瘦素对缺氧复氧L02肝细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响

目的： 观察瘦素(leptin)对缺氧复氧人正常肝细胞（L02）凋亡的影响。方法: 将L02细胞分别分为正常对照组、单纯缺氧12 h复氧组(IR组)和缺氧12 h复氧加不同浓度的瘦素（分别为100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L、800 μg/L 和1 600 μg/L）干预组, 以流式细胞仪分析、DNA缺口末端标记 (TUNEL) 试验、荧光定量 PCR 等方法观察leptin 对L02肝细胞凋亡、Fas/FasL mRNA表达的影响。结果: （1）与正常对照组相比,IR组细胞凋亡率和TUNEL细胞阳性率增加（P<0.01）,加用不同浓度瘦素干预组的细胞凋亡率和TUNEL细胞阳性率与IR组相比明显下降（P<0.05）;（2）与正常对照组相比,IR组 L02 细胞中Fas/FasL mRNA表达明显上调(P<0.01);加用不同浓度瘦素干预组与IR组相比,Fas/FasL mRNA表达下降,以400 μg/L瘦素作用明显,结果有显著差异（P<0.05）。结论: 瘦素能减轻缺氧复氧培养L02肝细胞的凋亡,其机制可能与其下调细胞中Fas/FasL mRNA的表达有关。     

瘦素、纤连蛋白对早孕绒毛滋养细胞分泌基质金属蛋白酶的影响

目的探讨瘦素、纤连蛋白对早孕绒毛滋养细胞分泌基质金属蛋白酶的影响及其作用。方法从孕6-8周的人工流产胚胎绒毛中分离、纯化出细胞滋养细胞(CTB)体外培养,在transwell上室CTB培养液中分别加入不同浓度lep-tin,在transwell下室中加入50μg/mlFN,采用明胶酶谱分析法检测培养液中CTB分泌的MMP-2、MMP-9值并进行比较。结果FN组、协同组分泌的MMP-2,9显著高于对照组(P0.05),协同组又高于单加leptin或FN组(P0.05)。结论leptin、FN均具有促进CTB分泌MMPs的作用,且leptin与FN协同作用,更加强了CTB对MMPs的分泌,从而参予调控CTB的浸润能力。     

肝素、IGFBP-4及IGF-1对肺成纤维细胞糖代谢及功能的影响

目的：探讨类胰岛素生长因子（IGF-1）及其结合蛋白-4（IGFBP-4）、肝素在肺纤维化形成过程中的相互关系。方法：选择二倍体人胚肺成纤维细胞（lung fibroblast,LF）株，分别给予100 μg/L IGF-1、100 μg/L IGF-1+100 μg/L IGFBP-4、100 μg/L IGF-1+200 μg/L IGFBP-4、100 μg/L IGF-1+100 μg/L IGFBP-4+100 μg/L肝素、100 μg/L IGF-1+100 μg/L IGFBP-4+200 μg/L肝素、100 μg/L IGF-1+100 μg/L肝素、100 μg/L IGF-1+200 μg/L肝素刺激24 h。检测细胞外弹性蛋白、胶原蛋白及细胞内葡萄糖转运蛋白-4（GLUT-4）、己糖激酶-2（HK-2）的含量。结果：与空白对照组相比，IGF-1组HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达增强（P<0.05）；加入IGFBP-4以后HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达明显强于IGF-1组（P<0.05）；而同时加入肝素与IGFBP-4后HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达明显抑制（P<0.05），并且这一抑制效应随肝素用量增加而更加明显；但单加肝素时HK-2及GLUT-4mRNA及相关蛋白表达抑制不如前组明显（P<0.05）。结论：（1） IGF-1能够刺激肺成纤维细胞的糖代谢，使HK-2及GLUT-4mRNA及细胞外基质（ECM）蛋白表达增强；（2）单纯增加IGFBP-4不仅不能抑制IGF-1的刺激作用，反而增加HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达，可能与IGFBP-4的降解有关；（3）IGFBP-4在肝素存在的情况下，能明显抑制IGF-1对肺成纤维细胞的刺激作用，使HK-2及GLUT-4及细胞外基质蛋白表达明显减少，说明肝素以及未被降解的IGFBP-4对肺纤维化可能是有效的防护因子。     

