LncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-515-5p调控胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA ZFPM2反义RNA1(ZFPM2-AS1)对miR-515-5p的靶向调控作用以及对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic和3种胆管癌细胞(RBE、HuCCT1、TFK1)中ZFPM2-AS1和miR-515-5p的...     

miR-493-5p下调METTL3表达影响鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨miR-493-5p对鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因.方法 实验分为miR-NC组(转染miR-493-5p模拟物阴性对照)、miR-493-5p组(转染miR-493-5p模拟物)、anti-miR-NC组(转染miR-493-5p抑制剂阴性对照)、anti-miR-493-5p组(转染...     

miR-125a-5p对卵巢癌细胞的增殖迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因。方法 购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测人卵巢上皮细胞HOSEpiC以及卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平。利用生物信息学方法预测miR-125a-5p的靶基因,构建预测靶基因3’端非编码区（3’-UTR）的野生型（WT）和突变型（mut）荧光素酶报告基因质粒,通过双荧光素酶报告基因法验证miR-125a-5p与预测靶基因的靶向作用。利用慢病毒感染的方法建立稳定过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞,使用荧光定量PCR和Western blot检测靶基因的表达水平。利用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC中miR-125a-5p的表达水平高于卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平,其中SKOV3中miR-125a-5p的表达水平最低,差异均有统计学意义（P<0.05）,选择SKOV3进行后续实验。生物信息学分析显示,miR-125a-5p能够靶向结合Rab3D的3’-UTR;双荧光素酶报告基因分析证实miR-125a-5p能够靶向作用于Rab3D的3’-UTR。筛选稳定表达miR-125a-5p和si-Rab3D及相应对照的SKOV3细胞,分别命名为SKOV3/miR-125a-5p组,SKOV3/si-Rab3D组,SKOV3/miR-NC组和SKOV3/si-NC组。在SKOV3/miR-125a-5p组中,Rab3D的表达水平低于SKOV3组和SKOV3/miR-NC组,差异均有统计学意义（P<0.05）。细胞增殖能力检测结果显示,与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,SKOV3/miR-125a-5p组在72小时和96小时细胞增殖能力降低,差异有统计学意义（P<0.05）。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,SKOV3/miR-125a-5p组分别与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力均显著下降,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 miR-125a-5p能够靶向作用Rab3D,抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

microRNA-515-5p调控c-MYC-p53信号轴对神经母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响

[摘要]目的：探讨microRNA-515-5p（miR-515-5p）对神经母细胞瘤（NB）SK-N-BE（2）和SK-N-AS细胞增殖、侵袭、迁移的影响及分子机制。方法：采用生物信息学技术结合多种软件预测方法,检测miR-515-5p在NB细胞中的表达。在NB细胞中瞬时转染miR-515-5p mimics,应用CCK8法和克隆形成实验、Transwell侵袭小室实验和体外划痕实验检测miR-515-5p对NB细胞转染后的增殖、侵袭和迁移的影响。采用Western免疫印迹（WesternBlot）检测miR-515-5p对c-MYC-p53信号轴的调控机制。结果：与对照组比较,转染miR-515-5p mimics的细胞集落平均形成率降低,细胞活性下降,且细胞侵袭和迁移能力降低（P<0.05）。WesternBlot检测结果显示miR-515-5p抑制c-MYC蛋白表达,但可促进P-p53活化（P<0.05）,对p53的表达无影响。结论：miR-515-5p通过调控c-MYC-p53信号轴抑制NB细胞的增殖、侵袭和迁移能力,可能作为NB分子治疗的潜在靶点。     

微小RNA-431-5 p对卵巢癌细胞增殖与迁移和侵袭的影响

目的 研究miR-431-5p在卵巢癌中的表达、功能及调节机制.方法 常规培养人卵巢癌细胞株(SKOV3).将实验分为对照组(miR-431 NC)和实验组(miR-431 mimics).用实时荧光定量-PCR法检测卵巢癌患者组织和细胞系中miR-431-5p以及KIF11 mRNA的表达水平,用Western bl...     

LncRNA XIST靶向miR-511-3p调控食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的 探讨LncRNA XIST通过靶向miR-511-3p对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 体外培养食管癌细胞Eca109,将细胞分组,分别为:si-NC组(转染si-NC)、si-XIST组(转染si-NC)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-511-3p组(转染miR-511-3p)、si-XI...     

lncRNA FENDRR靶向miR-362-5p抑制胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨FOXF1毗连非编码发育调控RNA(FENDRR)对胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响,分析其机制是否与调控miR-362-5p表达有关.方法:qRT-PCR检测胶质母细胞瘤组织、细胞以及人脑正常胶质细胞HEB中FENDRR和miR-362-5p表达.以LN229细胞为研究对象,分别构建过表达FENDRR...     

miR-3127-5 p靶向TRIM28调控直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨miR-3127-5p对三结构域蛋白家族28(TRIM28)的靶向作用以及对直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印记(Western blot)检测直肠癌组织中miR-3127-5p和TRIM28的表达水平.将直肠癌细胞SW1463分为miR-NC、miR-...     

