胃癌中lncRNA HOXA-AS2的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 分析lncRNA HOXA-AS2在胃癌组织中的表达水平及其对胃癌恶性生物学的影响。方法 采用qPCR方法检测胃癌组织和胃癌细胞系中lncRNA HOXA-AS2的表达水平;通过生物信息分析在线网站Kaplan-Meier Plotter 分析lncRNA HOXA-AS2对胃癌患者预后的影响;分析lncRNA HOXA-AS2表达水平与胃癌患者临床病理特征之间的关系;构建干扰lncRNA HOXA-AS2表达的细胞株,利用CCK-8、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、分析下调lncRNA HOXA-AS2对胃癌细胞增殖能力,迁移能力,侵袭能力的影响。结果 与癌旁组织比较,胃癌组织中lncRNA HOXA-AS2的表达水平显著上调;与人正常胃黏膜细胞GES比较,胃癌细胞系中lncRNA HOXA-AS2的表达水平显著升高(P＜0.05);生存分析表明,lncRNA HOXA-AS2的高表达与胃癌患者的不良预后相关;lncRNA HOXA-AS2的表达水平与胃癌分期,淋巴结转移和分化程度相关(P＜0.05);转染siRNA的胃癌细胞中lncRNA HOXA-AS2的表达水平显著下降(P＜0.05),其细胞增殖、迁移和侵袭能力也显著下降(P＜0.05)。结论 lncRNA HOXA-AS2在胃癌中发挥癌基因的作用且与预后相关,下调lncRNA HOXA-AS2的表达可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

“cell-in-cell”对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 探究胃癌肿瘤细胞与免疫细胞cell-in-cell的形成对胃癌细胞生物学行为的影响。 方法 胃癌细胞与单核淋巴细胞（PBMC）的共培养体系分为对照组、1∶1组和5∶1组。PBMC和BGC823细胞分别以1∶1和5∶1的接种到24 孔板中（共5×10 4个）。通过吉姆萨染色检测“cell-in-cell”构建情况。分别检测各组细胞增殖、凋亡和侵袭能力。 结果 1∶1组的“cell-in-cell”构建率为（8.65±1.06）%。5∶1组的“cell-in-cell”构建率为（12.92±1.32）%,显著高于1∶1组（P＜0.05）。3组细胞的生物学行为水平比较差异显著（P＜0.05）。1∶1组的增殖和侵袭能力显著高于对照组,而凋亡率显著低于对照组（P＜0.05）。5∶1组的增殖和侵袭能力显著高于1∶1组和对照组,而凋亡率显著低于1∶1组和对照组（P＜0.05）。 结论 胃癌细胞与免疫细胞形成的“cell-in-cell”结构会促进胃癌细胞的增殖和侵袭并抑制凋亡。     

调控miR-642a-5p表达对宫颈癌HeLa细胞生物学行为的影响及机制研究

目的:探究调控微小RNA(miR)-642a-5p表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法:通过转染不同质粒将Hela细胞分为miR-642a-5p mimic组、miR-642a-5p mimic NC组,以未做任何处理的Hela细胞作为对照组。RT-qPCR法检测miR-642a-5p、NF-κB mRNA的表达水平,Western blot法检测NF-κB p65蛋白的表达水平,MTT法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:与对照组、miR-642a-5p mimic NC组比较,miR-642a-5p mimic组miR-642a-5p的表达量及细胞凋亡率升高,NF-κB mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平及转染24、48 h的细胞增殖活性、侵袭细胞个数、划痕愈合率降低(均P<0.05);对照组与miR-642a-5p mimic NC组miR-642a-5p、NF-κB mRNA、NF-κB p65蛋白的表达水平及转染24、48 h细胞增殖活性、侵袭细胞个数、划痕愈合率、细胞凋亡率比较,...     