LPS诱导MC3T3-E1成骨细胞增殖并增加NF-κB p65蛋白的表达

目的： 研究LPS-NF-κB信号通路在骨形成过程中的作用。方法: MC3T3-E1成骨细胞常规培养,待细胞融合率为80%时,分别加入100 μg/L和500 μg/L LPS处理6 h。流式细胞仪检测细胞周期,计算细胞DNA相对增殖指数;RT-PCR法检测LPS处理成骨细胞后NF-κB mRNA的表达;蛋白质印迹法（Western blotting）检测LPS处理成骨细胞后NF-κB p65蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测LPS处理成骨细胞后NF-κB p65的核易位情况;电泳迁移率变动分析（EMSA）LPS处理MC3T3-E1细胞后NF-κB活力的变化情况。结果: 100 μg/L和500 μg/L LPS可诱导MC3T3-E1成骨细胞增殖;LPS处理成骨细胞后NF-κB mRNA的表达与正常组比较无显著变化（P>0.05）,而NF-κB p65蛋白的表达明显高于对照组（P<0.01）;LPS处理成骨细胞后免疫荧光法可明显观察到NF-κB p65从细胞质转移入细胞核,且EMSA结果显示LPS处理组细胞核内NF-κB结合活性增加。结论: 低浓度的LPS可促使成骨细胞增殖,此过程中并不影响NF-κB p65的基因表达水平,但能增加NF-κB p65蛋白的表达并提高细胞核内NF-κB的结合活性。     

瘦素促进低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞增殖及HIF-1α、NF-κB表达

目的研究瘦素对低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法分常氧、低氧2种状态体外培养大鼠ASMC,按随机数字表法将低氧组细胞分为低氧组、50μg/L瘦素联合低氧组(L50组)、100μg/L瘦素联合低氧组(L100组)、200μg/L瘦素联合低氧组(L200组)、200μg/L瘦素联合低氧和瘦素受体抗体组(ob-R抗体组)。各组均孵育24 h,CCK-8法检测细胞增殖率,反转录PCR检测HIF-1α、NF-κB的mRNA的表达,Western blot法检测HIF-1α、NF-κB的蛋白表达。结果与常氧组相比,各低氧组细胞增殖活性明显增强;与低氧组相比,L50、L100、L200组细胞增殖活性增强,并与浓度呈正相关(r=0.992);与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组细胞增殖明显降低。与常氧组相比,各低氧组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加;与低氧组相比,L50、L100、L200组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加,并与浓度呈正相关;与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达降低。结论瘦素能促进低氧状态下ASMC增殖,并且能够促进HIF-1α、NF-κB的表达。     

NF-κB信号通路介导AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞表达MMP-9

目的： 探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导人单核/巨噬细胞（THP-1细胞）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的机制。方法: 用0.1 μmol/L佛波酯（PMA）作用48 h,诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞后,随机分为4组：（1）PMA组,即对照组;（2）PMA+AngⅡ组（10-7mol/L,1 h）;（3）PMA+AngⅡ+2-硫代氨基甲酸吡咯烷组［PDTC（10 μmol/L,30 min）］;（4）PDTC组。用Western blotting蛋白印记技术分别检测总蛋白MMP-9及磷酸化核转录因子-κB p65（NF-κB p65）的变化,用RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达的变化。结果: 与对照组相比,AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞磷酸化NF-κB p65增加（1.02±0.10,P<0.05）,MMP-9蛋白量也增加（1.06 ±0.11,P<0.05）,MMP-9 mRNA表达上调（1.22±0.08,P<0.05）,而使用NF-κB的抑制剂PDTC后磷酸化NF-κB p65（0.99±0.12,P<0.01）减少,MMP-9表达明显受到抑制（1.04±0.14, P<0.01）,MMP-9 mRNA表达下调（0.90±0.06, P<0.01）。结论: NF-κB信号转导途径是AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞表达MMP-9的重要途径之一。     

