天冰调督胶囊对癫痫大鼠学习记忆及海马脑源性神经营养因子表达的影响

目的:观察天冰调督胶囊(全蝎,人工牛黄、冰片等)对印防己毒(PTX)诱导癫痫大鼠学习记忆、神经元损伤以及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:用印防己毒建立癫痫大鼠模型,观察天冰调督胶囊的疗效,并以丙戊酸钠、脑复康悬浊液作为对照观察。用旷场行为观察箱观察大鼠行为学改变及拒俘反应性。Morris水迷宫测试观察大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数。脑组织切片HE染色、尼氏染色、BDNF免疫组织化学染色并进行免疫阳性细胞记数。结果:天冰调督胶囊可改善大鼠行为学异常及拒俘反应性,寻找平台所需时间明显缩短,通过原平台的次数明显增加。减轻癫痫大鼠脑组织皮层和海马区细胞变性和坏死状况,改善神经元内尼氏体脱失现象,经免疫组化染色BDNF阳性细胞数增多。结论:天冰调督胶囊可提高PTX化学点燃癫痫大鼠学习记忆能力,可能通过增加BDNF的表达;保护尼氏小体,促进神经元蛋白质合成;维护神经元正常功能,提高癫痫大鼠学习记忆能力。     

天冰调督胶囊对慢性点燃癫痫大鼠腺苷A1受体表达的影响

目的探讨天冰调督胶囊对慢性点燃癫痫大鼠腺苷A1受体表达的影响。方法 SD大鼠腹腔注射印防己毒素(1.5 mg/kg)制作慢性反复发作癫痫模型,点燃模型大鼠随机分为模型组,天冰调督低、高(0.4,0.8 g/kg)剂量组,丙戊酸钠组,拉莫三嗪组,各组连续灌胃给药60 d,分别以免疫组织化学方法、免疫印记法观察各组大鼠脑组织腺苷A1R受体表达情况。结果模型组腺苷A1受体免疫反应阳性数量减少,与正常组相比有显著性差异(P<0.05);天冰调督胶囊各组腺苷A1受体表达有不同程度改善(P<0.05或0.01)。结论天冰调督胶囊可能通过调节腺苷A1受体表达改善慢性反复发作癫痫大鼠神经功能。     

调肝解毒方对慢性癫痫大鼠学习记忆及海马组织环磷酸腺苷反应元件结合蛋白表达的影响

目的观察调肝解毒方对慢性癫痫大鼠学习记忆与海马组织环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响。方法60只大鼠腹腔注射印防己毒素制作慢性癫痫模型后,随机分为模型组,调肝解毒方低剂量组、调肝解毒方高剂量组,丙戊酸钠组,每组15只,与正常组(15只)同期观察或治疗60天,以Morris水迷宫观察大鼠空间学习和记忆能力,应用RT-PCR方法检测大鼠海马组织CREBmRNA表达变化,免疫组织化学方法检测海马组织磷酸化的CREB水平变化。结果调肝解毒方低、高剂量组大鼠空间记忆能力高于模型组(P<0.01),海马组织CREBmRNA相对吸光度值增高,pCREB免疫阳性细胞的表达有不同程度增强,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。结论调肝解毒方可在一定程度上改善反复癫痫大鼠的学习记忆能力,可能与调节海马CREB表达有关。     

