人工虫草对庆大霉素致大鼠急性肾毒性损伤的影响

人工虫草对庆大霉素致大鼠急性肾毒性损伤的影响郑丰,黎磊石,储小曼(金陵医院全军肾脏病中心南京210002)作者等以往的动物实验和临床研究均已证明,天然虫草对氨基糖甙类抗菌素肾毒性损伤具有良好的防治作用[1]。但由于天然虫草药源匮乏,价格昂贵,很难在临床上推广应用,有报道人工发酵的虫草真菌与目前已知的天然虫草成分十分相近[2],本实验旨在观察人工虫草对庆大霉素致急性肾损伤的防护作用以及对庆大霉素药物浓度的影响。1材?...     

冬虫夏草对老年人氨基糖甙肾毒性损伤的保护作用

本研究观察了冬虫夏草对老年人氨基糖甙（ＡＧ）类肾毒性的影响。随机将２１例患者分为冬虫夏草治疗组和对照组。两组同时用于胺卡那霉素０．４ｇ／ｄ，连续６天。虫草组用冬虫夏草口服，连续７天。动态观察了尿ＮＡＧ酶和β２－微球蛋白（β２－ｍ）变化，治疗后虫草组与对照组尿ＮＡＧ酶分别为２３．５１±１０．８４ｍｕ／ｍｇ．Ｃｒ，４５．４２±２６．９７ｍｕ／ｍｇ．Ｃｒ，Ｒ＜０．０５。虫草组治疗后尿β２－ｍ＞１．０ｍｇ     

多毛孢菌菌粉含药血清对LLCPK细胞损伤的保护作用研究

肾小管上皮细胞是肾脏固有细胞之一，在结构上与肾间质紧密相连，既是肾脏损伤的受害者，也是直接参与者。肾小管间质疾病是肾脏病学研究的重点，肾间质损伤程度直接关系到肾脏疾病的预后，有关它对肾病进程的影响已引起了广泛重视。目的：研究多毛抱菌菌粉不同提取物含药血清对庆大霉素所致的肾小管上皮细胞的损伤、凋亡的影响。方法：培养猪肾小管上皮细胞株LLCPK，用庆大霉素刺激，同时加多毛孢菌的不同提取物含药血清干预。用MTT法测定存活细胞数；生化显色检测NAG酶活性；流式细胞法测定细胞凋亡。结果：实验结果显示，与正常组细胞相比。庆大霉素可显著降低细胞MTT实验的0D值、细胞上清液中NAG酶活性．并显著增强细胞表面Annexin Ⅴ的表达；菌粉水提物或醇提物含药血清均能够显著增强细胞的OD值．降低细胞上清液中NAG水平，抑制庆大霉素诱导的细胞表面Annexin Ⅴ的表达。结论：实验结果表明．多毛孢菌菌粉含药血清可以拮抗庆大霉素的肾小管细胞毒性，促进损伤细胞的修复，抑制细胞凋亡；除了传统水提物外．醇提物也对庆大霉素引起的肾小管上皮细胞损伤有显著的保护作用。     

冬虫夏草、大黄及肾大部切除大鼠血清对肾小管上皮细胞生长的影响

本研究利用体外肾小管上皮细胞培养及氚标记的胸腺嘧啶核普(3~H-TdR)掺入技术,观察了冬虫夏草(虫草)对细胞生长的影响,结果表明虫草可明显促进3~H-TdR 向肾小管上皮细胞内掺入(虫草组11060.63±603.04CPM,对照组8323.83±836.72CPM,P<0.001)。为此考虑虫草减轻肾小管损伤的作用之一在于促进细胞的修复。此外,我们还观察了大鼠5/6肾切除后血清及中药大黄对肾小管上皮细胞的影响,结果显示5/6肾切除后血清能明显刺激3~H-TdR 掺入到上皮细胞内,而大黄则可抑制肾小管上皮细胞的生长。     

虫草肾茶胶囊对肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：研究虫草肾茶胶囊对体外高糖环境下系膜细胞（HMC）增殖的影响,探讨其在糖尿病肾病（DN）防治中的意义。方法：将常规培养的人肾小球系膜细胞分为正常对照组、高糖组、虫草肾茶胶囊高、中、低剂量组及福辛普利组,分别于相应处理后24h,48h和72h收集细胞,用4-甲偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖。结果：高糖有刺激HMC增殖的效应,48h上增殖最明显,而在72h时呈下降趋势。虫草肾茶胶囊及福辛普利两种药物血清对高糖刺激下的系膜细胞增殖有明显的抑制作用,其中虫草肾茶胶囊血清对HMC的抑制作用优于福辛普利血清。且随着虫草肾茶胶囊浓度、作用时间的增加作用更明显,呈一定的时间、剂量依赖性关系。结论：高糖可促进HMC增殖,虫草肾茶胶囊能明显抑制高糖条件下HMC增殖,从而发挥预防肾小球纤维化及硬化的发生、发展,进而延缓DN的进展。     

