高浓度17β-雌二醇诱导巨噬细胞凋亡

目的　考察高浓度 17β 雌二醇 (E2 )对巨噬细胞的影响。方法　用Hoechst332 5 8进行染色质荧光染色 ;扫描电子显微镜观察细胞形态 ;激光共聚焦显微镜检测胞质内钙离子浓度 [Ca2 + ]i 及线粒体膜电位。结果　荧光染色及扫描电镜显示E2 (≥ 1μmol·L-1)作用后巨噬细胞出现多种凋亡表现。E2 1μmol·L-1作用后 ,细胞 [Ca2 + ]i 明显升高 ,且有剧烈的波动。E2 1μmol·L-1使线粒体膜电位下降。结论　高浓度的E2 (≥ 1μmol·L-1)能诱导巨噬细胞的凋亡 ,并且与[Ca2 + ]i 的变化及线粒体膜电位的下降有关     

比较鳗鱼降钙素与17β-雌二醇对体外培养成骨细胞增殖与分化的影响

目的比较鳗鱼降钙素(CT)与17β-雌二醇对大鼠体外培养成骨细胞增殖和分化的影响。方法用酶消化法分离培养新生SD大鼠成骨细胞(OB),取第2继代,在培养液中分别加入不同浓度的CT和17β-雌二醇(E2);用MTT法观察OB的增殖能力(A值)及分化功能(ALP)。结果CT组较对照组从1×10-12mol·L-1起A值增加,且呈剂量依赖关系,当浓度≥1×10-9mol·L-1时,差异才有显著意义(P<0.05);E2组较对照组在1×10-9～1×10-7mol·L-1,A值均增加(P<0.001),以1×10-8mol·L-1作用最明显。CT组较对照组从1×10-12mol·L-1起ALP活性均增加,也呈剂量依赖关系,当浓度≥1×10-10mol·L-1差异有显著性意义(P<0.05);E2组较对照组在1×10-9～1×10-7mol·L-1,ALP活性均增加(P<0.05),以1×10-8mol·L-1作用最强。结论鳗鱼降钙素与17-β雌二醇均可促进大鼠体外培养OB增殖和分化。     

17β-雌二醇对大鼠局灶性脑缺血bcl-2、bax表达及细胞凋亡的影响

目的 观察雌激素对大鼠局灶性脑缺血皮层bcl—2、bax表达及凋亡的影响。方法 36只SD雌性大鼠分成3组：2h组、24h组、48h组，每组再分成假手术组，卵巢切除组(OVX组)，17β—雌二醇治疗的卵巢切除组(OVX E2组)。利用免疫组化、原位末端标记方法观察三组大鼠永久局灶性脑缺血皮层bcl—2、bax的表达和细胞凋亡情况。结果 缺血2h，很少出现明显的凋亡细胞，但随缺血时间延长逐渐增多，缺血24h、48h，OVX E2组凋亡细胞较OVX组明显减少；bcl—2在各时间点皆有表达，随缺血时间延长表达逐渐降低，OVX E2组bcl—2表达较同时间点OVX组、假手术组高；随缺血时间延长，bax蛋白表达逐渐增多，OVX E2组bax表达较同时间点OVX组、假手术组降低。结论 脑缺血后雌激素促进bcl—2表达，抑制bax表达，减少细胞凋亡。可能是其脑保护作用的机制之一。     