调肝解毒方对点燃癫痫大鼠情感行为及神经肽Y蛋白表达的影响

目的观察调肝解毒方对慢性点燃癫痫大鼠情感行为的影响及其作用机制。方法腹腔注射印防己毒素制作慢性癫痫模型,将造模成功的60只SD大鼠随机分为模型组、调肝低量组、调肝高量组、拉莫三嗪组各15只,另设正常组(15只)同期观察治疗60天。治疗期间正常组、模型组灌胃10ml/kg生理盐水;调肝低量组、调肝高量组分别灌胃0.4g/kg、0.8g/kg调肝解毒方混悬液;拉莫三嗪组灌胃0.002g/kg拉莫三嗪混悬液,每天1次。用旷场实验、抬高迷宫实验观察大鼠情感行为改变,并检测大鼠海马等脑组织神经肽Y(NPY)的表达。结果与模型组比较,拉莫三嗪组、调肝高量组情感行为学各指标差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);调肝低量组拒俘反应性评分及开放臂逃避时间差异亦有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,其他各组大鼠脑海马区、尾壳核NPY蛋白表达均明显提高(P<0.05或P<0.01);拉莫三嗪组、调肝高量组脑海马各区NPY阳性细胞数均有增加(P<0.05或P<0.01);调肝低量组CA3、DG区亦有增加(P<0.01)。结论调肝解毒方可改善慢性点燃癫痫大鼠情感行为异常,并可能与其调节脑组织NPY表达有关。     

通督调神灸法抗轻度认知功能障碍大鼠海马β-淀粉样蛋白过度表达的机制研究

目的:观察通督调神灸对轻度认知障碍(MCI)大鼠行为学、海马β-淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响,探讨通督调神灸抗Aβ过度表达的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组12只、模型组36只,采用D-半乳糖、亚硝酸钠联合腹腔注射复制MCI大鼠模型。造模成功大鼠随机分为空模组、艾灸组、西药组,每组12只。艾灸组大鼠隔附子饼灸"百会",温和灸"天门""大椎",每次20min,1次/d,治疗2周;西药组大鼠用尼莫地平灌胃,每日3次,共2周。Morris水迷宫测试进行行为学检测,用免疫组化技术检测海马Aβ表达水平,反转录PCR法检测海马早老素-1(PS-1)mRNA、膜酸性蛋白酶-1(BACE-1)mRNA的表达水平,酶联免疫吸附法检测血清白介素(IL)-6含量。结果:空模组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期较正常组明显延长(P0.01),穿越目标平台次数减少(P0.01),跨越目标象限占整个游泳时间百分比明显降低(P0.01),与正常组相比,空模组海马中Aβ、PS-1mRNA、BACE-1mRNA表达及血清IL-6水平明显增高(P0.01)。与空模组相比,艾灸组、西药组大鼠海马组织Aβ、PS-1mRNA、BACE-1mRNA表达及血清IL-6水平显著下降(P0.01)。与西药组相比,艾灸组Aβ、PS-1 mRNA、BACE-1 mRNA表达及血清IL-6水平降低(P0.05)。结论:通督调神灸可能通过降低脑内PS-1mRNA、BACE-1mRNA表达水平,进而阻断Aβ的产生,并通过降低血清IL-6水平,进而阻断Aβ过度表达引发的炎性反应级联效应,以达到治疗MCI的目的。     

调督抗痫胶囊对马桑内酯所致大鼠癫痫模型情感行为及空间记忆的影响

目的:研究调督抗痫胶囊抗马桑内酯所致大鼠慢性癫痫大发作的作用。方法:马桑内酯所致的大鼠慢性癫痫大发作模型,分别口服不同剂量的调督抗痫胶囊、苯妥英钠合脑复康和生理盐水,连续120 d后,按文献的方法,检测癫痫大鼠情感行为、空间记忆的变化和海马Ach含量及ChAT、AchE活动。结果:中药高剂量组和苯妥英钠合脑复康组在旷场活动性、拒俘反应性、水迷宫搜索时间及距离、空间学习记忆能力上明显优于模型组,海马Ach含量及ChAT、AchE活性则高于模型组(P<0.05)。结论:调督抗痫胶囊可以明显改善慢性癫痫大鼠情感行为及认知能力低下状态。     

