鼻咽癌中Ptch1和Ptch2基因的表达及关系

目的 探讨Sonic Hedgehog信号通路Ptch1和Ptch2(Ptch1/2)成员在鼻咽癌组织中的表达及其关系.方法 应用免疫组化EnVision两步法检测60例鼻咽癌标本及15例正常鼻咽黏膜中Ptch1/2蛋白的表达,比较Ptch1与Ptch2表达的差异,分析Ptch1和(或)Ptch2与鼻咽癌患者临床病理特征之间的关系.结果 鼻咽癌组织中Ptch1/2蛋白表达的综合评分分别为4.70±3.59、3.58±3.47,明显高于正常鼻咽黏膜上皮组织的2.93±1.98、2.07±1.10(均P＜0.05);肿瘤或正常鼻咽黏膜上皮组织中Ptch1的表达水平均稍高于Ptch2;不同Ptch1及(或)Ptch2蛋白表达水平的鼻咽癌临床病理特征的比较均差异无统计学意义(P＞0.05);Ptch1与Ptch2蛋白表达在正常组织中呈显著相关(r =0.592,P＜0.05),而在肿瘤组织中则无相关性(r=0.114,P＞0.05).结论 鼻咽癌组织中Ptch1/2表达上调可能共同参与鼻咽癌的发生及发展,其中尤以Ptch1占主导地位.     

Shh和Gli1蛋白在大鼠肝细胞癌中的表达研究

目的探讨在SD大鼠肝细胞癌中Shh和Gli1蛋白的表达及其意义。方法取体质量为170～200g雄性SD大鼠30只,随机分为实验组(20只)和对照组(10只),实验组采用0.01%二乙基亚硝胺(DEN)自由喂养16周,对照组常规标准喂养,诱导大鼠肝细胞癌成功后,应用免疫组化检测肝癌组织和正常肝组织中Shh和Gli1表达情况。结果免疫组化检测实验组肝癌组织中Shh和Gli1的阳性表达率分别为87.5%(14/16)和75.0%(12/16),对照组肝组织中检测Shh和Gli1的阳性表达率分别为30.0%(3/10)和20.0%(2/10);两种蛋白质在肝癌组织中的表达与正常组织中的表达比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在人工诱导的SD大鼠肝癌模型中,Hedgehog信号通路处于激活状态。     

β1-整合素和Shh在大肠癌的表达及其相互关系

目的:探讨β1-整合素和Shh在不同分级、分期大肠癌的表达情况及其相互关系.方法:采用免疫组化SP法,检测β1-整合素和Shh在大肠癌组织芯片中的表达情况,并进行二者的相关性分析.结果:大肠癌组织中β1-整合素和Shh蛋白的表达阳性率分别为59.42%、71.01%.β1-整合素的阳性表达与大肠癌的浸润深度、Ducks...     

新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的 观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽(PYY) mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系.方法 选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-time PCR法和免疫组织化学法测定胃底组织Ghrelin mRNA和蛋白、结肠组织PYY mRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达.结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠(P<0.05),结肠PYY mRNA表达则低于7日龄大鼠(P<0.01).0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY 蛋白表达均高于7日龄大鼠(P<0.05).0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYY mRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性.     

Shh、Gli1和MMP-9在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织中Hedgehog(Hh)信号通路分子(Shh和Gli1)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达以及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测54例人胃癌组织、癌旁组织和30例正常胃黏膜组织中Shh、Gli1和MMP-9蛋白的表达.结果 胃癌组织中Shh、Gli1和MMP-9的阳性表达率分别为68.52％、61.11％和64.81％,明显高于癌旁组织(阳性表达率分别为27.78％、24.07％和22.22％)和正常组织(阳性表达率分别为36.67％、26.67％和33.33％)(P＜0.05);三者的表达均与胃癌患者性别、年龄、部位无关(P＞0.05);而与分化程度、浸润深度以及淋巴结转移相关(P ＜0.05);Shh、Gli1分别与MMP-9表达呈正相关.结论 Hedgehog( Hh)信号通路可能通过上调MMP-9的表达促进胃癌的侵袭转移.联合检测胃癌组织中Shh、Gli1和MMP-9蛋白水平,可作为胃癌预后的客观参考指标.     

