盐酸化伊红溶液在病理小标本包埋操作中的应用

正病理科日常工作中经常会遇到各种小标本,如内镜活检及穿刺活检组织的病理标本制作。由于标本体积小,经过脱水处理后体积更小,易遗漏给后期病理标本制作带来一定的困难,目前取材时多采用小标本伊红滴染法,使组织在包埋过程中易于识别,提高包埋速度和质量~([1])。作者在实际工作中发现,水溶性和醇溶性伊红滴染小标本脱水后仍出现着色过淡现象,这给小组织包埋和后续切片带来一定的影响。作者参照胥维勇等~([2])方法,配置盐酸化伊红溶液滴染小组织,     

苏木精与伊红染液在病理小标本制片中的应用比较

正病理科日常外检工作中经常会遇到各种内镜活检及穿刺活检小标本,由于其体积小,形状不规则,为使组织在制片过程中易于识别,醒目、便捷的预染方法对于小组织的辨认非常重要。目前常规取材时采用的伊红染色法经过脱水处理后经常出现着色不深甚至完全不着色现象,在标本后续制作过程中容易发生组织丢失、与其他组织碎屑相混淆、切片不全或过切等现象。作者通过反复摸索比较,发现Lillie-Mayer苏木精染色的小组织着色鲜明而均匀,不易褪色,缩短了制片时间,提高了     

不同染色方法对人脑垂体细胞显示效果的比较

目的改进人脑垂体的染色方法,更清晰地显示腺垂体内各种细胞的形态特点,提高实验课教学质量。方法应用苏木精-伊红染色法和改良染色液染色法显示脑垂体的组织结构。结果用传统的苏木精-伊红染色法不易区分各种细胞,而采用改良染色液显示脑垂体组织结构效果好,既能观察脑垂体的结构,又能区分嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。结论改良染色液染色法能够很好地显示脑垂体组织结构,使3种细胞的形态特点清晰可辨,可为实验教学提供优质的切片标本。     

水溶性伊红Y不同配置法对HE染色效果的影响

HE染色效果除与组织是否新鲜、固定是否及时以及脱水包埋过程是否恰当有关外,染色液的配置和使用也是重要的环节之一,染色液的质量最终决定染色的效果[1].本实验室使用伊红染色剂均是水溶性伊红Y,在长期的工作实践中发现,采用不同的伊红配置法所得的染液,HE染色效果差异明显,为了使染色效果更佳、更稳定和更可控,我们对伊红的配置方法和染色效果进行对比实验,现将实验过程及结果详述如下.     

基于硬组织切片染色的颈椎钩椎关节的解剖研究

目的利用硬组织切片技术、苏木精—伊红染色及甲苯胺蓝染色方法对成人钩椎关节的组织形态及各层结构进行观察,并对钩椎关节的解剖结构进行探讨。方法选取成年男性全颈椎标本,截取C₂~C₆钩椎关节进行福尔马林固定,脱水,于光固化机中包埋聚合。利用硬组织切片机对标本进行切片处理,磨片机对标本进行磨片处理,并使用苏木精—伊红及甲苯胺蓝进行染色。观察染色后钩椎关节组织形态及结构特点。结果苏木精—伊红染色的钩椎关节骨切片可清晰见到椎体及椎间盘被钙盐沉积分开,上下椎体切面可见粉染骨小梁,骨小梁间可见骨髓组织。甲苯胺蓝染色的钩椎关节骨切片可见成骨细胞和破骨细胞的各种骨组织形态,椎体切面可见体积、宽度、分布均正常的蓝色骨小梁。结论硬组织切片技术可以较完整保留钩椎关节的固有组织形态,经苏木精—伊红染色、甲苯胺蓝染色均可清晰观察到钩椎关节各层结构及形态特征。     

