过氯酸钠抑制法测定LDH1活性

乳酸脱氢酶同工酶1（LDH1）的测定对心肌梗塞等疾病的诊断及预后具有重要价值。目前国内多使用电泳分离后计算相对活性、操作繁琐、费时且需特殊仪器，直接测定LDH1活性的试剂盒均为国外进口，价格昂贵。我们参考文献[1，2]，用过氨酸钠抑制LDH2－5，用LDH试剂盒在生化分析仪上测定LDH1活性。该法简单、快速、特异性好。原理：LDH有五种同工酶，LDH2－5都含有M亚基，当过氨酸钠达到一定浓度时，所含M亚基的同工酶均被抑制，剩余活力即为LDH1活性。反应式为：1材料和方法1．1仪器BT－224半自动生化分析仪（意大利产）。1．2试剂…     

化学抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶LD1和LD2

本文应用１，６－已二醇为ＬＤ分子中Ｍ亚基的专一抑制剂，用自动生化分析仪直接测定血清中ＬＤ１和活性，加入１，６－已二醇的最终浓度分别为０．７５ｍｏｌ／Ｌ和０．５５ｍｏｌ／Ｌ。ＬＤ同工酶电泳图谱表明，此时血清中ＬＤ２－ＬＤ５和ＬＤ３－ＬＤ５的活性全部被抑制。用本法同常规电沪法平行检测７５例血清ＬＤ１和ＬＤ１＋ＬＤ２的平均回收率分别为９８．０％和９７．５％；线性范围至少可分别达到８４Ｕ／Ｌ和２０５Ｕ／Ｌ     

REP电泳系统快速检测乳酸脱氢酶同工酶

乳酸脱氢酶（LDH）同工酶在恶性肿瘤、心肌梗死、肝损伤、骨骼肌损伤和贫血等疾病的诊断和鉴别诊断中具有重要意义。LDH同工酶测定方法有电泳法、离子交换柱层析法、免疫学法、抑制法和酶水解法等,后三种方法只能测定LD或LDS。目前临床常规应用方法仍多为电泳法,多存在操作繁琐、电泳分离和染色时间长等缺点。我们应用Helena公司产REP电泳系统快速检测LDH同工酶,并对其进行初步评价。l原理根据不同LDH同工酶在琼脂糖凝胶缓冲体系中所带电行不同将其进行分离,然后用荧光底物孵育,即可见同工酶带。反应如下：LDHDL一乳酸十NA…     

MTT与NBT对LDH同工酶醋纤膜电泳显色效果的比较

ＭＴＴ与ＮＢＴ对ＬＤＨ同工酶醋纤膜电泳显色效果的比较潘小炜（南京市鼓楼区中医院，南京２１０００３）孙春洪张志宏（南京市鼓楼医院）关键词乳酸脱氢酶同工酶醋酸纤维薄膜电泳显色剂我们比较了甲基噻唑四唑盐（ＭＴＴ）和氯化硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）对醋纤膜电泳法测...     

某些实验因素对LDH同工酶电泳的影响

目的探讨实验因素对乳酸脱氢酶（LDH）同工酶电泳的影响。方法醋酸纤维素薄膜电泳分离LDH同工酶。结果实验在避免标本放置时间过长，标本溶血、黄疸，电压过高，缓冲液pH值过高或过低的情况下，对正常人和心肌梗死及肝功能损害患者的血清LDH进行检测，批内实验CV3．6％～6．5％，批间实验3．7％～7．4％，为正常测定结果。结论临床测定血清LDH同工酶时应避免不利的实验因素，才能建立一种适合于各级实验室开展的较稳定方法。     

使用不同电压对LDH同工酶琼脂糖电泳的比较

实验室在进行LDH同工酶电泳操作过程中,我们发现工作中存在一些缺点,如:电泳时间不易掌握;电泳标本>6个时易出现电泳槽两端标本较中间标本电泳速度快(即各标本之间由于位置不同而造成速度不等);同工酶条带有时出现不规则形状而造成结果扫描分析困难等现象发生。根据LDH同工酶琼脂糖电泳原理,我们在不改变其他条件的情况下试将原电泳电压100V增加至110V和120V进行电泳,操作报告如下。仪器:DY—Ⅱ电泳仪BECKMAN Appraise Den-sitomter System扫描仪1方法:当电压调为110V时,电泳25～30分钟后取出标本经反应并染色后观察5个同工酶条带…     

乳酸脱氢酶同工酶电泳测定的快速显色法

琼脂糖电泳法测定乳酸脱氢酶(LD)同工酶,分辨率高,但发色慢;直接在凝胶上开槽点样,扫描定量时易产生干扰峰,影响结果的准确性.我们对该法的点样方法、缓冲系统和酶反应的底物浓度进行了改进,建立了新的LD 同工酶测定法(下称本法),     

硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶Ⅰ

硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶Ⅰ孙月庭，刘斌剑，曲菁华（中国人民解放军第一六一中心医院，武汉４３００１０）现已证实心肌梗塞的早期在胸痛发作８～１２ｈ后，血清中ＬＤ１浓度开始升高，２４～４８ｈ达到高峰，其敏感性达１００％，特异性达９５％以上。测定Ｌ...     