17β雌二醇对氯胺酮所致神经元凋亡的影响

目的：研究17β雌二醇对氯胺酮所致原代培养皮质神经元凋亡的影响及其机制。方法原代培养皮质神经元,体外培养7 d,随机分为空白对照组（给予相同体积的DMSO）,雌二醇组（17β雌二醇终浓度为0.1μmol·L-1）,氯胺酮组（氯胺酮终浓度为100μmol·L-1）,氯胺酮＋雌二醇组（氯胺酮,17β雌二醇终浓度分别为100μmol·L-1,0.1μmol·L-1）。噻唑蓝（ MTT）法检测神经元存活率,Hoechest33258染色法检测皮质神经元凋亡,Western-blot 法测定cleaved-Caspase-3及Bcl-2蛋白表达。结果氯胺酮组神经元存活率（54.02±7.78）%,明显低于空白对照组;氯胺酮＋雌二醇组神经元存活率（88.09±6.54）%,明显高于氯胺酮组。神经元经Hoechest33258染色在荧光显微镜下观察,氯胺酮组神经元凋亡[凋亡率（49.50±4.34）%]较空白对照组明显增加,氯胺酮＋雌二醇组[凋亡率（15.74±3.40）%]较氯胺酮组神经元凋亡下降。氯胺酮组 cleaved-Caspase-3表达明显增加,Bcl-2明显下降,而氯胺酮＋雌二醇组较氯胺酮组cleaved-Caspase-3表达明显下降,Bcl-2表达明显升高。结论17β雌二醇通过抑制神经元凋亡对抗氯胺酮诱导的皮质神经元损伤,产生保护作用。     

17β雌二醇对氯胺酮诱导皮层神经元凋亡的影响

目的研究17β雌二醇对氯胺酮诱导的原代培养皮层神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠皮层神经元,分别给予不同浓度的氯胺酮及17β雌二醇培养24 h,MTT法检测神经元的存活率,显微镜下观察神经元的形态变化,TUNEL法检测神经元调亡,Western blot法测定pAkt蛋白的表达。结果与对照组比较,氯胺酮能剂量依赖性降低神经元存活率。与氯胺酮组比较,17β雌二醇能剂量依赖性提高神经元的存活率。100μmol·L-1氯胺酮组显微镜下神经元数量减少,胞体立体感消失,细胞轮廓不清,神经元轴突断裂,TUNEL阳性神经元明显增加,pAkt表达明显降低。0.1μmol·L-117β雌二醇与100μmol·L-1氯胺酮共处理改善了氯胺酮引起的神经元损伤,TUNEL阳性神经元明显下降,pAkt表达增加。PI3K抑制剂LY294002拮抗了17β雌二醇的保护作用,TUNEL阳性神经元较0.1μmol·L-117β雌二醇与100μmol·L-1氯胺酮共处理组明显增加,pAkt表达明显下降。结论 17β雌二醇可以保护神经元免受氯胺酮导致的凋亡,其保护作用可能是通过激活PI3K-Akt信号通路实现的。     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞株TE85和U2功能的调节

目的：以人的类成骨细胞株TE85和U2为细胞模型，观察雌激素对细胞功能的影响。方法：³H-胸腺嘧啶参入法测细胞增殖；ELISA法测细胞因子IL-6含量；精氨酸转化法测iNOS活性。结果：IL-1(20 U.mL^-1)和TNFα(50 U.mL^-1)刺激细胞分泌IL-6，并抑制细胞增殖。在TE85细胞，17β-雌二醇(E₂)可抑制IL-6分泌并能对抗IL-1和TNFα对细胞增殖的影响。NOS抑制剂L-NMMA使细胞³H-胸腺嘧啶的参入降低，E₂(1 nmol.L^-1)可对抗L-NMMA的抑制作用。结论：E₂通过减少IL-6分泌和影响iNOS活性而调节细胞功能。     