西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901生物学行为的影响

目的观察西咪替丁对人胃癌SGC-7901细胞的生长、凋亡、黏附及侵袭行为的影响。方法用四甲基偶氮唑盐（MTr）法检测不同浓度西咪替丁对胃癌SGC-7901细胞生长的影响;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;用吖啶橙（AO）染色后荧光显微镜观察药物作用后细胞的形态变化;透射电镜观察用药后细胞超微结构的改变;以matrigel为对象,检测西咪替丁对胃癌细胞与细胞外基质黏附作用的影响;利用millicell小室检测西咪替丁对胃癌细胞侵袭人工基底膜能力的影响。结果在0．5～5mmol／L浓度内,西咪替丁对SGC-7901的生长具有显著的抑制作用,并呈时间和剂量依懒性;0．5～10mmol／L西咪替丁作用后,可观察到典型细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪检测可见凋亡峰,G0／G1期细胞明显增多;0．0625～0．25mmol／L西咪替丁可抑制胃癌细胞和细胞外基质的黏附及对重组基底膜的侵袭。结论西咪替丁可改变细胞周期分布,诱导SGC-7901细胞凋亡,从而抑制细胞增殖。在无毒剂量下,可抑制SGC-7901细胞对细胞外基质的黏附与侵袭。     

间质反应细胞对进展期胃癌生物学行为的影响

目的 观察间质反应细胞对胃癌生物学行为的影响.方法 在HE染色及网状纤维和VG染色的切片上,根据纤维细胞在胃癌组织中的增生方式作了分型;用图像分析仪对淋巴-浆细胞和嗜酸性粒细胞反应的数密度作了测量;在光镜下对间质肥大细胞反应做了计数.以上指标均以均数作界值把胃癌分为两组,即高密度组和低密度组,然后观察临床病理参数在两组之间的差异.结果 进展期胃癌分为限制型纤维细胞增生和伴随型纤维细胞增生两种类型.临床病理参数在两型之间存在着显著差异(P＜0.05),淋巴-浆细胞浸润、嗜酸性粒细胞浸润和肥大细胞反应在两组间存在显著或极显著差异(P＜0.05/0.01).结论 间质反应细胞对胃癌的生物学行为有重要影响,胃癌术后患者应积极采取增强病人免疫力的治疗方案,慎用降低宿主免疫力的治疗措施.     

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1对胃癌细胞生物学行为的影响及相关机制

目的： 探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在胃癌中的表达、与胃癌患者预后的关系及其潜在机制。方法： 利用TCGA数据库、HPA数据库及Oncomine 4.5数据库中胃癌以及癌旁组织的相关数据与图片,分析PCK1表达水平与胃癌患者临床病理学特征和总生存期的关系,采用基因功能富集分析(GSEA)预测PCK1调控胃癌潜在的信号通路。体外细胞学实验采用慢病毒转染胃癌HGC-27和AGS细胞,分别敲低与过表达PCK1,采用细胞功能学实验检测PCK1对胃癌细胞生长、增殖、迁移等影响,同时采用蛋白质免疫印迹检测相关蛋白的表达。结果： 与癌旁组织相比,PCK1在胃癌组织中表达明显上调(P＜0.05);ROC曲线提示PCK1对胃癌患者预后具有良好的预测效能;通过GSEA富集分析提示原发性免疫缺陷、细胞黏附分子、趋化因子信号通路、全身性红斑狼疮、产生IgA的肠道免疫网络及RIGⅠ样受体信号通路相关的基因集在PCK1基因低表达表型中差异富集;敲低PCK1后,胃癌HGC-27和AGS细胞生长、克隆形成能力、迁移能力显著下降,同时p-AKT(Ser473)、p-mTOR、p-S6和p-4EBP1表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01);过表达PCK1则与之作用相反。结论： PCK1在胃癌中呈高表达且与患者预后相关,其可能通过活化AKT mTOR信号通路促进胃癌细胞生长、增殖与迁移。     

沉默β-catenin表达对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响与作用机制研究

目的探讨β-链蛋白（β-catenin）表达下调对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响,并分析其作用机制。方法将RNA干扰慢病毒（β-catenin-RNAi慢病毒）及空载体慢病毒（β-catenin-Neg）分别感染MGC-803细胞,分为实验组（MGC-803-RNAi细胞）、阴性对照组（MGC-803-Neg细胞）、空白对照组（未处理的MGC-803细胞）。Westernblot检测验证转染效率;双染流式细胞术检测细胞凋亡率,单染流失细胞术分析细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力;Westernblot检测细胞Bax、Bcl-2、cyclinD1及基质金属蛋白酶（MMP）-7蛋白表达水平。结果MGC-803-RNAi、MGC-803-Neg细胞中显示绿色荧光的细胞约占80%,MGC-803细胞不显示荧光;与MGC-803-Neg、MGC-803细胞相比,MGC-803-RNAi细胞β-catenin表达水平明显下调(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05),出现G1/S期阻滞现象(P＜0.05),侵袭能力明显减弱(P＜0.05),Bcl-2、cyclinD1及MMP-7蛋白表达水平下调(均P＜0.05）,而Bax蛋白表达水平上调(P＜0.05)。结论沉默β-catenin表达可促进胃癌MGC-803细胞凋亡,阻滞其细胞周期进程,减弱其侵袭转移力,其作用机制可能与影响Wnt/β-catenin信号通路下游靶蛋白表达有关。     

miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达及对胃癌生物学行为的影响

目的:探讨miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达情况及对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:应用实时荧光定量PCR法分析31例胃癌组织和癌旁组织样本以及人胃癌细胞系SGC-7901、MKN45、人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miRNA-101的表达水平;建立miRNA-101重组腺病毒载体感染胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,对照组为感染阴性对照病毒的胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,MTT法检测miRNA-101对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力.结果:胃癌组织中miR-101表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);miR-101在细胞系SGC-7901和MKN45中的表达量明显低于人正常胃黏膜上皮细胞系GES1(P<0.01).孵育48 h后MKN45细胞miRNA-101组的细胞增殖能力低于其对照组(P<0.05);而孵育72 h后SGC-7901细胞和MKN45细胞的miRNA-101组细胞增殖能力均亦低于相应对照组(P<0.05).迁移试验结果显示,miRNA-101组迁移的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数明显低于相应对照组(P<0.01);侵袭实验结果显示,miRNA-101组侵袭的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数亦明显低于其对照组(P<0.01).结论:miRNA-101在胃癌组织和胃癌细胞系中表达下调,转染miRNA-101可明显降低SGC-7901和MKN45细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miRNA-101可能参与了胃癌疾病的发生及发展.     

lncRNA与miRNA相互调控作用机制及其在胃癌中的影响

微小RNA(miRNA)是一类通过与mRNA结合从而调控众多编码基因的非编码小RNA。长链非编码RNA(lncRNA)在不同程度上调控基因的表达,包括染色质修饰、转录和转录后处理等,其转录本长度大于200bp。miRNA和lncRNA的相互调控在肿瘤的发生、发展中也发挥重要作用。本文在介绍lncRNA与miRNA相互调控及机制的基础上,总结其对胃癌(gastric cancer,GC)发生、发展的影响。     

PinX1在胃癌中的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 探索PinX1基因在胃癌中的表达情况,并观察PinX1表达水平改变对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。 方法 通过PinX1质粒转染及RNAi干扰技术,分别上调和下调胃癌细胞中的PinX1基因表达水平,然后运用Western Blot技术在蛋白水平检测正常胃癌细胞、PinX1基因上调组和PinX1基因敲低组胃癌细胞目标蛋白PinX1的表达情况,并通过CCK8法检测不同处理组胃癌细胞增殖曲线。选取36对胃癌组织和癌旁正常胃黏膜的组织,检测PinX1的表达情况并计算其与肿瘤分期之间的相关性。采用SPSS软件进行统计分析并绘制统计图。 结果 胃癌细胞系SGC7901及MKN28中PinX1的表达水平低于正常胃黏膜细胞株GES-1中PinX1的表达水平,PinX1基因在MKN28转染组胃癌细胞较正常MKN28细胞中表达上调,MKN28胃癌细胞生长速度相应的减缓(P＜0.05),而干扰组胃癌细胞PinX1基因表达下调,SGC7901胃癌细胞生长速度相应的增快(P＜0.05)。PinX1在胃癌组织中的表达率低于癌旁组织的表达率(P＜0.05),且PinX1表达水平与胃癌T分期呈现出一定的相关性。 结论 PinX1在胃癌组织和胃癌细胞中低表达并负性调控胃癌细胞恶性生物学行为。      

宫颈癌细胞EGFR过表达对肿瘤细胞生物学行为的影响及机制研究

目的 探索表皮生长因子受体(epidermal growth Factor receptor,EGFR)过表达对宫颈癌细胞生长,侵袭及凋亡等生物学行为的影响,并探讨其潜在机制.方法 构建EGFR过表达、EGFR空载质粒和空白对照组的宫颈癌SiHa细胞,应用MTT检测、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测EGFR...     

