长链非编码RNA ROR在恶性肿瘤发生发展及治疗中的作用研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一种无或少有蛋白质编码能力的RNA,现已成为人们研究的热点。长链非编码RNA ROR(linc-ROR)是一种具有多种生物学功能的lncRNAs,被认为是影响人类肿瘤发生发展的关键调控因子,在细胞重编程过程中起到重要作用。此外,linc-ROR参与调节肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭等过程,在肿瘤的发生过程中具有重要作用。同时,linc-ROR在肿瘤细胞中高表达,linc-ROR可以通过不同的机制影响肿瘤的治疗效果,抑制linc-ROR表达会降低肿瘤细胞的治疗抵抗性。因此,研究linc-ROR的抑制药物有助于减少肿瘤细胞的治疗抵抗性,为肿瘤的治疗提供了新方向。     

YAP在食管癌组织中的表达及其意义

目的探讨YAP在食管组织中的表达及与食管癌发生发展的关系。方法在51例食管癌患者中,应用免疫组化及蛋白免疫印迹法检测YAP在食管癌组织、癌旁组织、正常食管组织中的表达情况。结果 YAP在食管癌组织中阳性表达率为31.4%(16/51),在正常食管组织和癌旁组织中阳性表达率分别为7.8%(4/51)和11.8(6/51)。食管癌组织中YAP的阳性表达率明显高于正常食管组织和癌旁组织(P<0.05),而癌旁组织和正常食管组织中YAP表达阳性率无统计学差异(P>0.05)。食管癌YAP表达阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期及淋巴结转移无相关性,而与食管癌低分化程度有关(P<0.05)。结论 YAP在食管癌中的高表达状态可能参与了食管癌的发生发展。     

Yap1相关的化疗耐药机制研究进展

随着化疗的推进,部分患者逐渐出现耐药现象,从而导致治疗中止或失败,因此逆转耐药已经成为肿瘤临床治疗中亟待解决的问题。Yes相关蛋白1(Yap1)在肿瘤发生、发展中发挥关键作用,下调Yap1表达能提高耐药后肿瘤的药物敏感性,减少或延缓耐药事件发生。Yap1主要通过增强肿瘤干细胞表型、促进上皮-间充质转化、抑制自噬、调节肿瘤微环境及基因表达来促进耐药的发生;通过Yap1抑制剂、自噬激活剂及其他相关因子调控剂联合应用能够在临床中延缓患者生存期,同时也可将Yap1作为预后、治疗监测指标辅助临床决策。     

凋亡抑制蛋白家族在食管癌分子靶向治疗中的研究进展

细胞凋亡与抗细胞凋亡信号通路在胚胎及淋巴细胞发育、免疫系统调控、组织稳定及肿瘤发生中发挥着重要作用.研究发现凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)在多种恶性肿瘤组织中高表达,并与肿瘤的发生、发展、放化疗抵抗性及预后密切相关,使其成为肿瘤分子靶向治疗的研究热点.近年来,多种靶向IAPs药物正在进行临床试验评估,并在试验中显示出较好的治疗前景.同样,IAPs在食管癌发生发展中有着重要的地位,使其成为食管癌分子靶向治疗潜在的靶点.本文主要对IAPs在食管癌分子靶向治疗的研究进展进行综述.     

Yes相关蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究结直肠癌变组织中Yes相关蛋白及mRNA的表达,探讨其临床意义.方法:收集2010-03/2011-03福建省南安市医院普外科及福建医科大学附属第一医院普外科80例结直肠癌患者术中切除的癌组织,同时收集20例癌旁组织和正常结直肠组织,应用免疫组织化学S-P法和原位杂交方法检测结直肠癌组织、癌旁组织和正常组织中Yes相关蛋白及mRNA的表达.原位杂交法和免疫组织化学S-P法均严格按照试剂盒说明操作.结果:结直肠癌组织中Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率分别为66.25%和68.75%,癌旁组织中Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率分别为20.0%和25.0%和正常结直肠黏膜组织Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率分别为10.0%和15.0%.结直肠癌组织中Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常结直肠黏膜组织(P<0.01),癌旁组织与正常结直肠黏膜组织中Yes相关蛋白及mRNA阳性表达率比较差别无统计学意义.Yes相关蛋白及mRNA阳性表达率与年龄、性别、肿瘤部位之间比较差异无统计学意义,但与肿瘤分化程度和肿瘤分期等之间比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01).结论:Yes...     

