支原体肺炎患儿辅助性T淋巴细胞亚群TH1、TH2细胞状况

目的　探讨肺炎支原体肺炎急性期患儿外周血淋巴细胞亚群以及辅助性T淋巴细胞亚群TH1、TH2细胞的改变 ,为免疫治疗的可能性提供依据。方法　采用流式细胞仪技术 (FACS)检测了3 5例支原体肺炎急性期患儿外周血T淋巴细胞亚群以及NK细胞和B细胞 ,同时通过检测分泌细胞因子γ干扰素 (IFN γ)、白细胞介素 4(IL 4)的CD+ 4细胞方法 ,测出相应TH1、TH2细胞的百分比 ,并与2 8例正常儿童进行比较。同时对 3 5例支原体肺炎患儿中的 3 0例进行了血清免疫球蛋白及精制结核菌素 (PPD)皮肤试验。全部患儿均系在我院住院的患儿 ,男 15例 ,女 2 0例 ,年龄 3～ 13岁 ,平均 9岁。对照组男 14例 ,女 14例 ,年龄 3～ 12岁 ,平均 7岁。结果　支原体肺炎患儿急性期外周血CD+ 3 、CD+ 4T细胞百分率为 68 0 0± 6 66及 3 7 86± 5 84,较对照组 63 71± 7 92及 3 4 54± 6 2 3高 ,(P <0 0 5) ;患儿外周血TH1细胞百分率为 14 13± 8 46,对照组为 2 0 77± 6 89,两者差异有非常显著意义 (P =0 0 0 1)。NK细胞及TH1/TH2比值在患儿组降低 (P分别为 <0 0 1和 <0 0 5)。两组间CD8、TH2、B细胞百分率及CD4/CD8比值差异无显著意义。 3 0例患儿之血清免疫球蛋白与同龄正常儿童比较 ,IgG全部正常 ;IgA升高 7例 ;IgM升高 4例。皮肤P     

反复扁桃体炎患儿缓解期T细胞亚群及辅助性T淋巴细胞亚群的功能状态

目的探讨反复扁桃体炎(RT)患儿缓解期T淋巴细胞亚群及辅助性T淋巴细胞(Th)亚群功能状态。方法采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测27例RT缓解期和21例健康对照组儿童外周血T细胞亚群的表面分子表达情况;同时采用双抗夹心ELISA法检测两组外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IFN-γ和IL-4水平。结果RT患儿与对照组比较,CD4 和CD3 细胞的表达率均显著下降(P均<0.01),CD4 /CD8 比值失调(P<0.01);与Th1细胞功能相关的IFN-γ细胞因子表达水平显著降低(P<0.01),Th1/Th2比值失调(P<0.01);而CD8 细胞及与Th2细胞功能相关的IL-4细胞因子水平与对照组比较差异均无显著意义(P均>0.05)。结论RT患儿缓解期存在T细胞功能紊乱;Th1亚群功能低下以及Th1/Th2平衡的紊乱可能在RT的发病中起更重要的作用。     

支气管哮喘患儿血T辅助淋巴细胞的变化

目的探索支气管哮喘儿童细胞免疫状况的变化。方法采用流式细胞仪检测支气管哮喘儿童急性期及正常对照组外周血T辅助淋巴细胞1(Th1)和Th2的百分率、CD4 、CD3、CD8、NK细胞、B细胞百分率及CD4/CD8比值。对10例哮喘缓解期患儿复查淋巴细胞亚群。结果支气管哮喘患儿发作期外周血Th1细胞百分率[(16.28±9.83)%]明显低于正常对照组[(20.77±6.89)%](P<0.05);哮喘组Th2细胞百分率[(5.44±1.96)%]较对照组[(4.21±2.12)%]明显增高(P<0.05)。Th1/Th2比值,哮喘组为3.41±2.56,对照组为5.91±3.24,两组比较有非常显著性差异(P<0.01)。但哮喘组B细胞、NK细胞百分率、CD3、CD4、CD8及CD4/CD8与正常对照组比较均无统计学差异(P均>0.05)。10例哮喘缓解期患儿淋巴细胞亚群结果表明,B细胞百分率显著下降(P<0.05),其他各项指标在发作期与缓解期无明显差异。结论支气管哮喘儿童最重要的免疫异常是Th1/Th2细胞比例和功能失衡,主要表现为Th2细胞应答优势存在,Th1/Th2显著降低。     