醋纤膜电泳分离LDH同功酶显色剂稳定性的实验观察

乳酸脱氢酶(LDH)同功酶测定一般采用醋纤膜电泳法分离,然后显色测定。但显色剂要求在临用时配制,既繁琐,又浪费。本室通过实验证明,低温避光保存显色剂可在一定时间内连续使用而效果相同,并作实验观察。     

毛细管电泳法分离血清中乳酸脱氢酶同工酶

目的利用还原型辅酶I（NADH）在340nm波长处特异性吸收峰，建立用毛细管区带电泳在线检测人血清中乳酸脱氢酶（LDH）同工酶的方法。方法实验中采用未涂层毛细管，长60cm，内径75μm，pH9．4（23℃）二氨基二甲基1，3丙二醇（AM2P）缓冲液含20mmol/L氧化型辅酶I（NAD^＋）、51，6mmol/L乳酸锂。结果在25min内完成电泳分离，乳酸脱氢酶同工酶1（LDH1）、乳酸脱氢酶同工酶5（LDH5）纯品各自均可得到较好峰形，而且LDH1、LDH2纯品的混合物亦可得到完全分离，在分析正常人血清与肝癌患者血清时，其结果与美国Helena公司REP全自动琼脂糖电泳结果一致，取得满意效果。结论该法快速、低耗，具有较好的推广应用价值。     

应用化学抑制剂和酶偶联比色法直接测定LD1

本文应用1－6已二醇作为LD分子中M亚基的专一抑制剂，采用双试剂法，由自动生化分析仪直接将一定浓度的1．6－己二醇溶液（第一试剂）与血清样品同时加入反应比鱼池（加人1．6已二醇的最终浓度为1．16mol／L），于30C保温5分钟后再加入第二试剂，用酶偶联比色法测定LD；。LD同工酶电泳图谱表明在上述条件下，LD2～LDs的活性全部被抑制。用本法同常规电泳法平行检测51例血清LD，结果相关良好．r＝0．9885，Y＝0．87X＋189；平均回收率104.4％，线性范围至少可达到470U／L；批内CV（％）为3．83～4．08。     

不同检测系统LDH测定结果的可比性研究

目的探讨同一临床实验室不同检测系统间乳酸脱氢酶(LDH)测定结果是否只有可比性,为血清酶测定的标准化提供实验数据。方法参考NCCLS的EP9-A文件,以日立7170生化分析仪、罗氏原装试剂、c.f.a.s校准品和质控品组成的检测系统(已通过ISO/IEC17025实验室认可)为比较方法,检测系统1-4为实验方法,用患者新鲜血清对LDH进行检测,计算试验方法(Y)和比较方法(X)之间的相对偏差(SE%),以CLIA’88规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的可比性。结果LDH测定结果各系统的误差临床均可以接受。结论各检测系统测定LDH结果具有可比性。当同一实验室同一检验项目存在2个以上的检测系统时,应进行方法比对和偏差评估,以保证检验结果的可比性。     

血清ALP和LDH两种同工酶在不同组织学类型胃癌时的变化

本文对不同组织学类型的胃癌的血清标本进行了碱性磷酸酶（ALP）同工酶实验研究。结果表明：管状腺癌和乳头状腺癌患者血清有异常的碱性磷酸酶同工酶表达，并发现血清中乳酸脱氢酶（LD）同工酶的LD3和LD5的升高与胃癌的淋巴结转移和肝转移密切相关。     

乳酸脱氢酶同工酶电泳测定法的改进

测定LDH同工酶常用的方法是血清经醋纤膜电泳后以薄膜贴薄膜的方法进行酶促显色反应。该法由于操作不易掌握，区带易扩散．模糊不清。而另一种方法是电泳后在琼脂糖凝胶板上进行反应，效果较好。但有些试剂不易买到、操作也较复杂，为此我们在上述方法的基础上加以改良，经过反复摸索得到较为满意的结果。现介绍如下。     

免疫沉淀法测定血清乳酸脱氢酶同工酶1对急性心肌梗塞的诊断

用自行开发的免疫沉淀法和经典的电泳法测定乳酸脱氢酶（LDH）同工酶，比较它们对25例急性心肌梗塞（AMI）及24例心绞痛诊断价值，证实免疫沉淀法测得的LDH1和LDH的比值（LDH1／LDH）是所有指标中最好的一个，AMI阳性率为100％，假阳性率为4．1％，且100％阳性率持续16小时。与其它易引起总LDH增高的4种疾病共42例进行比较，也证实本法LDH1／LDH（％）优于电泳法的LDH1／LDH2指标。免疫法测定LDH1具有特异、灵敏、定量且操作简单，可适应急诊测定等特点，便于推广，有助于提高AMI诊断水平。