降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞增殖及小凹蛋白1表达的影响

目的观察降钙素基因相关肽在抑制血管平滑肌细胞增殖或肥大过程中是否伴有诱导其凋亡的作用,并探讨其作用机制是否涉及到血管平滑肌细胞内小凹蛋白1和caspase-3的变化。方法采用贴块法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,增殖或肥大型血管平滑肌细胞通过血管紧张素Ⅱ刺激静止期血管平滑肌细胞24 h建立。用噻唑蓝比色法和流式细胞仪分析血管平滑肌细胞增殖、凋亡及细胞周期变化,吖啶橙/溴化乙啶染色观察细胞及细胞核形态改变,Western blotting法测定不同状态下血管平滑肌细胞内小凹蛋白1和caspase-3的表达。结果降钙素基因相关肽能降低血管紧张素Ⅱ诱导的增殖型血管平滑肌细胞的代谢活性、细胞周期增殖指数(P<0.05);形态学及流式细胞仪分析表明降钙素基因相关肽对增殖型血管平滑肌细胞无明显的诱导凋亡作用。同时发现降钙素基因相关肽使血管平滑肌细胞内小凹蛋白1的表达增加,而对caspase-3的表达无明显影响。结论降钙素基因相关肽能显著抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖,但诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用较小;其抑制增殖的细胞内信号传导途径可能与增强小凹蛋白1表达有关。     

长链非编码RNA CDRT8通过调控YAP1表达对食管癌TE-1增殖的影响

目的探讨长链非编码RNA CDRT8在食管癌组织中的表达及其对食管癌细胞增殖的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测13对食管癌组织和癌旁组织,比较CDRT8的表达水平。设计并合成针对CDRT8的特异性短发卡RNA(shRNA)模板,构建CDRT8-shRNA重组质粒,转染TE-1细胞,以转染阴性对照质粒为对照组。流式细胞术检测细胞周期,噻唑蓝(MTT)比色法和集落形成实验分别检测细胞活力和增殖能力。qPCR和Western blot检测细胞中Yes相关蛋白1(YAP1)、细胞周期蛋白E(Cyclin E)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平。比较CDRT8-shRNZ组和对照组细胞周期进展情况、细胞活力、细胞增殖能力以及YAP1、Cyclin E和CDK2蛋白表达水平。结果食管癌组织中CDRT8表达水平显著高于癌旁组织(P0.01),CDRT8-shRNA组的CDRT8表达水平显著低于对照组(P0.05)。CDRT8-shRNA组细胞周期进展受到抑制(P0.05),细胞活力和增殖能力下降(P0.05),YAP1、Cyclin E和CDK2蛋白表达水平显著下调。结论 CDRT8在食管癌组织中呈高表达,干扰CDRT8表达可显著抑制TE-1细胞周期进展和细胞增殖,CDRT8可能通过YAP1基因参与调控食管癌的发生发展。     

凋亡相关蛋白在胃癌细胞凋亡中的作用研究

目的　研究核转录因子 (NF) κB、生存素 (survivin)、Bcl 2和Caspase3在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)诱导的胃癌细胞凋亡中的作用。方法　应用细胞培养和流式细胞仪检测的方法 ,观察胃癌细胞SGC 790 1、MKN2 8、AGS、MKN45经TRAIL作用后的细胞凋亡率 ,Westernblot方法分析 4种胃癌细胞中NF κB、生存素、Bcl 2和Caspase3的表达。结果　TRAIL 50ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 2 4.0 5% ,7.83 % ,8.0 5%和3 .17%。TRAIL 3 0 0ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 3 6.0 5% ,2 0 .2 7% ,16.50 %和 11.80 %。Westernblot结果显示 ,SGC 790 1细胞NF κB、生存素的表达高于MKN2 8细胞 (P <0 .0 5) ,与Bcl 2的表达无明显差异。MKN2 8细胞Caspase3的表达高于SGC 790 1细胞 (P <0 .0 5)。结论　TRAIL具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特性 ,肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象可能与凋亡抑制因子生存素和NF κB的表达增强以及Caspase3 的表达抑制有关     

自噬相关蛋白在白噬与凋亡中的作用及研究进展

上世纪中叶,随着电子显微镜的出现,两种与细胞命运息息相关的生理过程——自噬与凋亡被发现并命名,它们同时参与细胞损伤时的应激反应,并受到基因的严格调控。凋亡现象是多细胞生物面对生理或病理刺激时介导异常或不需要的细胞发生程序性死亡的过程,     

MTA1蛋白在Ⅱa期食管癌组织中的表达及意义

目的观察Ⅱa期食管癌中MTA1蛋白表达及与患者预后的关系。方法收集55例Ⅱa期食管癌患者手术切除标本,采用免疫组化SP法检测MTA1蛋白表达情况,随访2 a观察纵隔淋巴结转移复发情况。结果食管癌组织中MTA1蛋白表达阳性30例、阴性25例,随访2 a分别有17例、5例出现术后纵隔淋巴结转移复发,MTA1蛋白表达阳性者复发率显著高于阴性者,P〈0.05（2χ=0.012 9）;MTA1蛋白表达与肿瘤低分化及淋巴结转移复发均呈显著正相关（r=0.319、0.373）。结论Ⅱa期食管癌组织中存在MTA1蛋白过表达,且与术后肿瘤纵隔淋巴结转移复发有关;此对Ⅱa期食管癌患者预后分析和术后辅助治疗有重要指导意义。     