抗痫灵对癫痫大鼠脑电图及海马NMDAR1表达的影响

目的:观察中药复方抗痫灵对戊四氮点燃癫痫大鼠模型脑电图及海马NMDAR1表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠60只,体质量180～220g,随机分成空白组、模型组、抗痫灵高、中、低剂量组、丙戊酸钠(VPA)组各10只。点燃后各组大鼠描记脑电图,低温条件下迅速断头取脑,用免疫印迹(Westernblot)方法观察各实验组大鼠海马的NMDAR1活性变化。结果:抗痫灵组、丙戊酸钠组、模型组阳性细胞表达与空白组相比有显著性差异(P0.05),抗痫灵组显著低于模型组(P0.01)。结论:抗痫灵对戊四氮点燃大鼠癫痫发作有显著对抗作用,其作用机制可能与其降低模型大鼠海马NMDAR1活性有关。     

松果菊苷对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马组织BDNF、TrkB表达的影响

目的通过建立血管性痴呆(VD)大鼠模型,观察松果菊苷(ECH)对VD大鼠学习记忆及海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶B(TrkB)表达的影响。方法取SD大鼠随机分为假手术组、模型组和ECH组(30 mg·kg~(-1)),每组30只。采用永久性结扎双侧颈总动脉建立大鼠VD模型,ECH组给予ECH治疗4周,采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,处死大鼠取脑,分离皮层与海马组织,HE染色观察脑组织神经元损伤。RT-PCR法测定海马组织BDNF、TrkB mRNA表达,Western blot法检测BDNF、TrkB、AKT蛋白表达水平,免疫组化法测定N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数降低(P0.05),脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显,海马组织BDNF、TrkB mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达低于假手术组(P0.05);与模型组比较,ECH组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加(P0.05),脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显改善,海马组织BDNF、TrkB的mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达明显高于模型组(P0.05)。结论松果菊苷可能通过上调VD大鼠海马区BDNF、TrkB、AKT、NMDAR表达,减轻VD大鼠神经元缺血损伤,改善学习记忆能力。     

“调心通督”针刺法对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马组织VEGF、Ang-1蛋白表达的影响

目的:观察"调心通督"针刺法对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马组织血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-1(Ang-1)蛋白表达的影响,探讨"调心通督"针刺法治疗VD的作用机制。方法:24只雄性SD大鼠行Morris水迷宫实验后随机分为假手术组、模型组、西药对照组和调心通督针刺组,每组6只。模型组、西药对照组、调心通督针刺组大鼠采用双侧颈总动脉永久性结扎法复制VD模型。造模成功次日开始干预,调心通督针刺组选取"百会""神庭""水沟""大椎""风府""命门""内关""大陵""劳宫"进行针刺干预,每次30 min;西药对照组予尼莫地平溶液(0.0625 g/kg)灌胃,均每日1次,共干预2周。造模前、造模2周后及干预后采用Morris水迷宫实验对大鼠进行行为学检测;干预后,采用Western blot法检测大鼠海马组织VEGF、Ang-1蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠平均逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越原平台次数减少(P<0.01);与模型组比较,西药对照组、调心通督针刺组大鼠干预后平均逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越原平台次数增加(P&l...     

归芪聪志汤对VD模型大鼠海马神经元Claudin-1,TGF-β表达的影响

目的:研究归芪聪志汤对血管性痴呆(varscular dementia,VD)模型大鼠学习记忆和海马神经元紧密连接蛋白1(Claudin-1)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠120只,按随机数字表选10只大鼠作为假手术组,其余大鼠制备VD模型,选成功模型大鼠随机分为5组,分别为模型组、阳性组和归芪聪志汤低、中、高剂量组。归芪聪志汤低、中、高剂量组给药量分别为9.9,19.8,39.6 g·kg-1·d-1。阳性组给予脑复康吡拉西坦胶囊0.3 g·kg-1·d-1。假手术组、模型组给予等量水。每日1次。连续灌胃治疗28 d后,Morris水迷宫予以行为学检测,实时荧光定量PCR(Real-time PCR),免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组海马组织Claudin-1,TGF-β基因和蛋白表达。结果:灌胃治疗28 d后,与假手术组比较,VD模型组大鼠的平均逃避潜伏期明显延长、跨原平台次数明显减少(P0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),大鼠海马的TGF-βmRNA及蛋白表达水平明显降低(P0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠逃逸潜伏期均缩短,跨原平台次数均增多(P0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P0.05),大鼠海马的TGF-βmRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),归芪聪志汤中剂量组与脑复康吡拉西坦胶囊组优于其他组(P0.05)。结论:归芪聪志汤能够显著改善VD大鼠的学习记忆能力,可能与调节脑组织细胞间黏附作用、抑制炎性因子表达等有关。     

