小檗碱对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖影响研究

目的:观察小檗碱(Berberine)对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖影响及对核因子-κB(NF-κB)的影响。方法:采用一次性腹腔注射链脲佐菌素55mg.kg-1诱发糖尿病大鼠模型,取建模成功大鼠胸主动脉中膜血管平滑肌细胞进行培养,倒置显微镜下观察细胞形态,SMA免疫组化染色鉴定细胞,计数法观察细胞的生长曲线,CCK-8法测定小檗碱IC50,共聚焦显微镜下观察小檗碱对VSMC中NF-κB核转移的影响。结果:与正常组对比,糖尿病组VSMC生长速度快,小檗碱能明显抑制糖尿病血管平滑肌细胞增殖,IC50为6.001±0.853μmol.L-1,而对正常大鼠VSMC增殖的IC50为18.229±0.434μmol.L-1(P<0.05)有剂量依赖性;小檗碱能抑制糖尿病VSMC中NF-κB从胞浆转移到胞核。结论:小檗碱呈剂量依赖性能抑制糖尿病VSMC增殖与NF-κB的核转移。揭示小檗碱可能有抑制糖尿病大血管病变作用,而此作用可能与抑制NF-κB激活有关。     

瘦素促进低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞增殖及HIF-1α、NF-κB表达

目的研究瘦素对低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法分常氧、低氧2种状态体外培养大鼠ASMC,按随机数字表法将低氧组细胞分为低氧组、50μg/L瘦素联合低氧组(L50组)、100μg/L瘦素联合低氧组(L100组)、200μg/L瘦素联合低氧组(L200组)、200μg/L瘦素联合低氧和瘦素受体抗体组(ob-R抗体组)。各组均孵育24 h,CCK-8法检测细胞增殖率,反转录PCR检测HIF-1α、NF-κB的mRNA的表达,Western blot法检测HIF-1α、NF-κB的蛋白表达。结果与常氧组相比,各低氧组细胞增殖活性明显增强;与低氧组相比,L50、L100、L200组细胞增殖活性增强,并与浓度呈正相关(r=0.992);与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组细胞增殖明显降低。与常氧组相比,各低氧组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加;与低氧组相比,L50、L100、L200组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加,并与浓度呈正相关;与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达降低。结论瘦素能促进低氧状态下ASMC增殖,并且能够促进HIF-1α、NF-κB的表达。     

核转录因子-κB在糖尿病大鼠正中隆起室管膜细胞的表达

目的:观察核转录因子κB(NF-κB)在糖尿病大鼠不同时期正中隆起室管膜细胞的表达差异.方法:免疫组织化学观察NF-κB在2、4、8、11周的糖尿病大鼠及正常大鼠正中隆起处细胞内的表达情况.结果:NF-κB在2周组阳性表达水平最高,与正常对照组、4周、8周、11周比较差异有统计学意义;4周、8周组表达水平下降,但与11周、正常对照组比较差异有统计学意义;11周与正常组织之间无差异.结论:糖尿病时正中隆起处NF-κB阳性表达不同时期有差异,提示正中隆起作为敏感部位在糖尿病早期时,该处的NF-κB就被激活,参与了神经内分泌及神经免疫调节.     

核转录因子κB在门静脉高压大鼠肺血管中的表达及意义

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)在门脉高压大鼠肺血管中的表达及意义。方法:建立门脉高压大鼠模型,将实验动物随机分为三组:实验模型组,银杏治疗组,对照组,动态观察其肺血管NF-κBp65的表达。结果:对照组平均光密度值0.2229±0.0008、实验组0.3007±0.0044、治疗组0.2866±0.0037。造模后第2周、3周、4周,实验组为:0.2739±0.0383、0.2982±0.0754、0.3202±0.0592;治疗组为:0.2625±0.0534、0.2890±0.0686、0.2918±0.0683。对三组结果进行两两非配对t检验,都具有显著性差异(P<0.01);相同时间段实验组与治疗组间亦具有显著性差异(P<0.01)。结论:门脉高压可促成肺血管组织NF-κBp65的高表达,并在门脉高压引起的血管病变中发挥重要作用;银杏注射液对NF-κBp65的高表达有抑制作用。     

