前列腺癌Bcl-2、p53和PCNA表达的研究

目的观察前列腺癌及前列腺增生症组织中Bcl-2、p53和PCNA表达情况并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测33例前列腺增生症组织和69例前列腺癌患者Bcl-2、p53和PCNA的表达水平。结果①Bcl-2、p53和PCNA在前列腺癌组织的阳性率分别是56.52%,69.56%和68.11%,均高于良性前列腺增生组织的阳性率(P0.05)。②在前列腺癌组织中,低分化组Bcl-2和p53的表达水平明显高于高分化及中分化组(P0.05)。③PCNA在前列腺癌组织表达较前列腺良性增生症组织明显增加(P0.01);PCNA的表达随着组织学分级及临床分期的增加而增加(P0.01);PCNA高表达组术后生存率明显低于低表达组(P0.01)。结论 p53蛋白表达与肿瘤的分级和分化有关,Bcl-2、PCNA蛋白的表达可能与前列腺癌的发生发展有关,联合检测Bcl-2、p53和PCNA对其肿瘤的恶性程度、生物学行为及预后评估有着重要意义。     

p53、p16和C-myc基因表达在宫颈癌早期诊断中的价值

目的探讨p53、p16和C-myc基因表达在宫颈癌早期诊断中的价值。方法收集本院宫颈活检组织65例,免疫组化染色SP法显色观察结果。结果 p53在正常宫颈组织、CIN(LSIL、HSIL)和宫颈鳞癌中阳性率分别为7%,57%和80%,有显著性差异P<0.05;p16在正常宫颈组织、CIN(LSIL、HSIL)和宫颈鳞癌中阳性率分别为7%,90%和100%,有显著性差异(P<0.05);C-myc在正常宫颈组织、CIN(LSIL、HSIL)和宫颈鳞癌中阳性率分别为7%,73%和100%,有显著性差异(P<0.05)。结论 p53、p16和C-myc与宫颈癌前病变发生及进展相关,其检测可作为宫颈CIN分级与宫颈癌早期诊断的重要辅助指标。     

bcl-2、p53蛋白与喉鳞癌的临床相关性研究

目的探讨bcl-2及p53蛋白在喉鳞癌患者中的表达及与喉鳞癌的病理分级、临床分期和患者生存率间的相互关系。方法采用免疫组化法测定43例喉鳞癌石蜡切片中bcl-2及p53蛋白的表达。结果43例喉鳞癌中bcl-2、p53蛋白的表达率分别为88%(38/43)和33%(16/43)。结论bcl-2、p53蛋白表达与喉鳞癌的病理分级、临床分期、颈淋巴结转移和患者的3,5 a生存率有一定关系,可作为评定喉鳞癌的进展、预测其转移与预后的指标。bcl-2、p53在喉鳞癌患者中的表达具有一定的相关性。     

胃癌及癌前病变中hTERT基因，c-myc和p53的表达意义

目的探讨胃癌及癌前病变中端粒酶逆转录酶（hTERT）基因和c-myc，p53蛋白的表达，及相互关系。方法采用免疫组化和原位杂交方法检测c-myc、p53蛋白和hTERTmRNA，并对各指标阳性表达率和相互关系进行比较分析。结果正常胃粘膜-肠型化生-异型增生-胃癌中，c-myc蛋白的阳性率分别为0，28．7％，56．2％，66．8％；p53的阳性率为0，5．6％，18．7％，56．8％；hTERTmRNA的阳性率为10％，38．7％，68．7％，86．7％；三者在异型增生，胃癌中分别与正常组相比有显著差异性（P〈0．01），而且肠化与胃癌组比较也分别具有显著性差异（P〈0．05）；胃癌中c—myc，P53蛋白和hTERTmRNA的表达在低未分化较高中分化显著增高（P〈0．01-0．05）。c-myc与P53蛋白和hTERTmRNA在肠化、异型增生和胃癌中的表达呈显著正相关（P〈0．05）。结论c-myc，p53和hTERTmRNA过表达与胃癌的发生发展密切相关，其表达水平随着胃癌恶性程度的增加而增加；c-myc在转录水平上激活hTERTmRNA的表达，可能是胃癌发生发展的重要阶段。     

