重组成骨生长肽对兔同种异体骨移植的成骨影响

目的　观察重组成骨生长肽 (rOGP)静脉应用对兔同种异体骨移植愈合过程中成骨活性的影响。方法　4 2只日本大耳白兔选择一侧前肢造成桡骨中段骨缺损 ,植入常温储存的异体骨 ,随机分成二组。实验组从术后第1d开始每天注射rOGP0 .5 μg kg ,至取材前 1d ,对照组注射同样剂量的生理盐水。术后 4、8、1 2周每组各处死 7只 ,测血清ALP、BGP水平 ,同时取材摄X线片。结果　放射线学显示 ,实验组术后 8周植骨与宿主骨愈合 ,对照组术后 1 2周植骨与宿主骨愈合。实验组血清碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素 (BGP)水平高于对照组 ,术后 4周差异非常显著 (P <0 .0 1 ) ,术后 8、1 2周显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　全身应用rOGP通过提高宿主体内成骨细胞的活性 ,促进同种异体骨移植的愈合。     

重组成骨生长肽对兔截骨延长区骨愈合的影响

目的观察重组成骨生长肽（recombinant osteogenic growth peptide,rOGP）对兔截骨延长区骨愈合的影响。方法取42只健康兔随机分成实验组和对照组,每组21只,左胫骨结节下1cm处截骨制成骨延长动物模型。从术后第1天至取材的前1天实验组动物每日经耳缘静脉注射rOGP0．5μg／kg,对照组注射同等剂量的生理盐水。于延长后第10、30、60天取材分别行大体、放射线和HE染色组织学观察愈合情况。结果放射线学显示,延长后第60天实验组髓腔形成延长区已接近正常骨皮质。对照组骨皮质较薄,髓腔形成不完全。实验组自延长30天后组织学检查骨延长区修复组织的成熟度及新生骨小梁均优于对照组（P〈0．05）。结论全身静脉应用rOGP能促进兔截骨延长区骨愈合。     

同种异体骨移植后骨愈合的实验研究

目的：通过有关的动物实验来探讨有关异体骨移植骨愈合的规律，以达到加速异体骨移植骨愈合的目的。方法：24只新西兰大白兔为实验动物，随机分为实验组和对照组。实验组用梯度降温、深低温保存的股骨外侧髁植入，在接触的骨面置入骨形态发生蛋白(BMP)骨基质，以金属螺钉固定；对照组用取下的自体股骨外侧髁原位植入，用与实验组相同的内固定方法固定；术后4、8和12周行大体标本观察，并行苏木精-伊红(H-E)染色及BMP免疫组化染色，观察异体骨愈合的情况。结果：深低温保存的同种异体骨移植愈合与自体骨相似。BMP染色在新生骨及其周围类基质表达阳性。其愈合是从宿主骨向移植骨，从周围向中央，从哈佛管向其四周逐渐进行爬行替代的过程。结论：同种异体骨移植愈合过程主要通过骨传导实现成骨，骨诱导亦发挥积极作用。使用BMP、合适的内固定、大小适合的移植物，可以使异体骨愈合的过程与自体骨相似。     

MTT分析法检测重组成骨生长肽的活性

目的 对本研究室构建，表达的重组成骨生长肽（rOGP)进行活性测定。方法 采用MTT分析法，PBS为阴性对照，骨宁注射液为阳性对照。结果 rOGP，骨宁注射液组OD550值均明显高于PBS阴性对照组；rOGP组OD550值又明显高于骨宁注射液组。结论 重组OGP具有促进成纤维细胞增殖活性，且效果明显优于目前临床常规药物骨宁注射液。     

同何斌 同种异体骨移植

自1941年提出骨库概念以来,异体骨移植已广泛应用于临床,取得了满意疗效。移植骨愈合是植骨的最终目的,受多种因素的影响。现就移植骨成骨效应、免疫反应、生物力学及临床应用四方面概述如下。     

