β-Trcp冷冻切片抗体应用于石蜡切片免疫组化染色的研究

目的 探讨高压热修复后将β-Trcp冷冻切片抗体应用于石蜡切片的免疫组化技术.方法 在常规免疫组化技术的基础上,分别经0.3% Triton X-100/PBS溶液及0.2 mol/L甘氨酸溶液浸泡后,pH 6.0柠檬酸盐抗原修复液进行组织抗原高压热修复,观察β-Trcp冷冻切片抗体应用于石蜡切片的免疫反应性.结果 经上述处理后,石蜡切片中出现β-Trcp冷冻切片抗体的阳性率为63.3%(38/60),与β-Trcp石蜡切片抗体的阳性率无统计学差异(P>0.05).结论 β-Trcp冷冻切片抗体可经过处理后应用于石蜡切片免疫组化.     

高质量冷冻切片的制作技术探讨

正术中快速冷冻病理诊断是病理科一项重要工作,其对确定病灶性质、明确切缘状况以及判断组织来源等方面起着重要作用,为临床医师决定手术方式及范围提供可靠的依据。然而冷冻切片因时间受限,组织未经固定、脱水等前期处理,细胞形态与常规石蜡切片有着一定的差异,往往易出现冰晶、细胞肿胀、组织形态丧失等现象,直接影响快速病理诊断的及时性及准确性。因此,制作一张高质量的冷冻切片显得尤为重要,本科室经过摸索总结出一种高质量的冷冻切片的     

提高快速石蜡切片质量的方法和经验体会

随着外科技术的发展 ,手术中需要作快速病理诊断的病例越来越多 ,为了明确疾病的性质 ,确定下一步手术方案 ,手术中的快速病理诊断结果外科治疗有直接影响。优质的快速病理切片是准确病理诊断的最可靠保障〔1～ 4〕。目前快速病理切片技术有两种方法 :冷冻切片和快速石蜡切片。国内外目前多采用冷冻切片〔1～ 4〕。优质冷冻切片制作难度大 ,常有组织学假象 ,难辩认而易发生误诊。快速石蜡切片质量好 ,接近常规ＨＥ切片 ,易观察及诊断 ,当然快速石蜡制片不熟练时常难以制出质量优良的切片。快速石蜡切片常用的方法有 3种 :负压处理法、电炉加…     

使用超声处理仪制备快速石蜡切片的体会

目前国内手术中快速病理诊断多用冷冻切片葺传统加温快速石蜡切片技术，但冷冻切片中易出现细胞肿胀等人为假象，传统加温快速石蜡切片制备过程复杂，安全性差，且易造成组织收缩和硬变。为克服上述不足，我们应用超声处理仪制备快速石蜡切片，方便快捷，效果良好。     

冷冻切片中几种不同引导切片法的比较

<正>冷冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定的硬度,然后进行切片的方法。因其操作过程较石蜡切片快速,简便,易于操作,在组织学技术中的应用十分广泛,尤其对临床手术患者的术中快速病理诊断具有重要意义,而高质量的冷冻切片对于确保术中病理诊断的科学性和可靠性,具有至关重要的作用[1]。因此,在冷冻切片过程中,高效的切片技术     

改良PAS染色法在冷冻切片中的应用

正在日常病理诊断和技术工作中,我们经常会遇到临床怀疑为肺部真菌感染的病例。如果等常规石蜡组织切片来进行诊断,因组织处理时间长,临床等候结果需要花费很多时间。为缩短临床等候病理诊断的时间,本科室在组织冷冻切片上行改良PAS染色,并与石蜡切片PAS染色对比,提高了对真菌的快速检出率,现介绍如下。1材料与方法1.1材料收集福建医科大学附属漳州市医院2016年度接收的术中怀疑真菌感染病例41例,术后常规石蜡病理明     

如何提高冷冻切片的技术水平

冷冻切片是一种组织不经过脱水、透明处理,不需石蜡包埋的制片方法[1-3].冷冻切片分为直接冷冻切片法和明胶冷冻切片法[4].前者根据组织的制冷方法不同有半导体制冷切片法、甲醇制冷切片法、二氧化碳制冷切片法和低温恒冷箱冷冻切片法.目前,比较常用的方法是低温恒冷箱冷冻切片法.     

脂肪组织恒低温冷冻切片方法的改进

冷冻切片是通过快速冷冻使活体组织中组织液凝结,使组织硬度类似石蜡或树脂包埋,从而达到理想的切片硬度[1].不同的组织对冷冻切片的温度有不同的要求.     

