改良半薄切片多色性染色方法

半薄切片有助于电子显微镜超薄切片的准确定位。现有的半薄切片有各种不同的染色方法,但在观察时往往组织结构、细胞核及细胞浆分辨不够清楚。我们在半薄切片中改进染色液的配制和染色方法,并     

H-E染色在环氧树脂半薄切片中的应用

半薄切片是进行超薄切片前的必要环节，有助于准确定位。常用的染色方法有甲苯胺蓝、吉姆萨染色法等。这些染色单一，仅能提供组织细胞着色深浅不同的蓝色，对特殊组织与特殊结构则不能选择性的染色。若经H-E染色则可提供更为详细的结构，弥补石腊切片的不足，且结构介于光镜和电镜之间，可应用到临床中，提高病理诊断水平。为此，我们在实验工作中摸索出改进的苏木素、伊红(H-E)染色法用于半薄切片，清晰地显示组织结构，提高切片分辨率。现介绍如下。     

Harris苏木精染液化学性质的探讨

苏木精·伊红 (Hematoxylin·Eosin ,HE)染色是组织切片常用染色方法 ,苏木精在不同媒染剂如铝、铁、钼、钨等金属离子参与下可以显示多种组织成分 ,用途广泛。与铝、铁混合用于细胞核染色 ;与钼、钨结合适用于神经胶质细胞染色 ;与钨结合适用于细胞有丝分裂染色 ,还能显示骨骼肌和心肌纤维中的横纹及纤维蛋白染色 ;与碳酸锂结合显示神经髓鞘[1～ 3] 。因此在有关苏木精染料的化学性质上就存在着两种不同的观点 :有人认为苏木精是用于细胞核染色的碱性染料[4 ,5] ;也有人认为是酸性染料[1] 。 1 90 0年Harris创立了一种用于细胞核染色的H…     

几种半薄切片染色法的比较与改进

半薄切片是超薄切片前的一个重要步骤。光镜检查半薄切片,可确定电镜观察部位,判断组织固定和包埋的质量。半薄切片染色法很多,我们对几种常用方法进行了一些比较和改进,现将实践中的体会介绍如下,供参考。一、方法及结果:用Epon812包埋的组织块切成1微米或1.5微米厚的半薄切片,捞到滴有蒸馏水的载片上,在烘箱内烤干,待染色。1.甲苯胺兰染色法:将染液滴于切片上,在酒精灯上加热数秒钟,勿煮沸,流水冲洗,自然干燥,树胶封固后观察。不必经酒精及二甲苯,免切片皱缩不平。如染色适度,组织染成兰色,结构清楚,而树脂无色。2.苏木精—伊红染色法:锇酸固定、树脂包埋的组织,用此法难于着色,一般须先用氢氧化钾溶液脱去树脂,然后染色.为避免氢氧化钾液对组织可能产生的损伤,我们参考Chang法改用2.5%高碘酸处理切片,并用滴     

同时显示肾微血管和细胞构筑的实验研究

目的：在媒染微血管的同时显示肾内细胞构筑，以了解肾微血管与肾小管之间的相互关系。方法：用单宁酸一氯化铁法(TA—be)媒染肾微血管，再以苏木精、H—E法复染来观察肾小管细胞结构。结果：经复染的2组切片各级血管和细胞均染色良好，血管壁平滑肌纤维、内皮细胞界限清晰，细胞核蓝染，H—E染色的细胞质呈深浅不同的红色。因切片较厚，保证了微血管的立体感，细胞的染色效果却不及薄切片的鲜艳。结论：TA—Fe法配合苏木精或HE复染，可同时显示肾微血管和细胞构筑。     

制作运动终板电镜标本的一种简单方法

在运动终板的超微结构形态学研究中,由于在半薄切片中寻找到运动终板比较困难,因而在电镜下难以观察到运动终板,特别在长肌中要在电镜下观察到运动终板更加困难。由此导致在电镜制样时,工作量大;在电镜观察时,失败概率高。我们在工作实践中,逐步摸索出一种比较容易观察到运动终板的制样方法,即将长肌及其支配神经进行整体包埋,以神经进入肌束处为标志进行半薄切片,便于在半薄切片中寻找到运动终板,然后进行定位,再进行超薄切片观察的方法,现简要报道如下:1　标本的取材　捣毁蟾蜍脑脊髓,处死蟾蜍。剥皮去内脏后,将蟾蜍下半身固定于蛙板上,腹…     

