硫酸镁联合亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的　探讨硫酸镁对SD大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法　将 4 0只大鼠随机分成模型对照组、硫酸镁治疗组、亚低温治疗组、硫酸镁联合亚低温治疗组。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型。通过计算大鼠神经功能缺陷评分 ,测量脑梗死体积 ,观察神经元超微结构改变 ,评定硫酸镁联合亚低温治疗作用。结果各治疗组大鼠神经功能评分及脑梗死体积均显著低于对照组 (P <0 0 5 ) ,联合治疗组大鼠明显低于对照组 (P<0 0 1) ;联合治疗组神经元超微结构改变轻微。结论　硫酸镁联合亚低温治疗对大鼠局灶脑缺血有明显保护作用     

亚低温预处理大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的：模拟神经外科手术缺血过程，研究亚低温预处理情况下大鼠局灶性脑缺血的耐受时间。方法：采用线栓法制作可逆的大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。72只SD大鼠随机分成6组：1h、2h、3h缺血-常温组，1h、2h、3h缺血-亚低温预处理组。术后评价大鼠的神经功能以及脑梗塞体积的变化。结果：对于1h和2h缺血组，应用亚低温预处理，可以改善大鼠的神经功能恢复、减小脑梗塞体积。对于3h缺血组，则脑保护作用不明显。结论：应用亚低温预处理大鼠局灶性脑缺血，可以减轻脑缺血性损害，脑缺血的耐受时间应在2h以内。     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用

目的:观察亚低温对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达影响,探讨亚低温的脑保护作用。方法:选择健康雄性大鼠,随即分为假手术组、脑缺血组和脑缺血—亚低温组,利用大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血模型,利用免疫组化及TUNEL法观察Bcl-2蛋白及神经细胞凋亡情况。结果:假手术组Bcl-2蛋白阴性表达,亦未见凋亡细胞;与脑缺血组比较,亚低温组Bcl-2蛋白表达显著增加,两组相比差异有显著性(P<0.05),神经细胞的凋亡数目明显减少,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:亚低温可以减轻脑缺血损伤,可能与通过促进Bcl-2蛋白的表达,减少神经细胞的凋亡有关。     

尼莫地平联合亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的:探讨尼莫地平对脑缺血损伤的保护作用.方法:将40只大鼠随机分成模型对照组,尼莫地平治疗组,亚低温治疗组,尼莫地平联合亚低温治疗组.采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,通过计算大鼠神经功能缺陷评分,测量脑梗死体积.结果:各治疗组大鼠神经功能均显著低于对照组(P<0.05),联合治疗组明显低于对照组(P<0.01).结论:尼莫地平联合亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血有明显保护作用.     

大鼠局灶性脑缺血BCL-2及BCL-XL蛋白的表达

目的：探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中bcl-2及bcl-xl蛋白的表达。方法：采用健康雄性大鼠大脑中动脉阻断(NCAO)模型，阻断大脑中动脉(NCA)血流2h后再灌注，再灌注0．5h，3h，6h，12h，24h和48h断头取脑后，进行bcl-2、bcl-xl蛋白免疫组化染色。结朵：①Bcl-2、Bcl-xl蛋白在脑缺血再灌注早期表达较强，3h-6h达到高峰，24h-48h逐渐转阴。②bcl-2及bcl-xl蛋白均分布在脑缺血梗死灶的周边，梗死中心区及正常区无表达。结论：局灶性脑缺血再灌注损伤时，bcl-2及bcl-xl表达对神经细胞的凋亡可能起着抑制作用。     

雌激素对大鼠局灶性脑缺血Bcl-2蛋白表达的影响

实验表明 [1 ,2 ] ,雌激素在缺血性脑损伤中具有神经保护作用 ,但其作用机制还不十分清楚。Bcl- 2 [3] 是凋亡抑制基因 ,在缺血性脑损伤模型中 ,主要在存活的神经细胞中表达 ,其表达峰值在缺血后 2 4 h[4 ]。本研究采用去卵巢雌性大鼠制作大脑中动脉阻断 (MACO)局灶性脑缺血模型 ,观察雌激素对脑缺血时 Bcl- 2蛋白表达的影响 ,探讨雌激素在缺血性脑损伤中的作用机制。1　材料和方法1.1　动物分组及预处理　采用健康雌性 Wistar大鼠 30只 ,3～ 4个月龄 ,体质量 2 5 0～ 30 0 g(由北京大学医学部实验动物中心提供 )。全部大鼠于脑缺血手术…     

纳洛酮对大鼠局灶性脑缺血FOS蛋白表达的影响

目的：探讨纳洛酮对脑缺血再灌注的神经保护机制。方法：采用线栓法制造的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，通过免疫组化法检测脑缺血不同再灌时间FOS蛋白的表达以及经纳洛酮(5mg／kg)预处理后对该蛋白表达的影响。结果：脑缺血30min再灌6hFOS蛋白表达显著增加，24h后基本降低到正常；纳洛酮可显著抑制脑缺血后FOS蛋白的表达。结论：作为阿片肽受体拮抗剂，纳洛酮的神经保护机制可能与抑制c-fos基因的表达有关。     