circNT5E靶向调控miR-152-3p对胃癌细胞生物学行为的影响

摘要:目的 探讨circNT5E对胃癌细胞生物学行为的影响及其可能的作用机制。方法 采用qRT-PCR 法检测胃癌组织、癌旁组织与人胃黏膜上皮细胞 GES-1、人胃癌细胞 HGC27中circNT5E、miR-152-3p的表达量。双荧光素酶报告基因实验检测 miR-152-3p过表达对野生型载体 wt-circNT5E、突变型载体 mut-circNT5E 荧光素酶活性的影响。以HGC27细胞为研究对象进行体外细胞实验,实验分组为si-NC组、si-circNT5E组、si-circNT5E-NC组、si-circNT5E-152-3p组。CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术与 Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭能力。Westernblot检测 Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果 与癌旁组织和 GES-1细胞相比,circNT5E 在胃癌组织和细胞中表达量升高(均P<0.05),miR-152-3p的表达量降低(均P<0.05);进一步机制分析提示 miR-152-3p是circNT5E的靶基因。功能实验表明敲除circNT5E抑制胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭的能力,诱导细胞凋亡(均 P<0.05)。敲除 miR152-3p可逆转circNT5E表达降低对细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用和对凋亡的促进作用(均 P<0.05)。结论 circNT5E可通过调控 miR-152-3p介导胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。     

去甲基化作用对胃癌细胞生物学行为及xaf1基因表达的影响

目的:探讨去甲基化药物5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza.CdR)对体外培养的胃癌BGC823细胞增殖活性、细胞周期和凋亡以及对此细胞株xafl基因表达的影响.方法:用MTT法检测不同浓度5-Aza-CdR对细胞增殖活性的影响;PI染色和流式细胞仪检测不同浓度5-Aza-CdR处理72 h后细胞周期分布和细胞凋亡率;RT-PCR法检测用药前后xafl基因表达的变化.结果:用1×103,5×103.10×103nmol/L的5-Aza-CdR处理BGC823细胞6 d后,试验组细胞增殖抑制率较对照组明显升高(P<0.05),并呈剂量依赖关系;流式细胞仪分析表明,各药物浓度处理72 h后凋亡率明显增加:试验组凋亡率分别为(4.53±0.21)%,(8.11±1.01)%和(11.56±0.86)%,与对照组(0.51±0.01)%相比较差异显著(P<0.05).在5-Aza-CdR处理前,未检测到BGC823细胞株xafl基因mRNA表达,经过5-Aza-CdR处理后,xafl mRNA重新表达.结论:5-Aza-CdR可抑制BGC823细胞增殖;促进细胞凋亡;使xafl基因甲基化状态得到逆转,而重新表达.     

siRNA靶向抑制ATDC蛋白对胃癌细胞生物学行为的影响

目的通过比较ataxia—telangiectasiagroupDcomplementinggene（ATDC）在永生化胃黏膜细胞GES与胃癌细胞系MNK45、AGS中的表达差异,探讨其对胃癌细胞生长、增殖及侵袭能力的影响。方法应用Westernblot实验检测ATDC在胃癌细胞系MKN45、AGS及永生化胃黏膜细胞系GES表达差异,利用慢病毒携带的siRNA下调ATDC在MKN45细胞表达水平,采用MTT实验检测细胞生长能力、流式细胞术检测细胞周期、平板克隆实验检测细胞克隆形成能力以及transwell实验检测细胞侵袭能力。结果ATDC在人胃癌细胞系MKN45与AGS细胞中的表达水平均明显高于永生化胃黏膜细胞GES（均P〈0．05）;转染siRNA慢病毒后,与Con—MKN45及MKN45比较,Si—MKN45细胞的表达水平明显下降（P〈0．05）：下调ATDC表达后MKN45细胞的生长能力明显受到抑制（P〈0．05）,S期细胞明显减少、增殖指数克隆形成率及侵袭能力均明显降低（均P〈005）。结论慢病毒携带的siRNA下调ATDC表达后能够抑制胃癌细胞MKN45的生长、增殖与侵袭能力,可为胃癌的基因治疗提供新的靶点。     