病毒性肺炎患儿自然杀伤细胞亚群、T细胞亚群及血IL-2、IL-4、INF-γ变化的研究

目的 探讨病毒性肺炎患儿自然杀伤(NK)细胞亚群、T细胞亚群及血IL-2、IL-4、INF-γ的动态变化及临床意义.方法 采用流式细胞术测定32例病毒性肺炎患儿急性期(肺炎起病2?d内)、恢复期(肺炎起病5?d内)外周血NK细胞亚群、T细胞亚群,用ELISA法测定血IL-2、IL-4、INF-γ水平,用乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞活性变化,并与30例健康对照组儿童进行比较.结果 (1) 病毒性肺炎患儿CD16+CD56+、CD16+NK细胞在急性期分别为(0.73±0.17)%、(0.39±0.2)%,恢复期分别为(1.47±0.22)%、(0.89±0.14)%;急性期与恢复期比较,恢复期CD16+CD56+、CD16+NK细胞明显升高(P<0.01),但均显著低于对照组(P<0.01).两组NK细胞亚群变化与其活性改变呈正相关.病毒性肺炎患儿CD56+NK细胞与健康儿童差异无显著性(P>0.05).(2) 与对照组相比,病毒性肺炎患儿的急性期、恢复期IL-2、IL-4均无明显改变,差异无显著性(P>0.05);急性期INF-γ无明显改变,差异无显著性(P>0.05),而恢复期INF-γ[(28.10±1.38)?μg/L]明显高于急性期[(22.78±1.19)?μg/L],差异有非常显著性(P<0.01).(3) 与对照组相比,病毒性肺炎患儿CD4+、CD4+/CD8+T细胞计数在急性期与恢复期均无明显改变,差异无显著性(P>0.05).病毒性肺炎急性期、恢复期CD8+T细胞均低于对照组,差异有显著性(P<0.05),但病毒性肺炎急性期、恢复期间差异无显著性(P>0.05).结论 病毒性肺炎患儿NK细胞活性降低,活性与亚群数目呈正相关;病毒性肺炎患儿抑制性T细胞功能低下.病毒性肺炎急性期NK细胞激活是多因素共同作用的结果 .     

肺炎支原体感染患儿T淋巴细胞亚群检测及分析

目的　观察肺炎支原体肺炎患儿急性期外周血T淋巴细胞亚群、T淋巴细胞活化状态的改变,探讨其发病机制。方法　采用流式细胞仪技术检测了2 0 0 2年1 0月至2 0 0 3年6月就诊于上海市金山区中心医院的1 7例肺炎支原体肺炎患儿急性期外周血T淋巴细胞亚群及T细胞亚群上CD2 5+的表达和CD4+细胞上CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+的表达;对照组为1 0例健康体检儿童。两组年龄、性别差异无显著意义。结果　肺炎支原体肺炎患儿急性期外周血CD3 +百分率( % )为( 62 . 2 3±6 .2 7) ,较对照组( 68 .60±4. 74)低,差异有显著性意义(P <0 . 0 5) ;CD4+、CD8+百分率较对照组差异无显著性意义(P >0. 0 5) ;CD8+CD2 5+百分率( % )为( 0 . 61±0 . 58) ,较对照组( 2 .1 6±0 . 40 )降低,差异有极显著性意义(P <0 .0 1 ) ;CD4+CD45RA+/CD4+CD45RO+比值与对照组相比降低(P <0 . 0 5)。结论　肺炎支原体肺炎时存在细胞免疫失调,主要表现为总T细胞降低,T细胞活化障碍和CD4+CD45RA+/CD4+CD45RO+平衡失调。     