六种固定液对冰冻切片苏木精-伊红染色效果的比较

<正>让冰冻切片的苏木精-伊红(HE)染色效果等同于石蜡切片,固定液的选择是最关键。目前很多相关文献报道说法不一。我们选用组织学常用和易配制的6种固定液进行苏木精-伊红(HE)染色效果的比较观察。     

骨髓活检塑料半薄切片的染色

半薄切片的操作过程及方法简单 ,尤其适用于骨髓活体检查 ,切片中的各系统细胞形态接近于涂片形态。因ＨＥ染色不能完全显示骨髓中的一些特殊成分 ,故导致分辨率不够理想。作者针对这一问题建立一种适用于作骨髓半薄切片的染色方法。1　配制方法1 1　染色液的配制　 (1)苏木精、姬姆萨　根据Ｈａｒｒｉｓ苏木精和Ｇｉｅｍｓａ染液的配制方法。 (2 )酸性品红溶液　 1 2 %浓度。1 2　染色方法及步骤　 (1)将骨髓塑料半薄切片 (2 μｍ)附贴于载玻片上在加热板上使充分干燥。 (2 )Ｈａｒｒｉｓ苏木精染色 5ｍｉｎ ,自来水或蒸馏水冲洗。 (3)Ｇｉ…     

Urocortin在人足月胎盘合体滋养细胞表达的亚细胞定位

目的: 利用冰冻超薄切片免疫电镜技术, 观察研究urocortin在人足月胎盘合体滋养细胞上的表达与亚细胞定位。方法: 取材5例足月胎盘组织块固定在4%多聚甲醛液中, 每例标本分成两部分, 一部分做常规石蜡包埋切片, 免疫组化染色, 光镜下观察; 另一部分做冰冻超薄切片, A蛋白-金免疫标记, 透射电镜下观察。 结果: (1) 光镜下观察可见: urocortin主要分布在足月胎盘合体滋养细胞的胞质内。(2) 免疫电镜下观察可见: 抗urocortin金颗粒主要见于合体滋养细胞的粗面内质网上, 也见于细胞核膜上和细胞核内。结论: 足月胎盘的合体滋养细胞能合成和分泌urocortin, urocortin在胞质内合成后可内化（internalization）入胞核内, 提示人胎盘上作为肽类激素的urocortin可能存在“胞内分泌（intracrine）”现象。     

斑马鱼器官石蜡组织切片制作与观察

为观察斑马鱼(Danio rerio)器官的组织结构,丰富斑马鱼基础形态学资料。本实验以斑马鱼心脏和肝脏为材料,优化斑马鱼石蜡组织切片制作方法,并制作斑马鱼器官组织切片,用苏木精-伊红(HE)染色并采集图像分析。斑马鱼心肌纤维呈梭形,细胞间质少;肝细胞呈多边形,细胞核呈圆形,居中。     

环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法

环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法肖莎陈浦辉郭琳琅在肾脏疾病的研究中，肾小球基底膜银染色技术具有重要意义。如若采用半薄切片染色，在光镜下观察则可获得比石蜡切片更为清晰的结果。但因树脂包埋块为非水溶性质，故其半薄切片的特殊染色就较为困难。我们运用...     

抗孕-53及其类似物对小鼠子宫内膜结构的影响

本文旨在了解抗孕-53及其类似物SIPPR-113对着床期及阉割后小鼠子宫内膜形态的影响。选用ICR成年雌小鼠,实验分两部分进行。一、交配后小鼠。按抗着床最小有效剂量处理动物。二、切除卵巢后小鼠。按上述剂量的1/4～1/2处理动物。并与雌二醇及黄体酮进行对比。全部小鼠子宫用石蜡及Epon 812包埋,制备组织学切片、半薄切片(1μm)及超薄切片,光镜和电镜下观察。得到一致的结果:抗孕-53及SIPPR-113能促进小鼠子宫内膜发育及腺体生长,细胞核有丝分裂增多,并引起子宫及基质水肿。在第一部分实验中能抑制一部分着床期腺体的分泌。电镜图像中显示内膜细胞中溶酶体较多,并可见脂滴,少数基质细胞中微丝较多。SIPPR-113显示出与抗孕-53相似的作用,此二化合物具有雌激素样作用。     