脑通胶囊对VD大鼠海马NMDA受体 mRNA表达及锥体细胞的影响

目的:观察脑通胶囊对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆、海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体及锥体细胞的影响.方法:随机抽取大鼠19只作为假手术组,其余采用改良的四血管法(4-VO)制备VD模型并随机分为模型组、尼莫地平组( 12 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊高剂量组(1 200 mg· kg-1·d-1)、脑通胶囊中剂量组(600 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊低剂量组(300mg·kg-1·d-1).Morris水迷宫测定各组大鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR检测NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA的表达情况,光镜观察海马CA1区锥体细胞形态及数量变化.结果:与模型组比较,脑通胶囊高、中剂量组逃避潜伏期缩短(P＜0.01),穿越原平台次数增加(P＜0.01,P＜0.05),NMDA受体1亚基mRNA表达降低(P＜0.01),2B亚基mRNA表达升高(P＜0.01,P＜0.05);海马CA1区锥体细胞形态未见明显病变现象,锥体细胞数量增多,锥体细胞丢失比率减少.与尼莫地平组比较,脑通胶囊高、中剂量组穿越原平台次数增加(P＜0.01),NMDA受体1亚基mRNA相对表达量降低(P＜0.01),高剂量组NMDA受体2B亚基mRNA相对表达量增加(P＜0.05),CA1区锥体细胞增多(P＜0.01).结论:脑通胶囊可降低海马NMDA受体1亚基mRNA的表达,提高2B亚基mRNA的表达,减轻海马CA1区锥体细胞损伤,减少锥体细胞丢失比率,从而改善VD大鼠学习记忆能力,这可能是其治疗VD的作用机制之一.     

草果知母汤对印防己毒点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力的影响

目的:观察草果知母汤(Tsaoko-Anemarrhenae decoction,TAD)对印防己毒(Picrotoxin,PTX)化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力的影响,为进一步研究癫痫患者学习记忆损害的治疗提供线索。方法:27只雄性SD大鼠随机分为点燃组、点燃+TAD组和对照组,分别用PTX、PTX+TAD和生理盐水腹腔注射,然后行水迷宫行为的测定,评价其学习记忆能力。结果:癫痫大鼠在水迷宫测定中,点燃组和点燃+TAD组在寻找平台的潜伏期时间与对照组相比没有显著性差异。点燃组对平台空间位置的记忆的能力较对照组要差,差异有显著性。点燃+TAD组对平台空间位置的记忆能力与对照组无显著性差异,但是明显好于点燃组(P0.05)。结论:PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中记忆能力下降,而TAD能明显改善PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中的记忆能力。     

松果菊苷对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马组织BDNF、TrkB表达影响

摘要：目的 通过建立血管性痴呆（VD）大鼠模型,观察松果菊苷（ECH）对VD大鼠学习记忆及海马组织脑源性神经营养因子（BDNF）、酪氨酸激酶B（TrkB）表达影响。方法 选择6月龄雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组、模型组、ECH组,每组30只。采用永久性结扎双侧颈总动脉建立大鼠VD模型,ECH组给予ECH 4周,采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,大鼠处死取脑,分离皮层与海马组织,HE染色观察脑组织神经元损伤。RT-PCR测定海马组织BDNF、TrkB mRNA表达,western blot检测BDNF、TrkB、AKT蛋白表达水平,免疫组化法测定NMDAR蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数降低（P＜0.05）,脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显,海马组织BDNF、TrkB mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达低于假手术组（P＜0.05）;与模型组比较,ECH组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加（P＜0.05）,脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显改善,海马组织BDNF、TrkB的mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达明显高于模型组（P＜0.05）。结论 松果菊苷可能通过上调血管性痴呆大鼠海马区BDNF、TrkB、AKT、NMDAR表达,减轻VD大鼠神经元缺血损伤,改善学习记忆能力。     