慢性肾小管间质病变中药干预机制研究进展

肾小管损伤及间质纤维化（RIF）作为独立危险因素,比肾小球病变对肾脏病预后的影响更为重大。近年来对中药防治RIF的作用机制研究取得了一定的进展,其机理主要包括：抑制肾小管间质炎症反应始动或促动因素、抑制肾小管上皮细胞一间充质转变作用、激活细胞外基质降解酶途径、抑制肾小管上皮细胞凋亡、抑制肾间质成纤维细胞活化及增殖等,这些作用机制的揭示对指导临床用药提供了可靠的药理学依据。     

虫草益肾颗粒剂对糖尿病肾病大鼠WT1和nephrin表达的影响

目的：观察虫草益肾颗粒剂对糖尿病肾病（DN）模型大鼠nephrin、WT1表达的影响。方法：将70只雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组和DN组。DN组大鼠行右肾切除后腹腔单次注射链脲佐菌素（STZ）造模成功后,再随机分为模型对照组、虫草益肾低剂量组、虫草益肾高剂量组和福辛普利组。于给药后的第2、4、6、8周末测定24小时尿蛋白量、空腹血糖、血尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）的变化。第8周末处死大鼠,HE染色观察肾小球、肾小管病理变化。Western Blot法检测大鼠肾组织WT1的表达。RT—PCR检测大鼠肾组织nephrin表达。结果：①虫草益肾颗粒剂有降糖作用,且以高剂量组为明显。②虫草益肾颗粒各剂量组大鼠24小时尿蛋白定量在第6、8周时均低于模型组;福辛普利组大鼠24小时尿蛋白定量和虫草益肾低剂量组比较没有明显差别。③虫草益肾各剂量治疗组大鼠的BUN、SCr水平在第6周时均低于模型组;虫草益肾各剂量组大鼠的TC、LDL水平在第6、8周时低于模型组。④模型组nephrin表达增多,虫草益肾颗粒可减少其表达。⑤模型组WT1的表达比正常组对照组明显增多,虫草益肾高剂量组其表达量明显减少,与福辛普利组和虫草益肾低剂量组比较有明显差别。结论：虫草益肾颗粒对大鼠糖尿病肾病具改善作用,调节肾组织WT1和nepnmin表达是其机制之一。     

益肾健脾、活血利水方对含促肾因子血清作用下Gmc分泌炎症介质影响

目的：揭示益肾健脾、活血利水方药拮抗肾小球硬化作用途径。方法：通过肾小球系膜细胞（Gmc)体外培养技术，运用血清药理学方法，观察益肾健脾、活血利水方药对含促肾因子血清作用下Gmc分泌白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNFα）、血小板活化因子（PAF）等多种炎症介质的影响，并以雷公藤多甙片为阳性药物对照。结果：含个肾因子血清可以明显刺激Gmc对IL-1、IL-6、TNFα、PAF等炎症介质的分泌，益肾健脾、活血利水方药对含促肾因子血清作用下Gmc分泌多种炎症介质显示良好的抑制效应。且在一定程度上优于雷公藤多甙片。结论：本法方药无论在生理或病理条件下，均可通过干预炎症介质的释放，调节免疫机能，发挥防治肾小球硬化作用。     

虫草制剂对糖尿病肾病肾小管间质损伤保护作用的临床研究

目的观察虫草制剂对糖尿病肾病肾小管间质损伤的保护作用。方法将60例随机分成2组,对照组30例,采用降糖、降脂,控制血压等对症处理,治疗组30例在对照组治疗基础上加用虫草制剂,每日3次,每次5粒,口服,疗程1个月。结果治疗组临床症状改善、实验室指标改善均较对照组优（P〈0．05）,总有效率治疗组80．0％,对照组60．0％（P〈0．05）。结论虫草制剂对改善糖尿病肾病肾小管间质损伤有较好疗效。     

