重楼皂苷抗肿瘤作用机制研究进展

摘 要 重楼是百合科植物云南重楼干燥根茎,皂苷类化合物是其主要的化学成分和药理活性成分。皂苷类化合物主要通过抑制肿瘤细胞有丝分裂,诱导细胞周期停滞,抑制癌基因或促进抑癌基因及蛋白的表达,抑制肿瘤血管生长,调节机体免疫功能等作用产生很强的抗肿瘤活性,同时能够逆转肿瘤细胞的多药耐药性。本文对重楼皂苷类成分抗肿瘤作用机制进行综述,为重楼皂苷抗肿瘤活性深入研究提供依据。     

重楼皂苷的药理活性及药代动力学研究进展

目的综述重楼皂苷的药理活性及药代动力学研究进展,为重楼皂苷的进一步研究提供参考。方法查阅相关文献,整理重楼皂苷药理活性及药代动力学研究的相关资料,对其进行总结归纳。结果重楼皂苷是一种甾体皂苷,具有抗肿瘤、免疫调节、抗菌消炎、止血、调节血管和抗氧化等作用;重楼皂苷的药物浓度多采用高效液相色谱及色谱-质谱联用技术进行测定,以评价其体内药代动力学过程。结论整理和总结重楼皂苷的药理作用及体内药代动力学的研究进展,以期为重楼皂苷的深入研究和开发利用提供参考。     

重楼皂苷类成分分析方法的研究进展

重楼是目前临床常用传统中药,皂苷类成分是其主要有效成分,其在抗肿瘤、止血、止痛、抗菌、抗炎、抗氧化、提高免疫力等方面均有较好的治疗作用,在中医药界备受关注。通过查阅文献和相关资料,对近年来有关重楼及其制剂中皂苷类成分的含量测定方法进行归纳整理,并分析其各自的特点和优势,为重楼的深入研究提供依据,同时为其药材及制剂的质量评价提供参考。     

重楼皂苷提取分离及含量测定方法的研究

分离制备重楼药材中的专属性成分,建立相关成分的含量测定方法.应用常规柱色谱和反相中压制备色谱分离、制备重楼中主要皂苷成分,并建立高效液相色谱法测定重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ的含量测定方法.分离、制备了4种重楼皂苷单体,经光谱数据鉴定为重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ,建立了其中Ⅰ、Ⅱ的含量测定方法.为控制和评价重楼药材质量提供了良好的研究基础.     

重楼根茎与须根中四种重楼皂苷含量比较

摘 要 目的： 比较重楼根茎与须根中四种重楼皂苷含量,考察皂苷类次生代谢产物在重楼不同生长部位的分布情况,为重楼药材综合开发利用提供参考。方法: 采集武当山区及神农架林区的重楼药材样本,采用高效液相色谱法测定重楼根茎及其须根中主要次生代谢产物重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量。 结果: 须根中四种重楼皂苷总量明显高于根茎;薯蓣皂苷类成分在两个部位差异不显著,而偏诺皂苷类成分含量在须根中明显高于根茎。结论:从所含主要化学成分的角度分析,须根与根茎具有化学等同性,可以考虑入药用;但从重楼皂苷含量的角度分析,须根与根茎中分布有明显差异,有可能在须根中合成后转移至根茎中贮存。     

HPLC法测定不同来源重楼药材中7种甾体皂苷的含量

目的分析不同来源重楼属植物的主要活性成分,比较7种甾体皂苷的含量,为重楼药材的鉴别和品质评价提供参考依据。方法采用HPLC法测定不同来源重楼属15批药材中重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅴ的含量。色谱条件为Inertsil ODS-3C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水(50∶50);检测波长为203nm;流速为1.0mL·min~(-1);柱温为35℃;进样量为20.0μL。结果 15批样品中,重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ4种皂苷含量之和均在1.849~20.222mg·g~(-1)之间;样品中7种皂苷含量之和在2.351~37.366mg·g~(-1)之间。精密度、稳定性和重复性实验的RSD值均≤3.0%,7种皂苷的平均加样回收率均在95.92%~103.20%之间(RSD≤3.0%,n=5)。结论因产地或种类不同,重楼皂苷的含量存在一定差异。基于15批重楼样品的HPLC图谱,构建了重楼药材的HPLC指纹图谱,实验结果可用于重楼的真伪鉴别和质量评价。     