“通督调神”针刺对脑卒中后抑郁大鼠海马神经元保护作用及单胺类神经递质的影响

目的:观察"通督调神"针刺对卒中后抑郁大鼠海马神经元组织结构以及单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)的影响,探讨"通督调神"针法改善脑卒中后抑郁的可能作用机制。方法:选用清洁级SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、通督调神组和非经非穴组,每组12只。模型组、通督调神组、非经非穴组采用大脑中动脉闭塞和慢性不可预见性温和性应激法复合制备卒中后抑郁模型;假手术组仅切开皮肤,分离筋膜肌肉,暴露动脉后不进行结扎直接缝合切口。假手术组、模型组不予干预,通督调神组选取"百会""水沟""神庭""大椎"穴,针刺40 min,20 min行针1次,每日针刺1次,每周6次,连续治疗4周。非经非穴组选取大鼠前肢足背侧第3、4跖骨间隙凹陷处为"非经非穴"干预,针刺方法同通督调神组。观察干预后各组大鼠行为学变化,透射电镜观察各组大鼠海马CA1区神经元超微结构,高效液相色谱法测定海马组织中单胺类神经递质NE、5-HT和DA含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠Zea Longa神经行为学评分提高(P0.01),蔗糖水饮用量降低(P0.01),敞箱水平运动、垂直运动次数降低(均P0.01),大鼠海马CA1区神经元超微结构发生明显损伤,海马组织中NE、5-HT和DA含量降低(均P0.01);与模型组相比较,通督调神组大鼠Zea Longa神经行为学评分降低(P0.01),蔗糖水饮用量增加(P0.01),敞箱水平运动、垂直运动次数增多(均P0.01),大鼠海马CA1区神经元超微结构损害减轻,海马组织中NE、5-HT和DA含量升高(P0.01,P0.05);与非经非穴组相比较,通督调神组大鼠Zea Longa神经行为学评分降低(P0.01),蔗糖水饮用量增加(P0.01),敞箱水平运动、垂直运动次数增多(均P0.01),大鼠海马CA1区神经元超微结构损害减轻,海马组织中NE、5-HT和DA含量升高(P0.01,P0.05)。结论:"通督调神"针刺能改善卒中后抑郁模型大鼠行为、修复大鼠海马神经元的损伤,可能与其上调海马组织中单胺类神经递质(NE、5-HT、DA)含量有关。     

通督调神固本法对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马区mTOR、PTEN表达的影响

目的:观察通督调神固本法对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马区mTOR、PTEN表达的影响,探讨通督调神固本法治疗VD的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、LY模型组、LY电针组、DMSO电针组,每组6只。采用四血管阻断法(4-VO)复制VD模型。对电针组、LY电针组、DMSO电针组选取"百会""大椎""脾俞""肾俞"进行电针干预,每日1次,25 min/次,治疗两周。采用Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆能力,TUNEL法检测大鼠海马中神经元细胞凋亡数量,Western Blot法检测大鼠海马中mTOR、PTEN蛋白表达情况。结果:与假手术组相比,模型组大鼠的平均逃避潜伏期及首次穿越平台时间明显延长(P0.05),模型组海马区凋亡细胞数目明显增多(P0.01)及mTOR表达减少(P0.05),PTEN表达增加(P0.05);与模型组相比,电针组平均逃避潜伏期及首次穿越平台时间明显缩短(P0.05),LY模型组、LY电针组平均逃避潜伏期及首次穿越平台时间均无差异(P0.05),电针组凋亡细胞减少(P0.01),LY电针组、LY模型组凋亡细胞均无统计学差异(P0.05),电针组mTOR表达增加(P0.05),PTEN表达减少(P0.05);LY模型组与LY电针组比较,平均逃避潜伏期、首次穿越平台时间、凋亡细胞数、海马区mTOR及PTEN表达均无差异(P0.05);与LY电针组相比,DMSO电针组平均逃避潜伏期及首次穿越平台时间均有所缩短(P0.05),海马区凋亡细胞数减少(P0.01)及mTOR表达增加(P0.05),PTEN表达减少(P0.05)。结论:通督调神固本法改善了VD模型大鼠的学习记忆能力,海马中mTOR蛋白的表达增加,而PTEN蛋白的表达减少,减少了细胞凋亡数,对受损的神经元细胞起到保护作用,这可能是通督调神固本法治疗VD的重要作用机制之一。     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达的影响