17β-雌二醇对人牙髓细胞增殖影响的体外研究

目的：观察不同浓度17β-雌二醇对体外培养人牙髓细胞增殖的影响。方法选取年轻恒牙,采用组织块酶消化法获取人牙髓细胞并进行原代培养。取第4代对数生长期人牙髓细胞SABC法进行波形蛋白和角蛋白免疫组化染色鉴定细胞来源。将处于对数生长期的第4代人牙髓细胞随机分为5个实验组、1个对照组和1个空白对照组,96孔培养板每组选6个孔。实验组：在有细胞孔内分别加入含2％活性碳吸附胎牛血清的无酚红高糖DMEM培养液配置的终末浓度为10－5、10－6、10－7、10－8、10－9 mol／L的17β-雌二醇。对照组：在有细胞孔内仅加入培养液。空白对照组：在无细胞孔内仅加入培养液。分别于培养48 h和72 h时用MTT比色法检测17β-雌二醇对人牙髓细胞增殖的影响。采用流式细胞术检测各浓度组17β-雌二醇对人牙髓细胞的细胞周期的影响。结果与对照组比较,在一定浓度范围内17β-雌二醇能促进人牙髓细胞的增殖和细胞周期进程,以10－8 mol／L的17β-雌二醇作用最为明显（ P＜0．05）。结论17β-雌二醇对人牙髓细胞细胞增殖有一定的诱导作用。     

17β-雌二醇对离体猪基底动脉的影响

目的与方法研究17β_雌二醇(E2)对KCl和5_羟色胺(5_HT)引起离体猪基底动脉收缩的拮抗及保护作用。结果E2 浓度依赖性地对抗KCl引起的最大收缩作用 ,IC50 为10-4.8mol/L。E2 预处理后 ,浓度依赖性地抑制KCl引起的最大收缩 ,IC50 为10-4.8 mol/L ,并降低5_HT引起收缩的浓度效应曲线的最大反应 ,其 pD2’为4 57。结论E2 对离体猪基底动脉有舒张作用     

17β-雌二醇对骨骼肌代谢、发育以及功能的影响

17β-雌二醇(17β-estradiol)是卵巢分泌的类固醇激素,其不仅对生殖和性功能有重要作用,也影响肌肉、骨骼等其他器官的发育和功能。骨骼肌存在着明显的性别差异,17β-雌二醇是导致骨骼肌性别差异的主要因素之一。本文综述了17β-雌二醇与骨骼肌内糖与脂肪代谢,骨骼肌发育和17β-雌二醇与骨骼肌疾病之间的关系,并探讨17β-雌二醇与骨骼肌目前研究未解决的问题及近期及远期研究方向。     

17-β雌二醇对SKOV3细胞HOXA10基因表达及甲基化的影响

目的 探讨17-β雌二醇(17-β E2)对人卵巢癌细胞株SKOV3中HOXA10基因表达及基因启动子区CpG岛DNA甲基化的影响.方法 体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,按实验目的分别加入1×10-6、1×10-7、1×10-8 mol/L的17-β E2培养48 h后,收集细胞,分别采用实时荧光定量RT-PCR反应和Western blot检测HOXA10 mRNA和蛋白表达;提取SKOV3细胞基因组DNA,纯化、修饰后用甲基化特异性聚合酶链反应检测HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态.结果 与对照组相比,不同浓度的17-βE2可显著提高SKOV3细胞中HOXA10基因mRNA和蛋白表达(P＜0.05).同时17-β E2作用后HOXA10基因呈部分甲基化状态.结论 17-β 2可以逆转SKOV3细胞中HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态,使HOXA10基因的表达上调.     

17β-雌二醇调控大鼠成肌细胞L6GNR4细胞迁移能力的机制研究

目的研究17β-雌二醇对大鼠成肌细胞L6GNR4细胞迁移能力的调控作用及机制。方法L6GNR4细胞培养在含有10%胎牛血清的DM EM高糖增殖培养基中,培养基中添加10 nM雌激素17β雌二醇和/或50 nM雌激素竞争性拮抗剂Tamoxifen。应用细胞划痕试验在药物处理后0、12、24 h观察17β雌二醇对成肌细胞迁移能力的影响。在药物处理24 h后,应用荧光定量PCR技术检测各组细胞中雌激素受体α和β的表达。同时还检测了成肌细胞迁移相关关键基因(Pax3、Fhl1以及Fhl1相互作用蛋白Actg1、Myh10)在各组细胞中的表达情况。结果与对照组比较,17β-雌二醇在划痕24 h时可以明显抑制L6GNR4的细胞迁移。17β-雌二醇能够明显抑制ERβ的表达,而雌激素竞争性拮抗剂Tamoxifen能够部分逆转17β-雌二醇对ERβ的抑制作用。17β-雌二醇能够明显抑制成肌细胞迁移相关的关键因子Pax3、Fhl1以及Fhl1相互作用蛋白Myh10的表达,而雌激素竞争性拮抗剂Tamoxifen能够逆转或部分逆转17β-雌二醇对Pax3、Fhl1和Myh10的转录抑制作用。相同浓度的雌激素对L6GNR4细胞中Actg1的表达改变不明显。结论雌激素17β-雌二醇通过ERβ转录抑制Pax3、Fhl1以及Fhl1的相互作用蛋白Myh10的表达,发挥其抑制大鼠成肌细胞迁移的作用。     