UPLC法测定重楼药材中重楼皂苷I和重楼皂苷II的含量

目的:建立超高效液相色谱法测定重楼中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ的含量。方法:色谱柱为Waters Acquity UPLC@BEHC（100 mm×2.1 mm,1.8μm）,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 ml·min^-1,检测波长203 nm。结果:重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ在测定范围内呈良好的线性关系,其平均回收率为99.74%～100.18%,RSD为1.21%～1.96%。结论:本方法高效、便捷、结果准确,为重楼的质量控制提供了新的方法。     

武当山区不同采收期宽叶重楼根中重楼皂苷动态变化研究

目的:以武当山区人工种植基地宽叶重楼为样本,研究重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的动态变化规律,探讨本地区宽叶重楼的最佳采收期。方法:采用高效液相色谱法,以Waters Atlantis誖T3 色谱柱、乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长为203 nm。结果:不同采收期宽叶重楼中的重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量具有明显的差异,春季4月下旬和秋季8月下旬有两个高峰,而在植株生长旺盛的夏季和进入休眠期的冬季皂苷含量明显下降。结论:初步确定了武当山区宽叶重楼的最佳采收期,为重楼药材的采收及生产提供了一定的科学依据。     

中药重楼活性成分抗肿瘤的作用机制

重楼是中医临床常用的中药,具有清热解毒,消肿止痛,凉肝定惊之功效,近年来随着中药提取技术的发展,对重楼的活性成分的药理研究逐渐增多,其抗肿瘤作用及其机理日益受到研究人员的重视。关于重楼中活性成分的抗肿瘤的机制的研究是未来研究的一个方向。     

重楼植物中内生菌研究进展

摘 要重楼植物的内生菌主要有内生细菌和内生真菌。重楼的内生菌有多种生理活性,如抑制其他微生物活性、抗肿瘤细胞活性等作用,部分内生菌发酵液可产生宿主重楼植物中主要活性物质甾体皂苷;能使万古霉素、孕酮化合物等结构发生转化。重楼中内生菌的这些特性可能增加重楼抗病能力、抵御生长环境协迫能力、提高重楼产率、转化或修饰重楼中活性次生代谢产物或其他化合物等,因此,研究重楼中内生菌的分离、鉴别、筛选、克隆等对开辟药物研发新途径、缓解中药资源短缺等方面具有重要的意义。     

民族药材青阳参对照品的制备及质量标准提高研究

目的：建立青阳参苷甲对照品的制备方法和含量测定,为质量标准的提高提供参考。方法：采用植物化学方法制备青阳参苷甲作为对照品,采用质谱、核磁共振等光谱法鉴定对照品的结构,采用面积归一化法测定了对照品含量,并建立高效液相色谱法测定青阳参及同属药材白前、白薇和徐长卿中青阳参苷甲的含量。采用Waters X Select C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水溶液（43：57）,流速1.0 mL·min^-1;检测波长223 nm;柱温30℃;进样量10 μL。结果：经过鉴定分离的青阳参苷甲纯度大于98%,可作为质量研究用对照品。青阳参苷甲质量浓度在5.62~224.8 μg·mL^-1（r=0.9998,n=6）范围内线性关系良好,方法的平均回收率（n=6）为97.7%（RSD=1.4%）。白前、白薇和徐长卿中未检出青阳参苷甲,青阳参中青阳参苷甲含量在0.015%~0.070%。结论：青阳参苷甲是青阳参的特征成分,可作为该药材的定量指标。本文所建立的高效液相色谱法可作为青阳参药材质量标准中的含量测定方法。     

RP-HPLC法测定重楼中甾体皂甙的含量

为寻找和合理利用植物资源及控制生药质量,用RP-HPLC法分离并测定了重楼中9种甾体皂甙,其中4种为偏诺皂甙元的糖甙,5种为薯芋皂甙元的糖甙。分析柱为C₈(4.6mm×250mm),乙腈—水(42∶58)为流动相,检测波长203nm,9种甾体皂甙峰与其相邻峰能达基线分离,且线性良好,γ=0.9996～0.9999,回收率97.1%～100.2%。本法简便、快速、灵敏。用此法对不同产地重楼中9种甾体皂甙类化合物进行了分析,结果提示不同产地重楼中各成分含量差异较大。     