中老年结直肠癌细胞凋亡与增殖活性的研究

目的探讨结直肠癌细胞凋亡与增殖活性的临床病理意义。方法采用切口末端标记法（IUNEL），电镜观察显示凋亡细胞，免疫组化En Vosion法显示PCNA及p53蛋白表达，利用图像系统分析癌细胞DNA倍体。结果高分化型癌凋亡指数（Apoptosis Index，AI）、AI／PI（PCNA Index，PI）均高于低分化型癌（P〈0．05），而PI值、DNA〉王倍华值则高分化型低于低分化型癌（P〈0.05）；癌侵及黏膜下层、肌层、浆膜层时AI、AI／PI值逐层递减，而PI值、DNA〉王倍华值则逐层递增（P〈0．05）；肿瘤直径〈3cm、3-5cm、〉5cm3组AI、AI／PI值随肿瘤增大而递减（P〈0.01），其PI值、DNA〉王倍华值随肿瘤增大而递增（P〈0．05）,淋巴结阳性组PI值较阴性组高（P〈0．05），p53阴性组较p53阳性组AI值高（P〈0．05）。结论高分化、体积小的早期结直肠癌AI值较低，PI值增高；AI与PI呈负相关；PI值与淋巴结转移有关。显示癌瘤进展以细胞增殖为主而凋亡受抑。p53基因突变可显著降低癌细胞凋亡。     

三氧化二砷对鼻咽癌患者放疗增敏作用与增殖和凋亡相关蛋白关系

目的 探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）放疗增敏对鼻咽癌增殖和凋亡相关蛋白的影响.方法 将74例T1～4N0～1M0期鼻咽癌患者随机分为单纯放疗（简称放疗组）和ATO增敏组（简称增敏组）,观察两组患者放射治疗40Gy时鼻咽肿瘤和颈部淋巴结消退情况.每个患者在治疗前及放疗20 Gy后的24 h各取材1次.免疫组化EnVision法测定增殖核抗原（PCNA）、Bcl-2、Bax和p53蛋白表达.结果 放射治疗40 Gy时增敏组和放疗组的鼻咽肿瘤消退率分别43.6%（17/39例）和20.0%（7/35例）,差异有显著性（χ^2=4.684,P=0.003）;两组颈部淋巴结消退速度差异无显著性.治疗剂量为20 Gy的PCNA、Bcl-2、Bax和p53蛋白表达均下调,但仅增敏组PCNA和Bax差异有显著性（Z值分别-2.449和-3.031,P值分别为0.014和0.002）.两组24例肿瘤消失患者中,PCNA、Bax和p53蛋白下调与治疗前比较,差异有显著性（Z值分别为-2.656、-2.359和-1.999;P值分别为0.008、0.018和0.046）;肿瘤未消失患者中,仅PCNA下调,与治疗前比较差异有显著性（Z=-32.815,P=0.015）.结论 ATO对鼻咽癌患者有放射增敏作用,其增敏机制可能通过下调PCNA及凋亡相关蛋白,抑制肿瘤增殖和诱导凋亡有关.     

食管癌发展过程中COX-2蛋白和p53蛋白表达的研究

目的观察环氧合酶-2(COX-2)蛋白和p53蛋白在食管癌及癌前病变组织中的表达情况。方法应用免疫组化方法检测43例鳞状细胞癌及22例增生性病变和6例正常食管黏膜鳞状上皮中COX-2蛋白和p53蛋白的表达情况。结果正常食管黏膜上皮、单纯性增生、轻/中度不典型增生中未发现COX-2蛋白及p53蛋白表达。COX-2蛋白在重度不典型增生、食管鳞状细胞癌中表达阳性率分别为25%和74%,p53蛋白分别为75%和56%。COX-2蛋白、p53蛋白强阳性表达率在Ⅰ～Ⅱ期食管癌中分别为40%和18%,Ⅲ～Ⅳ期分别为为73%和77%。COX-2蛋白、p53蛋白表达与淋巴转移、浸润深度、肿物大小无关。结论 COX-2蛋白和p53蛋白的表达与食管癌的发展关系密切,是食管癌发展过程中的一个重要监测指标,可作为食管癌可疑病例定期随访的指标之一。     

