慢性丙肝患者外周CTL对HCV抗原位点的特异性识别及受HLA的限制

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染后外周血中细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）对ＨＣＶ的识别杀伤。方法用ＨＣＶＮＰ合成肽Ａ链和Ｂ链从ＰＢＭＣ中经反复刺激产生ＨＬＡＢ４４限制的ＨＣＶ抗原特异ＣＴＬ，对５位人类白细胞抗原（ＨＬＡ）Ｂ４４分子阳性的丙肝患者，６位ＨＬＡＢ４４阴性的丙肝患者及５位ＨＬＡＢ４４阳性，但ＨＣＶ阴性的对照者外周ＣＴＬ对ＨＣＶ核壳蛋白（ＮＰ）的反应进行研究。结果发现ＣＴＬ能识别一个ＨＣＶＮＰ位点，该位点位于ＨＣＶ核壳蛋白的第８１～１００个氨基酸残基之间。而此位点的识别受ＨＬＡⅠ类分子Ｂ４４的限制。在５位ＨＬＡＢ４４阳性的患者，其ＣＴＬ对此位点有明显的细胞毒作用，而其余６位ＨＬＡＢ４４阴性的患者及５位正常对照者，均无此种细胞毒作用。结论在慢性丙肝患者外周血存在ＣＤ８＋的ＣＴＬ，这种ＨＣＶ特异的ＣＴＬ能够识别一个ＨＣＶ的核壳蛋白（ＮＰ）位点，此位点位于ＨＣＶＮＰ残基第８１到１００之间。并且识别此位点的ＣＴＬ受ＨＬＡⅠ类分子Ｂ４４的限制。本文结果为ＨＣＶ感染后，体内细胞免疫在病毒清除中的作用及发病机理的研究提供了方法和线索。     

α-2b干扰素治疗不同基因型丙肝疗效与免疫指标的关系

根据Ｏｋａｍｏｔｏ基因分型法对２８例丙肝患者的病毒基因进行了分型，１８例为ＨＣＶ－Ⅱ型，１０例为ＨＣＶ－Ⅲ型。重点研究了α－２ｂＩＦＮ治疗ＨＣＶ－Ⅱ型患者和ＨＣＶ－Ⅲ型患者免疫功能的不同改变：在α－２ｂＩＦＮ治疗前，ＨＣＶ－Ⅱ型患者和ＨＣＶ－Ⅲ型患者之间ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＣＤ４百分比、ＣＤ８百分比及ＣＤ４／ＣＤ８比值６项指标无明显差别。α－２ｂＩＦＮ治疗８ｗ时，ＨＣＶ－Ⅲ型患者ＣＤ４／ＣＤ８比值明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者ＣＤ４／ＣＤ８比值。α－２ｂＩＦＮ治疗１个疗程（１２ｗ）时，ＨＣＶ－Ⅲ型患者ＣＤ４百分比，ＣＤ４／ＣＤ８比值明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者。α－２ｂＩＦＮ治疗１个疗程后第４周（１６ｗ）时，ＨＣＶ－Ⅲ型患者ＣＤ４百分比，ＣＤ４／ＣＤ８比值仍明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者，但在整个治疗过程中，ＨＣＶ－Ⅲ型和Ⅱ型患者ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ和ＣＤ８百分比４项指标改变无显著差异。α－２ｂＩＦＮ治疗ＨＣＶ－Ⅲ型患者，其ＣＤ４百分比，ＣＤ４／ＣＤ８比值改变明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者。这可能是α－２ｂＩＦＮ治疗ＨＣＶ－Ⅲ型患者疗效明显好于ＨＣＶ－Ⅱ型患者重要原因之一。     

α—2b干扰素治疗不同基因型肝疗效与免疫指标的关系

根据Ｏｋａｍｏｔｏ基因分型法对２８例丙肝患者的病毒基因进行了分型，１８例为ＨＣＶ－Ⅱ型，１０例为ＨＣＶ－Ⅱ型，重点研究了α－２ｂＩＦＮ治疗ＨＣＶ－Ⅱ型患者和ＨＣＶ－Ⅱ型患者免疫功能的不同改变，在α－２ｂＩＦＮ治疗前，ＨＣＶ－Ⅱ型患者和ＨＣＶ－Ⅱ型患者之间ＩｇＧ，ＩｇＭ，ＩｇＡ，ＣＤ４百分比，ＣＤ８百分比及ＣＤ４／ＣＤ８比值６项指标无明显差别，α－２ｂＩＦＮ治疗８ｗ时，ＨＣＶ－Ⅲ型患者ＣＤ４／ＣＤ８     

