长春花生物碱生物合成的分子机理

综述了近几年来国内外关于长春花生物碱生物合成途径、相关基因表达与调控的分子机理以及影响因素,并探讨了进一步研究的方向.     

长春花中长春碱含量测定方法的研究

研究了薄层扫描法及薄层－紫外分光光度法测定长春花中长春碱含量的两种方法,在硅胶Ｆ２５４－ＣＭＣ－Ｎａ碱性板上（ＮａＯＨ浓度为０．１ｍｏｌ／Ｌ）,以氯仿－甲醇－石油醚（９：１：５）为展开剂,分离了长春花提取液中长春碱和长春新碱等１４种成分。前法采用双波长薄层扫描,λｓ＝２８０ｎｍ,λＲ＝３５０ｎｍ,线性范围在２￣１０μｇ。后法采用薄层分离后,样品带用甲醇洗脱后,紫外分光光度法测定含量。后法在５￣２５     

真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响

目的 研究分别来源于镰刀菌Fusarium solani和黑曲霉Aspergillum niger的真菌诱导子(fungal elicitors)对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响。方法 用真菌诱导子对长春花愈伤组织进行诱导处理后提取吲哚总碱，并用RP—HPLC法测定其中阿玛碱和长春质碱含量。结果 两种真菌诱导子对吲哚总碱及其中阿玛碱和长春质碱的积累均有较明显的正向调节作用，并且确立了真菌诱导子最佳处理时间。结论 这两种真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱的积累有显著影响。     

用改进逆流分配法分离长春花提取物中有效成分

对长春花提取物中总生物碱的分离利用改进的逆流分配法可将长春碱和杂质完全分离,用氯仿液作流动相,经氯仿饱和的磷酸氢二钠一盐酸PH3.0缓冲溶液作固定相,石油醚:氯仿:丙酮:氨水(12:6:1:1)作展开剂,硅胶板作薄层板,经对3批混合物进行分离,均能将长春碱与杂质完全分离,各项指标均符合标准。     

小蔓长春花中生物碱的分离和鉴定

从小蔓长春花Vincaminor中分得7个吲哚生物碱，经理化性质和各种光谱分析，分别鉴定为：vincamine，apovincamine，epi－vincamine，N－methylaspidospermidine，vincadifformine，vincine和vincamidine。其中vincamine是治脑血栓的血管舒张药。     

长春花细胞大规模培养生产生物碱的研究现状

本文主要从通气状况，剪切力，流变学特征，培养方式，反应器的设计和放大等方面概述了近年来国外长春花细胞大规模培养生产生物碱的研究成果及存在的问题，试图为我国药用植物细胞大规模培养研究提供借鉴。     

超声法提取长春花中长春碱的工艺研究

长春花Catharanthus roseus(L.)G.Don是夹竹桃科长春花属植物,原产于非洲东海岸,现广泛分布于世界各地,我国广东、广西、云南、海南、贵州、四川以及江浙一带均有栽培。长春花中含有大量的生物碱,长春碱是其中最主要的一种。长春碱在临床上主要用于治疗何杰金氏病和绒毛上皮癌,     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织的过过程中,叶片中含量较高的文多灵和长春质碱迅速降解有低水平,而叶片中含量较低的阿玛码和蛇根碱的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。     

在长春花细胞悬浮培养中细胞分裂素和乙烯通过甲基赤藓醇磷酸盐或萜类途径调控吲哚生物碱的产生

长春花Catharanthus roseus（L）G．Don中的萜吲哚生物碱（TIAs）共同的母体化合物是异胡豆苷（strictosidine），而异胡豆苷由色胺和断马钱子苷（secologanin）立体定向缩合而成。由色氨酸脱羧酶（TDC）形成的1-色氨酸经过脱羧形成色胺；而断马钱子苷通过萜类途径由异戊烯基二磷酸（IPP）衍生而来。在IPP存在情况下，TIA主要是通过（选择的）甲基赤藓醇磷酸盐（MEP）途径，在质体中合成，而不是通过经典的甲羟戊酸途径在胞液中合成。作者研究了在长春花细胞悬浮培养中MEP和乙烯对TIA合成的调节作用。     

生物技术在长春花研究中的应用

长春花为重要的抗癌药用植物,对细胞组织培养,Ti和Ri质粒遗传化等生物技术在长春花研究中的应用作一综述,并对长春花的开发利用和长春花生物磁的工业化生产存在问题和前景作了分析.     