新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽（PYY）mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系。方法选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-timePCR法和免疫组织化学法测定胃底组织GhrelinmRNA和蛋白、结肠组织PYYmRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达。结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠（P〈0.05）,结肠PYYmRNA表达则低于7日龄大鼠（P〈0.01）。0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY蛋白表达均高于7日龄大鼠（P〈0.05）。0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYYmRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性。     

新生大鼠磷脂酶C-γ1mRNA的表达变化

目的 探讨新生大鼠早期各主要脏器磷脂酶C-γ1(PLCγ1,基因为PLCG1)的mRNA表达状况。方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析大鼠出生后1、3、5、7 d及2、3、5周等7个时期肝、肺、肾和脑等4种脏器共28例样本的PLCG1的表达变化,以看家基因磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)为内参照,同步逆转录PLCG1特异性片段和内参片段,以二者积分吸光度比值作为PLCG1 mRNA的相对表达量。结果 肝、肺、肾和脑4种脏器组织PLCG1在出生后早期的不同时期均有较强表达,并且各时期之间的表达有显著性差异(P均<0.01),第1天肝脏组织中PLCG1几乎没有表达,第7天脑组织的表达最高;而在同一时期4种不同的组织间PLCG1的表达也有显著性差异(P均<0.01)。结论 同种脏器组织在不同的发育时期及在同一时期不同脏器组织之间PLCG1的差异性表达提示,PLCG1可能参与了大鼠早期生长发育过程中细胞的增殖与分化。     

弓形虫感染对大鼠雄性生殖系统及其胎鼠发育影响的实验研究

本研究以大鼠为实验对象,探讨弓形虫感染对雄性生殖的影响及其可能的致病机理。1　材料和方法以2×1 0 5/m1活的纯化弓形虫速殖子悬液(CF 1 1纤维素纯化)腹腔接种成年雄性SD清洁级大鼠2ml,至感染第9周,解剖大鼠,检测血清性激素、睾丸精子数、精子活率、活力、精子质量、睾丸酶活性及睾丸组织的病理学损害等。并且对弓形虫感染大鼠雄性生育力进行研究,即弓形虫感染后第9天与正常成年雌鼠按1∶2合笼交配1周,于交配的第2天早晨开始检查阴道,以发现阴栓和查到精子为妊娠0天,于妊娠第2 1天处死雌鼠,检查雌鼠的黄体数,胎鼠重量及胎鼠情况,后者包…     

TGF-β1及其受体mRNA在哮喘大鼠肺组织中的表达

目的研究哮喘大鼠肺组织中TGF-β1及受体TGF-βRⅠ、TGF-β RⅡmRNA的表达水平,以了解TGF-β1在哮喘中的作用及其受体对其作用的调节机制.方法将30只成年雌性SD大鼠分为正常对照组,单纯致敏组和哮喘模型组,采用卵清蛋白(OVA)腹腔注射法复制大鼠哮喘模型,利用RT-PCR法检测肺组织中TGF-β1、TGF-βRⅠ及TGF-βRⅡmRNA的表达水平.结果TGF-β1mRNA的表达水平致敏组与正常组相比增加(70.21±11.68 vs 53.07±10.27,P＜0.05),哮喘组与正常组相比显著增加(114.14±16.57 vs 53.07±10.27,P＜0.01),TGF-β R Ⅰ mRNA的表达水平在致敏组和哮喘组相当,均较正常组下调(83.21±11.52 vs 100.14±16.13,85.76±12.95 vs 100.14±16.13,P＜0.05).TGF-βRⅡmRNA的表达水平致敏组与正常组相比有下降(89.04±9.23 vs 103.05±11.46,P＜0.05),哮喘组与正常组相比则显著下降(56.53±7.34 vs 103.05±11.46,P＜0.01).结论TGF-β1可能作为一个抗炎因子在哮喘的变应性炎症前阶段及炎症过程中起着重要作用,TGF-β RⅠ、TGF-β RⅡ的表达水平在哮喘组和致敏组的下降说明TGF-β1信号通路在哮喘的变应性炎症中和炎症前阶段的活化程度,TGF-βRⅡ表达水平在哮喘组的显著下降则显示TGF-β1信号通路可能被下调从而抑制其抗炎作用的发挥.     

Shh和Ptch在结肠癌、腺瘤性息肉中的表达及意义

目的:检测Shh和Ptch蛋白在结肠癌、腺瘤性息肉中的表达,探讨二者在结肠癌发生、发展的作用,关注其在不同临床病理特征中的表达差别,为临床工作提供理论支持.方法:以80例大肠癌、80例结肠腺瘤性息肉、80例正常结肠黏膜组织作为研究对象,采用免疫组织化学技术,检测Shh和Ptch蛋白的表达,比较二者在不同临床指标及临床病...     