肠套叠患儿外周血Th1/Th2的漂移

目的 探索肠套叠患儿细胞免疫状况的变化.方法 采用流式细胞仪检测肠套叠患儿急性期及对照组外周血T辅助淋巴细胞Th1和Th2的百分率、CD3、CIN+、CD8+、NK细胞、B细胞百分率及C1N/CD8比值.对10例肠套叠恢复期患儿复查淋巴细胞亚群.结果 肠套叠患儿急性期外周血Th1细胞百分率(15.98±9.83)%明显低于对照组(20.83±6.79)%(P＜0.05);肠套叠组Th2细胞百分率(5.48±1.86)%较对照组(4.31±2.02)%明显增高(P＜0.05).Th1/Th2比值,肠套叠组为3.51±2.49,对照组为5.89±3.14,二组比较有非常显著性差异(P＜0.01).急性期NK细胞百分率明显降低(P＜0.05),但肠套叠组B细胞、CD3、CIN+、CD8+及CD4/CD8与对照组比较均无统计学差异(P＞0.05).10例肠套叠缓解期患儿淋巴细胞亚群结果表明,NK细胞百分率显著升高(P＜0.05),其他各项指标在急性期与缓解期无明显差异.结论 肠套叠患儿最重要的免疫异常是Th1/Th2细胞比例和功能失衡,主要表现为Th2细胞应答优势存在,Th1/Th2显著降低.肠套叠急性期肠道抗感染免疫力下降.     

传染性单核细胞增多症患儿外周血T细胞亚群与细胞因子动态变化

目的 观察传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)患儿细胞免疫功能动态变化.方法 采用ELISA法和流式细胞仪分别检测30例IM患儿急性期和恢复期外周血T细胞亚群和血清IFN-γ、IL-2,并与32例同龄健康儿童组进行比较.结果 急性期IM患儿IFN-γ、IL-2、CD3、CD8水平显著高于对照组及恢复期(P＜0.01),CD4、CD4/CD8比值显著低于对照组及恢复期(P＜0.01),恢复期患儿外周血CD4升高,细胞因子IFN-γ 、IL-2及外周血CD3、CD8降低,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),恢复期CD4/CD8值仍低于对照组(P＜0.05),但高于急性期(P＜0.01).结论 IM患儿急性期外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子有明显变化,检测其变化规律对评估IM患儿的细胞免疫功能状况,辅助诊断和指导治疗具有重要临床意义.     

呼吸道合胞病毒及其他病毒性肺炎患儿血淋巴细胞亚群的变化

目的了解不同病原所致病毒性肺炎时血淋巴细胞亚群的改变。方法对2002~2004年确诊为病毒性肺炎的住院患儿,采用流式细胞仪对其急性期血淋巴细胞亚群进行检测。其中呼吸道合胞病毒(RSV)性肺炎组34例,非RSV肺炎组23例。同时与30例健康对照组比较。结果非RSV组Th1细胞百分率为[(15.89±7.88)%],RSV肺炎组为[(11.76±7.31)%],均较对照组显著增高(P=0.011,0);两者亦有显著差异(P=0.026);Th1/Th2在非RSV肺炎组较RSV肺炎组及对照组均明显增高,有非常显著差异(P=0.006,0)。结论病毒性肺炎时呈现Th1应答优势,并以非RSV感染最为明显。与非RSV肺炎相比,RSV感染具有潜在的相对Th2反应倾向。     

早产儿外周血辅助性T淋巴细胞亚群功能特点观察

为探讨早产儿外周血辅助性T淋巴细胞(Th)亚群功能特点,以足月新生儿为对照,ELISA法检测21例早产儿外周血单个核细胞(PBMC)体外产生γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-6和IL-6水平.结果显示早产儿PBMC体外产生IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平均明显低于足月儿,尤以IFN-γ和IL-2更为突出.表明早产儿Th(包括TH1和Th2)细胞功能明显低于足月儿,但其Th1/Th2功能状态与足月儿相似,即Th2细胞功能占优势,相对强于Th1细胞亚群.     

