一种减少冷冻切片组织内冰晶的处理方法

在常规冷冻组织切片中常有大量冰晶存在 ,特别在脑组织冷冻切片中更多见。由于冰晶的产生 ,使组织细胞形态发生了明显改变 ,严重影响临床病理诊断。为此 ,采用组织保护液 -微波 (ｔｉｓｓｕｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎ ＭＷ ,ＴＰＳ ＭＷ )法对组织进行前期处理 ,然后再冷冻制片 ,结果组织切片中冰晶明显减少。现将此法介绍如下。1　材料与方法1 .1　标本来源　术中脑组织活检标本 1 0例 ,将同一组织标本分成 2块。实验组采用ＴＰＳ ＭＷ法处理 ,另一组采用常规冷冻制片法。1 .2　组织保护液的配方　聚乙烯醇 1 2 4 2 ｇ,聚乙…     

如何提高冷冻切片的技术水平

冷冻切片是一种组织不经过脱水、透明处理,不需石蜡包埋的制片方法[1-3].冷冻切片分为直接冷冻切片法和明胶冷冻切片法[4].前者根据组织的制冷方法不同有半导体制冷切片法、甲醇制冷切片法、二氧化碳制冷切片法和低温恒冷箱冷冻切片法.目前,比较常用的方法是低温恒冷箱冷冻切片法.     

冷冻切片组织冷冻过度的处理方式

<正>冷冻切片是采用低温冷冻的方法使组织在较短时间变硬切成薄片,其原理是利用物理降温,使组织达到一定的硬度进行切片的方法。冷冻切片需注重温度与切片的关系,温度的变化可影响组织软硬程度,温度升高组织变软,温度降低组织变硬。然而我们在冷冻切片过程中很难精确控制组织冷冻温度,易冷冻过度,切片时组织裂开,甚至变成粉末状,尤其在间质纤维成分较少组织中更为明显,为病理报告的漏、误诊埋下隐患。本文通过对冷冻过度组织采用手捂复温、室温复温和调节样本头温度3种复温方式,旨在找出对冷冻过度组织细胞形态结构影响最小的复温方式。     

用已固定组织制作冷冻切片体会

经福尔马林固定的组织不能直接做冷冻切片 ,为此作者经过反复试验 ,探索出一种利用液氮快速冷冻制作冷冻切片的方法 ,取得了满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法　　经常规福尔马林固定 1～ 2天的外检和动物标本 (骨和含钙组织除外 ) ;低温恒冷切片机、ＯＣＴ包埋剂、包埋托、涂有防脱片胶的载玻片、液氮一罐。将福尔马林固定的组织常规取材 ,用滤纸吸干周围水分 ,置包埋托上加ＯＣＴ包埋剂 ,入液氮 3～ 5ｍｉｎ后取出 ,置于冷冻切片机冷冻台上片刻 ,修切组织 ,切片 ,吹干 ,不需固定 ,直接ＨＥ染色。2　体会　　组织从液氮中取出不宜立即…     

恒冷切片箱对固定后组织的冷冻切片技术

恒冷切片箱是冷冻切片机中最先进 ,最精密的一种。它用途广泛 ,日前常用于组织化学特别是酶组织化学、免疫组织化学、临床病理切片快速诊断、以及一些组织学教学标本的制作。以往一般都是用新鲜组织直接行冷冻切片 ,虽简易方便 ,速度快 ,但新鲜组织经冷冻 ,组织细胞内常形成冰晶 ,造成一定程度的损伤 ,影响结构的完整性 (图 1) ,尤其在免疫组织化学研究中 ,很容易使组织结构不清 ,抗原定位不精确 ,影响了观察和结果[1、2 ] ,笔者经过多年摸索和实践 ,采用组织先固定后行冷冻切片 ,并将固定组织经鸡蛋白甘油浸渍处理 ,克服了组织细胞冰晶的形…     