p27和p21在血管平滑肌细胞增殖信号传导中的作用机制研究

目的　研究p2 7及p2 1在血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法　分离SD大鼠主动脉中层平滑肌,培养平滑肌细胞。实验前无血清培养基培养4 8h ,使细胞进入静止期。以无血清组为对照组,培养基中分别加入血小板源性生长因子-BB(PDGF -BB) 2 0 μg/L和AngⅡ10 -6M ,分别在刺激6 ,12 ,2 4h收集细胞。采用Western蛋白印记法,检测平滑肌细胞内p2 7和p2 1蛋白表达量。结果　与AngⅡ组比较,PDGF -BB组p2 7蛋白表达量明显下降,刺激2 4hp2 7蛋白表达量下降幅度最大,较对照组降低5 9.32 % ;AngⅡ组p2 7光密度值与对照组相近,比较无显著性差异。PDGF -BB组p2 1蛋白表达量则升高,刺激2 4h时PDGF -BB组光密度值较对照组增加了6 6 .95 % ,较AngⅡ组增加了10 1.14 % ,PDGF -BB组与对照组和AngⅡ组比较均有显著性差异(P <0 .0 1) ;AngⅡ组较对照组减少17% ,2组比较无显著性差异。结论　p2 7蛋白表达量在血管平滑肌细胞增殖中降低,而p2 1蛋白表达量升高,两者在血管平滑肌细胞增殖中的作用不同。     

角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌p53和Bcl-2表达的比较研究

目的研究p53、Bcl-2蛋白在角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌中的表达及意义。方法采用EnVision免疫组化二步法对12例角化棘皮瘤、8例高分化鳞状细胞癌,进行p53、Bcl-2的表达检测。结果p53蛋白在角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为50.0%和62.5%,两者比较无显著性差异(P>0.05);Bcl-2蛋白在角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为66.7%和87.5%,两者比较无显著性差异(P>0.05)。结论p53和Bcl-2蛋白均参与了角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌的发病过程,但不宜单独作为角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌的鉴别诊断标志。     

纳米雄黄对皮肤鳞癌 A431细胞 p53、Bcl-2表达的影响及相关机制探讨

目的：探讨纳米雄黄对皮肤鳞癌A431细胞p53、Bcl-2表达的影响及相关机制。方法通过细胞培养,应用逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）技术、免疫组化法观察纳米雄黄干预p53、Bcl-2在人皮肤鳞癌A431细胞中的表达情况。结果各浓度纳米雄黄干预组、注射用顺铂（ DDP）干预组及联合用药组的Bcl-2阳性率均明显低于对照组（ P＜0．05）;随着纳米雄黄浓度的升高, Bcl -2阳性率也明显降低（ P＜0．05）;联合用药组的Bcl-2阳性率明显低于各浓度纳米雄黄干预组和DDP干预组（P＜0．05）。各浓度纳米雄黄干预组、DDP干预组及联合用药组的p53的相对灰度值（RATIO）均明显高于对照组（P＜0．05）;随着纳米雄黄浓度的升高,p53的RATIO明显升高（P＜0．05）;联合用药组的p53的RATIO明显高于各浓度纳米雄黄干预组和DDP干预组（P＜0．05）。各浓度纳米雄黄干预组条带灰度高于对照组;5％、10％、20％纳米雄黄干预组条带亮度依次变大;联合用药组条带亮度较DDP干预组、各浓度纳米雄黄干预组大,内参β-actin见不到肉眼可见的浓度变化。结论纳米雄黄可上调p53表达和下调Bcl-2表达,与DDP联合应用有协同作用,可能是纳米雄黄诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡的机制之一。     