糖肾安对糖尿病肾病大鼠的保护作用及对肾脏ICAM-1的影响

目的：探讨糖肾安对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏损害的保护作用及其机制。方法：采用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病（DM）大鼠模型,将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、辛伐他汀组、糖肾安组。治疗30周。观察治疗期间及治疗后大鼠的一般状况、血糖、肾质量／体质量（LKW）、内生肌酐清除率（CCr）和24小时尿蛋白改变;用免疫组化法检测细胞间黏附分子一1（ICAM一1）在DN大鼠肾小球及肾小管中的表达。结果：模型组LKW、CCr、24小时尿蛋白均高于正常对照组（P〈0．01）;肾小管中ICAM一1有明显表达,肾小球未见明显ICAM一1表达。糖肾安组血糖、LKW、CCr、24小时尿蛋白降低（P〈0．01）,ICAM一1表达明显下降。结论：糖肾安对糖尿病肾病有一定的保护作用。     

Mechanisms and therapeutic effect of Cordyceps sinensis (CS) on aminoglycoside induced acute renal failure (ARF) in rats]

Nephrotoxic ARF model of rat was induced by IP injection of either Gentamycin or Kanamycin and treated with CS. The results of study showed that the simultaneous administration of CS with Gentamycin could protect the proximal tubular cells from Gentamycin toxicity and the use of CS after the establishment of Kanamycin nephrotoxic ARF could prompt an earlier recovery from ARF as compared with the control group. The possible mechanisms of CS on ARF include: (1) protecting tubular cell sodium pump activity; (2) attenuating tubular cell lysosome overfunction stimulated by phagocytosis of aminoglycoside; (3) decreasing tubular cell lipoperoxidation in response to toxic injury.     

冬虫夏草对肾毒性急性肾功能衰竭的疗效及机制探讨

为了系统地研究冬虫夏草对庆大霉素和卡那霉素所造成大鼠急性肾功能衰竭的影响,动态观察了血肌酐、尿素氮、尿溶菌酶、N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)以及肾脏病理的变化。首次证明冬虫夏草治疗可明显减轻大鼠急性肾小管损伤程度,并可促使肾衰大鼠的肾功能损伤提早恢复。其机制可能与其减轻肾小管细胞溶酶体毒性损伤,保护细胞膜Na~+-K~+-ATP酶和减少细胞脂质过氧化的作用有关。     

绞股蓝对体外培养肾小管细胞庆大霉素毒性的保护作用

目的:研究绞股蓝(GP)对庆大霉素(GM)引起的近端肾小管细胞(PTC)毒性的保护作用。方法:采用原代培养的 PTC 制作 GM 损伤模型,观察丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、N-乙酰-β-氨基葡萄糖酶(NAG)、过氧化氢酶(catalase)、DNA 合成以及形态学变化,同时观察 GP 的保护作用。结果:GP 能激活并保护 ALT、LDH、Catalase 酶活力,降低 NAG酶活力增高、促进 DNA 合成等机制,减轻 GM 的肾毒性损伤。结论:GP 能有效保护 GM 对PTC 损伤。     

Cordyceps sobolifera extract ameliorates lipopolysaccharide-induced renal dysfunction in the rat

Cordyceps Sobolifera (CS), an economic traditional Chinese herb, may ameliorate nephrotoxicity-induced renal dysfunction in the rat via antioxidant, anti-apoptosis, and anti-autophagy mechanisms. We investigated the water extract of fermented whole broth of CS on lipopolysaccharide (LPS)-induced renal cell injury in vitro and in vivo. CS effect on LPS-induced epithelial Lilly pork kidney (PK1) and Madin-Darby canine kidney epithelial (MDCK) cell death was detected with MTT assay. Two-month treatment of CS effects on renal blood flow (RBF), glomerular filtration rate (GFR), plasma blood urea nitrogen, creatinine level and leukocytes (WBC) count were determined in the LPS-treated rats. We further examined the effects of CS supplement on renal tubular oxidative stress, endoplasmic reticulum stress, apoptosis and autophagy by Western blot analysis. LPS dose-dependently induced PK1 and MDCK cell death, which can be ameliorated by CS treatment. LPS significantly decreased RBF and GFR and increased blood leukocyte counts, plasma blood urea nitrogen and creatinine level in the rat after 24 hours of injury. LPS enhanced renal tubular ER stress, autophagy and apoptosis via by increase protein expressions of GRP78, caspase 12, Beclin-1 and Bax/Bcl-2 ratio. These findings are associated with the significant staining in renal proximal and distal tubular ED-1, GRP78, Beclin-1 autophagy, and TUNEL apoptosis in the LPS-treated kidneys. Two months of CS supplement significantly improved RBF, GFR and WBC values and reduced ED-1, GRP78, Beclin-1 autophagy and TUNEL apoptosis in the LPS-treated kidneys. Long-term CS treatment reduced LPS-induced stress responses and tissue damage possibly via blocking LPS-triggered signaling pathways.     