两种染色法判定左前臂骨缺损修复骨组织的成熟度

背景：苏木精-伊红染色和Masson染色是常用的两种评价骨组织修复程度的方法,但上述两种方法能否有效地评价骨缺损修复过程中骨组织成熟度,目前尚缺乏相关研究。 目的：比较Masson染色和苏木精-伊红染色两种方法判定骨组织成熟度的敏感性。 方法：构建新西兰白兔15 mm桡骨缺损的动物模型,植入丝素蛋白/羟基磷灰石/骨髓基质干细胞的组织工程化骨,分别于术后第4,8,12周随机选取6只动物摄X射线平片,随后处死取材,进行大体标本观察、Masson染色及苏木精-伊红染色组织学观察。 结果与结论：X射线片与大体标本可见兔桡骨缺损逐渐修复,新生骨走向成熟骨。术后4周,苏木精-伊红染色在材料与骨的结合部及中间的材料上均形成大量新生软骨,有类骨样组织形成及有少量编织骨出现;Masson染色主要表现为绿色,可见到少许红染。术后8周,苏木精-伊红染色出现更多的新生骨组织,并更趋于成熟,出现了成熟的骨细胞及大量编织骨,有血管形成;Masson染色主要表现为红-绿相间。12周时,苏木精-伊红染色新生骨逐渐改建,形成髓腔,有大量板层骨相互融合成片;Masson染色主要表现为红色。说明Masson染色结合苏木精-伊红染色能较好判定新生骨走向成熟骨的过程,但在判定骨质成熟度时Masson染色较苏木精-伊红染色更直观。     

新型超声组织处理仪及环保试剂对乳腺癌ER、PR和HER-2染色的影响

超声快速石蜡组织标本处理技术(简称超声组织处理技术)是近年来出现的一种新技术[1]。该技术采用新型的组织标本处理试剂和仪器,可以快速、无污染、较大批量地处理组织标本,且成本低廉,质量可靠[2]。目前已经有多家单位采用该方法处理标本以缩短病理报告周期。乳腺穿刺活检技术已成为诊断乳腺癌的主要手段之一,而ER、PR、HER-2免疫组化染色直接决定乳腺癌的治疗方式[3]和患者预     

微波二次固定提高肿瘤组织冰冻切片及苏木素—伊红染色质量的研究

冰冻切片质量的好坏直接关系到能否准确及时地作出病理诊断,以指导手术治疗方式,近年来,国内外学者对如何提高冻冻切片及染色质量做了大量工作,但仍然存在着组织结构被冰晶破坏,对比染色差,细胞核着色不清晰等缺点,我们应用微波加热固定液对组织块进行预固定,切片后再次固定的“二次固定技术”处理肿瘤组织,获得了比单纯脱脂固定切片更好的效果.1 材料与方法1.1 材料 选用我院1994～1995年外科送检需要急诊冰冻的乳腺、胃、肠、卵巢、甲状腺及脑等处的肿瘤组织,取材2cm×1.5cm×0.5cm数块.YWY781A型医用微波炉为浙江临安爱迪电子仪器厂产品,有8个功率选择开关,最大输出功率为500W.1.2 方法(1)将肿瘤组织分为不处理和处理组,处理组分别用生理盐水,10%甲醛和Bouin液在80℃恒温水浴固定5min,用微波2档(输出功率250W)固定1min.(2)将上述肿瘤组织用恒冷切片机切成5μm厚的冰冻切片数张,贴片稍于后分成不固定组和固定组,固定组分别用酒精-冰醋酸-甲醛固定液(AAF).改良的     

Pinpoint显微切割术分离切片DNA用于分子病理学研究

恶性肿瘤的分子病理学和分子遗传学研究的进展常受到肿瘤组织成分多样性和取材准确性的影响[1,2 ] 。原发肿瘤组织通常由肿瘤细胞和非肿瘤细胞混合构成。瘤体内除癌细胞外 ,还有基质细胞 ,如 :成纤维细胞、内皮细胞等 ,白细胞以及原器官组织成分[1] 。大多数肿瘤活检标本都是非肿瘤细胞和肿瘤细胞的混合物 ,各种成分的多少取决于肿瘤类型、瘤体内的取材部位及既往的处治结果[2 ] 。来源于非肿瘤细胞基因组的ＤＮＡ将影响分子生物学研究结果 ,其程度决定于肿瘤细胞和非肿瘤细胞基因组ＤＮＡ的比值和所用方法的敏感性[1] 。显微切割术 (ｍｉｃ…     

用碱粉腐蚀法制作头颈部保留骨骼的血管铸形标本

头颈部保留骨骼的血管铸型标本,其腐蚀方法有自然腐蚀法[1]、硫酸饱和液腐蚀法[2]和氢氧化钙饱和液腐蚀法[3]等.自然腐蚀法污染环境,且制作周期长,不易用作在短期内收集较多材料的科研工作.饱和的硫酸钙和氢氧化钙溶液,对骨骼有保护作用能阻止化学腐蚀剂对骨骼的过渡腐蚀,这两种方法制作周期短,对环境污染小,只是配制腐蚀液的过程较复杂.我们采用碱粉(氢氧化钾或氢氧化钠)直接铺洒腐蚀,结合局部注射腐蚀,方法简单、效果较好(图1).现介绍如下.     