介绍一种快速冷冻切片方法

快速冷冻切片有利于临床医师在术中获取病理诊断,以便决定进一步的治疗方案。我们在实践中摸索出一种快速、简便、高质量的－２５℃直接骤冷冻切片法,现介绍如下。１　材料与方法１－１　材料　日本产樱花牌恒冷切片机,我院术中冷冻切片标本１５２例。１－２　方法　将取材后的新鲜组织直接放在组织托上,底部、周围及表面都不加ＯＣＴ等包埋剂（穿刺活检、胃镜等微小组织,可预先在组织托上加少许ＯＣＴ等包埋剂,冷冻,再加上微小组织）,迅速置于冷冻台上,于－２５℃恒温下骤冻１～２ｍｉｎ后切片,厚度３～５μｍ,将切片直接贴附于…     

冷冻切片流程中的常见问题及优化措施

<正>冷冻切片技术是临床病理学诊断中常用的一种技术方法,其主要原理是在低温环境下使组织在较短时间内达到适合的硬度,随后进行快速切片、染色完成制片工作,进而于显微镜下观察切片对肿瘤性质进行判定,为临床医师在手术中确立手术方案提供强有力的支撑^[1]。冷冻切片质量直接影响了术中病理医师快速诊断的速度及准确率,因此,在短时间内完成一张优质的冷冻切片非常重要。     

介绍一种FAAPT冷冻切片快速固定液

手术中冷冻切片的病理诊断是根据冷冻切片组织学形态来进行 ,以确定病变组织的良恶性为目的〔1〕。制作冷冻切片包括制片、固定、染色三个环节 ,在冷冻切片中固定液的选择是不可忽视的一个因素。我们在工作中经反复试验在众多固定液中选择ＦＡＡ液 (福尔马林 -醋酸 -乙醇 ) ,经改良配成一种适合于冷冻切片的ＦＡＡＰＴ(福尔马林 -醋酸 -乙醇 -苦味酸 -ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 )快速固定液。该液具有固定速度快、渗透力强、ＨＥ染色鲜艳、组织结构清晰等优点。1　材料与方法1 1　ＦＡＡＰＴ固定液的配制　福尔马林 15ｍｌ,醋酸 3ｍｌ,95 %乙醇…     

改良固定法对冷冻组织石蜡切片的影响效果观察

正冷冻切片技术已广泛应用于术中病理诊断,高质量的冷冻切片技术对确保术中病理诊断的可靠性至关重要~([1-2])。目前,国内外对于术中冷冻制片的研究较多,有关冷冻后组织处理的研究较少。冷冻后组织行常规制片常常会出现形态学失真性改变,这是临床病理工作中普遍性难题~([3])。作者发现冷冻后的组织经常规10%中性福尔马林固定24 h左右或更长时间后制片,易发生组织收缩过度,细胞间或组织间     

提高卵巢肿瘤冷冻切片质量的体会

在短时间内制作卵巢肿瘤冷冻切片易出现切片不完整、过厚、有刀痕、镜下观察发现冰晶、细胞肿胀变形等现象,常导致诊断困难甚至误诊.为此,我们选择不同性质的卵巢肿瘤进行冷冻制片,探讨最佳的冷冻时间与温度.     

固定液对冷冻切片质量的影响

冷冻切片是借助低温冷冻将手术切除的组织块快速冷冻达到一定硬度进行切片的一种方法。高质量的冷冻切片对确保术中病理诊断的准确性、科学性具有极其重要的作用,从而降低术中诊断的风险。固定是冷冻切片的关键,本文选取几种常用的固定液,通过HE染色后观察各自固定效果对染色结果的影响,从而筛选出一种最佳的固定液。     

