氨酸合成通路中的PHGDH mRNA转录水平和蛋白表达水平。结果：平板克隆实验、划痕实验和Transwell迁移实验结果显示，与Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组比较，DMDD和索拉非尼联合应用组对Huh7细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用显著增强（均P<0.05），经金氏公式计算，2、4、8μmol/L DMDD分别联合1、2、4μmol/L索拉非尼具有协同作用（Q>1.15）,6、10μmo...     

安罗替尼对肺腺癌细胞株A549放射敏感性的影响及机制

  目的  研究安罗替尼对肺腺癌细胞放疗增敏作用及机制。  方法  采用安罗替尼处理人肺腺癌细胞株A549，使用CCK8法测定安罗替尼对细胞增殖的影响；采用克隆形成实验测定安罗替尼联合放疗对细胞的生长抑制作用；使用流式细胞术测定细胞周期和细胞凋亡的变化；采用免疫荧光测定安罗替尼联合放疗对细胞内DNA损伤的影响；采用Western blot检测细胞内DNA损伤标志因子DNA-PKcs的表达变化。  结果  安罗替尼对人肺腺癌细胞A549增殖具有抑制作用，第2、3、4、5天，（P < 0.05）。体外培养克隆形成实验显示，安罗替尼联合放疗组的准予剂量（Dq）、平均致死剂量（D0）及4 Gy照射时的存活分数（SF）均明显低于单纯放疗组（P < 0.05）。安罗替尼能够使细胞阻滞于G1/G0期，与放疗联合作用后，进一步降低了G2和S期细胞比例。安罗替尼能够增加放疗诱导的细胞凋亡比例（31.94±2.25）%和（44.44±2.30）%，（P < 0.001），增加γH2AX阳性细胞数量（25.67±2.52）%和(54.67±3.79）%，（P < 0.001）。安罗替尼能够降低放疗诱导的DNA断裂损伤标志因子DNA-PKcs的表达强度（0.90±0.06）和（0.40±0.06），（P < 0.001）。  结论  安罗替尼具有放疗增敏作用，其机制可能与减少G2/S期细胞、增加细胞凋亡和维持DNA持续损伤有关。     

舒芬太尼通过circCAMSAP1/miR-409-3p对宫颈癌细胞增殖和迁移及凋亡的影响

目的 探讨舒芬太尼对宫颈癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人宫颈癌细胞SiHa株,随机分为对照组、舒芬太尼L组（10 ng/mL）、舒芬太尼M组（20 ng/mL）、舒芬太尼H组（40 ng/mL）、si-NC组（转染si-NC）、si-circCAMSAP1组（转染si-circCAMSAP1）、舒芬太尼+pcDNA组（40 ng/mL+pcDNA）、舒芬太尼+pcDNA-circCAMSAP1组（40 ng/mL+pcDNA-circCAMSAP1）。采用甲基噻唑基四唑（MTT）法、平板克隆形成实验、Transwell实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测circCAMSAP1、miR-409-3p的表达量;双荧光素酶报告实验检测circCAMSAP1与miR-409-3p的靶向调控作用。结果 与对照组[抑制率：（0.00±0.00）%,凋亡率：（7.93±0.66）%]比较,舒芬太尼L组[抑制率：（13.58±1.29）%,凋亡率：（13.52±0.82）%]、舒芬太尼M组[抑制率：（28.50...     

安罗替尼联合放射治疗对食管鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡及放射治疗敏感性的影响

目的 探讨安罗替尼联合放射治疗对食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡及放射治疗敏感性的影响。方法 将对数生长期的食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞随机分为0μmol·L^-1安罗替尼组、2μmol·L^-1安罗替尼组、4μmol·L^-1安罗替尼组、8μmol·L^-1安罗替尼组、16μmol·L^-1安罗替尼组、32μmol·L^-1安罗替尼组、64μmol·L^-1安罗替尼组、128μmol·L^-1安罗替尼组,分别用含终浓度为0、2、4、8、16、32、64、128μmol·L^-1安罗替尼的培养基进行培养。采用细胞计数试剂盒-8法检测8组食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的增殖能力,并计算细胞增殖抑制率。应用Graphpad Prism8软件绘制细胞增殖抑制曲线并计算半抑制浓度(IC₅₀),选择IC₅₀值最小时的安罗替尼浓度及处理时间作为后续实验的药物处理条件。另...     