单纯性肾病综合征患儿T淋巴细胞亚群及体液免疫变化

目的　探讨单纯性肾病综合征 (SNS)患儿T淋巴细胞及体液免疫变化。方法　应用流式细胞仪和特定蛋白分析仪对SNS患儿 1 4例活动期和缓解期 (1 2例 )及 1 5例正常儿童外周血T淋巴细胞亚群及血清免疫球蛋白 (Ig)进行检测。结果　SNS患儿活动期组外周血总CD3 、CD4、CD8细胞低于对照组 (t=2 .1 4 ,2 .86　P均 <0 .0 5)。活动期组CD4 、CD8 细胞明显低于缓解期组 (t=2 .49,2 .2 9　P均 <0 .0 5)。活动期组CD4 /CD8 明显低于缓解期组和对照组 (t =2 .75 ,4.1 0　P均<0 .0 5)活动期组和缓解期组血清IgG与对照组比较均有明显降低 (t=2 .75 ,7.0 1　P <0 .0 5 ,0 .0 1 )。结论　SNS患儿在活动期周围血T淋巴细胞数量异常 ,且T淋巴细胞亚群间比例失调 ,且伴体液免疫异常。     

Haemophilia and T lymphocyte subsets.

Number of circulating lymphocytes and T cell subsets were assessed in 13 boys with severe haemophilia and 12 age matched controls. There was no significant difference between the two groups. This conflicts with previous findings in adults where lymphopenia and changes in T cell subpopulations have been found frequently.     

Peripheral blood lymphocyte subsets in healthy Turkish children

Immunophenotyping of peripheral blood lymphocyte subpopulations is essential for the diagnosis and follow-up of children with immunodeficiencies and other immune disorders. The relative size and absolute number distributions (median and 5-95%) of lymphocyte subsets, including cord blood (Coulter, EPICS-XL) were examined by flow cytometry in 190 healthy subjects from birth to 18 years of age with a view to obtaining normal reference values for Turkish children of the following age groups: cord blood (n:29), birth to 1 year (n:41), 1 to 2 years (n:30), 2 to 6 years (n:30), 6 to 10 years (n:30), and 10 to 18 years (n:30). The relative size of CD2+, CD3+CD16-56-, CD3+CD8+ T lymphocytes increased while the relative size and absolute counts of those together with CD3+CD4+ and CD19+, CD20+ B lymphocytes decreased with age. The percentage of CD3-CD16+56+ NK cells increased from 0-1 year to 10-18 years; however, absolute count of CD3-CD16+56+ NK cells remained stable and unchanged in all age groups. The relative size and absolute count of activation markers (CD3+CD25+ and HLADR+) decreased from 0-1 year through 10-18 years age group. This study has once more demonstrated that both the percentage and the absolute number of lymphocyte subsets in cord blood and peripheral blood of healthy infants and children changed with age. Therefore, comparison of results to those of age-matched healthy controls is of utmost importance in the reliable and accurate evaluation of lymphocyte subsets reflecting cellular immunity in children.     