2,3,7,8-四氯二苯并二噁英作用下鼠胚及乳鼠心脏组织ANF mRNA的表达变化

目的 目前认为心房利钠因子或多肽(atrial natriuretic factor,ANF)mRNA的表达水平可作为心脏疾病严重程度的诊断标准,研究2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)作用下SD大鼠胎鼠及乳鼠心肌组织ANF mRNA表达变化特点,探讨TCDD是否对心脏功能产生一定影响.方法 将实验动物分为0.05、0.5、5、10 μg/kg 4个实验组,采用RT-PCR半定量法,检测对照组及TCDD实验组胎鼠及乳鼠心肌组织ANF mRNA表达的变化.结果 与对照组比较,实验组心脏组织中ANF mRNA的表达出现不同程度的增加.结论 TCDD染毒可以使胎鼠及乳鼠心脏组织ANF mRNA表达升高,从而推测TCDD可能对心脏功能产生一定的损伤.     

雌激素对去卵巢大鼠骨组织中骨保护素、破骨细胞分化因子和巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达的影响

目的观察雌激素对去卵巢大鼠骨组织中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(ODF)和巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF)mRNA表达的影响,探讨雌激素预防和治疗绝经后骨质疏松(PMO)的可能细胞因子途径。方法健康3月龄雌性SD大鼠30只,随机等分为假手术组,去卵巢组和雌激素组(已烯雌酚片,0．0225 mg·kg-1·d-1,灌胃)。假手术组仅牵动卵巢,其余两组均行卵巢切除术。12周后取第3-6腰椎做骨密度检查。取股骨提总RNA。实时定量PCR法检测上述因子mRNA的表达情况。结果 (1)相对于去卵巢组,雌激素组大鼠腰椎骨密度增高,差异有统计学意义。(2)相对于去卵巢组,雌激素组大鼠骨组织OPG的mRNA表达增高,M-CSF的mRNA表达下降,ODF／OPG值下降。结论雌激素治疗绝经后骨质疏松的效应可能与其调控OPG,M-CSF的表达和ODF／OPG值有关。     

大鼠局灶性脑缺血后脑组织Ang-1和Ang-2 mRNA的表达及意义

目的：观察大鼠在局灶性脑缺血早期脑组织内血管生成素（Ang）-1和Ang-2 mRNA在不同时间点的表达变化,探讨其变化规律并分析脑缺血后Ang-1、Ang-2在缺血性脑卒中发病中的作用机制。方法：大鼠随机分为正常对照组（C组）、假手术组（S组）和缺血组（I组）,缺血组又分为缺血1、3、6、12、24、48和72 h组,采用改进的线栓法制做永久性大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,采用RT-PCR技术检测各组大鼠脑组织缺血半影区内Ang-1 mRNA及Ang-2 mRNA的表达水平。结果：正常对照组和假手术组Ang-1 mRNA中等量表达,两组表达量比较差异无显著性（P>0.05）;Ang-2 mRNA极低量表达,两组表达量比较差异无显著性（P>0.05）;缺血组Ang-1 mRNA表达水平在脑缺血早期（3～6 h）低于C组（P<0.01）,脑缺血48～72 h高于C组（P<0.01）;Ang-2 mRNA在脑缺血后3 h表达水平高于C组,在脑缺血后12 h出现高峰,且持续至脑缺血后72 h（P<0.01）。结论：Ang-1和Ang-2可能在局灶性脑缺血后与其他血管特异性生长因子共同参与缺血半影区的新血管形成并抑制神经元细胞凋亡,有利于改善缺血半影区血液供应和促进神经功能恢复。     