丙型肝炎病毒感染的血清学检测

目的了解丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染及病毒血症存在情况。方法用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对不同人群的血清标本做了抗－ＨＣＶ、抗－ＨＣＶＩｇＭ和ＨＣＶＲＮＡ的检测，并对三项指标间的关系进行了对比分析。结果抗－ＨＣＶ在普通成年人、献血员、急性肝炎和肝硬化患者中的检出率分别是３５７％，８５８％，６２５％和４８３８％；与ＨＣＶＲＮＡ的符合率分别是１１４３％，６１１１％，８００％和７３３３％。相同人群抗－ＨＣＶＩｇＭ与ＨＣＶＲＮＡ的符合率分别是７５％，９０９％，８１８１％和１００％。结论抗－ＨＣＶＩｇＭ比抗－ＨＣＶ能更客观地反映ＨＣＶ病毒血症的情况，个别抗－ＨＣＶ阴性血清检测到了抗－ＨＣＶＩｇＭ和ＨＣＶＲＮＡ。     

HBV感染与IgA肾病肾小管间质病变的关系

目的探讨ＩｇＡ肾病ＨＢＶ感染与肾小管间质病变的关系。方法利用原位分子杂交（ＨＢＶＤＮＡ）、免疫组化（ＨＢＡｇ、ＣＤ３、ＣＤ８）以及ＨＢＶＤＮＡＨＢＡｇ和ＨＢＡｇＣＤ４３双标记技术，对９１例ＩｇＡ肾病肾穿刺标本进行研究。结果肾组织内ＨＢＡｇ阳性率为６９．２％。ＨＢＶＤＮＡ原位杂交阳性率为４２９％。ＨＢＶＤＮＡ阳性的病例，双重标记染色发现ＨＢＶＤＮＡ阳性的肾小管上皮细胞可表达ＨＢｃＡｇ或／和ＨＢｓＡｇ。ＨＢＶ感染标记（ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｓＡｇ）阳性组ＣＤ３阳性细胞和ＣＤ８阳性细胞数明显高于阴性组（Ｐ＜００１），并可见数量不等的Ｔ淋巴细胞入侵ＨＢｃＡｇ及ＨＢｓＡｇ阳性肾小管管壁或围绕其周围。结论感染ＨＢＶ的肾组织细胞能够表达ＨＢＡｇ，并诱导ＣＤ３阳性细胞和ＣＤ８阳性细胞浸润，从而加重肾小管、间质损害。ＨＢＶ感染对ＩｇＡ肾病的发生发展可能起着重要作用     

HCMV体外感染兔胚细胞敏感性研究

ＨＣＭＶ体外感染兔胚细胞敏感性研究孟红刘菊华李焱孙广莲石永玉吴惠联郭进林人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）具有严格专一宿主特性，研究ＨＣＭＶ动物宿主是近年令人关注的课题。本研究观察了ＨＣＭＶＡＤ１６９株接种于胎兔成纤维细胞增殖的情况。将ＨＣＭＶＡＤ１６９（引自...     

肾移植术后受者人巨细胞病毒感染与其它机会感染的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测６５例肾移植受者（ＲＴＲ）尿中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＤＮＡ，配合捕获ＥＬＩＳＡ法及间接ＥＬＩＳＡ法检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ及ＩｇＧ，诊断ＨＣＭＶ感染，感染率为６０％（３９／６５）。应用临床及实验室方法诊断其它病原体（如革兰氏细菌，结核杆菌，霉菌，ＨＳＶ及ＶＺＶ等）所致的机会感染，结果表明，ＨＣＭＶ感染组机会感染率明显高于ＨＣＭＶ未感染组（Ｐ＜０．０１）。对其机理的分析表明，ＨＣＭＶ感染后外周血Ｔ细胞亚群产生了变化，即ＨＣＭＶ感染组ＣＤ４水平显著低于ＨＣＭＶ未感染组，ＣＤ８水平显著增高，导致ＣＤ４／ＣＤ８值显著降低（Ｐ均小于０．０１），说明ＨＣＭＶ感染组患者细胞免疫受到严重抑制，招致其它病原体的机会感染。     

乙型肝炎病毒在丁型肝炎病毒包装中的作用机理研究

用含ＨＢＶ全基因和ＨＢＶ大、中、小分子表面蛋白基因的真核细胞表达质粒（ＣＭＶ－ＨＢＶ、ＣＭＶ－ＬＳ、ＣＭＶ－ＭＳ、ＣＭＶ－Ｓ）分别与含ＨＤＶ ｃＤＮＡ三聚体的重组质粒共转染ＣＨＯ细胞。转染后３天在上述４种转染细胞内及培养上清中均检出了ＨＤＶ ＲＮＡ和ＨＤＡｇ表明上述４种转染细胞的培养上清中均有ＨＤＶ病毒颗粒的包装和分泌。提示：ＨＤＶ病毒的包装可能仅需ＨＢＶ Ｓ 基因及其小分子表面蛋白的辅助。     