复康片拮抗卡马西平肾毒性的研究

目的：探讨复康片拮抗卡马西平肾脏毒性的疗效。方法：将大鼠分为正常对照组、模型对照组、复康片低剂量组及高剂量组。用卡马西平遣模,治疗组造模第30天给与不同剂量复康片灌胃。实验第90天,处死所有大鼠,观察肾脏组织病理学和肾功能的改变。结果：中药低剂量组表现为肾小球结构基本正常,肾小管上皮细胞轻度水肿,间质可见炎细胞浸润;尿素氮(BUN)水平均明显降低;中药高剂量组大鼠肾小球内细胞增多,肾小管上皮细胞水肿,管腔狭窄,间质炎细胞浸润;尿素氮(BUN)水平降低均不如低剂量组明显。结果表明低剂量组治疗效果略好于高剂量组,说明增大中药剂量并不能进一步提高效果。结论：复康片可缓解卡马西平肾毒性。     

中药复方地灵丹对肾小管损伤保护作用观察

目的:观察地灵丹对马兜铃酸所致肾小管上皮细胞损伤的干预作用,探讨其可能的作用机制.方法:制备地灵丹含药血清加入体外培养的肾小管上皮细胞中,观察细胞增殖,检测NAG酶水平,TGF-β1含量.结果:地灵丹改善马兜铃酸对细胞增殖的抑制作用,减轻细胞毒作用,降低肾小管上皮细胞的TGF-β1分泌.结论:地灵丹对马兜铃酸所致肾小管上皮损伤有保护作用.     

中介素通过抑制内质网应激保护缺氧复氧损伤的大鼠肾小管上皮细胞

目的探讨中介素(intermedin,IMD)通过抑制内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)途径的细胞凋亡,发挥对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的保护机制。方法 NRK-52E细胞随机分为对照组;H/R组;空质粒(H/R+p IRES2)组;IMD(H/R+IMD)组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡;Realtime PCR法和Western-blot法分别检测ERS相关经典分子GRP78、CHOP、Caspase 12在mRNA及蛋白水平的表达;ER特异性荧光染料Dapoxyl用于观察ER形态变化。结果 MTT结果显示,H/R组NRK-52E细胞存活率较对照组明显下降,而IMD转染后细胞存活率提高;肾小管上皮细胞NRK-52E经H/R处理后出现凋亡,细胞凋亡率显著增加,同时H/R可导致ERS途径经典分子GRP78、CHOP、Caspase 12的mRNA和蛋白表达均显著上调;IMD转染后可显著降低NRK-52E细胞凋亡,细胞凋亡率降低,ERS途径经典分子GRP78、CHOP、Caspase 12的mRNA和蛋白表达均明显下降。内质网染色结果显示,H/R可以导致内质网结构受损,Dapoxyl染料聚集,荧光强度加强,内质网颗粒感增强,荧光颗粒分布不均、浓集,并有空泡;IMD转染后内质网结构受损减轻。结论大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E H/R损伤过程中可能存在ERS凋亡途径的活化,IMD可以通过抑制ERS相关的凋亡信号通路,从而减少肾小管上皮细胞凋亡,减轻肾脏IRI。     

中药延缓慢性肾脏病进展的机制

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)进展的病理基础包括肾小球硬化、肾间质纤维化和肾动脉硬化,这些病理改变与足细胞及其相关膜蛋白结构或表达异常、尿蛋白肾毒性、肾素.血管紧张素-醛固酮系统活性增强、致纤维化细胞因子过度表达、肾小管上皮细胞表型转化,以及高脂血症、高血压等因素有关.中药可以改善影响肾小球硬化、肾间质纤维化和肾动脉硬化的增恶因素,从而,延缓CKD进展.     

基于细胞的中药成分肾毒性研究

为探讨基于细胞的中药安全性评价新方法的有效性,本文对常用的肾小管上皮细胞的特点及其在中药成分体外肾毒性研究中的应用情况进行概述,并对基于细胞的中药肾毒性评价方法的应用前景进行展望。