头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的评价

目的:评价头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的可靠性和临床实用性.方法:将临床分离得到的葡萄球菌310株,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法实验,并以PCR检测葡萄球菌mecA基因为判断标准,比较4种方法的敏感性及特异性.结果:经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为57.1%(113/198),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为62.5%(70/112).头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,检测MRCNS敏感性为98.6%,特异性为100%.结论:头孢西丁纸片扩散法操作简便,结果可靠,可作为临床实验室检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法.     

PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因

[摘要] 目的 应用mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。方法 对临床分离的84株金黄色葡萄球菌,应用mecA基因PCR扩增法鉴定MRSA,并与苯唑西林纸片扩散法和头孢西丁纸片扩散法进行比较。结果 84株金黄色葡萄球菌中, 41株金黄色葡萄球菌的mecA基因扩增呈阳性,其中有1株表现为对苯唑西林敏感;苯唑西林纸片扩散法检出42株阳性，其中有2株mecA基因呈阴性. 头孢西丁纸片扩散法与PCR扩增法的试验结果完全符合。结论 mecA基因PCR扩增法可以准确、快速判定MRSA。     

凝固酶阴性葡萄球菌主动外排基因MsrA的检测分析

目的:调查凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase negative staphylococci,CNS)耐药现状,采用PCR分别检测mecA及MsrA基因,探讨主动外排系统在耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin resistant coagulase negative staphylococci,MRCNS)中的耐药机制,为临床预测MRCNS耐药菌株的发展趋势?合理选用抗菌药物进行治疗及预防MRCNS的爆发流行提供依据?方法:收集临床分离的120株MRCNS,采用K-B法作11种抗菌药物敏感试验,并用聚合酶链反应(PCR)分别检测mecA及MsrA基因,并将3种结果进行对比分析?结果:120株凝固酶阴性葡萄球菌中mecA 基因阳性79株,阳性率65.8%,MsrA基因阳性26株,阳性率21.7%,且MsrA基因阳性菌株mecA 基因全部呈阳性,对9种抗生素的耐药率也明显高于MsrA基因阴性组?结论:PCR 检测 mecA及MsrA基因可快速准确判定耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌,一旦发现MsrA基因就应慎用大环内酯类?氟喹诺酮类?克林霉素类?β-内酰胺类药物?     

压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究

目的：探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性。方法：收集临床64株葡萄球菌标本，对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA增后应用压电传感器阵列进行检测，并以PCR电泳检测作参照，与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析。结果：传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致，而此两种方法与常规培养加药敏法比较。结果略有差异。所有64株葡萄球菌中，2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA为阴性，2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA)的mecA为阳性，1株耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌（MRCNS）的mecA为阴性；2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）的mecA为阳性。结论：以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因，既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌，又可判断其耐药类型，能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据。     

4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌方法的评估

目的 评价4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)方法的临床应用价值.方法 对287株临床分离的凝固酶阴性葡萄球菌采用苯唑西林纸片扩散法,头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS,并采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因作为检测MRCNS的金标准.结果 287株中有218株为MRCNS,头孢西丁纸片扩散法筛选MRCNS敏感性为97.7%,特异性为95.7%;苯唑西林K-B法筛选MRCNS敏感性为99.1%.特异性为66.7%;苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS敏感性为98.6%.特异性为60.9%.结论 头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRCNS的简便又准确的实验方法.     

头孢西丁替代苯唑西林检测"耐甲氧西林"的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌

目的探讨头孢西丁纸片扩散法替代苯唑西林检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的准确率。方法临床标本培养鉴定出的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌同时用苯唑西林和头孢西丁筛选(K-B法)耐药菌株,再用PBP2a胶乳法进一步检测耐药菌株的mecA基因。结果121株的葡萄球菌,对苯唑西林的耐药率为97.5%,其中金黄色葡萄球菌31株,表皮葡萄球菌67株,腐生葡萄球菌18株,溶血葡萄球菌5株,用PBP2a胶乳试剂和头孢西丁纸片检测金葡菌中MRSA发生率均为77.4%(24/31),凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS发生率96.6%(87/90)和94.4%(85/90)。头孢西丁纸片扩散法的符合率为99%(109/111)。结论苯唑西林纸片扩散法检测MRSA假阳性率较高,而头孢西丁纸片法(K-B法)与PBP2a胶乳凝集法检测MRSA和MRCNS的结果相近,适合实验室推广使用。     

耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的比较

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为金标准，比较头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的优缺点。方法对临床分离的70株葡萄球菌（其中金黄色葡萄球菌40株，凝固酶阴性的葡萄球菌30株）分别用PCR法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌，药敏试验方法按标准KB（Kirby Bauer）法进行。结果经PCR法检测mecA基因，耐甲氧西林的金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的发生率分别为75．0％（30／40）和80．0％（24／30）；头孢西丁纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为93．3％、95．9％；90．0％和100％；苯唑西林纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为90．00%、87．5％；90．0％和83．3％；乳胶凝集法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为100．0%、100．0％；100．0％和100．0％。与PCR结果比较，3种方法所获得的结果经统计学分析，差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法是成批检测的理想方法；乳胶凝集法检测快速，结果可靠，但检测成本高；实验室应选择合适的方法，以提高MRS的检出率。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌三种筛查方法比较