抗HCV阳性患者体液中正链和负链HCVRNA的检测及意义

为了解ＨＣＶ感染者血清和体液中ＨＣＶ存在状况，利用ＲＴ－巢式ＰＣＲ方法检测了４２例抗ＨＣＶ阳性患者血清，唾液、精夜或阴道分泌物中的ＨＣＶＲＮＡ。患者血清和体液中ＨＣＶＲＮＡ的检测出率分别为：血清６９．０５％（２９／４２），唾液２３．８１％（１０／４２），精液３６．６％（４／１１），阴道分泌物１５．３８％（２／１３）。     

一株与正常人细胞成分反应的巨细胞病毒单克隆抗体的鉴定

用ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株抗原建立了一株分泌ＨＣＭＶＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株Ｎ４Ｅ６。经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现ＭｃＡｂ与ＨＣＭＶ抗原和正常人成纤维细胞（ＨＥＦ）抗原均有多条免疫沉淀带出现：与ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株抗原反应的沉淀带为８９Ｋ，８７Ｋ，７３Ｋ和４２Ｋ；与Ｄａｖｉｓ株抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，４４Ｋ；与８１６地方株抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，７３Ｋ，４４Ｋ；与ＨＥＦ抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，４４Ｋ。表明Ｎ４Ｅ６除能识别ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株和８１６地方株特异成分７３Ｋ，外，尚能识别ＨＣＭＶ和ＨＥＦ共同成分８９Ｋ，８７Ｋ和４４Ｋ。     

HCV感染所致肝损伤机制

ＨＣＶ感染半数以上会出现不正常肝活检，包括肝硬化，肝组织学检查表现为肝实质内有许多淋巴细胞，这些淋巴细胞由ＣＤ４，ＣＤ８细胞组成，ＣＤ８Ｔ细胞介导的细胞毒性作用可清除感染病毒外，也是慢性ＨＣＶ感染肝脏损伤的一个重要因素，细胞因子产物可通过ＣＤ４和ＣＤ８细胞在抑制病毒复制和引起肝损伤方面起重要作用，文中将对ＨＣＶ感染所至才肝损伤机制作较详细论述。     

蜕皮甾酮对肿瘤坏死因子致人脐静脉内皮细胞损伤的影响

目的和方法：实验以培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）为研究对象，应用大剂量肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）造成ＨＵＶＥＣ损伤，观察培养上清液血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）及ＨＵＶＥＣ的超微结构变化，研究蜕皮甾酮（ＥＤＳ）对内皮细胞损伤的影响。结果：大剂量ＴＮＦ作用于ＨＵＶＥＣ时，其培养上清液的ＡＣＥ非常明显增高，超微结构破坏；应用ＥＤＳ，则培养上清液的ＡＣＥ有所减少、超微结构的损害程度有所减轻。结论：ＥＤＳ能够减轻人血管内皮细胞的损伤，揭示了ＥＤＳ在抗血管内皮细胞损伤方面的价值。     

丙型肝炎病毒DNA核酸免疫的初步探讨

目的：探索ＨＣＶ－ＤＮＡ核酸免疫效应。方法：将构建的重组体ｐＣＤ－ＨＣＶｓ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,用ＥＬＩＳＡ和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测了免疫鼠血清抗体、脾细胞和ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原的增殖反应。结果：重组体ｐＣＤ－ＨＣＶ１、ｐＣＤ－ＨＣＶ２和ｐＣＤ－ＨＣＶ３均可诱导小鼠（ｎ＝６）产生抗体（０．６６５￣０．７０７,ＯＤ值）和脾细胞对ＨＣＶ抗原增殖反应（ｎ＝６,ＳＩ为３．８９￣４．４７）,但各重组体间的     

HCMV活动性感染孕妇842例临床分析

对８４２例孕妇ＨＣＭＶ活动性感染与胎儿先天性畸开有的关系进行了临床分析，结果发现有异常妊娠生育史且ＨＣＭＶ阳性者，其胎儿先天性畸形较高，用特异性ＤＬＥ治疗ＨＣＭＶ阳性者，可明显降低胎儿畸形率。提出在孕早期即行ＨＣＭＶ感染的检测，阳性者用特异性ＤＬＥ治疗可预防或减少胎儿畸形的发生。     

HBV感染与IgA肾病肾小管-间质病变的关系

目的 探讨ＩｇＡ肾病ＨＢＶ感染与肾小管间质病变的关系。方法 利用原位分子杂交（ＧＨＢＶ ＤＮＡ）、免疫组化（ＨＢＡｇ、ＣＤ３、ＣＤ８）以及ＨＢＶ ＤＮＡ－ＨＢＡｇ和ＨＢＡｇ－ＣＤ４３双标记技术,对９１例ＩｇＡ肾病肾穿刺标本进行研究。结果 肾组织内ＨＢＡｇ阳性率为６９．２％。ＨＢＶ ＤＮＡ原位杂交阳性率为４２．９％。ＨＢＶ ＤＮＡ阳性的病例,双重标记染色发现ＨＢＶ ＤＮＡ阳性肾小管上皮细胞可表达ＨＢ     