同种异体脱钙骨移植

本文采用新鲜同种异体骨进行完全脱钙后,治疗骨良性肿瘤和骨肿瘤样病变所致的骨缺损25例。临床应用结果表明,它具有与自体骨相似的成骨作用,且来源较广,制备简单。移植中可将空腔紧密充填,接触面大,便于毛细血管和间充质细胞伸入,加速诱导成骨,保存及使用方便,无明显的副作用和排斥反应,为骨缺损的治疗又提供了一种理想材料。     

辐照氟银同种异体骨移植的实验研究

目的　观察辐照氟银同种异体骨移植治疗骨缺损的效果。方法　48只健康成年南昌大白兔随机分为4 组,造成颅顶部1cm×1cm的骨缺损,分别将制备好的辐照氟银同种异体骨(A组)、单纯辐照同种异体骨(B组)、 深低温冷冻同种异体骨(C组)和自体骨(D组)植入骨缺损区。术后4、8、12周分批取材,各组进行淋巴细胞毒反应 试验和组织学观察。结果　(1)各组淋巴细胞死亡率均无明显差异(P>0.05)。(2)组织学变化:A、B、C、D组移植 骨愈合过程相似,是从宿主骨到移植骨,从周围到中央,从哈佛氏管向其周围逐渐爬行替代的过程。结论　辐照氟 银同种异体骨具有明显的低抗原性、良好的成骨活性,是较理想骨移植材料,对骨缺损的治疗有重要的临床意义。     

成骨生长肽的合成及药效学的实验研究

作者利用固相法合成了成骨生长肽 (ＯＧＰ)。并在体外观察了ＯＧＰ在低剂量范围对原代成骨细胞的促增殖作用 ,以及成骨活性标志蛋白ＡＫＰ的表达水平[1] 。在ＳＤ大鼠体内观察了ＯＧＰ对低钙饮食造成的骨质疏松的药效作用。现报道如下。一、材料和方法1 材料 :(1)试剂 :所有Ｂｏｃ 氨基酸、Ｂｏｃ Ｇｌｙ ＰＡＭ树脂购自美国ＡＢＩ公司 ;Ｅ ＭＥＭ培养基、胰蛋白酶 ＥＤＴＡ(依地酸 ) [0 .5 % (ｗ/ｖ)胰蛋白酶 ,5 .3ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ 4Ｎａ]为ＧＩＢＣＯＢＲＬ公司产品 ;Ⅱ型胶原酶为日本和光纯药工业株式会社产品 ;ＭＴＴ为Ｆｌｕｋａ…     

自体与新鲜同种异体骨软骨移植的实验研究

目的:评价自体与新鲜异体骨软骨镶嵌移植两种方法修复全层关节软骨缺损的生物学特性和修复效果。方法:采用完全随机设计,将16只新西兰大白兔的左右后肢制成全层软骨缺损模型,分别进行自体骨软骨镶嵌移植、同种异体骨软骨镶嵌移植修复。术后第12周处死动物取材,分别进行膝关节活动度测定、大体观察、光镜观察及Wakitani组织学评分法,数据行统计学分析。结果:膝关节伸屈活动度、大体观察、组织学光镜及组织修复评分显示自体骨软骨移植在第12周时能以类透明软骨组织修复缺损,而新鲜同种异体骨软骨移植为纤维肉芽组织。结论:自体骨软骨镶嵌移植可以修复兔关节软骨的缺损。新鲜无处理的同种异体骨软骨镶嵌移植修复关节软骨缺损不可行,其排斥反应及吸收破坏严重。     

成骨生长肽促成骨作用的研究进展

成骨生长肽（OGP）具有促成骨作用,具有较大的潜在临床应用价值,是国内外研究的热点。动物体内实验和体外细胞实验表明,OGP能促进骨密度增加,加速骨折愈合,促进体外培养大鼠成骨细胞的成骨功能,增加核心结合因子α1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平,促进骨髓间充质干细胞的增殖和分化,上调成骨标志物的表达。文章对OGP促成骨作用的研究进展进行综述。     