如何减少冷冻切片中的类冰晶现象

正术中冷冻切片快速病理诊断是协助临床医师明确病变性质、指导手术方式和范围的重要依据。由于冷冻切片技术、取材范围有限和报告时间短等问题,易导致病理医师延迟诊断,甚至是误诊。高质量的冷冻切片是病理医师准确发出术中快速病理诊断的基础。笔者在临床实践操作中观察到部分冷冻切片组织结构扭曲、细胞挤压变形,存在类冰晶现象,而冰对组织石蜡切片中未见此类现象。     

胰腺组织108例冷冻切片病理诊断分析

目的探讨胰腺组织冷冻切片,总结取材、制片和诊断经验,以提高胰腺组织冷冻切片诊断的准确率。方法对108例胰腺组织的冷冻切片进行回顾性分析,并与术后常规石蜡切片最后诊断结果进行对照。结果 108例胰腺组织冷冻切片中,103例与石蜡切片诊断符合,4例延迟诊断,1例误诊,诊断准确率高达95.4%。结论掌握正确的取材方法,提高冷冻切片质量,加强对胰腺良恶性病变的鉴别和诊断能力,减少误、漏诊。     

5种固定液对冷冻切片免疫组织化学显色效果的比较

冷冻切片免疫组织化学在科研及临床方面应用得越来越多,它具有操作简单,实验过程较短,对抗原保存较好等优点,并且认为是评估和确定新抗体的金标准,目前还有很多抗体只能用冷冻切片,石蜡切片则做不出结果;但它也有不利于保存和进行回顾性研究、组织结构较模糊,清晰度不够好,抗原弥散等缺点[1].     

印片代冷冻切片472例病理定性诊断分析

基层医院病理科在未开展冷冻切片时,如何配合临床进行手术中快速病理诊断,是目前急需解决的问题。我科自1988年以来应用手术中活体标本做快速印片细胞学定性,为临床提供良、恶性诊断,供确定手术范围做主要参考。其定性准确率在95%以上。在目前缺乏冷冻切片设备的病理科应用是可行的。对已开展冷冻切片的科室可作为协助诊断,纠正部分冷冻切片可能出现的失误。1　材料与方法1.1　材料　标本均选自何贤纪念医院(二级甲等综合性医院、妇幼保健院)病理科1988年11月至1999年11月,快速印片代替冷冻切片,有常规石蜡切片诊断做对照的病例472例。其中…     

基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值

目的探讨基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值。方法收集手术中送检的甲状腺良性病变组织、乳头状癌组织各30例,采用直接免疫组化染色法、石蜡切片免疫组化染色法检测CK19、Galectin-3的表达,对比两种染色法的时间、质量、阳性率及诊断准确率。结果直接免疫组化染色法耗时15 min,石蜡切片免疫组化染色法耗时280 min,前者大幅缩短了时间。两种染色结果显示,CK19、Galectin-3在甲状腺乳头状癌中的阳性率基本一致,直接免疫组化法的质量稍差。在诊断甲状腺前哨淋巴结转移癌中,冷冻切片的直接免疫组化染色法正确诊断率为100%,单纯HE染色正确诊断率为60.00%,诊断准确性显著提高。结论基于冷冻切片的直接免疫组化染色法较石蜡切片免疫组化染色法大幅缩短了染色时间,染色质量近似,阳性率一致,在判断甲状腺不典型病变性质及甲状腺前哨淋巴结转移癌中具有重要价值。     

显示石蜡组织切片脂质的染色方法

在实验动物脂质代谢模型中，为了观察组织中脂质的分布情况，笔者采用石蜡包埋连续切片，进行脂质染色，克服了冷冻切片不能有效原位固定脂质的局限性。经过改进油红乙醇液和Tracy染色法的石蜡制片，获得较好的染色效果。     

淋巴结组织术中冷冻切片常见问题与对策

在临床术中送检的快速病理标本中,淋巴结是含脂肪较多的组织之一,周围脂肪很难剔除干净,组织结构致密、细胞丰富,其外周又有致密结缔组织的被膜包裹,难以冻结,切片呈糊状,需要较低的温度进行冷冻。但冷冻温度过低,又易使淋巴结组织变脆,不能满足镜检要求,极易造成漏诊,与其他组织相比其制片难度较大[1]。本科室在实际工作中对术中同时送检的多个淋巴结组织冷冻切片进行实践和探索,取得满意效果。镜下观察,淋巴结组织结构完整,胞质与胞核红蓝对比鲜明,实质细胞无收缩,与常规石蜡切片观感结果较一致(图1)。现就术中冷冻淋巴结组织制片中常见问题与对策进行总结,并介绍如下。     

γ-GT酶组织化学染色中低熔点石蜡切片代替冰冻切片的方法

酶组织化学染色的效果取决于标本组织中酶的含量和活性 ,标本组织的处理及制片过程对于酶的保存十分重要。常规石蜡切片因组织浸蜡温度高 ,易使酶变性 ,因此酶组织化学染色通常选用冰冻切片。寻找一种较理想的切片方法 ,是研究人员的迫切愿望和要求 ,我们在谷氨酰转肽酶 (γ -ＧＴ)染色中 ,摸索采用低熔点石蜡切片代替冰冻切片 ,取得了良好的效果 ,现介绍如下 :1　材料与方法正常兔肾新鲜标本 ,①冰冻切片 :取 1ｃｍ× 0 5ｃｍ×0 2ｃｍ组织 ,立即放入 - 2 0℃恒冷冰冻切片机 ,冷冻 10ｍｉｎ ,切片厚 8μｍ ,放 4℃冰箱备用 ;②低熔点石蜡…     