亚低温对小鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的　研究亚低温对小鼠局灶性脑缺血急性期的保护作用。方法　 2 4只小鼠随机分为亚低温组和常温对照组 ,采用线栓法制作可逆性小鼠大脑中动脉缺血 (middlecerebralarteryocclusion ,MCAO)模型 ,缺血 30min 再灌注 2 4h ,亚低温组在MCAO后 1h开始给予 34.5℃ - 35℃亚低温处理 2h。分析两组小鼠脑组织含水量以及神经功能缺陷评分的变化。结果　亚低温组脑组织含水量在亚低温后 3h、2 4h的较常温对照组显著降低 (P <0 .0 5 ) ;亚低温组在亚低温后 3h、6h、12h、2 4h神经功能缺陷评分较对照组显著降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;脑组织含水量与相应的神经功能缺陷评分具显著相关性 (P <0 .0 5 )。结论　亚低温对小鼠急性期局灶性脑缺血具有降低脑水肿、减轻神经功能缺陷的作用     

亚低温对小鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的:研究亚低温对局灶性脑缺血小鼠梗死灶大小的影响。方法:取16只C57小鼠,用线栓法制作局灶性缺血模型,平均分为两组,一组行低温处理,一组处于室温下,缺血再灌注24 h行TTC染色,计算梗死体积。结果:低温处理的小鼠,脑梗死体积明显小于未处理的小鼠。结论:对局灶性脑缺血而言,低温具有保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血后脑组织Ref-1蛋白的表达

脑缺血后细胞死亡方式有 2种 :一是坏死 ,二是凋亡。在脑梗死中心区 ,细胞死亡以坏死为主 ,在脑梗死周边部 ,即半暗带区 ,则以凋亡为主。Ｒｅｆ 1(氧化还原因子 1,ＡＰＥ) ,是ＤＮＡ碱基切除修复通路中的多功能蛋白酶 ,在缺血性脑损伤过程中 ,由于兴奋性氨基酸增加 ,钙离子内流升高 ,大量自由基产生 ,造成了ＤＮＡ损伤 ,Ｒｅｆ 1蛋白酶免疫活性同时也下降 ,造成ＤＮＡ修复丧失 ,导致细胞凋亡[1] 。我们采用免疫组织化学方法 ,对大鼠局灶性持久性脑缺血不同时程脑组织Ｒｅｆ 1蛋白酶的表达进行了观察 ,同时采用ＴＵＮＥＬ染色 (ＴｄＴ ｍｅｄ…     

病变侧亚低温对局灶脑缺血再灌注后胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 观察病变侧亚低温(32—33℃)对局灶脑缺血再灌注后星形胶质细胞活性和组织病理变化的影响。方法 采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，将雄性Wisutr大鼠随机分为缺血常温组、亚低温组和假手术组。根据缺血时间不同，每组又分为缺血3h和12h。缺血30min后应用反馈控温半导体制冷块对大鼠病变侧给予亚低温治疗，并持续至再灌期。采用免疫组织化学方法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达及HE染色观察组织病理变化。结果 缺血常温组GFAP阳性细胞数量增多，突体粗大，胞体肿胀；亚低温组GFAP表达数量明显减少。结论 病变侧亚低温能明显抑制脑缺血后星形胶质细胞反应性增生和肥大，并能减轻组织损伤程度。     

亚低温对脑缺血再灌注后脑皮质梗塞灶及MCP-1含量的影响

目的　观察缺血过程中亚低温对大鼠脑缺血再灌注后脑皮质梗塞灶及缺血核心区皮质内单核细胞趋化蛋白 (MCP) 1含量的影响。方法　 80只雄性Wistar大鼠随机分为常温组 ( 37℃ )和亚低温组 ( 32～ 33℃ ) ,对大鼠进行神经病学评分 ,2 ,3,5三苯基四氮唑 (TTC)染色法测定缺血 2h再灌注不同时间 ( 0、6、16、2 4和 4 8h)脑梗塞灶的大小 ,用ELISA法测定缺血核心区脑皮质内MCP 1含量的变化。结果　脑缺血 2h再灌注 6h脑皮质出现明显的梗塞灶 ,亚低温能显著减小再灌注后不同时间脑梗塞灶的面积和神经病学评分 (P <0 .0 5 )。缺血核心区脑皮质内MCP 1含量于再灌注后 6h开始升高 ,至 4 8h逐渐达到高峰。亚低温能显著降低再灌注后 6h及 4 8h缺血核心区脑皮质内MCP 1的含量(P <0 .0 5 )。结论　抑制缺血再灌注后脑皮质内MCP 1的分泌 ,可能是亚低温发挥脑保护作用的重要途径之一。     