目的：以PCR检测的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA基因为金标准,比较耐甲氧西林金葡菌快速胶乳凝聚检测法、头孢西丁纸片法、苯唑西林纸片法三种检验方法在MRSA筛查中的特异性和敏感性。方法：采用NCCLS推荐的30μg头孢西丁纸片法和苯唑西林纸片法,以及快速乳胶法检测。结果：苯唑西林纸片法检测MRSA阳性47株,阴性36株,敏感性94%,特异性94.7%。头孢西丁纸片法检测MRSA阳性49株,阴性38株,敏感性98%,特异性100%。快速胶乳检测法检测MRSA阳性49株,阴性37株,敏感性98.0%,特异性97.4%。结论：头孢西丁纸片法、快速胶乳检测法与PCR法这个金标准有很高的一致性。     

用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 探讨用头孢西丁纸片扩散法确证耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)在临床实验室的应用.方法 采用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的120株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌(SA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)各60株.并与苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林-NaCl琼脂筛选法进行比较.结果 三种方法检测MRSA结果没有差异;在CNS中有1株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林-NaCl 琼脂筛选法检测耐药,苯唑西林纸片扩散法敏感;6株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法耐药,苯唑西林-NaCl琼脂筛选法敏感.结论 头孢西丁纸片扩散试验可用于多种表型的MRS,尤其对低水平表达、异质性耐药的MRS,是临床实验室确证MRS的一种可靠方法.     

头孢西丁和拉氧头孢低密度菌落法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌

目的 评价头孢西丁和拉氧头孢低密度菌落法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的可靠性和临床实用性.方法 临床收集的93株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),按法国生物学会(CASFM)推荐的头孢西丁和拉氧头孢30μg低密度菌落法检测MRCNS,并与mecA基因PCR扩增法进行比较.结果 以mecA基因PCR扩增法为金标准,其中MRCNS 56株(阳性率60.2%),低密度菌落法头孢西丁的敏感性和特异性分别为94.6%和100%,拉氧头孢的敏感性和特异性分别为100%和97.3%.结论 头孢西丁和拉氧头孢低密度菌落法是鉴定异质性MRCNS的良好方法.     

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性

目的 观察凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）对甲氧西林等的耐药性和β-内酰胺酶的产生率,指导临床用药。方法 对本院临床感染标本常规分离鉴定菌株,药敏试验应用K-B纸片扩散法,按NCCLS规定的标准进行,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）MIC测定应用Vitex微生物自动分析系统,β-内酰胺酶检测采用碘量试管法。结果 CNS95株中MRCNS的分离率为39%,β-内酰胺酶的阳性率为63%,MRCNS的产酶率为95%,以甲氧西林敏感的葡萄球菌（MSCNS）的产酶率为43%;95%株CNS对万古霉素100%敏感,对氨苄青、青霉素、红霉素最低耐药率为85%,对头孢派酮、头孢唑林、舒普深最低敏感率为83%。结论 MRCNS和MSCNS的产酶率与对甲氧西林的耐药性呈正相关,MRCNS与产β-内酰胺酶葡萄球菌间的耐药率无显差异。目前万古霉素和舒普深是治疗MRCNS和产酶CNS的首选抗生素。     

三重聚合酶链反应快速诊断耐甲氧西林葡萄球菌感染

目的建立一种能快速有效地对葡萄球菌感染进行病原体诊断的方法.方法利用三重聚合酶链反应技术(Triplex PCR)同时检测葡萄球菌特异性16S rRNA 基因、金黄色葡萄球菌特异性Sa442基因和编码青霉素结合蛋白(PBP2a)的mecA基因.结果 84株葡萄球菌的16S rRNA 基因100%阳性,其中33株金黄色葡萄球菌的Sa442基因100%阳性,mecA基因阳性率为78.8%.51株凝固酶阴性葡萄球菌的Sa442基因100%阴性,mecA基因阳性率为76.5%.30株其他临床常见菌16S rRNA、Sa442、mecA基因100%阴性.结论该技术具有简便、快速、特异性强等特点,是一种非常有效的耐甲氧西林葡萄球菌感染快速诊断方法.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测及其耐药性研究

目的 分析耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）检测方法及其耐药性。方法 采用头孢西丁、苯唑西林纸片法和PCR3种方法检测2005年安徽地区12家医院临床分离133株金黄色葡萄球菌中MRSA菌株;琼脂稀释法测定金黄色葡萄球菌对17种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）。结果头孢西丁、苯唑西林纸片法及PCR法对MRSA检出率分别为52．63％、54、13％、51．87％,3种方法对MRSA检出率差异无显著性。以PCR法检出mec—A基因为判断MRSA的金标准,头孢西丁纸片法灵敏度为100％、特异度为98．44％、符合率为99、24％,r（正确诊断指数）=0．9844。苯唑西林纸片法的灵敏度为98．55％、特异度为93、75％、符合率为96．24％,r=0．923。除了青霉素-G、氨苄西林、替考拉宁、万古霉素以外,其余抗生素的耐药率,MRSA组均明显高于MSSA组（P〈0．01）。结论 头孢西丁纸片法是筛选和确认MRSA菌株的一种可靠、简便的方法;MRSA为多重耐药菌株,临床应加强检测。     