17β-雌二醇后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的研究

目的：探讨17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）后处理对缺血再灌注损伤离体大鼠心肌的影响。方法：采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,随机分3组,其中后处理组（Pos组）在复灌时给予3次30s短暂开放／30s阻断,雌激素组（E2组）灌注液中含有17B-雌二醇。定时收集冠脉流出液测定冠脉流量（CF）;检测缺血前及复灌后冠脉流出液中LDH、SOD、CK的含量;测定缺血区心肌梗死面积,电镜下观察心肌超微结构变化。结果：复灌后各时点CF值在Pos,E2组较Isc组恢复好（P〈0．05）,复灌30min后Pos,E2组中CK、LDH漏出量较少,SOD含量较高伙0．05）,Pos,E2组心肌梗死面积减小（P〈0．05）。结论：机械后处理、17β-雌二醇后处理,对离体大鼠心肌有保护作用．雌激素抗氧化功能是后处理的重要机制之一。     

17-β雌二醇对缺氧诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

流行病学资料[1]提示雌激素对心血管系统有保护作用,其确切机制尚不十分清楚.缺氧能引起血管内皮细胞功能异常:一氧化氮(NO)下降和内皮素(ET-1)上升,同时能够加速血管内皮细胞的凋亡,并参与一系列的临床病理过程[2].本研究拟探讨缺氧对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能和凋亡的影响,17-β雌二醇(E2)对上述影响是否有保护作用.     

三羟基异黄酮和17-β雌二醇对自由基缩血管效应的影响

目的 :研究自由基引发血管收缩的机制 ,并通过血管静息张力的变化探讨三羟基异黄酮和 17 β雌二醇对自由基缩血管效应的影响。方法 :制备猪冠状动脉血管环 ,固定于恒温肌槽内 ,待平衡后 ,加入各种药物观察血管张力的变化。结果 :内皮完整的血管环在O2· -作用下产生明显的收缩 ,去除内皮后无明显反应。 1μmol·L-1三羟基异黄酮对O2· -引发血管收缩有明显的抑制作用 (P <0 .0 1,n =16 ) ,1μmol·L-117 β雌二醇无明显作用。H2 O2 使去内皮血管环产生明显的收缩作用 ,对内皮完整的血管环缩血管效应不明显 ,30 μmol·L-1三羟基异黄酮可明显抑制H2 O2 的缩血管作用。结论 :三羟基异黄酮可明显抑制O2· -和H2 O2 的缩血管效应 ,其作用明显强于 17 β雌二醇。     

