食管癌中抗凋亡基因bcl-2的表达及意义

目的　检测 5 4例食管癌和 2 2例癌旁组织中bcl- 2基因产物的表达。方法　采用免疫组化碱性磷酸酶法检测各组经福尔马林固定、石蜡包埋标本中bcl - 2基因的蛋白表达。结果　正常食管磷状上皮组织bcl- 2均阴性 (15例 ) ,食管癌和癌旁组织bcl- 2的阳性率分别为 6 8 5 %和 5 0 0 % ,与正常对照相比 ,有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　bcl- 2蛋白的过量表达 ,可能参与了食管癌的发生过程 ,同时可能是肿瘤细胞抗药性的重要机制     

非小细胞肺癌凋亡及相关基因bcl-2和bax的表达

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡与相关基因bcl-2、bax表达产物的关系及其临床意义。方法:应用流式细胞术和间接免疫荧光标记法进行检测。结果:凋亡率,Bcl-2、Bax蛋白标记率在NSCLC组与对照组中的差别有统计学意义(P<0.05)。NSCLCI期凋亡率明显高于II、III期组(P<0.01)。NSCLCI期组Bcl-2蛋白标记率明显低于II、III期组(P<0.01)。NSCLC中Bcl-2蛋白标记率与凋亡率呈负相关(r=-0.667,P<0.01)。Bax标记率与凋亡率无直线相关性(r=0.230,P>0.05)。Bcl-2/Bax>1组凋亡率明显低于Bcl-2/Bax≤1组(P<0.05)。结论:随着NSCLC临床分期的进展凋亡率下降,Bcl-2通过抑制凋亡影响NSCLC的进展。NSCLC细胞内存在一种对死亡讯号的应答模式:bcl-2/bax。     

凋亡相关bcl-2基因族在儿童神经母细胞瘤中的表达

目的:探讨癌基因bcl鄄2及其基因族成员bax蛋白的表达水平与神经母细胞瘤(NB)临床生物学行为的关系。方法:运用免疫组化方法对25例NB中的bcl鄄2、bax蛋白表达进行检测。结果:25例NB中bcl鄄2蛋白阳性检出率为72%(18/25)。bax蛋白的阳性检出率为48%(12/25)。年龄<1岁,F型NB的bcl鄄2蛋白阳性表达明显低于年龄≥1岁、UF型(P<0.05,P<0.01)。bax蛋白在NB不同组间阳性表达差别无统计学意义。结论:bcl鄄2蛋白对判断NB的预后有重要价值。     

clusterin、bcl-2在非小细胞肺癌中的表达及其相关性

目的:研究clusterin、bcl-2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其相关性,探讨其与非小细胞肺癌发生、发展的关系.方法:免疫组化pv9000通用型二步法检测53例NSCLC组织、20例癌旁组织中簇集蛋白(Clusterin)、bcl-2的阳性表达情况.结果:非小细胞肺癌组clusterin、bcl-2阳性表达率高于癌旁组织(P＜0.05);clusterin、bcl-2表达与肺癌TNM分期、分化程度及淋巴结转移均有关(P＜0.05),但与组织学类型、性别、年龄无关(P＞0.05);在非小细胞肺癌组织中,clusterin、bcl-2表达成正相关(r=0.396,P＜0.05).结论:clusterin和bcl-2的高表达可能与非小细胞肺癌的发生、发展和浸润有关,二者在肺癌的发生发展中可能存在协同作用.     

大鼠颈总动脉球囊损伤后凋亡相关基因p53、bcl-2表达的研究

目的探讨大鼠颈总动脉球囊损伤后凋亡相关基因p53、bcl-2表达的变化规律。方法将40只SD雄性大鼠随机分为2组,对照组8只;实验组32只,每个时间点8只（2、7、14、28天）,制备大鼠颈总动脉球囊导管扩张损伤模型,采用RT—PCR方法检测损伤后不同时间点动脉壁凋亡相关基因p53、bcl-2的表达丰度。结果对照组p53和bcl-2基因均表达;实验组P53在损伤后第2天表达量明显减少,而后渐增至14天达高峰,在28天时表达量有所下降,但仍较对照组为高;而BCL-2在损伤后表达量逐渐减少,在14天时最低,28天时有所回升。结论在动脉球囊损伤后p53和bcl-2基因的表达符合细胞增殖凋亡规律,可作为动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞凋亡研究的一个指标。     