沉默小窝蛋白1对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响

目的探讨小窝蛋白1(Cav1)对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响。方法通过慢病毒载体构建Cav1沉默的小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞株和小鼠原代胰岛(Cav1-shRNA组),以空载体病毒组作为对照组(Ctrl-shRNA),并设空白对照组,各组均分别加入脱脂牛血清白蛋白和棕榈酸(0.5 mmol/L)处理24 h及48 h,通过四甲基偶氮唑蓝比色法及Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞活性及细胞凋亡,实时荧光定量PCR、Western blot检测凋亡相关的mRNA及蛋白表达水平。结果采用t检验和单因素方差分析法进行统计学分析。结果与对照组比较,棕榈酸处理组的细胞存活率显著下降(0.89±0.10比0.24±0.04,t=13.49,P<0.01),P18、P19的mRNA和蛋白表达均上调(1.00±0.09比1.30±0.04、1.00±0.04比1.37±0.13,t=5.28、4.71,均P<0.05;0.87±0.04比1.48±0.05、1.02±0.06比1.41±0.07,t=16.50、7.33,均P<0.01);含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-6、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平明显上调(1.00±0.04比1.57±0.08、1.01±0.15比1.57±0.20、1.02±0.19比1.57±0.09,t=11.04、3.88、4.53,均P<0.05),蛋白表达也明显上调(0.86±0.10比1.28±0.11、0.69±0.01比0.86±0.06、0.70±0.02比1.18±0.01,t=4.89、4.84、37.18,均P<0.01)。而Cav1-shRNA+棕榈酸组细胞存活率较Ctrl-shRNA+棕榈酸组显著上升(0.53±0.10比0.26±0.08,t=4.71,P<0.01),P19的mRNA和蛋白表达均下调(1.53±0.18比0.66±0.04、1.48±0.05比0.70±0.02,t=8.17、25.09,均P<0.01);Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平下调(1.82±0.11比1.03±0.07、1.43±0.24比0.42±0.15、1.41±0.22比0.51±0.18、1.45±0.18比0.42±0.13,t=5.48~10.49,均P<0.01),蛋白表达也下调(0.99±0.14比0.63±0.11、0.90±0.14比0.62±0.04、0.90±0.02比0.60±0.04、1.30±0.01比0.65±0.04,t=3.50~27.31,均P<0.01)。结论Cav1沉默可以通过影响胰岛β细胞Caspase家族,促进其增殖、减少棕榈酸作用下的β细胞凋亡,保护脂毒性下胰岛β细胞活性。     

KAP1在恶性肿瘤发生、发展及治疗中作用的研究进展

恶性肿瘤是当前威胁人类健康的重要疾病,其整体发病率和死亡率均较高,并且呈现逐年上升趋势。深入研究恶性肿瘤的发病机制对其早期诊断和治疗以及预后改善至关重要。KRAB相关蛋白1(KAP1)是一个多功能蛋白质,能够参与基因转录抑制、DNA损伤修复、免疫调节、胚胎发育以及病毒感染等。越来越多研究发现,KAP1在多种恶性肿瘤细胞中高表达,并通过调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学行为,参与恶性肿瘤的发生、发展,同时在肿瘤治疗耐药和免疫治疗中发挥一定作用。但目前KAP1促进恶性肿瘤发生、发展的机制尚不完全清楚,仍需进一步研究。     

PIM1对老年食管癌患者癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨PIM1对老年食管癌患者癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将RNAi重组质粒(PIM1-shRNA-3)经脂质体介导转染食管癌ECA-109细胞株。PIM1基因沉默(PPIM1-shRNA-3)稳定转染的ECA-109细胞(转染组),用空质粒载体稳定转染的ECA-109细胞(空白转染组)和正常培养的ECA-109细胞(对照组)作为对照进行体外研究。通过细胞计数法绘制细胞生长曲线图,RT-PCR法测量PIM1基因表达水平,CCK-8法计算其增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI流式法和TUNEL法测算凋亡情况来检测细胞的增殖能力。结果载体成功转入到食管癌细胞中并表达,转染组ECA-109细胞数量减少;转染组肿瘤细胞PIM1基因表达水平明显低于空白转染组和对照组(P<0.05),且转染组PIM1 mRNA相对表达与空白转染组和对照组相比显著降低(P<0.05);相比空白转染组和对照组,ECA-109细胞计数和增殖能力在转染组明显降低(P<0.05);与空白转染组和对照组比较,转染组细胞的细胞抑制率明显升高,P<0.05;TUNEL和Annexin V-FITC/PI法检测结果表明:PIM1基因沉默可促进细胞的凋亡反应,进而抑制细胞的增殖水平。结论食管癌ECA-109细胞株可通过PIM1基因沉默抑制增殖,增加凋亡。     