细胞外ATP对U87胶质瘤细胞生长和侵袭的作用

目的观察细胞外三磷酸腺苷(adenosine Triphosphate,ATP)对体外培养的U87人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用MTT法检测不同浓度细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖的影响;以相同条件下不加ATP作为对照组,以加入100μmol/L ATP作为处理组,采用Transwell细胞侵袭实验检测100μmol/L细胞外ATP对U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响;用时间显微镜动态观察100μmol/L的ATP作用下U87胶质瘤细胞的迁移情况。结果高浓度(5 000μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖有显著抑制作用,较低浓度(50、100、500μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖无明显影响,5 000μmol/L ATP组与其他浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验中,处理组细胞跨膜细胞数为(163.83±17.81)明显多于对照组(89.83±13.27)(P<0.01);迁移实验中,处理组细胞运动速度为(163.83±17.81)μm/h,对照组细胞运动速度为(89.83±13.27)μm/h,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 100μmol/L的细胞外ATP对体外培养的U87胶质瘤细胞的侵袭和迁移具有明显促进作用。     

安罗替尼对儿童 T-急性淋巴细 胞白血病细胞的抑制作用及机制 研究

目的 探讨安罗替尼对儿童 T-急性淋巴细胞白血病（T-ALL）细胞的抑制作用及机制。 方法 给予 CCRF-CEM 和 J.gamma1 细胞不同浓度安罗替尼，使用细胞计数套件-8（CCK-8）法检测细胞增殖能力，显微镜下观察安罗替尼对细胞形态 的影响，利用膜联蛋白V/碘化丙啶（Annexin V/PI）染色结合流式细胞仪检测细胞凋亡率。通过生物信息学分析预测安罗替尼作用 靶标，分子对接预测作用位点。采用免疫印迹法检测安罗替尼对凋亡相关蛋白、靶标蛋白及其下游信号相关蛋白表达的影响。 结 果 安罗替尼能够在 48 h 显著抑制 CCRF-CEM（半抑制浓度=3.39 μmol/L）和 J.gamma1 细胞的增殖（半抑制浓度=2.36 μmol/ L），引起 CCRF-CEM 和 J.gamma1 细胞皱缩；安罗替尼可诱导细胞凋亡，促进凋亡相关蛋白的表达，与对照组相比，cl-Caspase、 cl-PARP 及Bax的表达均升高（均P＜0.05）。生物信息学分析与分子对接结果提示，安罗替尼可能靶向结合Abelson 酪氨酸蛋白 激酶1（ABL1）；Western blot结果显示，与对照组相比，安罗替尼可降低Abelson酪氨酸蛋白激酶1（ABL1）总蛋白表达（P＜0.05）， 从而抑制下游信号通路磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（PKB）的磷酸化水平（P＜0.05），PKB激活剂则可削弱安罗替尼的抑 制效应。 结论 安罗替尼能显著抑制T-ALL细胞增殖并诱导凋亡，其机制可能与靶向抑制ABL1表达后，削弱ABL1/PI3K/PKB信 号通路有关。     

双氢青蒿素对人宫颈癌细胞Hela生物学特性的影响

目的 探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人宫颈癌细胞Hela细胞周期、增殖、凋亡和侵袭的影响及机制.方法 以Hela细胞为研究对象,根据DHA的不同浓度,分组:空白对照组(等体积生理盐水)、低浓度DHA组(50μmol/L)及高浓度DHA组(400μmol/L).RT-PCR、Wester...     