成骨生长肽促成骨作用的研究进展

成骨生长肽（OGP）具有促成骨作用,具有较大的潜在临床应用价值,是国内外研究的热点。动物体内实验和体外细胞实验表明,OGP能促进骨密度增加,加速骨折愈合,促进体外培养大鼠成骨细胞的成骨功能,增加核心结合因子α1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平,促进骨髓间充质干细胞的增殖和分化,上调成骨标志物的表达。文章对OGP促成骨作用的研究进展进行综述。     

合成成骨生长肽对大鼠骨髓基质干细胞的促成骨作用

目的研究合成成骨生长肽（sOGP）对体外培养的大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）的作用,并与经典的成骨诱导剂地塞米松相对比。方法取大鼠股骨骨髓,贴壁法分离骨髓基质干细胞进行体外培养,加入不同浓度的sOGP,观察细胞形态变化,细胞增殖率,细胞内碱性磷酸酶（ALP）的表达,RT—PCR法检测3种主要成骨标志物（ALP、Ⅰ型胶原、骨钙素）的表达,组织化学染色检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达及钙质的沉积并进行图像分析。结果sOGP对BMSCs增殖的影响随浓度不同呈现双向作用。sOGP和地塞米松在mRNA和蛋白水平均能促进各成骨标志物的表达,定量分析结果显示,sOGP在10^-9mol／L浓度组促成骨的作用最强,明显高于对照组和地塞米松组。结论sOGP能明显促进大鼠BMSCs向成骨方向转化。这种促成骨能力与其浓度密切相关,以10^-9mol／L浓度下促成骨能力最强。     

负载成骨生长肽的静电纺丝PLGA支架可加速大鼠颅骨缺损再生

目的 从体内外水平评价一种负载了成骨生长肽（OGP）的聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）纤维支架作为新型骨组织工程支架的可行性。方法 采用静电纺丝法制备支架,一共有4组。对照组：纯PLGA支架（不含OGP的 PLGA支架）;实验组：0.1%OGP@PLGA（电纺含有0.1%OGP的PLGA溶液制得的支架）、0.2%OGP@PLGA（电纺含有0.2%OGP的PLGA溶液制得的支架）、0.4%OGP@PLGA（电纺含有0.4%OGP的PLGA溶液制得的支架）。通过扫描电子显微镜（SEM）观察支架的微观结构,将材料浸泡在PBS中观察支架中OGP的释放规律,CCK-8和活死细胞染色实验评估支架的体外生物相容性,ALP活性检测和ARS染色评估支架上大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）的体外成骨分化水平,在雄性SD大鼠上制备直径为5 mm大小的颅骨缺损模型,将支架植入8周后利用Micro-CT检测、HE染色和Masson染色分析缺损处的骨修复情况。结果 SEM结果显示,支架具有类细胞外基质（ECM）的纤维结构,负载的OGP能持续从支架内缓释长达1月以上,将细胞与支架共培养4、7 d后,负载高浓度OGP（OGP浓度大于2%）的PLGA支架细胞增殖率显著高于纯PLGA支架（P<0.01）,ALP活性检测结果显示第14天时,在负载0.4%含量OGP的PLGA支架上rBMSCs的ALP活性最高（P<0.01）。ARS染色结果显示,细胞14 后在负载0.4% OGP的PLGA支架上分泌的钙化结节最多。Micro-CT扫描结果发现,负载0.4% OGP的PLGA组材料周围较其他两组有更多的新骨生成（P<0.01）。此外组织学HE和Masson染色结果和以上结果类似。结论 负载OGP的静电纺丝PLGA支架有效模拟了体内细胞外基质,具有良好的生物相容性及促成骨分化能力,是一种具有潜在应用价值的新型骨组织工程支架。     