PKCδ及相关信号通路在NASH发生中作用的研究进展

蛋白激酶Cδ(PKCδ)是非典型PKC家族成员,广泛参与细胞功能的调节.作为信息分子,PKCδ在多种细胞外刺激因素诱导的胞内信号转导通路中发挥着重要的作用,除了常见的诱导细胞凋亡作用之外,PKCδ还参与胰岛素敏感性、内质网应激的调节过程,与非酒精性脂肪性肝炎(NASH)密切相关.     

C反应蛋白在预测食管癌患者放射性肺损伤中的作用

目的检测食管癌患者放疗前、中、后血浆中CRP的变化,探讨CRP对放射性肺炎的预测价值。方法66例经病理证实的食管鳞癌患者,采用Elekta-precise计划系统制定三维适形放疗计划,处方剂量为50~70 Gy,并采集相关物理学数据,通过三维适形计划中的剂量体积直方图来获得肺的V 5、V 10、V 20及正常组织并发症概率(NTCP)等数据。根据胸部CT、患者的呼吸道症状和体征来对肺损伤状况进行评价。据RTOG定义的Lent-Soma量表来对肺损伤的严重程度进行分级。用全自动生化分析仪检测放疗前、放疗中(40 Gy)、放疗结束时、放疗结束后1个月及结束后3个月时血浆中CRP水平。统计学数据采用单因素分析、多因素分析、t检验。结果66例患者中31.82%(21/66)的患者发生放射性肺损伤,其中1级24.24%(16/66),≥2级7.58%(5/66)。发生急性放射性肺损伤患者血浆中CRP水平在放疗中及放疗后较未发生放射性肺损伤的患者升高(P<0.05)。对患者一般资料单因素分析提示:放射剂量≥60 Gy、紫杉类药物应用者更易发生放射性肺损伤。结论在严格限制肺受照剂量和药物应用的情况下,CRP可作为放射性肺损伤的预测因子。     

糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达研究

目的　研究实验性糖尿病大鼠心肌细胞凋亡以及凋亡相关蛋白的表达。方法　链脲菌素 (STZ)法复制SD大鼠实验性糖尿病模型。于模型成功后 30、4 5、6 0、75及 90d取材。原位末端标记法 (TUNEL)和免疫组化法检测细胞凋亡及心肌组织中凋亡相关蛋白的表达变化。结果　健康对照大鼠心肌仅有少量凋亡细胞 ,p5 3、Fas和Bcl 2的免疫反应阳性 ,Bax免疫反应阴性。糖尿病 30d后 ,心肌的凋亡细胞阳性指数开始升高 ,糖尿病 90d仍持续较高水平。p5 3、Fas、Bcl -2和Bax分别于糖尿病 4 5d、4 5d、4 5d和 30d开始升高 ,并于糖尿病 6 0d、75d、75d和 6 0d达高峰。结论　糖尿病大鼠心肌细胞凋亡增加 ,凋亡相关蛋白的表达水平也增加。     

小凹蛋白1在动脉粥样硬化中的作用

小凹是细胞表面胞膜穴样内陷,小凹蛋白为小凹的主要组成成分。其中小凹蛋白1在单核/巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞中均有表达,在动脉粥样硬化形成发展过程中发挥重要而广泛的作用。     

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6在肥胖及胰岛素抵抗中的研究进展

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)是CTRP超家族中的一员,诸多研究证明,CTRP在胰岛素抵抗及肥胖的形成中起到重要作用,因而研究其参与的作用及具体机制,有助于为胰岛素抵抗及肥胖的治疗指明方向。文章主要对CTRP6的结构、分布及其促进胰岛素抵抗与肥胖的相关生理功能的研究进展进行综述。     

沉默调节蛋白1在非酒精性脂肪性肝病发生发展中的作用

沉默调节蛋白1(SIRT1)为Sirtuin家族的一员,是依赖于烟酰腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的去乙酰化酶,其主要作用是参与能量代谢﹑细胞生存、衰老及凋亡。而非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种与胰岛素抵抗、氧化应激及脂质过氧化等密切相关的慢性肝脏疾病。从SIRT1与NAFLD者的能量代谢关系﹑SIRT1与氧化应激、脂质过氧化、内质网应激等方面进行了阐述,认为SIRT1与NAFLD的发生发展密切相关。