维甲酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞凋亡的研究

目的　探讨全反式维甲酸 (all- trans retinoic acid,ATRA)和 bcl- 2反义寡核苷酸 (antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对肺癌的作用及机制 ,寻找肺癌治疗的新途径。方法　采用不同浓度的 ATRA单用或联用 bcl- 2 ASODN和 bcl- 2无义寡核苷酸 (nonsense oligodeoxynucleotides,NSODN)处理 SH- 77细胞 ,通过苔盼蓝拒染实验检测细胞活力 ,MTT法检测细胞生长抑制率 ,流式细胞术检测细胞周期分布、细胞凋亡和 BCL- 2蛋白的表达。结果　不同浓度的 ATRA和 bcl- 2 ASODN对 SH- 77细胞均有抑制生长和诱导凋亡作用 ,G1 / G0 期细胞比例升高 ,S期细胞比例降低 ,增殖指数 (PI)降低 ,凋亡指数 (AI)和 AI/ PI比值升高 ;BCL- 2蛋白比例下降明显。 ATRA(10 - 6 m ol/ L)与 bcl- 2 ASODN两者联用与两者分别单用或与对照组比较差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。结论　 ATRA和 bcl- 2 ASODN对 S- 77细胞的生长均有抑制作用 ,同时可诱导其凋亡 ,降低其 BCL - 2蛋白表达 ,两者联用时抗癌作用进一步加强 ,提示分化诱导和基因联合治疗可能成为肺癌治疗的新策略     

实验性肝硬化大鼠的c-fos、bcl-2、Bax表达及细胞凋亡的研究

目的 :检测 c- fos、bcl- 2、Bax基因及细胞凋亡在肝纤维化、肝硬化中的表达 ,探讨肝纤维化的发生发展机制。方法 :将 10 0只同龄 Wistar大鼠随机分为实验组 80只 ,对照组 2 0只 ,实验组皮下注射四氯化碳制备肝纤维化大鼠模型 ,采用TU NEL 末端标记检测凋亡细胞数。用免疫组化 S- P法检测实验组与对照组肝组织中 c- fos- bcl- 2 - Bax基因表达 ,了解细胞凋亡和 c- fos、bcl- 2、Bax在肝纤维化、肝硬化发展过程中的作用。结果 :c- fos在肝组织中的表达明显高于正常肝组织(P <0 .0 1) .bcl- 2在肝纤维化大鼠肝组织中的表达明显高于正常肝组织 ,且主要表达在纤维间隔、汇管区等组织中。 Bax在肝纤维化大鼠肝组织中的表达明显高于正常肝组织 ,且主要表达在肝细胞浆中。结论 :c- fos、bcl- 2、Bax在肝纤维化、肝硬化的发展过程中起调控作用 ,这些基因通过对肝贮脂细胞凋亡的控制 ,在肝纤维化演变过程中起关键作用。     

糖尿病大鼠心肌组织中bcl-2表达的图像分析

目的:探讨糖尿病大鼠心肌组织中bcl-2的表达及对心肌细胞凋亡的影响。方法:按体重随机分为正常对照组(10只)和实验组(10只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L、饮水量>40ml/d、尿糖强阳性(+++~++++)的大鼠作为糖尿病大鼠。将糖尿病模型组和对照组大鼠处死,切取心室肌组织,进行组织切片和免疫组织化学实验观察。结果:糖尿病模型组心肌细胞Bcl-2表达的平均光密度及阳性面积率与对照组心肌细胞比较有显著性差异(P<0.01)。结论:糖尿病导致的心肌病与心肌细胞凋亡等有关。     

大鼠脑二次损伤凋亡相关基因的表达

目的 探讨大鼠脑二次损伤(SBI)c-fos、bcl-2、bcl-xL基因表达和细胞凋亡关系.方法 40只大鼠随机分为正常对照组10只、脑缺血组10只、颅脑损伤组10只和SBI组10只,以免疫组织化学方法,检测脑神经细胞中c-foe、bcl-2、bcl-xL的表达水平;以原位细胞凋亡(TUNEL)法检测神经细胞凋亡水平.结果 颅脑损伤组、SBI组皮层区c-fos基因表达(23.6±9.4)、(37.1±5.5)阳性细胞数/个/H均明显高于脑缺血组(5.6±1.4)阳性细胞数/个/H(t=3.458,t=3.648,均P<0.01);颅脑损伤组、SBI组皮层区bcl-2基因表达(18.2±4.6)、(15.6±3.7)阳性细胞数/个/H低于脑缺血组(23.6±4.3)阳性细胞数/个/H(t=2.345,t=2.447,均P<0.05);脑缺血组、颅脑损伤组和SBI组bcl-xL基因表达变化不大;SBI组皮层区细胞凋亡(36.6±5.3)个细胞/0.1mm2高于颅脑损伤组(21.6±4.4)个细胞/0.1mm2(t=2.378,P<0.05);细胞凋亡水平与bcl-2表达均呈负相关(r=-0.857,P<0.01).结论 脑二次损伤c-fos、bcl-2、bcl-xL基因表达增加并与神经细胞凋亡水平密切相关.     