油酸激活Src基因诱导Hela细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨油酸是否能够通过激活Src基因,从而诱导宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移和侵袭.方法 给予不同浓度的油酸(0、5、10μmol/L)处理人宫颈癌Hela细胞,使用CCK-8、平板克隆、EdU及Tran-swell等方法分别检测不同浓度油酸负荷下Hela细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化情况;Western blot检测油酸处理前后Src和p-Src蛋白表达水平变化;使用Src激酶特异性抑制剂SU6656处理细胞后,观察Hela细胞增殖率及穿膜细胞数等指标变化.结果 不同浓度油酸处理Hela细胞后,其体外增殖、迁移和侵袭能力均明显增加(P<0.05),且存在浓度依赖性.与NC组比较,油酸组p-Src蛋白表达水平升高(P<0.05).应用Src特异性抑制剂SU6656处理后,油酸引起的Hela细胞的增殖、迁移及侵袭力的增强均受到抑制.结论 油酸激活Src基因促进Hela细胞增殖、迁移和侵袭.     

蛋白激酶Cζ抑制剂对人乳腺癌细胞侵袭迁移力的影响

目的探讨蛋白激酶C（PKC）ζ抑制剂T1038-2546对人乳腺癌细胞侵袭迁移力的影响。方法体外应用美国经典Z＇-LYTETM试剂盒筛选出PKCζ的高效抑制剂T1038-2546,其半数抑制浓度（IC50）约为30μmol/L;通过观察T1038-2546处理人乳腺癌MDA-MB-231细胞前后细胞的生长速度,细胞周期分布以及细胞侵袭迁移能力的改变,探讨T1038-2546对乳腺癌细胞MDA-MB-231恶性生物学行为的影响。结果与DMSO处理的MDA-MB-231细胞（对照组）相比,低浓度T1038-2546处理的细胞（实验组）生长速度没有明显改变,而90和180μmol/L T1038-2546处理的MDA-MB-231细胞生长速度明显减慢（P〈0.05）,并且呈现时间依赖性;实验组与对照组细胞相比,细胞周期分布差异无显著性（P〉0.05）;体外迁移实验结果显示,与对照组细胞相比,30μmol/L T1038-2546处理组细胞的迁移能力明显减弱（P〈0.05）;体外侵袭实验结果显示,30μmol/L T1038-2546处理组细胞的穿膜细胞数明显少于对照组细胞的穿膜细胞数,差异有显著性（P〈0.05）。结论蛋白激酶Cζ抑制剂T1038-2546可显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭迁移力。     

油酸激活Src基因诱导Hela细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨油酸是否能够通过激活Src基因,从而诱导宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移和侵袭.方法 给予不同浓度的油酸(0、5、10μmol/L)处理人宫颈癌Hela细胞,使用CCK-8、平板克隆、EdU及Tran-swell等方法分别检测不同浓度油酸负荷下Hela细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化情况;Western blot检测油酸处理前后Src和p-Src蛋白表达水平变化;使用Src激酶特异性抑制剂SU6656处理细胞后,观察Hela细胞增殖率及穿膜细胞数等指标变化.结果 不同浓度油酸处理Hela细胞后,其体外增殖、迁移和侵袭能力均明显增加(P<0.05),且存在浓度依赖性.与NC组比较,油酸组p-Src蛋白表达水平升高(P<0.05).应用Src特异性抑制剂SU6656处理后,油酸引起的Hela细胞的增殖、迁移及侵袭力的增强均受到抑制.结论 油酸激活Src基因促进Hela细胞增殖、迁移和侵袭.     