目的观察酸枣仁汤对抑郁模型大鼠大脑皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达的影响,并探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和酸枣仁汤高、中、低剂量组,除空白组外,其余各组大鼠均以慢性应激法复制抑郁症模型,各给药组给予相应药物灌胃。采用RT-PCR检测大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A和NMDAR2B基因的表达。结果与模型组比较,酸枣仁汤高、中剂量组大鼠皮质和海马中NMDAR1阳性表达均降低(P0.01);酸枣仁汤高、中剂量组和西药组皮质和海马中NMDAR2A阳性表达均降低(P0.05,P0.01),酸枣仁汤低剂量组海马中NMDAR2A表达增高(P0.05);酸枣仁汤高、中、低剂量组和西药组皮质中NMDAR2B阳性表达均降低(P0.01),酸枣仁汤中、低剂量组海马中NMDAR2B表达增高(P0.01)。结论酸枣仁汤可能通过降低大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达达到治疗抑郁症的作用。     

人参-知母-赤芍提取物对血管性痴呆大鼠海马神经元的保护作用及机制

目的:观察人参-知母-赤芍提取物对血管性痴呆大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的影响,探讨其保护海马神经元的作用机制。方法:60只SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,人参-知母-赤芍提取物组(0. 20 g·kg-1)和美金刚组(2. 1 mg·kg-1),每组12只。采用双侧颈总动脉反复夹闭合并腹腔注射硝普钠的方法建立血管性痴呆大鼠模型,造模后,正常组,假手术组,模型组给予同等体积生理盐水,每日1次,连续14 d。采用Morris水迷宫评价各组大鼠学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色观察海马CA1区病理改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马神经元胞膜NMDAR1的蛋白表达水平;免疫组化法(IHC)检测海马NMDAR1的表达情况;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测海马组织中NMDAR1 mRNA的表达水平。结果:与正常组和假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长(P 0. 01),在平台所在象限停留时间及穿越平台的次数显著减少(P 0. 01),海马CA1区神经细胞层次减少,排列紊乱、出现核固缩、神经元丢失,NMDAR1蛋白及mRNA表达显著升高(P 0. 01);与模型组比较,人参-知母-赤芍提取物组,美金刚组逃避潜伏期明显缩短(P 0. 05,P 0. 01),在平台所在象限停留时间及穿越平台的次数明显增加(P 0. 05,P 0. 01),海马CA1区神经元数目与形态有明显改善,海马神经元NMDAR1蛋白及NMDAR1 mRNA表达明显降低(P 0. 05)。结论:人参-知母-赤芍提取物能够改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力,减轻海马CA1区神经元的损伤,其机制可能与下调海马神经元NMDAR1的表达有关。     

复方苁蓉益智胶囊对痴呆老龄大鼠海马MARCKS mRNA表达的影响

目的:研究复方苁蓉益智胶囊对β-淀粉样蛋白(1-40)致痴呆老龄大鼠海马MARCKS mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为年轻组、老龄组、假手术组、模型组、中药组和西药组,对老龄大鼠采用β-淀粉样蛋白(1-40)一次性侧脑室注射,建立痴呆模型,中药和西药组分别予复方苁蓉益智胶囊和安理申溶液灌胃14d。通过水迷宫以及RT-PCR检测,观察大鼠学习记忆功能以及MARCKS mRNA的变化。结果:行为学检测表明中药组和西药组的学习记忆功能明显高于模型组,模型组海马MARCKS mRNA比正常组显著增高,而中药组海马MARCKS mRNA比模型组明显降低。结论:复方苁蓉益智胶囊能够降低脑室注射β-淀粉样蛋白(1-40)致痴呆老龄大鼠海马MARCKSmRNA的表达,并改善痴呆老龄大鼠学习记忆功能。     