姜黄素对肺癌A549细胞bcl-2、bax表达与生长的影响研究

目的:研究姜黄素对肺癌A549细胞的抑制作用机制。方法:采用MTT法测定不同浓度姜黄素作用于肺癌细胞A549后的吸光值以计算其抑制率,并用半定量逆转录聚合酶链反应法测定其bcl-2、bax表达量。结果:不同浓度姜黄素对肺癌A549细胞均有抑制作用,且呈浓度、时间依赖性,并可升高细胞bax及降低bcl-2的表达量。结论:姜黄素可能通过激活bax及抑制bcl-2的表达,从而抑制肺癌A549细胞的生长。     

凋亡相关基因bcl—2和bax在结肠肿瘤的表达及意义

用免疫组织化学方法观察３９例结肠癌凋亡相关基因ｂｃｌ－２和ｂａｘ的表达，以１７例结肠腺瘤作为对照。结果显示：ｖｃｌ－２和ｂａｘ在结肠癌和结肠腺瘤的表达率分别为３３．３３％，１．０３％，３０．７７％和４１．１８％，２３．５３％，４１．１８％，结肠癌和结肠腺瘤中ｂｃｌ－２和ｂａｘ表达率比较均无显著性差异。     

抗凋亡基因bcl-2转染哺乳动物细胞的研究

目的：构建抗凋亡基因bcl-2的哺乳动物细胞表达型质粒并转染哺乳动物细胞293T细胞。方法：利用基因重组技术，将bcl-2全编码cDNA序列，导人pCMV-Tag1表达型质粒；应用磷酸钙共沉淀技术，将其转染293T细胞：并利用免疫沉淀和Westernblotting技术检测Bcl-2融合蛋白的表达。结果：bcl-2全编码cDNA序列成功导人pCMV-Tag1表达型质粒；在转染后的293T细胞成功地检测出bcl-2融合蛋白的表达。融合蛋白大小与预期完全一致。结论：该表达型质粒可以成功转染哺乳动物细胞，为对胰岛细胞的转染奠定了基础。     

高浓度葡萄糖对胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的：观察高浓度葡萄糖体外对胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。探讨葡萄糖毒性及其分子机制。方法：应用TUNEL法检测高浓度葡萄糖培养后大鼠胰岛细胞和小鼠βTc3细胞凋亡百分率；应用定量RT-PCR（QRT-PCR1）检测培养后大鼠胰岛细胞和小鼠βTc3细胞bcl-2和baxmRNA的表达；应用定量RT-PCR检测低剂量链脲佐菌素糖尿病大鼠胰岛bcl-2和baxmRNA的表达。结果：高浓度葡萄糖使原代培养的大鼠胰岛细胞和βTc-3的凋亡细胞比例明显增加；胰岛细胞凋亡过程中。诱导凋亡基因bax的mRNA表达水平明显升高，抵抗凋亡基因bcl-2 mRNA表达水平明显下降．致使bcl-2／bax比率明显降低；对低剂量链脲佐菌素糖尿病大鼠胰岛凋亡相关基因QRT-PCR检测也显示同样的结果。结论：高浓度葡萄糖可能通过诱导胰岛细胞凋亡增加而加重糖尿病。其中bcl-2／bax mRNA表达比率变化可能起重要作用。     

bcl-2基因产物在EB病毒相关性T细胞淋巴瘤中的表达

目的：探讨抗凋亡基因产物blc－2与鼻咽部T-细胞淋巴瘤发生与EB病毒感染的关系。方法：应用双温PCR技术和免疫组化（SP法）检测18例鼻咽T-细胞淋巴瘤组织中EB病毒DNA和抗凋亡基因产物bcl-2的表达。结果：15例EB病毒DNA阳性病例中7例出现blc－2表达（46.67％）,3例EB病毒DNA阴性病例中有1例bcl-2呈阳性反应（33．33％）。两组间无显著差异（P＞0．05）。结论：鼻咽T细胞淋巴瘤发病可能与EBV感染有关。bcl－2基因产物在鼻咽T-细胞淋巴瘤中异常表达与EB病毒感染无明显关系。     