黄连提取物减轻脓毒症相关急性肾损伤的代谢组学研究

目的 探讨黄连提取物（Rhizoma Coptidis extracts,RCE）对脓毒症相关急性肾损伤的影响及潜在机制。方法 将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组以及治疗组3组;采用试剂盒检测血清肌酐（serum creatinine,Scr）及尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）水平;采用气相色谱-质谱进行代谢组学分析。结果 模型组较假手术组Scr、BUN水平均上调;而治疗组较模型组均下调,差异均有统计学意义（P<0.05）。代谢组学分析共获得16个代谢物可能与脓毒症相关急性肾损伤过程有关,主要参与氨基酸代谢和糖代谢。在这16个代谢物中,8个代谢物水平在黄连提取物干预下发生回调。结论 黄连提取物可能通过改善脓毒症相关急性肾损伤的代谢物变化从而起到治疗作用。     

左金方的化学成分与药理作用研究进展

左金方为元朝医家朱震亨创制的经典中药复方,始载于《丹溪心法》,仅由黄连、吴茱萸以6∶1比例组方,治疗肝火犯胃所致胁肋胀痛、吞酸呕吐等,如今不仅用于多种消化系统病症（如胃溃疡、胃炎、胃癌、幽门螺杆菌感染等）,还在精神症状、非胃肠道肿瘤、高血压、糖尿病等非消化系统疾病的治疗中起到较好疗效,具有抗炎抗溃疡、抗肿瘤、抗菌等多种作用。就近5年来对左金方的化学成分与药理作用的研究进展进行归纳总结,同时对其未来可能的研究方向进行了展望,以期为其进一步综合开发利用奠定基础。     

星点设计-效应面法优化青连宁心胶囊中黄连和青蒿的提取工艺

目的 用星点设计-效应面法对黄连和青蒿的提取工艺进行优化。方法 以小檗碱、巴马汀、黄连碱和表小檗碱为考察指标,采用星点设计考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间对黄连的提取工艺进行优化;以青蒿素得膏率为考察指标,采用星点设计考察乙醇用量、温浸时间、乙醇浓度对青蒿的提取工艺进行优化。结果 优选的黄连提取工艺为10.5倍量含1%硫酸的70%的乙醇提取3次,每次90 min,小檗碱、巴马汀、黄连碱和表小檗碱的平均含量与预测值偏差-1.5%;优选的青蒿提取工艺为11.5倍量60%的乙醇提取2次,每次110 min,青蒿素的平均含量与预测值偏差-0.33%。结论 星点设计-效应面法优选黄连和青蒿的提取工艺,方法简便,预测性良好。     

非水毛细管电泳法测定延胡索中延胡索乙素的含量

目的：建立非水毛细管电泳法,分离测定延胡索中延胡索乙素的含量。方法：以５０ｍｍｏｌ／Ｌ醋酸钠甲醇液含２ｍｏｌ／Ｌ醋酸为分离缓冲液。结果：本法在延胡索乙素浓度为５－４０μｇ／ｍｌ范围内具有良好的线性关系和重现性,且无需预处理。回收率为９７．４２％,ＲＳＤ＝１．６８％,结论：本法准确、快速、简便。     

疏水改性白及多糖自组装载紫杉醇纳米粒子在大鼠体内药动学研究

目的 建立一种简便、灵敏的测定大鼠尾静脉和灌胃给予胆甾醇琥珀酰基白及多糖载紫杉醇纳米粒子后的血浆药物浓度的HPLC方法,并评价其药动学特征。方法 以酮康唑为内标,采用AgilentTC-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇-乙腈-水（45：20：35）为流动相,流速为1.0 ml/min,采用统计矩法计算药动学参数,评价药动学特征。结果 紫杉醇在大鼠血中浓度在0.5~20 μg/ml范围内线性关系良好（r=0.999 7）,准确度和精密度均符合生物样品分析要求。尾静脉注射3种不同取代度的自制纳米粒和紫杉醇注射液后的t_1/2分别为3.86、3.76、3.35和2.62 h;灌胃给予自制紫杉醇纳米粒溶液和紫杉醇混悬液后的t_1/2分别为5.28和3.72 h。结论 该测定方法可用于紫杉醇纳米粒子在大鼠体内的药动学研究,且载紫杉醇自组装纳米粒子在体内的滞留时间比紫杉醇注射液和紫杉醇混悬液有明显延长。     