LINC00691负调控miR-512-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 探讨LINC00691对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞恶性生物学行为的影响。方法 RT-qPCR检测30例NSCLC患者癌组织和对应癌旁组织中LINC00691和miR-512-5p的表达。双荧光素酶报告基因实验验证LINC00691和miR-512-5p的靶向关系。将A549细胞分为si-NC组、si-LINC00691组、miR-NC组、miR-512-5p组、si-LINC00691+anti-miR-NC组和si-LINC00691+anti-miR-512-5p组,MTT和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术、Transwell检测细胞凋亡、迁移和侵袭,Western blotting检测细胞中Ki67、Cleaved-caspase3、Ecadherin和N-cadherin蛋白表达。结果 LINC00691在NSCLC癌组织中表达水平上升（P<0.05）,而miR-512-5p表达水平下降（P<0.05）。LINC00691在A549细胞中负调控miR-512-5p。沉默LINC00691表达或过表达miR-512-5p可降低A549细胞的存活率、克...     

miR-593-5p调控肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制

目的探讨微小RNA-593-5p(miR-593-5p)对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及作用机制。方法采用qPCR检测正常肝细胞HL7702和肝癌细胞系Hep3B、HepG2、SMMC-7721、Huh7中miR-593-5p和PHF10 mRNA表达。在SMMC-7721细胞中转染miR-593-5p,MTT法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达。starBase软件结合双荧光素酶报告实验分析miR-593-5p和PHF10靶向关系。miR-593-5p和pcDNA-PHF10共转染,观察PHF10过表达对miR-593-5p过表达诱导的SMMC-7721细胞增殖、迁移、侵袭及PI3K/Akt信号通路的影响。结果 miR-593-5p在肝癌细胞系Hep3B、HepG2、SMMC-7721、...     

miR-186-5p靶向CXCL13基因通过Wnt/β-catenin信号调节胃癌HGC-27细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭

目的 探讨miR-186-5p对胃癌HGC-27细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 在胃癌HGC-27细胞中通过脂质体转染miR-186-5p模拟物（mimics）,采用实时荧光定量PCR检测转染效果, MTT实验分析HGC-27细胞增殖水平,流式细胞术分析细胞周期变化和细胞凋亡情况,Transwell实验分析HGC-27细胞迁移和侵袭能力,生物信息学、双荧光素酶报告基因实验以及Western blotting分析miR-186-5p和CXCL13的靶向关系,Western blotting分析Wnt/β-catenin信号通路活化情况。结果 体外转染miR-186-5p mimics可上调HGC-27细胞中miR-186-5p的表达。上调miR-186-5p表达能够抑制HGC-27细胞体外增殖、细胞周期进程、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡。miR-186-5p可靶向抑制CXCL13的表达,上调miR-186-5p表达能够抑制β-catenin和c-Myc的表达。结论 miR-186-5p可靶向抑制CXCL13的表达,阻断Wnt/β-catenin信号通路,并抑制胃癌HGC-27细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。     

lncRNA SND1-IT1靶向miR-185-5p调控胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)葡萄球菌核酸酶结构域包含蛋白1内含子转录本1( SND1-IT1)靶向miR-185-5p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人胃黏膜上皮正常细胞和胃癌细胞中lnc SND1-IT1和miR-185-5p的表达.将胃癌细胞AGS分为对...     

miR-876靶向Pax6抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的 探讨miR-876靶向Pax6对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 采用RT-qPCR检测胃癌组织与癌旁组织中miR-876和Pax6的表达水平,分析miR-876表达与胃癌患者临床指标的关系。检测胃上皮细胞GES-1以及胃癌细胞MGC-803、BGC-823、SGC-7901中miR-876的表达水平。将MGC-803细胞分为对照组、miR-876 mimic组、mimic-NC组和miR-876 mimic+pcDNA-3.1-Pax6组,采用RT-qPCR和Western blotting检测各组细胞中miR-876以及Pax6的mRNA和蛋白表达水平;MTT检测各组细胞增殖情况;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭情况;双荧光素酶实验验证miR-876与Pax6的靶向关系。结果 与癌旁组织相比,miR-876在胃癌组织中低表达(t=13.962,P<0.05),而Pax6 mRNA和蛋白在胃癌组织中均呈高表达(t=23.368,13.757;P<0.05),且两者呈负相关(r=-0.434,P<0.05)。miR-876低表达与胃癌患者TNM分期(...     

lncRNA FGD5-AS1靶向miR-524-5p调控前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

目的 探讨lncRNA FGD5-AS1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 培养正常人前列腺上皮细胞P69及前列腺癌细胞系LNCaP、DU145、PC-3;qRT-PCR检测lncRNA FGD5-AS1和miR-524-5p的表达水平;将LNCaP细胞分为si-lncRNA FGD5-AS1组、si-NC组、miR-524-5p组、miR-NC组、anti-miR-524-5p+si-lncRNA FGD5-AS1组、anti-miR-NC+si-lncRNA FGD5-AS1组;CCK-8检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆数;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FGD5-AS1和miR-524-5p的靶向关系。结果 与正常人前列腺上皮细胞P69相比,前列腺癌细胞系LNCaP、DU145、PC-3中lncRNA FGD5-AS1表达水平升高,miR-524-5p表达水平降低(P<0.05)。干扰lncRNA FGD5-AS1表达或miR-524-5p过表达后,细胞活性降低,细胞克隆数、迁移和侵袭数量减少(P<0....     