PI-103对人黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制研究

目的观察PI-103在体外对人黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨可能的作用机制。方法应用MTT法检测不同浓度PI-103对A375细胞增殖的影响,Transwell小室实验检测0.1、0.2μmol/L PI-103对A375细胞迁移能力和侵袭能力的影响,Western Blot法测定细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达。结果 0.1、0.2μmol/L PI-103对A375细胞增殖的抑制作用不明显（P〉0.05）;在浓度高于0.4μmol/L时,PI-103能够明显抑制A375细胞的增殖（P〈0.05）。0.1μmol/L PI-103作用后,迁移实验和运动实验穿膜细胞数分别为（91.73±13.80）、（63.67±8.54）,与对照组比较明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;0.2μmol/L PI-103作用后,迁移实验和运动实验穿膜细胞数分别为（64.07±9.22）、（34.80±7.89）,与对照组比较明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。0.1、0.2μmol/L PI-103作用后,A375细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 PI-103可通过下调MMP-2、MMP-9的表达抑制A375细胞迁移和侵袭,为其应用于抗恶性黑素瘤转移治疗提供了实验依据。     

沉默环状RNA hsa_circ_0011021表达对宫颈癌细胞增殖 迁移及侵袭的影响

【摘要】 目的 探讨环状RNA（circRNA）hsa_circ_0011021在宫颈癌组织和细胞株中的表达变化及其对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 选取河南科技大学第一附属医院就诊的15例宫颈癌患者,取15对宫颈癌组织和癌旁组织。qRT PCR实验检测hsa_circ_0011021在宫颈癌组织和宫颈癌癌旁组织（Hela和SiHa）细胞中的相对表达水平;CCK 8和克隆形成实验检测沉默hsa_circ_0011021对Hela细胞活性和克隆形成能力的影响;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测沉默hsa_circ_0011021对Hela细胞迁移及侵袭能力的影响。结果 hsa_circ_0011021在宫颈癌组织的相对表达水平明显高于癌旁组织（P＜0.05）;hsa_circ_0011021在Hela和SiHa细胞中的相对表达水平明显高于人永生化表皮细胞HaCaT（P＜0.05）。在Hela细胞沉默hsa_circ_0011021,Hela细胞的活性和克隆形成能力显著降低,迁移距离明显减少,侵袭能力也明显下降（P＜0.05）。结论 hsa_circ_0011021在宫颈癌组织和宫颈癌细胞（Hela和SiHa）中的表达水平明显升高;沉默hsa_circ_0011021显著抑制宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移和侵袭。     

慢病毒介导的hTERT-shRNA联合光动力治疗对宫颈癌细胞SiHa的影响

目的：探讨慢病毒介导的人端粒酶逆转录酶（hTERT）联合四甲基吡啶卟啉（TMPyP4）及光动力疗法对宫颈癌细胞SiHa的影响。方法实验分4组：空白对照组、单纯基因治疗组、单纯光动力治疗组、联合治疗组。体外化学合成Lenti-hTERT-shRNA并转染SiHa细胞,确定最适感染复数（MOI）值,成功稳定转染后给予浓度为7．5μmol／L的TMPyP4行光动力治疗。RT-PCR法检测hTERT、p53、HPV-16 E6、Caspase-8 mRNA的表达;免疫荧光检测hTERT蛋白的表达;细胞增殖及细胞毒性（CCK-8）检测各组中人宫颈癌细胞SiHa的抑制作用;AnnexinV-PE／7-AAD双染试剂盒检测各组细胞的凋亡率;Transwell实验检测各组细胞侵袭能力的改变。结果与空白对照组比较,其他3组hTERT、HPV-16 E6、Caspase-8 mRNA的表达水平均下降,p53mRNA的表达水平升高,hTERT蛋白表达水平相应下降,其中联合治疗组最明显（P＜0．05）;联合治疗组较其他组明显抑制SiHa细胞的增殖（P＜0．05）;流式细胞学AnnexinV-PE／7-AAD和Transwell实验检测结果显示,联合治疗组较单纯基因治疗组和单纯光动力治疗组的凋亡率明显升高,细胞侵袭能力明显减弱（P＜0．05）。结论慢病毒介导的hTERT-shRNA联合光动力治疗明显抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖和侵袭能力,并促进细胞凋亡。     