建立科研使用FFPE肿瘤组织库的几点建议

福尔马林固定石蜡包埋( formalin fixed paraffn embed-ded, FFPE)是病理科普遍采用的组织处理和保存方法。组织标本经取材、固定、脱水、透明、浸蜡以及包埋等程序处理之后,可长时间保存[1]。《临床技术操作规范—病理学分册》(以下简称《操作规范》)要求, FFPE 组织需保存15年[2]。该操作由于流程简单,易于掌握,可以实现高度自动化处理,且代价低廉,适合大多数医院病理科开展。目前, FFPE组织已广泛应用于病理科的常规病理工作中。     

介绍一种骨髓组织脱钙新方法

骨髓组织活检标本来之不易 ,在制片过程中若处理不当 ,会给诊断造成极大的困难。如何既快又好地制作高质量的骨髓病理组织切片对正确诊断尤为重要。笔者通过 2年的反复实践 ,摸索出一种骨髓组织脱钙后的常规制片方法(简称“新法”) ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　中南大学湘雅医院骨髓穿刺的活检组织 4 0例。1.2　试剂　脱钙液 :2 %硝酸 ,即浓硝酸 2ml加 98ml自来水 ;固定液 :10 %福尔马林液 ;染色液 :Gill苏木精 ,沉淀酸化伊红Y乙醇液。1.3　方法　穿刺活检组织入 10 %福尔马林液中固定 30min ;入 2 %硝酸脱钙液 ,室温下脱钙。在…     

小鼠不同器官组织脱水方法的改进

正目前由于科研工作的需要,不同种类实验动物的组织石蜡切片应用日益广泛。在医学科研工作中,实验标本多来自于动物模型,如小鼠、大鼠、兔及犬等,其中尤以小鼠最为普遍[1]。人体标本与动物标本的组织处理,以及同一种属动物不同脏器间的处理程序也不尽相同,必须根据其组织结构特点,采用不同于人体组织的处理方法[2]。实验动物组织柔软,含水分多,在固定、脱水、透明和浸蜡等过程中若处理不当则很容易出现组织块变脆、收缩过度等现象,影响切片的成功率[3]。本实     

环保型组织样本制备液在不同脂肪细胞检测中的应用价值

背景：当前使用的传统试剂(甲醛溶液固定、乙醇脱水、二甲苯透明脱蜡)对组织前期处理制作的常规石蜡切片质量较低,已成为制约脂肪细胞性肿瘤病理诊断的瓶颈。而且,传统试剂容易对实验室环境造成污染,对实验室人员造成多种健康危害。目的：探讨环保型组织样本制备液在脂肪细胞肿瘤苏木精-伊红染色及非典型性脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤MDM2基因检测中的应用价值。方法：选取2016年2月至2022年7月期间592例脂肪细胞肿瘤标本为研究对象,同一标本对半切开,按照所使用的标本前期处理试剂的不同,随机分为2组：传统组和环保组。传统组使用传统试剂甲醛溶液固定、乙醇脱水、二甲苯透明脱蜡制作常规石蜡切片592张;环保组使用环保型组织样本制备液制作切片592张。依据切片苏木精-伊红染色质量的不同等级,比较两组切片的苏木精-伊红染色优良率;进一步对其中病理确诊为非典型性脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤的33例标本再次切片后,使用荧光原位杂交法检测MDM2基因,比较两组切片MDM2基因扩增率的差异。结果与结论：(1)相对于传统组,环保组的脂肪细胞肿瘤的组织切片更舒展、更完整,细胞无折叠,染色更清晰,红蓝对比度更佳,细胞结构...     