常温下无水甘油保存的同种异体肌腱

背景:寻找一种同种异体组织保存液,使保存的肌腱具有最大程度的生物活性。目的:使用无水甘油在常温下对兔子肌腱进行保存,观察不同时间点的细胞形态和肌腱活性。方法:使用特殊的方法处理兔肌腱,并常温避光密封保存在无水甘油中,在保存2,4,7,12个月使用苏木精-伊红染色石蜡切片、透射电镜观察肌腱组织结构及细胞形态,使用超氧化物歧化酶酶学实验观察肌腱的生物学活性。结果与结论:2,4,7,12个月苏木精-伊红染色石蜡切片示大部分细胞细胞膜完整,细胞核规则,肌腱组织结构存在。透射电镜结果示细胞呈静止状态,核形态正常。超氧化物歧化酶酶学实验示肌腱具有超氧化物歧化酶酶活性。结果说明使用特殊的方法处理兔肌腱并在无水甘油中常温避光保存12个月,肌腱的组织结构、大部分细胞的细胞形态和肌腱生物活性得以保存。     

胃癌组织中淋巴细胞的超微结构研究

为了观察胃癌组织中癌细胞和癌间质中淋巴细胞的超微结构改变及两者之间的关系,我们对3例胃低分化腺癌进行了电镜观察。每例取肿瘤和正常组织交界处组织多块,以2.5%戊二醛作前固定;1.0%锇酸1.5%亚铁氰化钾作后固定;Epon 812包埋;半薄切片定位后超薄切片,在H-500型透射电镜下观察。结果发现,胃癌间质中有两种形态的淋巴细胞:一种细胞体积小,胞浆内细胞器少,核大呈圆形,细胞没有伪     

同时显示大鼠中枢神经系统神经元和神经纤维的全程连续切片方法

目的　探索一种简便易行并能同时显示大鼠中枢神经系统 (CNS)神经元和神经纤维的全程连续切片方法。　方法　经过灌流固定的CNS组织低温冰箱速冻后连续冰冻切片和改良的苏木精染色方法。　结果　大鼠全程CNS连续切片各断面上神经元呈蓝黑色 ,神经纤维呈蓝色 ,背景淡黄色。　结论　运用低温速冻、连续冰冻切片、改良的苏木精染色方法可制作同时显示CNS神经元和神经纤维的全程连续切片。     

钩端螺旋体在豚鼠肺弥漫性出血模型肝、肾、心等组织分布的电镜观察

用黄疸出血型O_(17)株钩端螺旋体原培养液,经浓液10倍后,以每支豚鼠静脉注射2毫升,待感染豚鼠引起口鼻涌血而死亡后,立即取肝、肾、心组织固定,以1u厚的薄切片作光学定位观察,超薄切片经染色后电镜观察,其结果显示这些器官和组织之中含有较多的钩端螺旋     

一种提高冷冻切片染色效率的苏木精加热组件

临床病理工作中,冷冻切片质量的优劣直接影响到术中病理诊断的快速性和准确性。冷冻切片制片速度与质量受多种因素的影响,其中苏木精染色是非常关键的环节。细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA带负电荷,呈酸性,很容易与苏木精碱性染料结合而被染色,苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色［1］,易与被伊红染成红色的细胞质区分。我们设计了一种病理冷冻切片的染色加热组件（专利证书号：ZL 201320589148.4）,对150例冷冻切片进行染色,比较该组件处理下与其他4种苏木精染色条件下,HE染色的速度与质量。     

改良Mallory染色法应用于周围神经再生形态学观察的探讨(摘要)

<正> 一般病理检验技术手册和组织学技术手册介绍改良 M_allory 三色染色法多应用于观察结缔组织中的胶原纤维,而应用于周围神经再生的形态学观察,则很少报道。我们在研究激光对大白鼠坐骨神经再生的影响过程中,分别用 H·E、palmgren 氏镀艮及改良 Mallory 染色法染制两批实验大白鼠坐骨神经标本。一批是钳伤的一侧大白鼠坐骨神经标本,分别在损伤后第9、11、18、25天取材切片染色观察;一批是切断的一侧大白鼠     

大鼠胰淋巴管的微细分布

采用半薄切片光镜观察和超薄切片电镜观察方法研究了大鼠胰淋巴管的微细分布。结果证明 ,在胰小叶内包括胰岛内及其周围均不存在毛细淋巴管和淋巴管而有丰富的血管 ;胰的毛细淋巴管和淋巴管仅见于小叶间的结缔组织内。     

脊索瘤超微结构观察

7例脊素瘤标本均于本院手术室取材。将标本分成两份,分别制成石蜡切片(HE及PAS—AB染色)及超薄切片于光镜及H600Ⅳ型电镜下观察。