17β-雌二醇对乳腺癌细胞迁移的影响及CANP-FN通路的介导作用

目的探讨17β-雌二醇(E2)对人乳腺癌细胞迁移活动的影响及其信号机制。方法以雌激素受体(ER)阳性MCF-7和ER阴性MDA-MB-468乳腺癌细胞为研究模型,E2处理诱导细胞迁移。采用划痕实验检测细胞迁移能力,小分子RNA(siRNA)转染模型细胞沉默纤连蛋白(FN)基因表达,Western blot法检测蛋白水平,钙蛋白酶(CANP)特异性抑制剂Calpeptin(Cal)预处理细胞干预胞内CANP活性。结果(1)E2(50 nmol·L~(-1))处理24 h可明显促进MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,迁移率分别增加(51.55±5.50)%(P<0.05)和(40.78±4.78)%(P<0.01);(2)E2明显上调MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达水平,分别为对照组的2.11倍(P<0.05)和1.86倍(P<0.01);(3)Cal(10μmol·L~(-1))可明显抑制E2诱导的MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(49.55±6.44)%(P<0.05)和(36.85±4.40)%(P<0.01);(4)Cal能明显抑制MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达上调,抑制率分别为(80.12±4.55)%和(78.84±5.70)%(P<0.01);(5)siRNA沉默FN能抑制E2诱导MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(40.65±5.80)%(P<0.01)和(40.88±6.02)%(P<0.05)。结论E2可促进ER阳性或阴性乳腺癌细胞的迁移,而CANP-FN信号通路可能参与介导E2的促细胞迁移效应。     

APP17肽对Aβ25-35诱导神经细胞凋亡保护作用

目的通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ25-35诱发SH-SY5Y细胞凋亡是否有保护作用,并对其保护作用机制作进一步的探讨.方法选用细胞形态观察、半定量LM-PCR DNA ladder Assay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17肽是否对Aβ25-35诱发SH-SY5Y细胞凋亡有保护作用;通过测定细胞MTT代谢率,共聚焦显微镜观察Aβ25-35和APP17肽对细胞内过氧化物含量、线粒体膜电位的影响以及Western Blotting 观察细胞内凋亡诱导因子AIF及核转录因子NF-κB的表达情况,探讨了APP17肽的保护作用机制. 结果 APP17肽可以明显改善Aβ25-35造成的细胞形态损伤,显著降低细胞凋亡比率;与Aβ25-35损伤组相比,APP17肽预孵育能明显提高细胞MTT代谢率,稳定线粒体膜电位,减少AIF的表达;有效降低Aβ25-35引起的细胞内过氧化物含量增高;并且使具有神经保护作用的核转录因子NF-κB表达增加. 结论 APP17肽可以稳定线粒体功能、降低细胞内过氧化物含量,激活NF-κB并使其持续表达,对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有比较明显的保护作用.     

17β-雌二醇长时程作用促进成骨细胞HOS TE85 45Ca摄取及间质矿化

目的　研究 17β 雌二醇 (17β estradiol,E2 )对HOSTE85细胞骨形成的长时程效应。方法　3H 胸腺嘧啶参入法 (3H TdR)测细胞增殖 ;4 5Ca沉积法测细胞钙摄取 ;茜素红染色法测间质矿化。结果　E2 (0 1～ 10nmol·L- 1 )作用14d剂量依赖地刺激细胞3H TdR参入、增加4 5Ca摄取并增加茜素红染色面积。ICI1 82 ,780 (1 0nmol·L- 1 )能部分抑制E2作用 ,使其3H TdR参入分别减少了 36 5 6 % ,19 6 %和 15 4 % ,4 5Ca的摄入则分别减少了 2 2 2 7% ,37 2 8%和 4 0 1% ,茜素红染色面积减少。结论　E2 通过增加细胞数量、增加钙摄入而促进骨间质生成和矿化     

17β-雌二醇对人成骨细胞株HOS TE85细胞增殖及胞内cAMP,cGMP,iNOS影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对ＨＯＳＴＥ８５细胞增殖及胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ影响。方法［３Ｈ］－ＴｄＲ参入，放射免疫及Ｌ－３Ｈ－精氨酸转化法。结果Ｅ２１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理４８ｈ，细胞计数为（９４．３×１０７±７．５×１０７）个·Ｌ－１，对照组为（６５．０×１０７±５．９×１０７）个·Ｌ－１，［３Ｈ］－ＴｄＲ参入量增加４５．０％；细胞ｉＮＯＳ活性为（７３．０±６．６）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·ｇ－１·ｍｉｎ－１（比对照组增加４６１．５％），ｃＧＭＰ为（０．６９±０．０３）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·１０－８ｃｅｌ（比对照组增加３０５．９％）；抑制ｈＰＴＨ诱导胞内ｃＡＭＰ升高。结论Ｅ２能刺激成骨细胞增殖。Ｅ２可能通过影响胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ含量和活性而发挥作用。     