应用人精子头-尾膜完整性试验对生育力组及不育组精液的评价

目的应用人精子头-尾膜完整性试验,比较生育力组与不育组男性精液4种精子膜完整性类型的差异.方法精液标本分为生育力组(n=32)和不育组(n=50),采用"低渗肿胀-伊红拒染"结合试验,检测人精子头-尾膜完整性.结果头膜尾膜均损伤的Ⅰ型精子和头膜损伤-尾膜完整的Ⅲ型精子,生育组和不育组存在明显差异(P<0.01);头膜完整-尾膜损伤的Ⅱ型精子,生育组和不育组无明显差异(P>0.05);头膜-尾膜均完整的Ⅳ型精子,生育组明显高于不育组(P<0.01);Ⅳ型精子率与生育组精子活动率(n=32, r=0.82,P<0.01)和不育组精子活动率(n=50,r=0.80,P<0.01)均呈显著相关性.结论生育组具有较多头膜-尾膜均完整的精子."低渗肿胀-伊红拒染"结合试验能够清晰显示包括过渡型膜损伤的4种膜完整性类型的精子,精子头-尾膜完整性可以作为评价精子生理学的一项检测指标.     

伊红-固定液对活检小标本预染色的应用体会

正目前,各种内窥镜及穿刺等微创技术在临床上广泛应用。我们在病理科日常工作中,经常会遇到很多非常小的标本[1],如胃、肠镜、鼻咽镜活检组织及细针穿刺组织等。尤其在现代基因检测技术的飞速发展下,少量标本信息即可分析患者的基因结构,帮助明确病理诊断。但太小的标本对切片制作要求较高,怎样收集、取材、制作标本成为病理科越来越     

一种骨磨片标本制作法—复红酒精浸染油磨法

对骨磨片的浸染,White用复红稀火棉胶液浸染骨磨片;Matschinsky用硝酸银液浸染骨磨片;Cowdry用酸性复红水溶液浸染;还有用大理紫酒精溶液漫染骨磨片的方法。 (我们曾用美兰、伊红液浸染骨磨片。)孟瑞朝也推荐复红稀火棉胶液和硝酸银液浸染骨磨片。上述诸法,各有其优点,特别是大理紫法。但也各有其不足之处,如硝酸银法的封片快而容易,但由于标本制作过程处理不当,或经过使用和光线照射之后,标本的黑色有普遍加深的现象。复红稀火棉胶法,则由于浸液中有火棉胶,浸透力弱,浸染的时间较     

兔脑组织三种染色方法的比较

目的通过Nissl染色、苏木素伊红(HE)染色和Nissl-HE联合染色方法观察兔脑组织结构。方法分别对同一新鲜兔脑组织进行Nissl染色、HE染色和Nissl-HE联合染色。结果 Nissl染色易于观察神经元细胞的尼氏体形态;HE染色方便观察神经组织形态结构的轮廓;Nissl-HE联合染色后神经元细胞细胞核蓝染、细胞质粉染,尼氏体呈虎斑状蓝染,均清晰可见,易于观察、分辨。结论应用Nissl-H-E联合染色能够清晰地分辨出神经元细胞的细胞核、细胞质和尼氏体等形态结构。     

成年斑马鱼石蜡连续切片的制作和苏木精-伊红染色

目的介绍斑马鱼石蜡连续切片的制作和苏木精-伊红(HE)染色的方法。方法利用ThermoShandonExcelsior组织处理机、ThermoShandonHistocentre2型石蜡包埋机、ThermoShandonFinesse325型切片机、ThermoShandonVaristainGemini全自动染片机和ThermoShandonConsul全自动封片机制作成年斑马鱼石蜡连续切片并进行HE染色。结果利用上述方法获得清晰的成年斑马鱼石蜡连续HE染色切片。结论斑马鱼石蜡连续切片的制作和HE染色与哺乳类动物组织切片和染色在操作和某些工作参数上有所不同。     

盐酸脱钙液后脱钙在骨髓组织活检中的应用及体会

正骨髓组织活检是明确骨髓病变最主要的方法之一,但由于骨髓组织中含有大量的磷酸钙和碳酸钙,在常规制片中易致切片破碎、刀痕严重等问题,因此对骨髓组织进行充分的脱钙也显得格外重要[1-2]。目前在临床工作中,我们常使用的脱钙液有酸类脱钙液、电解质脱钙液、螯合剂脱钙液、离子交换树脂脱钙液等[2-3]。这些脱钙液作用机制不同,效果各有千秋[4]。在实际临床工作中我们对脱钙液选择的标准应该是效果强、时间短、对组织细胞形态以及对抗原影响小等[5]。本实