石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用

在肾脏的病理诊断中,肾穿刺组织必须进行冷冻切片免疫荧光染色[1,2]、石蜡切片HE、Masson、PAS、PASM染色和电镜检查等,以达到正确的诊断.光镜观察时须有10个以上的肾小球才能作出客观的诊断[3,4].在肾脏的病理诊断中,冷冻切片免疫荧光染色具有不可或缺的作用,但有时各种原因导致所取的肾小球数目不够或基层单位无冷冻切片设备等因素均给诊断带来困难.因此,我们通过对肾活检组织石蜡切片进行免疫荧光染色,取得了较好的效果,现介绍如下.     

肺隐球菌病漏诊原因分析

目的 探讨病理(含术中冷冻切片)漏诊肺隐球菌病(pulmonary cryptococcosis,PC)的原因,以提高病理诊断水平.方法 回顾7例PC的临床、病理资料及其病理诊断过程.结果 7例PC中有5例病理漏诊:(1)3例活检常规石蜡切片分别初诊为"脂质肉芽肿"、"纤维肉芽组织"和"慢性炎症";1例术中冷冻切片"考虑为结核病",冷冻切片检查后相应石蜡切片改诊为"肺隐球菌病";另1例术中冷冻切片诊为"结节病",相应石蜡切片仍误诊为"结节病".(2)病理漏诊的5例PC中,4例皆被及时纠正,得以正确治疗;1例术中冷冻切片及其常规石蜡切片皆被诊为"结节病"并于2个月后继发隐球菌性脑膜炎.结论 病理漏诊PC的原因:①未虑及肉芽肿形态的多样性及其可能的病因相关性;②未将PC列入病理鉴别诊断思路;③观察镜下病变不仔细、忽视微细病变的诊断提示意义.术中冷冻切片可及时诊断PC,有助于避免过度治疗.需重视结节病与结核病、隐球菌病等感染性肉芽肿的病理鉴别诊断,应慎诊结节病.     

冷冻切片后甲醛固定石蜡包埋组织DNA质量分析

目的分析冷冻切片后再行甲醛固定、石蜡包埋组织的DNA质量,探讨其在分子病理检测中的应用价值。方法收集已行术中快速冷冻病理诊断的肺腺癌14例,分别提取同一病例冷冻切片后剩余组织蜡块及常规包埋组织蜡块DNA,检测DNA浓度及OD260/OD280值,行内参基因PCR扩增以检测DNA完整性,并以ARMS法行EGFR基因突变检测。结果冷冻切片后固定包埋组织提取DNA浓度及OD260/OD280均值,分别为157.33 ng/μL及1.96,均较常规包埋组织低;所有冷冻后包埋组织提取的DNA均具有100 bp及200 bp的PCR产物,但仅部分能扩增出300 bp及400 bp的PCR产物,DNA完整性稍逊于常规固定包埋组织;冷冻后包埋组织与常规包埋组织EGFR基因突变检测结果完全一致。结论组织冷冻后再行甲醛固定及石蜡包埋,会使得组织DNA进一步降解及片段化,但仍适用于ARMS法的分子病理学检测。     

直接免疫组织化学染色在术中冷冻切片细支气管腺瘤辅助诊断中的应用价值

目的探讨直接免疫组织化学染色技术提高术中肺肿瘤疑难病例细支气管腺瘤(bronchiolar adenoma, BA)诊断准确性的可行性及应用价值。方法选取2021年1月至7月中国医学科学院肿瘤医院CT提示单发或多发肺磨玻璃结节或实性结节, 术中单纯依靠冷冻HE切片肺肿瘤鉴别诊断困难病例共19例, 实验组采用直接免疫组织化学染色细胞角蛋白5/6(CK5/6)和p63在冷冻切片中基底细胞的表达情况, 辅助术中肺肿瘤疑难病例BA与原位/微小浸润腺癌/腺癌/浸润性黏液腺癌鉴别;对照组为两名诊断医师对这19例病例进行常规冷冻HE切片诊断。两组均以石蜡切片诊断结果为金标准, 评价实验组与对照组BA诊断的灵敏度、特异度、与石蜡切片诊断的一致性及冷冻切片诊断耗时。结果 CK5/6、p63染色显示BA存在基底细胞;在原位/微小浸润腺癌/腺癌/浸润性黏液腺癌中不存在基底细胞。实验组中直接免疫组织化学染色对术中疑难病例BA的灵敏度为100%、特异度为86.7%, 冷冻与石蜡切片诊断的一致性Kappa值为0.732, 均显著高于对照组(P<0.05)。实验组术中冷冻切片诊断平均耗时(32.4 min)比...