人A-549细胞中锌与锌转运体表达的关系

目的： 通过ZnCl2和膜渗透性特异锌螯合剂(TPEN)处理人肺癌细胞株A-549,观察高锌和低锌条件下锌转运体在mRNA水平的表达情况。方法: 0、50、100、150、200 μmol/L ZnCl2 以及0、5、10、15、20 μmol/L TPEN分别处理人肺癌细胞株A-549细胞12 h,细胞存活率用MTT（噻唑蓝）方法检测;zinquin（荧光锌离子探针）检测细胞内锌离子含量;RT-PCR方法检测锌转运体mRNA的表达。结果: ZnCl2浓度为150 μmol/L和200 μmol/L以及TPEN对A-549细胞均有明显抑制生长作用;ZnCl2处理后的A-549细胞内锌离子含量显著升高,TPEN处理的A-549细胞内锌离子含量降低。与对照组相比,ZnCl2处理的细胞ZnT-1（锌转运体）mRNA表达量普遍升高;TPEN处理的细胞ZnT-1mRNA表达水平依次降低;ZIP-1（锌铁调控样蛋白）mRNA的表达水平随ZnCl2浓度增加而依次降低,随TPEN浓度的增加而依次升高;ZIP-10 mRNA的表达水平随ZnCl2浓度增加而依次降低,TPEN处理后普遍增加。结论: 高锌促进人肺癌A-549细胞ZnT-1mRNA的表达,抑制ZIP-1 和ZIP-10 mRNA的表达;低锌促进人肺癌A-549细胞ZIP-1 和ZIP-10 mRNA的表达。     

单核细胞趋化蛋白-1经细胞外信号调节激酶通路对肺癌A549细胞 增殖、侵袭转移的影响及机制*

目的：研究单核细胞趋化蛋白-1（ MCP-1）对非小细胞肺癌增殖、侵袭转移能力的影响及可能的作用 机制。方法：体外培养肺癌细胞株A549。细胞分为对照组,MCP-1 组（25、50、75、100 ng/mL）,MCP-1 （75 ng/mL）+PD98059 组（100 μmol/mL）,抑制剂PD98059 组（100 μmol/L）。MTT 法检测细胞增殖活力,细胞划痕、 Transwell 侵袭实验分析细胞迁移侵袭能力。免疫印迹检测细胞外信号调节激酶（ t-ERK）、磷酸化细胞外信号调 节激酶（ p-ERK）、基质金属蛋白酶-14（ MMP-14）、基质金属蛋白酶-2（ MMP-2）及N- 钙黏蛋白（ N-cadherin） 的表达。结果：与对照组相比,MCP-1 明显促进A549 细胞的增殖、侵袭与转移;免疫印迹结果显示,MCP-1 可 上调p-ERK、MMP-14、MMP-2 及N-cadherin 蛋白的表达;应用ERK抑制剂PD98059 可阻断上述作用。ERK总 蛋白表达量差异无统计学意义。结论：MCP-1 经ERK通路上调MMP-14、MMP-2 及N-cadherin 蛋白表达,促进 肺癌A549 细胞增殖、侵袭与转移。     

溶血磷脂酸对基质金属蛋白酶-9表达及活性的影响

目的观察溶血磷脂酸（Lysophosphatidie Acid,LPA）对人单核细胞株THP-1细胞基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases-9）表达及活性和NF-κB p65表达活性的影响,探讨MMP-9在LPA致动脉粥样硬化中的作用及机制。方法以不同浓度水平LPA（0-10μmol/L）刺激人THP-1细胞4h,RT-PCR法测定MMP-9mRNA表达,酶谱法检测MMP-9活性,westernblot检测核蛋白NF-κB p65表达变化。结果随着LPA剂量的增加,MMP-9表达及活性,核蛋白NF-κB p65表达逐渐增强,在LPA1μmol/L时达到最高点,然后逐渐减弱,LPA以剂量依赖的方式激活NF-κB,上调THP-1细胞MMP-9表达,增加MMP-9活性。结论LPA可能通过激活NF-κB,在转录水平促进THP-1细胞MMP-9mRNA表达,并增强其活性,促进粥样硬化发生和发展。     