Changes in lymphocyte subsets after cardiac surgery in children

Children undergoing cardiopulmonary bypass (CPB) operations have an increased risk of developing severe infections. Impairment of the immune system may contribute to the development of sequelae such as capillary leaks, pulmonary dysfunction and auto-immune reactions. The objective of this study was to investigate the impact of cardiac surgery with CPB on the immune system of infants and young children. We conducted a prospective study to investigate the changes in circulating lymphocyte subpopulations in a sample of 21 consecutive infants and young children undergoing cardiac surgery for congenital heart disease. The following statistically significant ( P<0.05) results were obtained: leucocyte counts rose 6 h after surgery due to the increase in neutrophils. Absolute T-cell number and absolute T-helper cell number decreased within 24 h after CPB. The proportion of T-cells expressing the T-cell receptor gammadelta as well as natural killer cells increased during CPB. In contrast, the proportion of T-cells expressing activation markers (CD25, CD45R0) decreased within 24 h after CPB, as did the number of cells expressing adhesion molecules (CD11b and ICAM). CONCLUSION: during cardiac surgery with cardiopulmonary bypass, absolute natural killer cell counts increase while T-cells decrease, presumably due to an extravasation or adhesion of activated T-cells. The relevance of this finding regarding the risk of infection is discussed.     

早产儿外周血淋巴细胞亚群分布的研究

目的 探讨早产儿外周血淋巴细胞亚群分布及与胎龄、出生体质量关系.方法 检测生后2 h内胎龄28～34周(A组)、34～37周(B组)早产儿及足月新生儿外周血淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CDl9+、CD(16+56)+分布情况.结果 早产儿CD3+CI)4+明显高于足月儿,CD3+CD8+、CD19+、CD(16+56)+均明显低于足月儿,差异有统计学意义(P值分别为0.002,0.002,0.036,0.0001);A组CD3+明显高于B组,CD19+、CD(16+56)+明显低于B组,差异有统计学意义(P值分别为0.015,0.025,0.0006);新生儿CD4+/CD8+与胎龄、出生体质量的相关系数分别为0.45和0.48(P值均＜0.01);CD(16+56)+百分比与胎龄、出生体质量的相关系数分别为0.53和0.58(P值均＜0.01).结论 早产儿淋巴细胞免疫功能低于足月儿;胎龄越小、出生体质量越低,其细胞免疫功能越不成熟;新生儿外周血CD4+/CD8+、CD(16+56)+百分比与胎龄、出生体质量有一定的相关性.     

SGK1调节T细胞亚群失衡在儿童哮喘中的作用

目的：探讨SGK1在儿童哮喘T细胞中的表达及对T细胞分化的影响,揭示SGK1调节T细胞分化在儿童哮喘中的作用。方法收集在西安市儿童医院收治的儿童支气管哮喘患儿28例,依据临床诊断进行分级。通过ELISA分别检测IL-4、IL-13和IL-17A在哮喘患儿血清中的表达水平。从哮喘患儿外周血( peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中,磁珠分选CD4+T细胞,通过Real-time PCR检测SGK1的表达。从PBMC中分选获得Na?ve T细胞,体外诱导分化,通过Real-time PCR检测SGK1在Th1、Th2和Th17细胞中的表达。以siRNA干扰SGK1,FCM分别检测Th2和Th17细胞分泌IL-4和IL-17A的能力。构建哮喘小鼠模型,以shRNA-SGK1 Na?ve T细胞静脉回输,观察shRNA-SGK1对哮喘气道炎症的影响。结果与健康儿童相比,哮喘患儿血清中IL-4、IL-13和IL-17A的水平明显升高,且随病程进展,血清中这三种因子的水平越高。哮喘患儿中,SGK1在外周血CD4+T细胞中的表达显著升高,且SGK1的表达与IL-13和IL-17A呈明显正相关。在体外诱导分化的Th2和Th17细胞中,SGK1的表达明显升高,而在Th1细胞中表达变化不明显。抑制SGK1的表达,Th2和Th17相关的细胞因子IL-4和IL-17A都明显下降。在体内,shRNA-SGK1抑制了哮喘小鼠IL-13和IL-17A的血清水平,气道炎症明显降低。结论高表达的SGK1通过调节T细胞亚群的分化促进了儿童哮喘的进展。     