核转录因子NF-κB的研究进展

核转录因子ＮＦ κＢ(ｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ κＢ ,ＮＦ κＢ)是一类关键性的核转录因子 ,通常以同源或异源二聚体非活性形式存在于几乎所有类型细胞的胞质 ,具有十分重要的功能。它与免疫细胞的活化 ,Ｔ和Ｂ淋巴细胞的发育 ,应激性反应 ,细胞凋亡等多种细胞活动有关。许多因素可激活核转录因子ＮＦ κＢ ,使其从细胞质转位于细胞核 ,与ＮＦ κＢ反应性基因的κＢ位点结合并调控ＮＦ κＢ反应性基因的转录。我们对近年来有关核转录因子ＮＦ κＢ活化的信号转导机制 ,ＮＦ κＢ对炎性分子转录的调控 ,ＮＦ …     

NF-κB与危重病治疗

核因子 κB (NF κB)为一种参与多种炎症介质基因表达的转录因子。NF κB过度及长时间激活与许多炎性疾病 ,包括脓毒性休克、急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)、缺血及再灌注损伤等有关。为减轻组织和器官损伤 ,NF κB在调控炎症中的重要作用使之成为一个治疗目标。通过基因治疗策略或药物抑制导致NF κB活化中的关键步骤 ,能调控NF κB信号转导。     

黄芩苷抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖和新生内膜肥厚

目的 探讨黄芩苷对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和内皮损伤诱导的新生内膜形成的影响及其机制。方法 采用细胞培养、MTT分析、Western blot及免疫组织化学等方法研究黄芩苷的作用机制。结果 黄芩苷可呈浓度依赖性地抑制血小板源生长因子（PDGF）诱导的VSMC增殖,降低增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,阻断PDGF受体的激活和MEK/ERK信号通路的活化。整体实验显示,黄芩苷可预防球囊损伤诱导的血管新生内膜肥厚,明显降低内膜/中膜面积（I/M）比值（P<0.01）;PCNA、细胞间黏附分子（ICAM-1）和血管黏附分子（VCAM-1）蛋白的表达也明显减少（P<0.01）。结论 黄芩苷通过抑制VSMC增殖而阻止球囊损伤诱导的大鼠血管内膜增生。     

雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织PGE2与NF-κB表达的影响

目的观察雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织前列腺素E2(PGE2)与核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法选取50只雄性SD大鼠,随机分为正常组(n=10)、模型组(n=20)及雷公藤甲素组(n=20)。模型组与雷公藤甲素组大鼠给予高糖高脂饮食,并以链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病肾病大鼠模型。8周后处死大鼠,检测相应生化指标并计算肾脏指数,免疫组织化学方法和Western blot方法检测PGE2与NF-κB的蛋白表达。结果模型组大鼠肾脏指数、血糖、血肌酐和24 h尿蛋白较对照组显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠的各项指数显著降低,P0.05。与对照组比较,模型组大鼠肾脏组织PGE2与NF-κB的蛋白表达显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠肾脏组织PGE2与NF-κB的蛋白表达显著降低,P0.05。结论雷公藤甲素能降低糖尿病肾病大鼠肾组织PGE2与NF-κB的水平,具有一定的肾保护作用。     

核转录因子κB/环氧化酶-2参与糖尿病肾病大鼠肾细胞增殖

目的探讨核转录因子-κΒ(NF-κΒ)/环氧化酶-2(COX-2)信号与糖尿病肾病大鼠肾细胞增殖的关系。方法单侧肾切除大鼠ip链脲佐菌素诱发糖尿病模型,16周后切除左肾。用免疫组织化学检测肾皮质NF-кB和COX-2蛋白的表达;用正常糖和高糖培养基培养肾小管上皮细胞,24、48和72h后收集细胞,用免疫细胞化学检测PCNA蛋白的表达,流式细胞术检测NF-кB和COX-2蛋白的表达。结果(1)糖尿病模型组肾脏肥大指数增加,肾小球体积增大,系膜基质增多;(2)糖尿病模型组肾组织中活化的NF-кB和COX-2蛋白表达高于对照组,两者呈显著正相关;(3)高糖组肾小管上皮细胞PCNA表达强于正常糖组;(4)高糖能够上调肾小管上皮细胞NF-кB和COX-2蛋白的表达,两者呈显著正相关;同时COX-2蛋白表达与PCNA阳性率呈显著正相关。结论活化NF-κB,上调COX-2蛋白表达从而引起肾脏固有细胞的增殖可能是糖尿病肾脏损伤的机制之一。     