中国湖南株丁型肝炎病毒cDNA（443－870）片段的克隆和序列分析

取１例湖南丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ阳性血清，经强变性剂法抽提ＨＤＶＲＮＡ，逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增，扩增的ＨＤＶＣＤＮＡ片段重组到ｐＵＣ１８质粒中，获得了中国湖南株ＨＤＶＣＤＮＡ（４３３－８７０）片段克隆，ＤＮＡ测序结果显示，该片段（４３８ｈｐ长，包括一端ＰＣＲ引物２５ｈｐ）与已知的美国、意大利、法国、诺鲁和中国台湾５株ＨＤＶｃＤＮＡ相同片段比较，同源性分别为９１．３％，９４．５％，９１．３％，８４．５％和８９．３％，其中与ＨＤＶＲＮＡ复制密切相关的第一个高度保守区与美国株、意大利株和法国株完全同源。     

丁型肝炎病毒感染者细胞免疫状态的观察

丁型肝炎病毒感染者细胞免疫状态的观察曲春枫，苗乃法，玄恩余，李在连，梁秀玲，吕世军采用鼠抗人ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８和ＣＤ（１６）单克隆抗体的碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）免疫酶染色法，观察比较了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）合并丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）感...     

STUDY ON PERIPHERAL BLOOD MONONUCLEAR CELL(PBMC) PROLIFERATIVE RESPONSES TO DIFFERENT HCV ANTIGENS IN PATIENTS WITH HEPATITIS C

为探讨丙型肝炎（ＨＣ）病人细胞免疫功能和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的致病机制及机体对其免疫保护作用,收集２４例ＨＣ病人（急性３例,慢性２１例）,用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对不同ＨＣＶ抗原增殖反应,并用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）检测了ＰＢＭＣ中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞亚群在ＨＣＶ抗原刺激后的变化。结果：ＨＣ病人ＰＢＭＣ对ＨＣＶ合成肽ＣＰ９,ＮＳ４和基因重组抗原Ｃ,Ｅ１,Ｅ２,ＮＳ３刺激后出现不同程度增殖反应,刺激指数（ＳＩ）分别为１．６９±０．５１,１．６１±０．５４,１．６８±０．５８,１．４９±０．４４,１．４４±０．４４和１．３３±０．３３。３例急性ＨＣ中２例病人的ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原呈有效增殖反应（ＳＩ≥２．１）,且血清ＨＣＶＲＮＡ阴转伴ＡＬＴ正常。细胞表型分析显示：增殖的细胞表型是ＣＤ４＋淋巴细胞,而ＣＤ８＋淋巴细胞增殖反应较弱。结论：ＨＣ病人ＰＢＭＣ确实存在对ＨＣＶ抗原的增殖反应;ＣＤ４＋淋巴细胞比ＣＤ８＋淋巴细胞增殖反应要强,急性ＨＣ病人ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原有效的增殖反应预示可能有良好的临床愈合     

丙型肝炎发病中特异性细胞毒性T细胞的作用及其意义

随着对丙型肝炎病毒致病机理的深入研究，ＨＣＶ特异性细胞毒性Ｔ细胞的作用日益引起人们的重视。研究表明，ＨＣＶ感染者肝小叶内活化ＣＤ８＋Ｔ细胞浸润，识别感染肝细胞表达的抗原与主要组织相容性抗原ＭＨＣ分子（对于人类又名人类白细胞抗原ＨＬＡ）复合物，杀伤靶细胞，清除病毒。对ＨＣＶ特异性ＣＴＬ的研究可能使丙型肝炎的发病机理和防治研究进一步深入。     

干扰素和肿瘤坏死因子对人脐静脉内皮细胞表达HLA—Ⅱ类抗原…

采用ｃｅｌｌ－ＥＬＩＳＡ法对ＩＦＮ－α，γ及ｒＴＮＦα单独或协同影响人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）表达ＨＬＡ－Ⅱ类抗原作了定量观察，结果表明，ＩＦＮγ直接刺激ＨＵＶＥＣ可依浓度和时间依赖的方式提高其ＨＬＡ－Ⅱ类抗原表达量，而ｒＴＮＦα，ＩＦＮα单独处理ＨＵＶＥＣ无效，当ｒＴＮＦα和ＩＦＮγ同时诱导时，对ＨＵＶＥＣ表达ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ均表现抑制作用，但是，当先用ＩＦＮγ诱导ＨＵＶＥＣ２４ｈ后