川崎病患儿淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的变化

目的探讨检测川崎病(KD)患儿淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的临床价值。方法入选388例KD患儿,160例感染发热性疾病患儿,85例健康体检的正常对照儿童;采用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞(NK细胞)和B淋巴细胞绝对值和百分比,速率散射比浊法检测血清Ig G,Ig M,Ig A和补体C3、C4水平。结果与感染发热性疾病患儿及正常对照儿童相比,KD患儿B细胞、补体C3和CD4/CD8比值显著升高,而CD8+T细胞和NK细胞百分比下降,CD3+T细胞的绝对值升高,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论淋巴细胞亚群和补体可作为鉴别KD和了解KD发病机制的实验室指标。     

儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生症淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的探讨外周血淋巴细胞亚群对儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)诊断、治疗和预后判断的意义。方法 30例HLH患儿,采用HLH-2004诊断治疗方案,20例患儿获得完全缓解,10例死亡。30例同龄健康儿童作为正常对照。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群。结果 20例缓解患儿和10例死亡患儿急性期与正常对照组比较,CD3+T和CD8+T细胞比例均增高,CD4+T和CD3-CDl6+CD56+NK细胞比例均下降,CD4+/CD8+比值减低,差异均有统计学意义(H=7.857~45.448,P均0.05);CD19+B细胞比例与对照组比较,差异无统计学意义(H=6.202,P0.05)。20例HLH缓解患儿缓解期与急性期淋巴细胞亚群比较,CD3-CD16+CD56+NK细胞比例的差异有统计学意义(Z=3.760,P0.05),CD3+T、CD8+T、CD4+T和CD4+/CD8+比值、CD19+B计数差异无统计学意义(Z=0.135~1.082,P均0.05)。结论 HLH患儿淋巴细胞亚群有明显变化,存在细胞免疫失衡;动态检测其变化可能有助于判断HLH的治疗效果及预后。     

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目的研究儿童幽门螺杆菌(H.pylori)感染时的T淋巴细胞亚群变化。方法流式细胞仪直接免疫荧光法测定38例[H.pylori+慢性浅表性胃炎(CSG)12例;H.pylori+十二指肠溃疡(DU)5例;H.pylori-CSG21例]儿童胃窦黏膜及外周血T淋巴细胞亚群。各组患儿均在内镜检查下取胃窦黏膜作快速尿素酶试验、组织学检查及淋巴细胞提取,同时抽取外周肝素抗凝静脉血2mL。提取的淋巴细胞经CD3FITC、CD4PE、CD8PerCP染色后行流式测定。其中,胃黏膜T淋巴细胞亚群的检测以CD3设门。结果(1)胃黏膜CD+3(%)细胞的检出率分别为:H.pylori-CSG组3.14±2.03,H.pylori+CSG组4.58±2.30,H.pylori+DU组为6.49±4.49;(2)胃黏膜CD+3细胞中CD+4(%),CD+8(%)的相对比例及CD+4/CD+8值分别为:H.pylori-CSG组为19.81±9.25,47.30±12.83,0.43±0.19,H.pylori+CSG组为40.66±12.52,29.25±8.58,1.42±0.31,H.pylori+DU组为31.98±14.02,49.52±19.00,0.72±0.43。H.pylori+CSG组局部胃窦黏膜CD+4细胞、CD+4/CD+8比值明显高于H.pylori-CSG组,CD+8细胞则低于H.pylori-CSG组(P<0.01)。H.pylori+DU组CD+4、CD+4/CD+8比值也高于H.pylori-CSG组(P<0.05),但CD+8细胞无统计学差异。H.pylori+DU组CD+8细胞高于H.pylori+CSG组而CD+4细胞无统计学差异,CD+4/CD+8比值则低于H.pylori+CSG组(P<0.01)。(3)外周血T淋巴细胞亚群的变化在三组之间并无明显的差异。结论H.pylori+DU与H.pylori+CSG的宿主的T淋巴细胞反应并不相同,而局部胃窦黏膜的T淋巴细胞亚群的异常可能在儿童H.pylori感染的免疫致病机制中起一定的作用。