当归对宫内缺氧幼年大鼠海马CA3区神经元与学习能力的影响及机制

目的 探讨宫内缺氧对幼年大鼠海马CA3区神经元与学习能力的影响,以及NMDAR1 mRNA在其新生期的表达与当归的调控作用.方法 健康SD孕鼠30只,随机分为对照组、缺氧组和当归组各10只,于孕14 d开始将缺氧组与当归组孕鼠用三气培养箱制作胎鼠宫内缺氧模型,当归组用250 g/L当归静脉注射干预.3组孕鼠分娩当日每窝随机选取新生鼠2只,取脑、常规石蜡切片;余新生鼠随机选取2只喂养至30 d进行Morris水迷宫测试,测试结束当日,多聚甲醛灌注固定取脑、常规石蜡切片.幼鼠脑组织作NSE mRNA原位杂交、新生鼠脑组织作NMDAR1 mRNA原位杂交.结果 Morris水迷宫实验和NSE mRNA原位杂显示:与对照组(n=20)相比,缺氧组幼鼠(n=20)空间探查测试和对位探查测试时间较缩短、海马CA3区阳性细胞数减少(P＜0.05),当归组(n=20)探查测试时间较缺氧组延长(P＜0.05)、海马CA3区阳性细胞数增多(P＜0.05);NMDAR1 mRNA原位杂交显示:与对照组相比,缺氧组海马CA3区阳性细胞积分光密度值增大,当归组较缺氧组减小(P＜0.05).结论 宫内缺氧可致新生大鼠海马CA3区NMDAR1 mRNA表达增高,从而使幼年大鼠该区神经元减少,学习记忆能力降低,而当归注射液可改善宫内缺氧状态,增加幼年大鼠海马CA3区神经元数量,提高其学习记忆能力.     

黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病大鼠海马EGFR-PLCγ信号通路的影响

黄蒲通窍胶囊(Huangpu Tongqiao Capsules,HPTQC)功能益气补肾,豁痰化瘀,具有治疗阿尔茨海默病(AD)的作用,但其作用机制需进一步探讨。为了探讨黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病的治疗作用机制与EGFR-PLCγ信号通路的关系,该实验选择健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组:假手术组(sham)、模型组(model)、黄蒲通窍胶囊组(HPTQC)、尼莫地平组(NMP),运用腹腔注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ_(25-35)的方法进行造模,给药28 d后,Morris水迷宫实验和HE染色结果显示:AD大鼠学习记忆能力明显下降(P0.01),海马神经元出现明显损伤,而黄蒲通窍胶囊可显著提高AD大鼠学习记忆能力(P0.05),减轻海马神经元损伤。免疫荧光实验结果显示:AD大鼠海马CA1区EGFR和p-Tau表达明显增加(P0.01),而黄蒲通窍胶囊可显著减少AD大鼠海马EGFR和p-Tau表达(P0.01)。Western blot实验结果显示:AD大鼠海马EGFR,PLCγ,IP3R,p-Tau蛋白表达明显增加(P0.01),而黄蒲通窍胶囊可显著减少AD大鼠EGFR,PLCγ,IP3R,p-Tau蛋白表达(P0.05);RT-PCR实验结果显示:AD大鼠海马EGFR,PLCγ,IP3R,Tau的mRNA水平明显升高(P0.01),而黄蒲通窍胶囊可显著降低AD大鼠EGFR,PLCγ,IP3R,Tau的mRNA水平(P0.05)。结果表明,黄蒲通窍胶囊可改善AD大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与调节EGFR-PLCγ信号通路有关。