皂角刺抑制小鼠宫颈癌U14的生长及对增殖细胞核抗原和p53表达的影响

目的:研究皂角刺醇提物对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用及对增殖细胞核抗原(PCNA)和突变型p53蛋白表达的影响。方法:观察皂角刺醇提物对U14实体瘤和腹水瘤的抑瘤率和生命延长率,并用免疫组化SP法检测PCNA和突变型p53蛋白阳性细胞表达数。结果:以阴性对照组为基数,皂角刺醇提物3个剂量组及环磷酰胺(CTX)阳性对照组实体瘤各组抑瘤率分别为47.44%,59.49%,63.92%,73.42%(P<0.01);腹水瘤各组生命延长率分别为52.21%,67.26%,78.76%,95.58%(P<0.01)。同时各组药物对PCNA和突变型p53蛋白的表达水平也有不同程度抑制作用(P<0.01,P<0.05)。结论:皂角刺对小鼠宫颈癌U14的生长有一定的抑制作用,其机制可能与抑制PCNA和突变型p53蛋白的表达有关。     

p14ARF基因在肺癌中的表达及意义

目的:探讨p14ARF基因在肺癌中的表达及意义.方法:采用免疫组化S-P法,检测60例肺癌及20例正常肺组织中p14ARF蛋白的表达情况.结果:p14ARF在肺癌组织中的阳性率为43.3%,显著低于正常肺组织的95%,两组间差异有显著性(P<0.05);p14ARF与肺癌患者的性别、年龄、组织学类型、分化程度及淋巴结转移等无相关性(P>0.05).结论:p14ARF的表达缺失在肺癌的发生发展中起重要作用,可作为肺癌基因诊断和治疗的靶点.     

理冲汤对体外培养人子宫肌瘤细胞 p53信号通路基因表达谱的影响

目的:研究理冲汤对体外培养人子宫肌瘤细胞p53信号通路基因表达谱的影响。方法:体外原代培养子宫肌瘤细胞并传代后,加入理冲汤含药血清,继续培养。选用功能分类PCR p53信号通路基因芯片(PCR p53 Signaling PathwayMicroarray),从空白对照组、理冲汤组子宫肌瘤细胞中进行样品的RNA抽提及纯化,采用紫外吸收测定法及变性琼脂糖凝胶电泳进行RNA质量检测,合成cDNA,最后进行实时定量PCR。结果:所采用的PCR p53信号通路基因芯片共检测96条基因,理冲汤组与空白对照组比较,共17条(17.7%)基因表达发生明显变化,其中10条基因表达量明显下降(Fold Down-Regulation<-2),7条基因表达量上升(Fold Up-Regulation>2)。按功能将其进行大体分类,涉及到细胞凋亡、细胞周期、细胞生长增殖和分化、DNA修复等多方面。结论:理冲汤对子宫肌瘤p53信号通路的细胞凋亡、细胞周期、细胞生长增殖和分化、DNA修复等相关基因均有调节作用,提示细胞内外的信号传导是子宫肌瘤发病的关键环节,理冲汤对子宫肌瘤p53信号通路相关基因表达具有调控作用。     

p53基因生物制剂的研究进展

p53基因是声名显赫的抑癌基因.大约50%的人类肿瘤中都发现有异常的p53基因存在,包括有点突变、等位基因缺失、重排、插入、基因融合等.p53基因存在于人体正常细胞,在体内控制着与肿瘤生成和生长相关的多种不同基因的表达,并受Mdm2和p19-Arf等的调节控制.p53蛋白对细胞周期起负调控作用,抑制细胞从G1期到S期的进展,其对周期的调节有2种途径:一是"短期抑制",为细胞周期关卡调控因子,调节DNA复制过程;二是"长期抑制",发现DNA损伤时启动修复或是诱导其凋亡.     