力生长因子E肽对前交叉韧带成纤维细胞活力、迁移与侵袭的影响

目的研究力生长因子(mechano-growth factor,MGF)E肽对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)成纤维细胞活力、迁移与侵袭的影响。方法以ACL成纤维细胞为研究对象:(1)经不同浓度(0、10和100μg/L)MGF E肽处理细胞24 h后,去除培养基,换成1%血清浓度DMEM低糖培养基培养6和30 h后,检测细胞活力、DNA含量、细胞凋亡、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性变化及I型胶原(COL I)、III型胶原(COL III)mRNA表达;(2)使用不同浓度(0、5、10、20、50和100μg/L)MGF E肽处理ACL成纤维细胞48 h后,检测细胞活力与MMP-2活性,并利用划痕实验与Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭能力。结果 (1)6 h时,10μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-2、MMP-9活性,对细胞活力、增殖、凋亡及COL I、COL III mRNA表达无影响。100μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-2、MMP-9活性,并提高了COL I、COL III mRNA表达,但对细胞活力、增殖、凋亡无影响。30 h时,10μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-9活性及COL I、COL III mRNA表达,对细胞活力、增殖、MMP-2活性及细胞凋亡无影响。100μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-9活性及COL III mRNA表达,但对细胞活力、增殖、MMP-2活性、细胞凋亡、COL I mRNA表达无显著性调控作用。(2)MGF E肽显著促进ACL成纤维细胞的迁移与侵袭,且呈一定程度浓度依赖性;迁移与侵袭过程可能依赖于MMP-2活性。结论 MGF E肽能够促进ACL成纤维细胞胞外基质的合成与降解,进一步提高了细胞的迁移与侵袭,有助于组织损伤修复过程中成纤维细胞向损伤部位迁移,对ACL组织修复再生与术后康复具有积极的调控作用。     

阿司匹林对TNF-α诱导人早孕滋养细胞增殖和侵袭的影响及机制

目的:采用体外细胞模型探讨阿司匹林促进人早孕滋养细胞增殖和侵袭在预防子痫前期(preeclampsia,PE)发生中的作用及机制。方法:收集PE病例20例和正常孕妇作为对照20例;HE染色观察胎盘组织病理改变;ELISA法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)及MMP-9的含量。体外培养人早孕滋养细胞HTR-8/SVneo,分别加入不同浓度的阿司匹林和肿瘤坏死因子α(TNF-α);CCK-8法检测细胞活力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达水平。结果:PE组胎盘组织存在子宫螺旋动脉血管重铸障碍,且孕妇血清中MMP-2及MMP-9浓度明显低于对照组(P0.05)。体外早孕滋养细胞系实验表明,与对照组比较,0.1 mmol/L阿司匹林明显增加细胞活力,且可缓解TNF-α引起的细胞活力降低(P0.05);TNF-α处理滋养细胞后,细胞cyclin D1及PCNA蛋白表达水平显著下降,侵袭能力减弱,培养上清液中MMP-2和MMP-9表达水平及活性均明显下降(P0.05);同时给予0.1 mmol/L阿司匹林和TNF-α处理后,滋养细胞cyclin D1及PCNA蛋白表达水平显著增高,侵袭能力增强,培养上清液中MMP-2和MMP-9表达水平及活性均明显上升(P0.05)。结论:小剂量阿司匹林可以促进绒毛滋养细胞增殖和侵袭,可能有利于改善PE胎盘浅着床和子宫螺旋动脉重铸异常情况。这为阿司匹林预防PE的发生提供实验依据。     

Distribution patterns of matrix metalloproteinase (MMP)-2 and -9 and their inhibitors (TIMP-1 and TIMP-2) in the human decidua during early pregnancy