硫化氢对脂多糖诱导的大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的探讨硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)诱导的内毒素性急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法♂SD大鼠48只,随机分为6组,每组8只:空白对照组、LPS组、LPS+NaHS低剂量组、LPS+NaHS中剂量组、LPS+NaHS高低剂量组和LPS+PPG组。LPS组、LPS+NaHS低、中、高剂量组和LPS+PPG组舌下静脉注射LPS(5 mg.kg-1),空白对照组注射等容量的生理盐水。LPS+NaHS低、中、高剂量组和LPS+PPG组在注射LPS 3 h时腹腔分别注射低、中、高剂量的氢硫化钠(NaHS)或炔丙基甘氨酸(PPG),空白对照组和LPS组腹腔注射等容量生理盐水。各组大鼠均在舌下静脉注射LPS或生理盐水6 h后处死,取肺组织。应用流式细胞学技术检测各组大鼠肺组织细胞凋亡情况,免疫组化法检测肺组织Bcl-2和Bax的表达,Westernblot检测肺组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3和9(Caspase-3、9)的蛋白表达。结果 LPS组与空白对照组比较肺组织细胞凋亡率明显升高,Bcl-2蛋白表达明显减弱,Bax蛋白表达明显增强,Bcl-2/Bax比值明显降低,Caspase-3和Caspase-9蛋白表达明显增强(P<0.05或P<0.01)。与LPS组比较,LPS+NaHS中、高剂量组肺组织细胞凋亡率明显降低,LPS+NaHS高剂量组Bcl-2阳性细胞表达明显增强,LPS+NaHS中、高剂量组Bax阳性细胞表达明显减弱,LPS+NaHS低、中、高剂量组Bcl-2/Bax比值明显增加,LPS+NaHS高剂量组Caspase-3和Caspase-9蛋白表达明显减弱(P<0.05或P<0.01)。与LPS组比较,LPS+PPG组肺组织细胞凋亡率明显升高,Bcl-2阳性细胞表达明显减弱,Bax阳性细胞表达明显增强,Bcl-2/Bax比值明显降低,Caspase-3和Caspase-9蛋白表达明显增强(P<0.05或P<0.01)。结论 LPS诱导的ALI早期肺组织细胞凋亡增加,给予外源性H2S可减少肺组织细胞凋亡,可能与通过下调Bax、Caspase-3、9蛋白表达和上调Bcl-2蛋白表达有关。     

17β-雌二醇和运动对去卵巢大鼠后肢骨组织PPARγ蛋白表达的影响

目的观察17β-雌二醇(E2)和运动对去卵巢大鼠后肢骨组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白表达和骨髓脂肪细胞的影响。方法3mon成年♀性未经产SD大鼠40只,经双侧卵巢切除手术或假手术1wk后,按体重随机分为假手术、去卵巢、去卵巢运动和雌激素4个组。运动组每周进行4次45min、速度18m.min-1、坡度5°的跑台训练。雌激素组每周颈部皮下注射3次,剂量为25μg.kg-1E2。实验结束后,HE染色观察股骨和胫骨形态学变化,Westernblot检测骨组织PPARγ蛋白的表达量。结果去卵巢组股骨远端和胫骨近端的骨髓腔脂肪空泡数目以及股骨PPARγ蛋白表达高于假手术组、去卵巢运动组和雌激素组。结论E2与运动能改善去卵巢大鼠的骨组织学结构,其机制可能部分是与抑制去卵巢大鼠骨组织PPARγ蛋白的表达和抑制骨髓脂肪分化有关。