卵巢肿瘤细胞凋亡与细胞增殖的关系

目的 :评估卵巢肿瘤细胞凋亡与增殖状况及两者的关系。方法 :运用流式细胞术检测良交恶三组卵巢肿瘤中bcl-2、p16、Rb,Cyclin D1蛋白及 TGF-β1 因子的表达和 DNA含量 (恶性组 3 3例、交界组 12例、良性组 5例 )。各指标间的相关性通过单因素直线相关分析和多因素直线相关分析来评估。结果 :bcl-2和 AP%间 ,TGF-β1 和 PI间俱呈负相关 ( r=-0 .2 8,P<0 .0 5 ,r=-0 .2 5 ,P<0 .0 5 )。多因素相关分析发现 p16的 F I值和 PI值呈负相关 ( Yi=-2 0 .3 2 ,P=0 .0 81)。恶性组和交界组卵巢肿瘤的 AP%值与良性肿瘤比较发生了相对减少。多因素分析证实 A P%值与 DI值呈负相关 ( Yi=-9.96,P=0 .0 3 7)。恶性组的细胞累积率高于良性组 ( P<0 .0 1)和交界组 ( P<0 .0 5 )。bcl-2和 p16呈负相关 ( r=-0 .2 6,P<0 .0 5 )。结论 :bc L -2能够抑制凋亡 ,它的增加有助于细胞恶性转变。 TGF-β1 能够抑制增殖 ,细胞对 TGF -β1 反应性的降低有助于恶变。 p16、 Rb的缺失和 Cyciln D1的增加有助于卵巢癌的发生和发展。恶性肿瘤中 AP%值的相对下降对于肿瘤恶变具有重要意义。 bcl-2和 p16间的负相关提示凋亡和增殖间具有相互作用。正由于凋亡相关蛋白和细胞周期调节因子间的相互作用 ,使恶性肿瘤保持较高的细胞累积率。     

p16、ER及PR在宫颈病变中的表达及与临床病理关系的研究

目的探讨p16、雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)在不同程度宫颈病变组织中的表达及与临床病理的关系。方法采用免疫组化SP法染色观察p16、ER及PR在117例宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)及正常宫颈组织中的表达情况。结果p16、ER及PR在宫颈鳞癌组中的阳性表达率分别为100%,7%和4%;在CINⅢ级组中的阳性表达率分别为79%,12%和8%;在CINⅡ级组中的阳性表达率分别为77%,41%和14%;在CINⅠ级组中的阳性表达率分别为76%,69%和52%;正常对照组p16阴性表达,ER、PR表达率为100%,93%。宫颈鳞癌、CINⅢ级、CINⅡ级及CINⅠ级组织中p16、ER及PR阳性表达率与正常对照组比较有显著性差异(P均0.01)。结论p16与宫颈鳞癌、CIN的发生、发展密切相关;p16的升高与宫颈病变程度呈正相关。     

回药爱康方含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白表达的影响

目的探讨回药爱康方(AKR)含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白表达的影响。方法将80只大鼠分为8组,每组10只:生理盐水对照组(NS),回药爱康方低、中、高剂量(AKRL、AKRM、AKRH)组,环磷酰胺(CTX)组,回药爱康方低、中、高剂量联合环磷酰胺(AKRL/AKRM/AKRH+CTX)组。制备含药血清。MTT法检测各组含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖的影响,免疫细胞化学法检测细胞Bcl-2以及p53蛋白的表达。结果和NS组比较,回药爱康方对SK-MES-1细胞生长增殖有抑制作用(P0.05)。回药爱康方高剂量联合CTX组的抑制率最高(P0.05)。免疫细胞化学法检测结果显示,在不同浓度的含药血清作用下,和NS组相比,各实验组细胞的IOD值逐渐减小,差异有统计学意义(P0.05);20%浓度的含药血清各实验组IOD值低于5%、10%浓度的含药血清组(P0.05)。分别干预细胞24h、48h、72h后,与NS组比较,各实验组细胞的IOD值逐渐减小(P0.05);20%浓度含药血清干预细胞72h,各实验组的阳性表达逐渐减弱,IOD值较低(P0.05),AKRH+CTX组细胞的抑制率最高,故阳性表达最弱,IOD值最低。结论回药爱康方可以降低人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白的表达,抑制SK-MES-1细胞增殖。     