舒芬太尼对BT474细胞恶性生物学行为影响及机制研究

目的 探讨舒芬太尼对BT474人乳腺导管癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法 体外培养BT474人乳腺导管癌细胞,随机将细胞分为对照组(C组)和舒芬太尼组,C组仅使用1640完全型培养基培养,舒芬太尼组分别给予含不同剂量舒芬太尼[0.1 nmol·L^-1(L组),1 nmol·L^-1(M组),10 nmol·L^-1L(H组)]的1640完全型培养基培养;处理时间24 h。采用平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,血管形成实验检测血管生成能力,Western blot实验检测细胞生长、转移和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达。结果 与C组比较,舒芬太尼组细胞克隆形成能力逐渐降低、细胞迁移率和细胞侵袭数逐渐减少(P均<0.05)、血管生成能力逐渐降低且均与浓度呈剂量相关性(P均<0.05);Western blot结果显示,与C组比较,L组MMP-9、E-cadher...     

查尔酮对人胃癌BGC823细胞生物学行为影响的初步研究

目的:研究查尔酮对人胃癌BGC823细胞生长抑制、细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡的作用,为寻找预防肿瘤药物提供一定的线索.方法:细胞生长抑制采用MTT比色法检测,细胞周期阻滞用流式细胞仪检测,细胞凋亡用流式细胞仪及琼脂糖凝胶电泳检测.结果:浓度为6.25、12.5、25和50μmol/L的查尔酮呈剂量依赖性抑制BGC823细胞增殖.查尔酮诱导细胞凋亡率是对照的2.71、2.79、4.74倍.琼脂糖凝胶电泳可观测到12.5μmol/L、25μmol/L有DNA"梯子"现象.结论:查尔酮可以抑制BGC823细胞生长,并呈剂量-反应关系.查尔酮有将BGC823细胞增殖周期阻滞在G0/G1期趋势,查尔酮可以抑制肿瘤细胞的生长和增殖.     

调控Livin基因表达对食管癌EC9706细胞生物学行为的影响

目的:探讨调控Livin基因表达对食管癌EC9706细胞生长速度、细胞凋亡以及放射线敏感性的影响.方法:取EC9706细胞,分7组,siRNA组、Livinα组、Livinβ组分别用脂质体包裹法转染沉默Livin表达的siRNA载体pSUPER-neo-Sli1、Livinα表达载体pIRES2-AcGFP-Livinα及Livinβ表达载体pIRES2-AcGFP-Livinβ;Livinα/β组同时转染pIRES2-AcGFP-Livinα和pIRES2-AcGFP-Livinβ,空siRNA载体组转染pSUPER-neo,空表达载体组转染pIRES2-AcGFP,空白对照组不转染.取各组细胞,荧光定量RT-PCR法检测Livin mRNA表达情况,MTT法测定细胞生长曲线,TUNEL法检测细胞凋亡,同时检测Caspase-3 活性及放射线敏感性.结果:与空白对照组比较,空表达载体组、空siRNA载体组细胞倍增时间、凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性差异均无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组比较,Livinα组、Livinβ组和Livinα/β组细胞倍增时间、凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性均降低(P＜0.05);siRNA组细胞凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性增加(P＜0.05),细胞倍增时间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:调控EC9706细胞Livin基因的表达,可有效改变细胞的生物学行为;Livin基因可能成为肿瘤治疗的新靶点.     

间质反应对胃癌生物学行为的影响

作者就107例胃癌间质反应对其生物学行为的影响作了研究。根据纤维性间质反应形式,把胃癌分作膨胀型、中间型和浸润型;依间质淋巴浆细胞反应程度的差异分为轻、中、重度。结果发现,不同形式的纤维性间质反应对患者预后有极显著影响(P<0.01),间质淋巴-浆细胞反应对患者预后有显著影响(P<0.05),无论纤维性间质还是淋巴-浆细胞反应对淋巴结转移均有显著影响(P<0.05)。因此,我们认为间质反应对胃癌的生物学行为有重要影响。     

核分裂计数对胃癌生物学行为的影响

作者用107例胃癌标本研究了核分裂计数对其生物学行为的影响。结果发现,核分裂计数在胃癌患者存活1年和≥3年组之间存在非常显著差异(P<0.01),在淋巴结癌转移组和无转移组之间以及在大核癌细胞组和小核癌细胞组之间存在显著差异(P<0.05)。据此,我们认为核分裂计数对胃癌生物学行为有重要影响。