阻断ErbB4受体对人胆管细胞癌QBC939细胞系增殖与转移的影响

目的:通过体外培养人胆管癌QBC939细胞系,阻断ErbB4受体,检测肿瘤生物学行为的改变,从而探讨人类第4表皮生长因子(ErbB4)受体介导人胆管细胞癌肿瘤生物学行为的分子机制.方法:体外培养人胆管癌QBC939细胞系细胞,分别加入终浓度为0μmol/L,1μmol/L,5μmol/L,10μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L,100μmol/L的AG1478阻断胆管癌细胞ErbB4受体,使用CCK-8法测量各组胆管癌细胞增殖情况,然后利用SPSS软件计算AG1478对人胆管癌QBC939细胞的半数抑制浓度(IC50值);根据IC50值选择使用0μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L AG1478阻断胆管癌细胞ErbB4受体,使用划痕实验检测各组胆管癌细胞迁移能力的变化.分别使用0μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L浓度AG1478阻断胆管癌细胞ErbB4受体,使用Transwell小室法实验检测各组胆管癌细胞侵袭能力的变化.结果:AG1478以浓度依赖方式抑制QBC939细胞增殖,其IC50值为:49.14μmol/L;AG1478抑制ErbB4受体后,胆管癌QBC939细胞的迁移、侵袭能力减弱.结论:在体外抑制ErbB4受体能使胆管癌肿瘤细胞生长、迁移、侵袭能力减弱;ErBb4在胆管癌的发生、发展中具有重要的作用,ErbB4可能成为胆管癌分子治疗的新靶点.     

微小RNA-7-5p调控三叶因子3对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究三叶因子3（TFF3）基因在宫颈癌组织和正常组织中的表达情况,同时探讨微小RNA-7-5p（miR-7-5p）调控TFF3对人宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 实时聚合酶链反应检测TFF3在30例宫颈癌及其邻近正常组织中的表达;采用脂质体转染法将TFF3-siRNA、miR-7-5p转染入宫颈癌HeLa及SiHa细胞中。采用CCK-8、Transwell实验和平板克隆实验检测瞬时转染TFF3-siRNA及miR-7-5p mimics对宫颈癌细胞增殖、迁移及克隆形成能力的影响;并利用双荧光素酶报告实验检测miR-7-5p与TFF3的相互关系。结果 TFF3在73.33%（22/30）宫颈癌组织中表达量明显高于其邻近正常组织（P＜0.001）。与阴性对照组比较,TFF3 siRNA转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 3～5d后,细胞增殖明显受到抑制（P＜0.05）。Transwell细胞迁移实验表明： HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞分别为（170±15）个/高倍镜视野和（155±10）个/高倍镜视野,TFF3干扰组迁移细胞分别为（70±20）个/高倍镜视野和（54±8）个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制（P＜0.05）。克隆形成实验表明： HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数分别为（160±34）个和（183±17）个,TFF3干扰组细胞克隆数分别为（45±15）个和（33±12）个,形成能力明显减弱（P＜0.05）。荧光素报告系统表明miR-7-5p可抑制含野生型TFF3 3′UTR序列的荧光素酶活性（P＜0.01）,但对含突变型TFF3 3′UTR的荧光素酶活性影响不显著（P＞0.05）。与阴性对照组比较,miR-7-5p mimics转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 4～5d后,增殖明显受到抑制（P＜0.05）。Transwell细胞迁移实验表明： HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞为（364±48）个/高倍镜视野和（411±27）个/高倍镜视野,miR-7-5p mimics转染组迁移细胞为（165±15）个/高倍镜视野和（100±208）个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制（P＜0.05）。克隆形成实验表明： HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数为（83±11）个和（129±21）个,miR-7-5p mimics转染组细胞克隆数为（25±7）个和（14±8）个,形成能力明显减弱（P＜0.05）。结论 TFF3基因的异常高表达可能会对宫颈癌的发生发展起促进作用,miR-7-5p抑制宫颈癌细胞TFF3的表达或可为将来宫颈癌的靶向治疗提供一定的实验基础。