性激素对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡基因表达的作用

目的　探讨雌、雄激素对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡基因表达的作用。 方法 　体外培养 SD大鼠卵巢颗粒细胞设加睾酮 1μg· ml- 1 的雄激素组 ,加雌二醇 1μg· ml- 1 的雌激素组和不加性激素的对照组 ,以 MRNA差异显示技术研究各组凋亡相关基因的表达。所获差异片段以NORTHERN杂交鉴定 ,阳性片段以自动测序仪测序并与 GENBANK数据库资料比较。结果　发现 7个差异条带 ,其中两个分别与 BCL-2和BAX基因同源 ,另 5个条带为假阳性。结论 　BCL-2和 BAX基因直接参与了甾体性激素作用下的大鼠卵泡颗粒细胞凋亡 ,雄激素组 BCL-2表达下调 ,BAX表达上调 ;雌激素组则相反。     

bcl-2、baX在胎儿宫内发育迟缓患者胎盘中的表达

目的　观察胎儿宫内发育迟缓孕妇胎盘组织中细胞凋亡 (IUGR) ,探讨bcl -2和baX在胎盘组织细胞凋亡中的作用。方法　收集IUGR和正常足月胎盘各 2 0例 ,应用TUNEL法检测其胎盘组织中的细胞凋亡 ,免疫组化法检测胎盘组织中bcl -2和baX基因表达。结果　①正常和IUGR胎盘组织中均可见凋亡细胞 ,但IUGR胎盘组织中细胞凋亡指数显著增多P <0 0 5。② 2 0例IUGR胎盘组织中均可见baX过表达 ,差异有显著性P <0 0 5。③IUGR胎盘组织中bcl-2表达显著减少P <0 0 5。④在IUGR胎盘组织中细胞凋亡、baX表达高于正常妊娠组 ,指数呈正相关 ,而bcl-2表达低于正常妊娠组 ,指数呈负相关趋势。结论　在正常妊娠和IUGR胎盘组织中均有细胞凋亡 ,但IUGR胎盘组织中细胞凋亡较多 ,且baX过表达而bcl -2表达显著减少 ,可能是引起细胞凋亡增加的主要原因 ,而细胞凋亡指数显著增加可能是引起IUGR的主要病理过程。     

肝细胞癌中bcl-2及bax基因的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制基因和凋亡促进基因bax表达与肝细胞癌生物学行为的关系及对肝细胞癌预后的关系。方法：用免疫组化LSAB法测定40例肝癌细胞和16例正常肝组织的bcl-2和bax蛋白表达水平。结果：bcl-2及bax蛋白表达阳性率在正常肝组织和肝细胞癌分别为12．5％（2／16）、45．0％（18／40）、87．5％（14／16）、52．5％（21／40）,两组间比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。bcl-2、bax蛋白表达与肿瘤病理分级、分期、淋巴结转移及患者预后相关。结论：bcl-2和bax蛋白的表达参与肝细胞癌的发生及进展,并存在相互作用的关系。bcl-2蛋白表达在肝癌有独立预后价值。     

膀胱癌ras基因表达的研究

本文通过免疫组织化学技术对32例膀胱癌组织 ras 基因表达进行了检测,试图探讨ras 基因表达与膀胱癌病理分级及肿瘤复发的关系。结果表示:32例膀胱癌组织 ras 基因阳性表达率的37.5%。G_1期的20%,G_2期的33.3%,G_3期的53.8%。20例初发膀胱癌 ras 基因阳性表达率的35%。化疗后复化的膀胱癌组织为41.6%。实验结果提示 ras 基因的表达水平与膀胱癌组织的病理分级及肿瘤的复发密切关系。     

bcl-2基因对乳腺癌细胞多药耐药性的影响

乳腺癌细胞的多药耐药性是临床上常见的影响乳腺癌化疗效果的原因之一.近年来发现,抗凋亡基因bcl-2在乳腺癌细胞多药耐药性的产生过程中起到了重要的作用.bcl-2基因通过抑制乳腺癌细胞的凋亡、延长细胞生存时间等机制,诱导乳腺癌细胞对化疗药物产生耐药性.用反义寡核苷酸抑制 bcl-2的表达可以增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.