放射自显影术在神经组织研究中的应用

<正> 研究神经组织结构与功能的方法很多,其中放射自显影术有其独特的优点,即能够准确地示踪定位,显示形态与功能的定位关系,因而能够分析神经元内物质的摄取、代谢、分布和释放等的动态过程,较其它细胞化学方法简便而准确。其缺点是只能作相对定量而不能精确定量。本文着重讨论光镜放射自显影术在神经组织研究中的应用特点和一些要求,并且讨论怎样阅读自显影标本的结果。     

放射自显影术在植块培养(explant culture)中的应用

<正> 由于放射自显影术能够分析细胞内物质代谢与分布的动态过程,较其它细胞化学方法简单而准确,因而非常广泛地应用在各种领域的放射性同位素示踪研究。在组织培养方面,应用放射自显影术,一般都是在单层细胞培养中进行。而在植块法培养中,应用放射自显影术则较少报道。我们在神经组织的植块培养中,曾进行~3H-尿嘧啶核苷和     

高速闪烁放射自显影

标准的放射自显影需要的时间很长,它限制了许多在临床和研究技术上的应用。虽然离体培养下细胞周期的分析,对急性白血病患者的化疗方案和监察患实体肿瘤病人的化疗反应,都可以提供有效的报告,而测定~3H-胸腺嘧啶核苷标记指数(细胞通过预定计划进行的DNA合成的百分比),用常规的放射自显影(ARG)最少需要六天才完成。对应用在低剂量的或低比活的氚胸腺嘧啶核苷,或两者都低的,ARG的曝光需要     

电镜放射自显影研究细胞膜

细胞膜表面成分依附有大分子物质,它们对细胞微环境的通讯,代谢物质的输送,激素、药物和病毒受体等外源物质的识别,均有重要意义。研究细胞表面大分子的结构和功能,常用放射标记法示踪大分子的位置。为不损伤细胞膜,减少同位素进入胞质,作者对比了两种放射自显影的标记方法,其结果如下。     

几种国产感光材料在氚标记冰冻小鼠整体切片放射自显影术中的应用

本文试将几种国产感光材料应用于氚标记冰冻小鼠整体切片放射自显影术。给每只小鼠注射氚水1毫居里,得到的冰冻整体切片与天津工业用高速 X 线片接触曝光22天可得到令人满意的放射自显影谱;使用上海医用 X 线片时,曝光30天的结果不理想;使用自制核_4—乳胶干板时,曝光124天也不能得到完整的放射自显影谱。     

放射自显影神经追踪术的一些基本技术经验

放射自显影术应用于中枢神经系的纤维追踪方面,只有十多年的历史。因有特殊优点,国内外应用者日多。但总的看来,本方法的几个基本方面,例如用何种溶剂配制标记氨基酸、浓缩度、局部注入量、成活期、~3H-氨基酸以及核乳胶质量的影响等等,还缺乏系统的有依据的经验报导,为此,本文作了一些实验观察。材料和方法用体重约200克大白鼠共55只,戊巴比妥钠麻醉。上定位仪。按DeGroot图谱并参考颅骨表面的冠状缝和脑膜表面以定座标。用一微升的Hamilton注射器直接向右侧尾壳核头端注入不     

放射自显影与Feulgen反应结合法

放射自显影与Ｆｅｕｌｇｅｎ反应结合法阎国和，古德全，粟永萍（第三军医大学防原教研室．重庆６３００３８）制作放射自显影标本，以住一般都用苏木素或伊红作对比染色，其结果对比度较差，定位困难．为解决这个问题，我们应用Ｆｅｕｌｇｅｎ反应显ＤＮＡ的方法，作放射...     