Antagomir-30d对大鼠骨髓基质干细胞成骨分化的影响

目的：探讨miR-30d拮抗剂（antagomir-30d）正性调控大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）的成骨分化作用并确认转染的最佳浓度。方法：BMSCs培养并分组,分为不同浓度的antagomir-30d（antagomir-30d组）、阴性对照（NC组）和未做转染的BMSCs（空白组）;将不同浓度的antagomir-30d及其NC转染至BMSCs后进行成骨诱导。通过RT-PCR技术进行比较,测定成骨基因碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OC）、Runt相关转录因子2（RUNX2）的mRNA的表达情况,并确定最佳转染浓度及其转染效率。通过ALP染色验证antagomir-30d对成骨分化的调控作用。结果：RT-PCR结果表明,antagomir-30d体外可以促进BMSCs的成骨分化。不同浓度antagomir-30d组的成骨基因表达量随浓度变化而改变,当antagomir-30d转染浓度为150 nmol/L时,ALP、OC、RUNX2的mRNA水平均显著高于空白组和NC组（P＜0.05）。Antagomir-30d的转染最佳浓度为150 nmol/L,此时ALP染色结果显示其活性最高,成骨分化作用好。结论：Antagomir-30d体外正性调控BMSCs的成骨分化,其转染至BMSCs的最佳浓度为150 nmol/L。     

成骨生长肽对不同血清浓度下OPG-/-小鼠骨髓基质细胞增殖和分化作用

 目的 研究合成成骨生长肽（synthetic osteogenic growth peptide,sOGP） 对在不同血清浓度条件下OPG-/-小鼠骨髓基质细胞（bone marrow derived stroma cells,BMSCs）的增殖和分化作用。方法 取OPG-/-小鼠股骨,分离骨髓基质细胞进行体外培养。在各自培养条件下分为实验组（OGP组）、空白对照组（CON组）和阳性对照组（bone morphogenetic protein-2 group,BMP-2组）,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化、MTT法测定细胞增殖率、PNPP法测定碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）的表达。结果 OGP在含10%胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）的LG-DMEM和矿化液的培养条件下,对OPG-/-小鼠BMSCs 起到增殖作用,在第3、5天均高于CON组和BMP-2组（P<0.05）;OGP组对ALP表达的影响与CON组相似,而与BMP-2组存在较大差异,BMP-2组在所有不同血清浓度条件下的第3、5天ALP活性均高于CON组和OGP组（P<0.05）。结论 OGP组对OPG-/-小鼠BMSCs的增殖作用要求较高血清浓度的体外培养条件,但在ALP的分化活性方面弱于BMP-2组。     

常温储存的人同种异体骨制备

目的：探讨常温储存的人同种异体骨制备流程。方法：遵循供体选择标准，无菌条件下取骨经脱脂、脱钙等处理，制备新鲜骨、脱钙骨基质(DBM)、表面脱钙骨、半脱钙骨，封装常温储存备用。结果：临床应用常温储存人同种骨植骨10例，成活良好。结论：常温骨库制备人同种骨流程可靠、实用。     

成骨生长肽衍生物抗去卵巢大鼠骨质疏松作用的实验研究

目的通过建立去卵巢大鼠骨质疏松模型来研究成骨生长肽衍生物对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用。方法选取3月龄未交配雌性健康SD大鼠48只,按体重随机分为6组,其中5组行双侧卵巢切除术,建立骨质疏松模型,1组行假手术,给药组分别给予一定剂量的ALEN、OPG、OPG1、OPG2。给药12周后,测定骨密度,血清中的钙、磷、碱性磷酸酶、骨钙素。结果模型组与假手术组比较,骨密度明显降低(P0.05);各给药组及模型组与S组比较,骨密度降低(P0.05),OGP1组与OGP2组比较,骨密度增加(P0.05);模型组与假手术组比较,碱性磷酸酶活性明显升高(P0.05);治疗组与模型组比较,碱性磷酸酶活性明显降低(P0.05);与假手术组比较,其他各组骨钙素活性高(P0.05);其他治疗组分别与阿伦磷酸钠治疗组比较,血清钙浓度升高(P0.05);各治疗组分别与模型组比较,血清磷浓度增高(P0.05)。结论成骨生长肽及其衍生物对去卵巢大鼠骨质疏松具有治疗作用,其中OGPA1对抗去卵巢大鼠骨质疏松的作用较好。