Early human trophoblast shows dramatic invasive properties during early pregnancy. A tightly-regulated activation of matrix metalloproteinases (MMPs) is considered to be of critical importance for the control of trophoblast invasion. The aim of the present study was to determine MMP-2, MMP-9, TIMP-1 and TIMP-2 protein expression in decidual endometrium during the first trimester of pregnancy (22-42 days post coitus) with special attention to their expression patterns in endometrial compartments. Cytokeratin staining applied to adjacent sections was used to identify epithelial and trophoblast cells. We observed that MMP-2, particularly in the fourth week, appeared to be expressed more strongly in extravillous trophoblasts (EVTs) and vascular endothelial cells in the first trimester of pregnancy. Therefore, MMP-2 is likely to be the primary mediator in invasion of the trophoblast into the decidual endometrium, as well as in vascular remodeling and angiogenesis in the first trimester of pregnancy. The high expression of TIMP-1 and TIMP-2 in EVTs and glandular epithelium suggests that a restricted and balanced expression of these molecules is important for matrix remodeling and controlled trophoblast invasion during placentation. We conclude that (1) MMP-2 and MMP-9 and their inhibitors TIMP-1, and TIMP-2 determine the invasive behavior of trophoblast into the endometrium, and in particular, (2) MMP-2 may be the key regulator of trophoblast invasion in early human pregnancy.     

Progesterone Inhibits Leptin-Induced Invasiveness of BeWo Cells

Background: This study investigated the roles of progesterone and leptin in placenta invasion, which is closely related to pregnancy prognosis. We examined the effects of leptin and progesterone on the invasion of BeWo cells, a human trophoblastic cell line, and the effect of concurrent treatment.Methods: Cells were treated with leptin (0, 5, 50, or 500 ng/mL) or progesterone (0, 2, 20, or 200 µM) and cultured in an invasion assay. Cells treated with 500 ng/mL leptin were also treated with progesterone (0, 2, 20, or 200 µM) in the invasion assay for 48 h. The number of cells that invaded the lower surface was counted in five randomly chosen fields using a light microscope with a 200× objective. The mRNA expression levels of MMP-9, TIMP1, TIMP2, and E-cadherin were detected by semi-quantitative PCR.Results: Invasion of BeWo cells was promoted by leptin and influenced by both leptin concentration and treatment duration. Invasion was most effective at 500 ng/mL leptin and 48 h culture. Leptin-induced invasiveness was suppressed by progesterone in a dose-dependent manner. Leptin significantly decreased the expression levels of TIMP1 and E-cadherin, whereas progesterone significantly decreased expression of MMP-9 and significantly increased levels of TIMP1, TIMP2, and E-cadherin.Conclusions: Leptin promotes invasion of BeWo cells, and progesterone suppresses leptin-induced invasion by regulating the expressions of MMP-9, TIMP1, TIMP2, and E-cadherin. The balance between leptin and progesterone may play an important role in human placenta formation during early pregnancy.     

Vascular endothelial growth factor, epidermal growth factor and fibroblast growth factor-4 and -10 stimulate trophoblast plasminogen activator system and metalloproteinase-9

Trophoblast invasion, accompanied by degradation of extracellular matrix, is crucial to normal pregnancy development, whereas shallow placental invasion and implantation likely plays a role in the subsequent development of pre-eclampsia. The growth factors vascular endothelial growth factor (VEGF), epidermal growth factor (EGF) and fibroblast growth factor (FGF) are placental growth factors that activate degradation of extracellular matrix. We determined the effect of VEGF, EGF, FGF-2, FGF-4 and FGF-10 on the plasminogen activator system of first trimester cytotrophoblasts cultured in vitro. We studied the activity of urokinase plasminogen activator (uPA), its inhibitor plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1), and 92 kDa gelatinase-B (matrix metalloproteinase-9, MMP-9), using protein gel and reversed gel zymography. The expression pattern of FGF-4 and FGF-10 in human placental sections was determined by immunohistochemistry. FGF-4 was expressed in first trimester villi stroma, primarily in endothelial cells. FGF-10 expression was localized to first trimester extravillous trophoblasts. VEGF, EGF, FGF-4 and FGF-10, but not FGF-2, stimulate the activity of trophoblast uPA, PAI-1 and MMP-9. These results support the hypothesis that specific growth factors modulate the invasive potential of trophoblasts, and therefore may play an important role in early placental development. Our findings may contribute to the understanding of the pathophysiology of diseases associated with shallow placentation, such as pre-eclampsia.     