放射自显影神经解剖示踪术及其在大鼠中脑中央灰质传出纤维联系研究中的应用

放射自显影神经解剖示踪术(Autora-diographic neuroanatomical tracing,简称ARNT)是利用神经细胞的胞体吸收标记的氨基酸后合成的蛋白质沿轴突运送到终末的生理现象,然后用放射自显影术示踪轴突的走行和终止。本实验探讨了ARNT中的几个环节,应用ARNT研究了与镇痛作用有关的大鼠中央灰质(外侧区)的传出纤维联系。     

心肌活检组织β受体放射自显影定量分析及其初步应用

心肌组织于-20℃恒冷切片机中连续切片,贴于载玻片上。~(125)I-心得静(30～300pM,本室标记)滴加于玻片组织上,在37℃、pH7.4缓冲液下孵育,含或不含L-心得舒10~(-4)M,4℃缓冲液震荡洗脱2次。平行做二组,一组刮下直接测定cpm数;一组留做自显影分析。浸膜法将核4乳胶涂布于载玻片上,避光晾干。与组织片按绞链法密贴,曝光、显影、定影。用Ommicon 3600(USA)计算机图像信息分析仪进行银粒计数。蛋白     

32P放射自显影术对家兔经脉循行路线的宏观显示

目的对家兔经脉循行路线进行宏观显示的研究,为细胞水平及超微组织结构的示踪研究奠定基础。方法用穴位测定治疗仪在对应人体的外关、内关、昆仑、太溪经穴处对家兔的经穴定位,经穴位注入Na2H32PO4,用32P整体放射自显影术对家兔经脉循行路线进行宏观显示。结果获得了家兔经脉循行路线整体放射自显影像,影像线性较宽,形状单一且较粗大,影像走向与通过家兔皮肤导电量测定获得的经穴走向相似。结论家兔体表存在与人体相近的具有低阻抗性的经穴,32P放射自显影术可以实现家兔经脉循行路线的宏观显示。     

雌激素受体在不同品系小鼠组织中的放射自显影定位和定量研究

本研究用氚—雌二醇和冰冻切片放射自显影方法观察了雌性LACA和C57BL小鼠下丘脑视叶前区神经核、垂体前叶、乳腺、胸腺、肝等器官雌激素受体的分布。结果表明,两个品系小鼠下丘脑视叶前区、垂体前叶细胞的标记串均在85％以上,标记细胞平均银颗粒数在19个以上。LACA品系小鼠乳腺上皮细胞标记率达96％,标记细胞平均银颗粒数12个。C57BL小鼠的标记率和银颗粒数分别为5％和5个。两个品系小鼠的肝和胸腺仅偶见个別细胞被标记。上述结果部分地解释了雌性激素(戊酸雌二醇和己酸孕酮)能诱发雌性LACA小鼠乳癌和C57BL小鼠的垂体肿瘤,而未能诱发C57BL小鼠乳癌的原因。雌激素受体的存在是个先决条件,但不是唯一的条件,可能还有其他因素的作用。因为两个品系小鼠的下丘脑视叶前区和LACA小鼠垂体前叶细胞均含有较多的雌激素受体,而雌性激素很少能诱发该组织发生肿瘤。     

改进的G-显带染色体放射自显影技术

中期染色体显带分析,同时结合测定放射自显影颗粒,便于使放射性探针定位。但是,当用氚化放线菌素D(~3H actinomy-cin-D)进行人类中期染色体G显带研究时,Giemsa染色的染色体同由银粒组成的核轨迹乳胶之间的反应,给分辨G-带造成困难。所以,许多研究者常采用放射自显影后G-显带。其中方法之一是Chandler和Yunis(1978)提出的瑞氏染色(Wrightstain)。但瑞氏染色法操作程序繁杂,重复性较差。为了防止Giemsa染料与感光乳胶化学     