核转录因子κB/环氧化酶-2参与糖尿病肾病大鼠肾细胞增殖

目的 探讨核转录因子-κB(NF-κB)/环氧化酶-2(COX-2)信号与糖尿病肾病大鼠肾细胞增殖的关系.方法 单侧肾切除大鼠ip链脲佐菌素诱发糖尿病模型,16周后切除左肾.用免疫组织化学检测肾皮质NF-κB和COX-2蛋白的表达;用正常糖和高糖培养基培养肾小管上皮细胞,24、48和72 h后收集细胞,用免疫细胞化学检测PCNA蛋白的表达,流式细胞术检测NF-κB和COX-2蛋白的表达.结果 (1)糖尿病模型组肾脏肥大指数增加.肾小球体积增大,系膜基质增多;(2)糖尿病模型组肾组织中活化的NF-κB和COX-2蛋白表达高于对照组,两者呈显著正相关;(3)高糖组肾小管上皮细胞PCNA表达强于正常糖组;(4)高糖能够上调肾小管上皮细胞NF-κB和COX-2蛋白的表达,两者呈显著正相关;同时COX-2蛋白表达与PCNA阳性率呈显著正相关.结论 活化NF-κB,上调COX-2蛋白表达从而引起肾脏固有细胞的增殖可能是糖尿病肾脏损伤的机制之一.     

黄芪多糖通过NF-κB诱导巨噬细胞产生NO和TNF-α

目的 通过体外试验研究黄芪多糖(Astragalus mongholicus polysaccharides,ASP)激活巨噬细胞产生NO和TNF-α的分子机制和细胞内信号转导机制.方法 黄芪多糖刺激RAW264.7细胞,用Western blot方法 检测细胞核内核转录因子-κB(NF-κB)的变化.用Griess还原法观察黄芪多糖对巨噬细胞释放NO的作用的影响以及NF-κB抑制剂对黄芪多糖诱导巨噬细胞释放NO作用和分泌TNF-α的影响.ELISA法检测黄芪多糖对巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化.结果 100μg/ml黄芪多糖刺激RAW264.7细胞,4 h后可引起细胞核内NF-κB含量显著增加,6 h达到顶峰.16 h后可显著诱导NO[(18.9±1.5)μmol/L;P<0.01]释放和TNF-α分泌[(81.2±16.7)pg/ml,P<0.01]的增加,以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)[(23.54±2.41)U/mg蛋白质,P<0.01]活性的增加.NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)可明显抑制黄芪多糖诱导RAW264.7生成NO和分泌TNF-α.结论 NF-κB在黄芪多糖诱导巨噬细胞生成NO和TNF-α过程中发挥重要作用.     

黄芪多糖通过NF-κB诱导巨噬细胞产生NO和TNF-α

Objective To explore the molecular and cell signal transduction mechanism of Astragalus mongholicus polysaccharides (ASP) on macrophage. Methods After stimulating RAW264.7, the change in value of NF-κB was determined by Western blot. The induction of NO and secretion of TNF-α by ASP in macrophage was observed with or without inhibitor of NF-κB using Griess method. Moreover, protein levels of TNF-α secreted by macrophage were investigated with ELISA in respond to ASP. Results 4 h after stimulation by 100 μg/ml ASP, the concentration of NF-κB in nucleus increased significantly, peaked at 6 h. 16 h after stimulation by 100 μg/ml ASP, the activity of iNOS[(23.54±2.41) U/mg protein; P<0.01], producton of NO [(18.9±1.5)μmol/L, P<0.01] and level of TNF-α[(81.2±16.7)pg/ml, P<0.0l] in macrophage were improved markedly. Blocking NF-κB with inhibitor results in decreased levels of NO and TNF-α. Conclusion The results suggest that NF-κB play an important role in induction of NO and TNF-α by ASP in macrophage.     

黄芪多糖通过NF-κB诱导巨噬细胞产生NO和TNF-α

Objective To explore the molecular and cell signal transduction mechanism of Astragalus mongholicus polysaccharides (ASP) on macrophage. Methods After stimulating RAW264.7, the change in value of NF-κB was determined by Western blot. The induction of NO and secretion of TNF-α by ASP in macrophage was observed with or without inhibitor of NF-κB using Griess method. Moreover, protein levels of TNF-α secreted by macrophage were investigated with ELISA in respond to ASP. Results 4 h after stimulation by 100 μg/ml ASP, the concentration of NF-κB in nucleus increased significantly, peaked at 6 h. 16 h after stimulation by 100 μg/ml ASP, the activity of iNOS[(23.54±2.41) U/mg protein; P<0.01], producton of NO [(18.9±1.5)μmol/L, P<0.01] and level of TNF-α[(81.2±16.7)pg/ml, P<0.0l] in macrophage were improved markedly. Blocking NF-κB with inhibitor results in decreased levels of NO and TNF-α. Conclusion The results suggest that NF-κB play an important role in induction of NO and TNF-α by ASP in macrophage.     