冷冻切片的快速黑色素染色法

在恶性黑色素瘤的冷冻切片中 ,仅靠形态学诊断非常困难 ,Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色有一定帮助 ,对冷冻切片上黑色素形成不明显 ,黑色素颗粒细小、散在或棕色颗粒难与含铁血黄素相鉴别时尤为有用〔1〕,但常规的Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色需要时间长 (12ｈ)不能用于快速冷冻切片的诊断。我院采用一种快速黑色素染色法 ,全部过程仅需 11ｍｉｎ ,取得了满意效果。1　材料与方法1.1　氨银液的配制　取 5 %硝酸银水溶液 40ｍｌ,逐滴加入浓氨水至产生棕黑色沉淀 ,再继续缓慢地逐滴加入浓氨水 ,边加边震荡 ,当沉淀几乎接近溶解 ,仅有少…     

冷冻切片常见问题分析与预防

冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法。它是术中诊断的一种重要方法。但由于各种原因,影响冷冻切片的质量,拖延病理报告发出的时间,直接影响着病理诊断的及时性、准确性,间接影响着病人的预后。归结起来有以下几方面。１　切片不全或不能切片切片不全是指切出的切片组织切面不完整、有缺损现象;不能切片是指组织块的温度过高或过低不能制作一张完整的切片。切片不全直接影响着冷冻报告切片的准确性。导致切片不全或不能切片的常见的原因有几下几方面。１１　组织内含过多的脂肪或坏死组织　脂肪或坏死组织…     

5种固定液对淋巴结冷冻切片HE及免疫组化染色效果的影响

正淋巴结组织纤维成分少,淋巴细胞丰富,往往还附有较多的脂肪组织,在制片过程中容易出现裂纹、细胞核皱缩、染色模糊甚至是脱片等,如需改善应严格控制冷冻的温度和时间,挑选渗透力强、固定作用强的固定液。本文通过对固定液配方的探索,着重与病理医师交流制片的方法与经验,以提高淋巴结组织冷冻切片优良率。1 材料与方法1.1 材料选取2019年1～3月我院手术室送检淋巴结组织标本30例,其中乳腺前哨淋巴结12例,中央组淋巴结14例,其它淋巴结     

冷冻切片的几点技巧

1 肪肪及富含脂肪的组织切片 脂肪及富含脂肪的软组织、畸胎瘤头结节组织等,因水分含量少,不易冻硬,难以切片。将此类标本的组织块夹固于一自制的金属网架内（或在不锈钢组织脱水盒内垫一层脱脂棉,防止组织卷曲）置入液氮罐内的液氮（-196℃）内速冻20～40s,用镊子取出后包埋固定于组织托盘上,在组织四周涂少许OCT将其冻结、切片,染色。     

不同组织冷冻切片的体会

随着医疗技术的发展,各临床科室对术中冷冻的要求也随之提高,除常规的明确病变性质外,保乳手术切缘、宫颈癌前病变锥切手术、甲状腺清扫淋巴结、手术断端等,都需要通过冷冻切片的快速诊断确定手术范围及治疗方案.这就要求我们技术人员在较短的时间内根据不同组织制出高质量的切片.由于组织不同对冷冻的时间、温度、切片厚度、染色等要求也不同,我们通过多年的经验,总结出一些提高冷冻切片质量、缩短冷冻制片时间的可行方法,现报告如下.     

冷冻切片中几种不同引导切片法的比较

<正>冷冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定的硬度,然后进行切片的方法。因其操作过程较石蜡切片快速,简便,易于操作,在组织学技术中的应用十分广泛,尤其对临床手术患者的术中快速病理诊断具有重要意义,而高质量的冷冻切片对于确保术中病理诊断的科学性和可靠性,具有至关重要的作用[1]。因此,在冷冻切片过程中,高效的切片技术     

冷冻切片5min快速制片染色法

冷冻切片整个过程所用时间的快与慢,切片染色质量的好与坏直接影响病理诊断的速度和准确性,如何又快又好地制好一张冷冻切片,一直是困绕病理技术员的难题.我们通过多年的不断摸索和改进,对一些特定的标本,如乳腺肿瘤、卵巢实性肿瘤、子宫肌瘤标本,在接到标本后5 min内制好2张冷冻切片,制片结果符合诊断要求,质量令人满意,现总结报道如下.