弥散性血管内凝血的放射自显影研究

大白鼠注射~(125)I标记的纤维蛋白原后,再注射凝血酶,造成弥散性血管内凝血。放射自显影检查发现,同位素标记的微血栓主要位于肾小球毛细血管,直小血管之中。肺泡的毛细血管也可发现这些微血栓。肝脏和脾脏的网状内皮细胞吞噬了大量的标记物质,这些吞噬细胞定位在肝门区,而在脾脏则位于马氏小体周围。此外,在肾小管的上皮细胞内也发现有同位素,这些物质可能是通过肾小球过滤而被肾小管重吸收的标记物质。用自显影术,常规染色和纤维蛋白的特殊染色互相比较,肺的微血栓在常规和特殊染色中不能被发现,用自显影术则很易检出同位素标记的微血栓。     

在成熟分裂前期人卵母细胞RNA合成的放射自显影研究

作者应用光学显微镜放射自显影技术,对13、18和19周龄的三个人胎儿,研究了~3H-尿核苷掺入处于成熟分裂前期Ⅰ的卵原细胞和卵母细胞。结果表明,在40或60分钟脉冲标记之后,在卵原细胞的核和核仁见到强烈的标记。在前细线期染色体的浓缩阶段,异固缩的物质未被标记,而在它周围的细丝上,却可见到许多银粒。在细线期,染色体和核仁RNA的合成显著,但比卵原细胞少。在合线期,染色体的标记与细线期相比有所下降,核仁不再被标记。早粗线期,染色体的标记降低了,核仁中没有~3H-尿核苷的掺     

双特异抗体在肿瘤免疫治疗中的意义

双特异抗体在肿瘤免疫治疗中的应用以导向药物和导向细胞毒细胞最为重要。用于导向药物其效力比单抗高;用于导向细胞毒细胞时,可改变细胞毒细胞的靶特异性。NK 细胞、CTL 及LAK 细胞均可被双特异抗体导向而杀伤肿瘤细胞。经双特异抗体导向的细胞毒细胞用于治疗肿瘤已初步显示其重要作用。     

新生血管特异抗体的制备及生物活性鉴定

目的 研制识别肿瘤新生血管的单克隆抗体及其活性。方法 用肝癌细胞条件培养基刺激人血管内皮细胞，以此作为抗原免疫小鼠制备抗体。用免疫组化、ELISA和流式细胞术筛选肿瘤血管特异抗体并鉴定其免疫特性。用MTT法研究抗体对血管内皮细胞增殖的影响。结果 抗体AA98选择性地识别肿瘤血管和人血管内皮细胞，抑制血管内皮细胞的增殖。结论 抗体AA98在肿瘤诊断和治疗方面具有潜在的应用价值。     

培养乳鼠心肌细胞M—胆碱能受体的放射自显影

体外培养乳鼠心肌细胞是药理学研究中的有用工具,尤其在药物—受体作用的研究中可进行直接的受体结合研究,具有独特的优点。[~3H]-二苯羟乙酸奎宁酯(~3H-QNB)是一种强效的M-胆碱能拮抗剂,能与M-受体紧密结合,具有很高的特异性。它可作为放射性配基进行受体结合研究,本实验应用放射配基受体结合法,以放射自显影技术直接观察培养乳鼠心肌细胞中的M-胆碱能受体。     

以小鼠125I、125Zn 在体内分布情况谈放射自显影技术的应用

放射性核素的核射线 ,能使照片中卤化银结晶感光 ,所以在示踪实验中 ,标本上涂一层卤化银乳胶 ,标本上示踪剂使相应部位卤化银感光 ,而得知示踪剂在标本中的准确位置和数量 ,用放射自显影技术观察动物体内不同时期蛋白质与酶类分布情况 ,为基础临床科学研究提供依据。1　材料与方法1 .1　实验动物和试剂一组 :小鼠腹腔内不同时间分别注入碘 7.5μci/ 50 ui。二组 :采用北京原子能研究所提供 65Zn加 1 2 N HCl1 .4 ml经 4天溶或透明液体 ,选普通蛋鸡 ,将 65Zn装入胶囊内 ,喂养 ,测试 9-1 6时所下蛋为含 65Zn高峰蛋 ,其中蛋黄内含锌最高 ,…