加味四逆散对身心应激模型大鼠胃肠功能及胃组织中GASR和空肠组织中VIPR2 mRNA表达的影响

目的:建立大鼠慢性身心应激模型,探讨加味四逆散(JWSNS)对模型大鼠胃排空率及小肠推进比、大鼠下丘脑环核苷酸系统(cAMP、cGMP)、胃组织中胃泌素受体（GASR）与空肠组织中血管活性肠肽Ⅱ型受体（VIPR2）mRNA表达的影响,阐明JWSNS干预应激性胃肠功能障碍的机制。方法：60只大鼠随机分为正常组,模型组,小、中、大剂量JWSNS组和西沙比利组,每组10只。采用慢性心理性应激方法建立大鼠应激模型,经JWSNS等干预后检测胃肠动力,放射免疫法检测大鼠下丘脑中cAMP和cGMP含量,RT-PCR法检测胃组织中GASR及空肠组织中VIPR2 mRNA表达变化。结果：与模型组比较,各治疗组大鼠下丘脑中cAMP和cGMP 含量显降低(P<0.05或P<0.01);与西沙比利组比较,大剂量JWSNS组大鼠下丘脑cAMP和cGMP 含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各治疗组胃排空率及小肠推进比均明显升高(P<0.05或P<0.01);与西沙比利组比较,大剂量JWSNS组胃排空率升高不明显(P>0.05),而小肠推进比明显升高 (P<0.05)。各治疗组大鼠胃组织中GASR mRNA表达水平均高于模型组,空肠组织中VIPR2 mRNA表达水平则降低(P<0.05或P<0.01);中和大剂量JWSNS组大鼠胃组织中GASR mRNA表达水平均高于西沙比利组 (P<0.05或P<0.01);大剂量JWSNS组大鼠空肠组织中VIPR2 mRNA表达水平低于西沙比利组 (P<0.01)。结论:环核苷酸系统（cAMP、cGMP）异常可影响胃肠功能,JWSNS可通过影响环核苷酸系统对慢性心理应激反应进行调控,进而改善胃肠功能,并可改善胃组织中GASR和空肠组织中VIPR2 mRNA的表达。     

灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸雄激素结合蛋白和抑制素表达的影响

目的 观察灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸雄激素结合蛋白和抑制素的影响.方法 45只SD雄鼠,随机均分为3组:对照组、Cd组、灵芝孢子粉拮抗组(GLS+ Cd).灵芝孢子粉拮抗组用5mg/kg灵芝孢子粉灌胃,对照组与Cd组灌胃等量生理盐水,每天1次.Cd组和GLS+ Cd组腹腔注射CdCl22mg/kg,隔天1次.对照组腹腔注射等量生理盐水.3个月后分3批处死,间隔为1个月.用RT-PCR法对抑制素和雄激素结合蛋白的表达量进行定量分析,睾酮定量分析酶联免疫检测试剂盒测定血清睾酮浓度.结果 在镉染毒1个月时,Cd组ABP(雄激素结合蛋白)表达量应激性升高,在第3个月Cd组ABP表达量低于灵芝孢子粉拮抗组,有统计学意义(P＜0.05);随着镉染毒时间延长,第2、3个月Cd组INH-B(抑制素B)表达量低于灵芝孢子粉+ Cd组,有统计学意义(P＜0.05);镉染毒3个月时,与对照组比较,Cd组和灵芝孢子粉拮抗组血清睾酮水平明显降低(P＜0.05);与Cd组比较,灵芝孢子粉+Cd组血清睾酮水平浓度高(P＜0.05).结论 灵芝孢子粉可以通过提高ABP、INH-B的表达对镉致雄性大鼠支持细胞损伤有一定的保护作用.     

Type 1 iodothyronine deiodinase activity and mRNA expression in rat thyroid tissue with different

Background  Type 1 deiodinase (D1) plays an important role in the metabolism of thyroid hormone and has close relationship with thyroid function. In this study we explore the effects of iodine intake on D1 activity and its mRNA expression and its possible mechanism.
Methods  Forty-eight Wistar rats were randomly divided into six groups with 8 in each: low iodine (LI), normal iodine (NI), five-fold iodine (HI₅), ten-fold iodine (HI₁₀), fifty-fold iodine (HI₅₀), one hundred-fold iodine (HI₁₀₀) group. Three months, six months and twelve months after admistration of potassium iodate, they were sacrificed and thyroids were excised. The expression of D1 mRNA in the thyroid tissue was determined by RT-PCR and D1 activity was analyzed by ¹²⁵I-rT3 as substrate. The thyroid hormone was measured with radioimmunoassay method.
Results  Compared with NI group, D1 mRNA expression in LI groups slightly decreased, and D1 activity greatly increased. Both T₃ and T₄ in thyroid tissue significantly decreased, but the T₃/T₄ ratio increased. D1 mRNA expression decreased in all HI groups, and D1 activity was significantly lower in HI groups. There was a tendency of decrease in D1 activity with increased doses of iodine intakes. There was no significant difference in T₄ in thyroid tissue between HI groups and NI group, but a tendency of decrease in T₃ level was found in all HI groups.
Conclusions  In the case of iodine deficiency, D1 activity increased greatly in order to convert more T₄ to T₃. Excess iodine can inhibit both D1 mRNA expression and its activity to protect organism from being injured by excessive T₃.