亚低温对缺血再灌注鼠脑LN与MMP-9表达的影响及意义

目的 研究亚低温与常温条件下层粘连蛋白(Laminin, LN)与明胶酶-B(MMP-9)表达的差异性,为进一步探讨亚低温的脑保护机制提供实验依据.方法 制备大鼠脑缺血再灌注模型,随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组和亚低温条件下缺血再灌注组;缺血2h后依照再灌注时间点的不同分为3h、6h、12h、24h、72h与7d 6组,共14组.免疫组织化学法观察脑组织LN与MMP-9的表达变化.结果 LN在微血管的表达于再灌注12h明显减少,24h达最低,72h开始回升;在同一时相(72h, 7d除外),与常温组比,亚低温组LN的表达显著增多.LN在神经元的表达于再灌注3h明显增多,6h明显减少,12h和24h呈阴性,72h开始回升,7d开始下降.在同一时相(72h除外),与常温组比,亚低温组LN的表达显著增多.MMP-9的表达于再灌注6h开始增加,12h开始减少,72h达最低,呈阴性,7d又回升.与常温组比,3h、6h组,亚低温组MMP-9的表达显著减少;12h、24h、72h组, 亚低温组MMP-9的表达显著增多;7d组,亚低温组MMP-9的表达显著减少.结论 LN与MMP-9可能参与了缺血再灌注血管源性脑水肿的形成与发展.再灌注早期亚低温通过增加LN的表达,减少MMP-9的表达而对缺血再灌注脑有保护作用.     

亚低温对大鼠脑缺血损伤的保护作用

目的：验证亚低温对脑缺血损伤的保护作用。方法：２４只ＳＤ大鼠随机分为对照组，缺血组，亚低温组，参照Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ和Ｂｒｉｅｒｌｅｙ的方法建立脑缺血动物模型，观察Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶活性，脑组织含水量和丙二醛（ＭＤＡ）含量的改变。结果：与对照组和缺血组相比，亚低温组能阻止Ｎａ＾＋－Ｋ－ＡＴＰ酶活性的降低，降低脑组织含水量和ＭＤＡ含量。结论：亚低温具有保护血脑屏障，减轻脑水肿，减少Ｃａ＾２＋内流，     

自由基清除剂联合亚低温对急性脑缺血大鼠氧自由基的影响

目的探讨自由基清除剂依达拉奉联合亚低温对急性脑缺血大鼠氧自由基的影响。方法取40只Wistar大鼠,随机分为假手术组、脑缺血模型对照组、依达拉奉组、依达拉奉联合亚低温组,每组10只,依达拉奉组大鼠在脑缺血模型成功后,给予依达拉奉腹腔注射,依达拉奉联合亚低温组在依达拉奉腹腔注射后,给予亚低温,检测各组大鼠SOD、MDA含量变化。结果依达拉奉联合亚低温组SOD水平显著高于依达拉奉组,MDA水平均显著低于依达拉奉组(P<0.001)。结论依达拉奉可以有效改善脑缺血大鼠的SOD、MDA水平,依达拉奉联合亚低温治疗效果优于依达拉奉的单独应用。     

全身亚低温对脑缺血再灌注海马CA1区Bcl-2、Bax表达影响的动态变化

目的　研究脑缺血再灌注后全身亚低温的脑保护作用及其对Bcl- 2、Bax表达的动态影响。方法　 12 6只S -D雄性大鼠随机分为假手术组、常温组和亚低温组。采用Pulsinelli四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型 ,即刻全身亚低温 4h ,分别在 7个时间点取脑标本 ,进行Bcl- 2、Bax免疫组织化学及苏木精 -伊红染色。结果　与常温组相比 :亚低温组海马CA1区死亡细胞数明显减少 (P <0 .0 1) ;Bcl - 2蛋白免疫反应强度峰值增高持续时间延长 ;Bax蛋白免疫反应强度峰值减低 ,持续时间缩短。结论　全身亚低温对缺血再灌注锥体细胞损害有较好的保护作用。可增强具有抗凋亡的Bcl- 2蛋白的表达 ,延长其表达持续时间 ;而减弱具有促凋亡的Bax表达 ,同时缩短其表达持续时间。此可能是亚低温对缺血再灌注脑组织损害产生保护作用的分子机制之一。     

大鼠局部脑缺血后NADPH-d神经元的变化

目的：观察缺血性脑损害中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）神经元的变化规律,探讨一氧化氮（ＮＯ）参与缺血性脑损害的机制。方法：采用组织化学染色方法观察大鼠局灶性脑缺血后尼克酰胺腺啶呤二核酸磷黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）阳性神经元的变化规律。结果：大鼠局灶性脑缺血后ＮＡＤＰＨ－ｄ阳性神经元明显增加,缺血２ｈ后出现形态学改变,且以细胞皱缩、胞浆致密为主要死亡方式。结论：ＮＡＤＰＨ－ｄ阳性元对缺血性损害相对耐受,细胞凋