提高长春花冠瘿细胞中吲哚生物碱含量的研究

研究了长春花冠瘿细胞接种物年龄与接种量对悬浮物培养细胞生物产量的影响,探讨了以大丽花轮枝孢菌的匀浆物为外源刺激物处理冠瘿细胞,对细胞生长和吲哚生物碱积累的作用,确立了外源刺激物产生效应的最适条件。     

一株产长春新碱内生真菌的初步研究

目的 通过长春花叶内生真菌的分离，筛选产生长春新碱的菌株。方法 从长春花叶中分离内生真菌，对其发酵提取物进行TLC和HPLC分析。结果 从长春花叶中分离筛选到一株无孢菌群菌株：97CY3。它能产生长春新碱，HPLC测定其长春新碱含量约为0.205μg／L。结论 长春花内生真菌中，有的菌株可产生与宿主所产相同的抗癌物质长春新碱。     

长春花突变细胞生理特征的研究

目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca2 和Zn2 的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。     

EMS诱变的长春花细胞系突变研究

目的 通过化学诱变的手段筛选生长快且吲哚碱含量高的长春花突变细胞系。方法 用不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS)处理长春花愈伤组织，挑选成活愈伤组织块继代扩大培养，比较其与对照愈伤组织生长速率、吲哚总碱积累等方面的差异。结果 用EMS处理的长春花愈伤组织与对照相比，不仅生长快，并且吲哚总碱含量高。结论 EMS处理的愈伤组织发生了变异，变异种是所期望的比较理想的细胞系。     

不同来源长春花药材中文多灵的含量比较

目的建立长春花中文多灵的含量分析方法,比较不同来源长春花药材中文多灵的含量。方法采用高效液相色谱法,以依利特C18柱为分析柱,甲醇：水（体积比64：36,以二乙胺和磷酸调pHI1）为流动相,流速为1mL／min;220nm为检测波长。结果红色长春花、白色长春花以及恩平、阳江、广州紫色长春花样品中文多灵含量分别是1．561、0．390、0．982、0．622、0．587mg／g。结论不同来源的长春花中文多灵的含量差异较大。     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关酶的分析

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织发生的过程中,叶片中含量较高的文多灵（ｖｉｎｄｏｌｉｎｅ）和长春质碱（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉｎｅ）迅速降解至极低水平,而在叶片中含量较低的阿玛碱（ａｊ－ｍａｌｉｃｉｎｅ）和蛇根碱（ｓｅｒｐｅｎｔｉｎｅ）的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。光照和黑暗中的变化趋势基本一致,但光照可提高过氧化物酶的活性,对培养物的长春质碱、文多灵和蛇根碱的合成有利。不同的培养基对生物碱的合成影响较大,２,４－Ｄ显著抑制生物碱的合成,持续光照使愈伤组织的生长受到抑制,使阿玛碱向其蛇根碱转化。     

长春花内生真菌的分离及其发酵产生药用成分的初步研究△

首次报道从长春花Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅｕｓ （Ｌ．）Ｇ．Ｄｏｎ茎的韧皮部中分离出尖孢镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏ－ｒｕｍ。为该植物的一种内生真菌,并用ＴＬＣ和ＨＰＬＣ对该菌的９７ＣＧ３菌株培养物进行了分析。初步结果表明该真菌能产生抗癌药长春新碱成分。