p53、bcl-2蛋白表达与胃癌生物学行为的关系

目的研究p53、bcl-2蛋白在胃癌及癌前病变中的表达与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法，检测p53、bcl-2蛋白在60例胃癌、46例异型增生和20例正常胃黏膜中的表达情况。结果p53在正常胃黏膜不表达，异型增生表达率为20％，随胃黏膜异型增生程度的加重，p53表达逐渐增高，在胃癌中的阳性表达率为53％。bcl-2在胃癌中的阳性表达率为47％，在异型增生中表达率为48％，在正常胃黏膜中表达呈弱阳性。bcl-2表达与胃癌的分化程度有关（P〈0．05），与淋巴结转移、浸润深度无关（P〉0．05）；p53表达与上述临床病理因素均无关。结论p53、bcl-2蛋白的表达与胃黏膜增殖和恶化密切相关，可作为评估胃癌预后的参考指标。     

p53、bcl-2蛋白表达与胃癌生物学行为的关系

目的研究p53、bcl-2蛋白在胃癌及癌前病变中的表达与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法,检测p53、bcl-2蛋白在60例胃癌、46例异型增生和20例正常胃黏膜中的表达情况。结果p53在正常胃黏膜不表达,异型增生表达率为20%,随胃黏膜异型增生程度的加重,p53表达逐渐增高,在胃癌中的阳性表达率为53%。bcl-2在胃癌中的阳性表达率为47%,在异型增生中表达率为48%,在正常胃黏膜中表达呈弱阳性。bcl-2表达与胃癌的分化程度有关(P<0.05),与淋巴结转移、浸润深度无关(P>0.05);p53表达与上述临床病理因素均无关。结论p53、bcl-2蛋白的表达与胃黏膜增殖和恶化密切相关,可作为评估胃癌预后的参考指标。     

自拟善胃方对萎缩性胃炎癌前病变患者p16、p21的影响

目的　观察自拟善胃方对慢性萎缩性胃炎 (CAG)伴有胃粘膜异型增生 (Dys)和 (或 )肠上皮化生 (IM)的治疗效果 ,并观察抑癌基因蛋白p16 (p16 )以及癌基因蛋白 p2 1(p2 1)在治疗前后的表达情况。 方法　将内镜和病理确诊为CAG且伴有Dys和 (或 )IM的患者 6 0例 ,随机分为治疗组和对照组。治疗组 30例 ,给予善胃方 ;对照组 30例 ,给予猴头菌片 ,两组均用药 12周。结果　 1)善胃方在总体疗效方面(90 .0 0 % )优于猴头菌片对照组 (5 6 .6 7% ) ,P <0 .0 5 ;2 )中药治疗组患者治疗前后腺体萎缩程度缓解明显优于对照组 ,P <0 .0 5 ;3)中药治疗组患者治疗前后粘膜Dys、IM改善显著优于对照组 ,P <0 .0 5 ;4 )中药治疗组中 ,粘膜p16表达经治疗显著提高 ,P <0 .0 5 ,而对照组治疗前后 p16表达水平无显著变化 ;5 )中药治疗组中 ,粘膜 p2 1表达经治疗显著降低P <0 .0 1,而对照组治疗前后p2 1表达水平无显著变化。 结论　中药善胃方对萎缩性胃炎有良好的治疗作用 ,并在一定程度上可使粘膜Dys、IM改善 ,提高 p16的表达 ,降低 p2 1的表达。