NF-κB在急性胰腺炎中的研究进展

NF-κB(转录因子核因子-κB)是一类主要参与机体炎性分子表达调控的转录分子，在急性胰腺炎中，其表达也受到很大的影响，苓主要对近几年NF-κB在急性胰腺炎中的研究作一综述。     

核转录因子-κB与支气管哮喘的研究进展

近年来,支气管哮喘发病率呈逐年上升趋势,有效控制哮喘的发生对哮喘患者的生活质量至关重要.目前研究认为气道炎症和气道重构是支气管哮喘病理过程的两个重要方面.此过程与多种炎性蛋白的高表达有关,而核转录因子-κB(NF-κB)作为这些炎症蛋白的上游调控因子参与了哮喘的病理发展.由此,特异性的抑制NF-κB信号转导通路为支气管哮喘的治疗开辟了一条新的途径.     

NF-κB在糖尿病大鼠肾脏和血液单个核细胞中的表达

探讨NF κB在糖尿病肾病 (DN)发病机制中的作用。应用电泳迁移率实验和超迁移率实验检测了 12周STZ—糖尿病大鼠血液单个核细胞和肾组织提取物中NF κB的表达及组成NF κB的亚单位。发现糖尿病大鼠肾组织和血液单个核细胞NF κB的表达显著高于正常对照组 (P均 <0 0 5 ) ,进一步利用超迁移率实验证实血液单个核细胞NF κB由P50 和P6 5抗体组成 ,而肾组织NF κB仅P6 5抗体参与 ;丙丁酚干预后可下调肾和血液单个核细胞NF κB的表达 ,但与糖尿病组比较 ,差异仍有显著性 (P均 <0 0 5 )。提示糖尿病时存在NF κB的激活与持续高表达 ,NF κB可能通过调节参与DN发病机制中重要因子的表达 ,在DN发生过程中起关键作用 ;丙丁酚可以抑制DN时NF κB的表达。     

BDNF对大鼠急性脊髓损伤后NF-κB表达的影响

目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)对急性脊髓损伤大鼠核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达的变化。方法参照Nystrom压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,按随机数字表法分为正常对照组8只、损伤组32只、BDNF组32只。免疫组化和Western blot检测各组大鼠NF-κB的表达。结果免疫组化结果显示:损伤组与BDNF组NF-κB阳性产物的平均光密度值(mean optic density,MOD)显著高于正常对照组(P<0.01);而BDNF组与损伤组相比A值明显降低(P<0.01);Western blot结果显示:与正常对照组比较,损伤组与BDNF组NF-κB的灰度值(integrated density value,IDV)与内参照IDV的比值明显升高(P<0.01),而BDNF组则明显低于损伤组(P<0.01)。结论 BDNF很可通过下调NF-κB的表达参与脊髓继发性损伤。     

核因子-κB在糖尿病肾组织中的表达及干预治疗

核因子(NF)-κB是细胞中一种重要的核转录因子，它参与细胞内的信号转导、免疫反应、炎症反应以及细胞生长发育等多种生物过程，在细胞因子诱导的基因表达中起关键性的调控作用。活化的NF-κB可能通过调控许多炎症因子的转录过程在糖尿病肾病（DN）的发生发展过程中起重要作用。抑制NF-κB的激活和IκB的降解等干预治疗可能是防治DN的手段之一。     

大鼠硅肺纤维化中NF-κB和MMP-9的表达

目的 研究核转录因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达在硅肺纤维化发生发展中的作用。方法 应用免疫组化SP法观察NF-κB和MMP-9在大鼠硅肺组织中的表达。结果 对照组支气管上皮细胞、肺巨噬细胞和肺间质细胞均可表达NF-κB和MMP-9，肺泡上皮细胞和血管内皮细胞未见表达。实验组的支气管上皮细胞、肺巨噬细胞、间质细胞和肺泡上皮细胞NF-κB、MMP-9表达均明显增加。在实验的每一个时间点，肺巨噬细胞、肺间质细胞中NF-κB和MMP-9的半定量表达基本同步，呈明显正相关。支气管上皮细胞NF-κB在1～28d均呈持续高水平表达，但MMP-9在14d后开始减少；肺泡上皮细胞NF-κB在114d呈较高水平表达，以后下降，而MMP-9仅于第3～7天时有阳性表达。结论 矽尘作用下肺内多种细胞NF-κB和MMP-9表达增加，并可能通过NF-κB介导调控MMP-9表达而影响硅肺的发生发展。