New isoflavones from Belamcandae Rhizoma

Four new isoflavones (iristectrigenin A-7-glucoside (2), 8-hydroxytectrigenin (5), 8-hydroxyiristectrigenin A (6), and 8-hydroxyirigenin (7–1) have been isolated from Belamcandae Rhizoma (the rhizome of Belamcanda chinensis), along with nine known compounds: tectridin (1), tectrigenin-4′-glucoside (3), astragalin (4), irilin D (7–2), isotectrigenin (8), tectrigenin (9), iristectrigenin B (10), hispiludin (11–1), and irigenin (11–2). The structures of 2, 5, 6 and 7–1 were determined by spectroscopic methods, including high-resolution mass spectrometry (HR-MS), proton nuclear magnetic resonance (¹H-NMR), carbon-13 NMR (¹³C-NMR), and various two-dimensional (2D)-NMR techniques.     

Inhibitory activities of the alkaloids from Coptidis Rhizoma against aldose reductase

As part of our ongoing search of natural sources for therapeutic and preventive agents for diabetic complications, the rat lens aldose reductase (RLAR) inhibitory effect of Coptidis Rhizoma (the rhizome of Coptis chinensis Franch) was evaluated. Its extract and fractions exhibited broad and moderate RLAR inhibitory activities of 38.9∼67.5 μg/mL. In an attempt to identify bioactive components, six quaternary protoberberine-type alkaloids (berberine, palmatine, jateorrhizine, epiberberine, coptisine, and groenlandicine) and one quaternary aporphine-type alkaloid (magnoflorine) were isolated from the most active n-BuOH fraction, and the chemical structures therein were elucidated on the basis of spectroscopic evidence and comparison with published data. The anti-diabetic complications capacities of seven C. chinensis-derived alkaloids were evaluated via RLAR and human recombinant AR (HRAR) inhibitory assays. Although berberine and palmatine were previously reported as prime contributors to AR inhibition, these two major components exhibited no AR inhibitory effects at a higher concentration of 50 μg/ml in the present study. Conversely, epiberberine, coptisine, and groenlandicine exhibited moderate inhibitory effects with IC₅₀ values of 100.1, 118.4, 140.1 μM for RLAR and 168.1, 187.3, 154.2 μM for HRAR. The results clearly indicated that the presence of the dioxymethylene group in the D ring and the oxidized form of the dioxymethylene group in the A ring were partly responsible for the AR inhibitory activities of protoberberine-type alkaloids. Therefore, Coptidis Rhizoma, and the alkaloids contained therein, would clearly have beneficial uses in the development of therapeutic and preventive agents for diabetic complications and diabetes mellitus.     

高通量测序分析附子、红参不同比例配伍对大鼠肠道菌群的影响

目的 初步研究附子、红参不同比例配伍对大鼠肠道菌群的影响。方法 红参、附子分别采用8倍体积的70%乙醇加热回流提取2次,每次1 h,制备醇提物。将15只SD大鼠随机分成A、B、C 3组,每组5只,A组为附子醇提物单独给药组,给药量为0.415 g/kg,B、C组分别为附子、红参配伍比例1∶1（红参醇提物1.17 g/kg）和1∶2（红参醇提物2.34 g/kg）给药组,每天ig给药1次,连续给药7 d。给药结束后,于第8天收集大鼠粪便,提取粪便中细菌的DNA,对粪便菌群的16Sr-RNA的V4区进行扩增,利用Miseq高通量测序平台进行基因序列的测定,利用Uparse software对序列进行分析,将相似性在97%以上的序列进行归并,生成分类操作单元（OTU）;利用QⅡME软件计算样品的菌群丰度指数（Ace、Chao1）、菌群多样性指数（Simpson、Shannon）。结果 A组和B组的OTU数量较C组显著增多（P<0.05）;A组和B组Ace、Chao1指数为1 393、1 368和1 085、1 057,C组Ace和Chao1指数为889和884,A组和B组较C组显著增多（P<0.05、0.01）;厚壁菌门、拟杆菌们和变形菌门均为3组样品中的优势菌门;在属的水平上,C组中乳酸杆菌属和拟杆菌属含量较A组和B组增加。结论 红参与附子不同比例配伍可对大鼠肠道菌群产生显著的影响,随红参比例的增加,可能在一定程度上改善肠道的微生态环境。