葡萄球菌的分离鉴定及药敏分析

目的：了解不同种类葡萄球菌在本院临床标本中的感染情况及耐药性，为临床治疗和控制此类感染提供参考。方法：采用VITEK-AMS GPI卡进行鉴定，纸片扩散法(NCCLS)及GPS卡进行药敏实验、β内酰胺酶测定和MRS检测，并结合临床资料进行分析。结果：总共3753株感染菌中822株为葡萄球菌(21．90％)，其中金黄色葡萄球菌(SA)322株(39．17％)，凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)500株(60．83％)。SA中293株(90．99％)产生β内酰胺酶，苯唑西林耐药者(MRSA)183株(56．83％)；CNS中450株(90．00％)产生β内酰胺酶，苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)350株(70．00％)。结论：葡萄球菌特别是凝固酶阴性葡萄球菌是临床感染的主要致病菌之一；万古霉素是有效治疗苯唑西林耐药的葡萄球菌(MRS)的唯一可选药物；合理使用抗生素对治疗和控制感染至关重要。     

几种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评价

目的对三种检测耐甲氧西林葡萄球菌方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法以PCR检测金黄色葡萄球茵甲氧西林决定因子A（mecA）为金标准,按临床实验室标准化委员会（CLSI）操作规程用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法对临床分离的155株金黄色葡萄球菌进行检测。结果155株金黄色葡萄球菌经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为61．9％（96／155）;头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100％;苯唑西林纸片扩散法的敏感性为95．8％,特异性为91．5％;苯唑西林琼脂稀释法的敏感性为100％,特异性为98．3％;头孢西丁纸片扩散法优于苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林琼脂稀释法。结论头孢西丁纸片扩散法操作简便、敏感性高、特异性好、结果可靠,可作为医院微生物实验室日常工作中检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法。     

应用ROC曲线评价耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法

目的：通过对耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的常用检测方法及实验条件进行评价，选择特异性和敏感性较好的方法和理想的实验条件。方法：以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为“金标准”，比较PBP2a胶乳凝集试验法、头孢西丁（FOX）琼脂筛选法、苯唑西林（OXA）琼脂稀释法（MIC）、FOX纸片扩散法、OXA琼脂筛选法、OXA纸片扩散法检测MRS的敏感性和特异性。同时应用ROC曲线对实验方法及不同的实验条件进行评价。结果：PCR法共检出79株mecA基因阳性菌株，阳性率为73．8％。以PCR法为“金标准”，上述6种方法的ROC曲线下面积分别为0．994，0．964，0．955，0．946，0．932，0．862。结论：选择最佳实验条件，用两种表型检测方法作平行检测，对可疑结果用PBP2a胶乳凝集试验或PCR法确诊。     

107株凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析

目的：分析医院感染凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）的分布及耐药性。方法：回顾性分析2010年6月～2011年5月我院临床送检标本中分离出的CNS 107株。结果：107株CNS中,表皮葡萄球菌最多为51株,占47.7%。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌82株,占76.7%,全部产β-内酰胺酶;甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌25株占23.3%,其中,20株产β-内酰胺酶,产酶率为80.0%。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌除了对万古霉素和利奈唑胺还保持敏感外,对绝大多数抗生素都有较高的耐药率。结论：CNS已为重要的医院感染菌,耐药情况严峻,临床应加强耐药性的监测,合理使用抗生素。     

儿科住院患者标本中分离葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性

目的了解儿科住院患者标本中分离出的葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,检测红霉素诱导克林霉素耐药的发生情况。方法使用纸片扩散法测定葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,使用D-试验方法检测红霉素诱导克林霉素耐药表型。结果585株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌(SA)406株,其中甲氧西林敏感的SA(MSSA)387株,甲氧西林耐药的SA(MRSA)19株;凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)179株,其中甲氧西林敏感的CNS(MSCNS)20株,甲氧西林耐药的CNS(MRCNS)159株。红霉素、克林霉素均敏感的葡萄球菌117株(20.0%),红霉素和克林霉素均耐药的葡萄球菌282株(48.2%);红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌186株(31.8%),其中D-试验阳性占82.3%(153/186)。MSSA,MRSA,MSCNS和MRCNS中表现为诱导克林霉素耐药分别为92.2%(94/102),50.0%(1/2),77.8%(7/9)和69.9%(51/73)。结论在儿科住院患者标本分离的对红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌中,对克林霉素诱导耐药率高,对该类菌株应采用D-试验检测,以指导临床合理使用抗生素。