石见穿多糖通过调控DSCAM-AS1/miR-129-5p轴抑制oxLDL诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移和侵袭

摘要：目的:探讨石见穿多糖对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的人主动脉血管平滑肌细胞（HASMCs）增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:体外培养HASMCs,不同剂量(0.25,0.5,1 g·L-1)的石见穿多糖干预oxLDL诱导的HASMCs、或oxLDL诱导转染DSCAM-AS1小干扰RNA的HASMCs、或1 g·L-1的石见穿多糖干预oxLDL诱导的转染DSCAM-AS1过表达载体的HASMCs后,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭,Western Blot检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,RT-qPCR法检测DSCAM-AS1和miR-129-5p表达。双荧光素酶报告基因实验验证DSCAM-AS1和miR-129-5p调控关系。结果:石见穿多糖可降低oxLDL诱导的HASMCs的OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低（P<0.05）,而促进E-cadherin蛋白表达（P<0.05）,且呈剂量依赖性。石见穿多糖可降低oxLDL诱导的HASMCs中DSCAM-AS1表达（P<0.05）,而促进miR-129-5p表达（P<0.05）,DSCAM-AS1靶向结合并负调控miR-129-5p表达。沉默DSCAM-AS1可降低oxLDL诱导的HASMCs的OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低（P<0.05）,而促进E-cadherin蛋白表达（P<0.05）。过表达DSCAM-AS1逆转石见穿多糖对oxLDL诱导的HASMCs增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:石见穿多糖可抑制oxLDL诱导的HASMCs增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与调控DSCAM-AS1/miR-129-5p轴有关。     

miR-619-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响北大核心CSCD

目的探究miR-619-5p在人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7增殖、迁移和侵袭中的作用及机制。方法乳腺癌和正常乳腺组织及细胞中miR-619-5p的表达利用生物信息学分析或经qRT-PCR法检测;分别转染miR-619-5p模拟物或抑制剂后,qRT-PCR法测定miR-619-5p、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子mRNA的表达;CCK-8法用于检测细胞增殖;划痕愈合实验和Transwell TM实验观察细胞迁移和侵袭能力转变;EMT相关分子的蛋白表达由Western blot检测。生物信息学预测miR-619-5p靶基因,并对潜在靶基因CREB1作初步分析。结果miR-619-5p在乳腺癌中低表达。与对照组相比,过表达miR-619-5p后,miR-619-5p表达水平上调,EMT上皮标志物表达上调,促EMT分子及间质标志物表达下调,细胞的增殖、迁移与侵袭能力削弱,CREB1表达下调;低表达miR-619-5p组结果与上述结果相反。结论乳腺癌组织及细胞中miR-619-5p表达更低,miR-619-5p可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT,其效应可能通过靶向CREB1实现。     

circ＿0072083靶向miR-142-3p调控结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的 探讨结直肠癌组织中circ＿0072083和miR-142-3p的表达情况,分析circ＿0072083靶向miR-142-3p在结直肠癌进展中的作用。方法 选取2018年3月至2019年12月行手术切除的52例结直肠癌患者的结直肠癌组织和癌旁组织。RT-qPCR检测circ＿0072083和miR-142-3p在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达。将si-circ＿0072083、si-NC、miR-142-3p mimic、miR-NC、si-circ＿0072083+anti-miR-NC、si-circ＿0072083+miR-142-3p Inhibitor分别转染结直肠癌LoVo细胞,运用平板克隆实验、Transwell法、CCK-8法评估细胞克隆、迁移侵袭和增殖能力。circ＿0072083和miR-142-3p的靶向关系通过双荧光素酶报告实验确定。结果 结直肠癌组织中circ＿0072083表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),miR-142-3p表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。沉默circ＿0072083显著增加细胞增殖抑制率和miR-14...     

硝呋齐特通过miR-877-5p/蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子通路调控肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨硝呋齐特对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 实验分为对照组(不做任何处理)、低、中、高剂量实验组(5,10和20μmol·L-1硝呋齐特)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-877-5p组(转染miR-877-5p mimics)、anti-miR-NC-20组(转染anti-miR-...     

circ_0000264促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨环状RNA circ_0000264在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的功能及作用机制。方法 采用qRT-PCR检测乳腺癌组织和细胞系中circ_0000264的表达;利用si-circ_0000264构建敲低circ_000026的细胞模型;分别采用CCK-8、BrdU和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭;采用双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000264与miR-622的靶向调控关系。结果 circ_0000264在乳腺癌组织和细胞中均呈高表达（P<0.05）。与对照组相比,敲低circ_0000264可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05）。circ_0000264对miR-622具有吸附作用。下调miR-622可部分逆转敲低circ_0000264对乳腺癌细胞增殖和转移的抑制作用。结论 circ_0000264在乳腺癌进展过程中发挥促进作用;circ_0000264通过负向调控miR-622促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。