低分子肝素抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡

目的：探讨低分子肝素对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的作用机制。方法： 应用“neurobasal 加 B27 supplement”体外培养大鼠大脑皮层神经细胞，并在缺氧条件下使用Hoechst 33342荧光染色法、免疫细胞化学染色法观察低分子肝素对原代神经细胞的抗凋亡作用。结果： 在250-500 U/L的浓度范围內，低分子肝素能降低缺氧诱导的神经细胞凋亡率（P<0.05），并且较BDNF（50 μg/L）抗凋亡阳性对照组的凋亡率更低（P<0.05）。低分子肝素（500 U/L）增加缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白的表达（P<0.05），减少Bax蛋白的表达（P<0.01），提高Bcl-2/Bax比值（P<0.01）。低分子肝素500 U/L组的Bcl-2/Bax比值比正常对照组、BDNF抗凋亡阳性对照组和凋亡阳性组都高（P<0.05）。结论： 低分子肝素通过上调缺氧神经细胞Bcl-2表达和下调Bax表达，提高Bcl-2/Bax比值减少缺氧的神经细胞凋亡。     

脂多糖通过NF-κB途径上调大鼠腹膜间皮细胞表达CD40和ICAM-1

目的 观察脂多糖(LPS)作用下大鼠腹膜间皮细胞NF-κB活性及其对CD40和细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响.方法 分离及培养大鼠腹膜间皮细胞.LPS不同浓度作用12 h 及LPS (5 μg/ml)作用不同时间点收集细胞;LPS(5 μg/ml)或BAY11-7085(一种IκBα的磷酸化抑制剂)不同浓度(1 μmol/L和5 μmol/L)预处理3 h加LPS,作用3 h后收集细胞;采用RT-PCR方法检测CD40和ICAM-1 mRNA表达.采用蛋白印迹检测NF-κB和磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达.结果 与常规培养基对照组相比,5 μg/ml LPS组CD40和ICAM-1 mRNA表达显著升高(P<0.05),10 μg/ml LPS组显著高于5 μg/ml LPS作用组(P<0.05).5 μg/ml LPS 作用下,ICAM-1 mRNA表达从1 h开始升高,3 h达到高峰,之后逐渐降低.CD40 mRNA表达在1 h无显著变化,3 h时迅速达到高峰,之后逐渐降低.常规培养的大鼠腹膜间皮细胞结构性表达p-NF-κB蛋白;加入LPS后,p-NF-κB蛋白表达显著增加,其中30 min～1 h表达最强,之后逐渐降低,至2 h仍显著高于常规培养组(P<0.05).加入5 μmol/L BAY11-7085后,LPS诱导的CD40和ICAM-1 mRNA表达显著降低(P<0.05),与正常对照组相比差异无统计学意义. 结论 LPS以时间依赖和浓度依赖模式上调CD40和ICAM-1的表达.NF-κB信号途径参与调节LPS诱导的大鼠腹膜间皮细胞CD40和ICAM-1的表达.     

bFGF对人退变椎间盘髓核细胞影响的临床研究

目的:探讨bFGF对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响,观察退变髓核细胞基因表达量高于正常髓核细胞的生长刺激因子对退变髓核细胞的影响。方法:分离、培养人退变椎间盘髓核细胞,取第2代髓核细胞,随机将退变椎间盘髓核细胞分为5组。A组:加入100μg/L bFGF;B组:加入200μg/L bFGF;C组:500μg/L bFGF;D组:1 000μg/LbFGF,E组:对照组,不加干扰因素。通过对试验组和对照组髓核细胞测定细胞II型胶原和糖胺多糖的mRNA表达;检测细胞外基质II型胶原和糖胺多糖表达水平。结果:bFGF刺激退变髓核细胞,II型胶原、糖胺多糖mRNA,细胞外液Ⅱ型胶原和糖胺多糖含量在第7天较对照组增加明显(P<0.05)。14 d、21 d II型胶原、糖胺多糖mRNA明显低于对照组(P<0.05)。但细胞外液Ⅱ型胶原和糖胺多糖含量在14 d、21 d两个时间点仍高于正常组(P<0.05)。结论:根据本研究结果结合文献调研,bFGF在椎间盘髓核细胞中存在着双重效应(促进或改善椎间盘退变)。