促红细胞生成素对1-甲基-4-苯基吡啶损伤的PC12细胞的保护作用(英文)

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞变性损伤的保护作用及机制。方法用MPP+处理PC12细胞制作帕金森病细胞模型,采用四甲基偶氮唑蓝法检测暴露于不同浓度EPO后细胞的活性;流式细胞术与DNA断端原位标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTPnick end labeling, TUNEL)检测各组的细胞凋亡率;免疫印迹法检测不同处理组PC12细胞Bcl-2和Bax的表达,并采用荧光法观察不同处理组PC12细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)与线粒体膜电位水平以及caspase-3活性的变化。结果 MPP+可以使PC12细胞存活率下降,凋亡率增高;同时PC12细胞内ROS增多,线粒体膜电位下降。MPP+还可以明显地提高Bax/Bcl-2比值并激活caspase-3。而EPO可以抑制这些由MPP+引发的改变,并在1 U/mL时发挥最大保护作用。结论 EPO可抑制MPP+诱导的PC12细胞死亡,其作用机制可能与其自身抗氧化和抗凋亡的特性有关。     

促红细胞生成素对1-甲基-4-苯基吡啶损伤的PC12细胞的保护作用

目的探讨促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP^＋）诱导的PC12细胞,变性损伤的保护作用及机制。方法用MPP^＋处理PC12细胞制作帕金森病细胞模型,采用四甲基偶氮哗监泫检测暴露于不同浓度EPO后细胞的活性;流式细胞术与DNA断端原位标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL）检测各组的细胞凋亡率;免疫印迹法检测不同处理组PC12细胞Bcl-2和Bax的表达,并采用荧光法观察不同处理组PC12细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）与线粒体膜电位水平以及caspase-3活性的变化。结果MPP^＋可以使PC12细胞存活率下降,凋亡率增高;同时PC12细胞内ROS增多,线粒体膜电位下降。MPP^＋还可以明显地提高Bax／Bcl-2比值并激活caspase-3。而EPO可以抑制这些由MPP^＋引发的改变,并在1U／mL时发挥最大保护作用。结论EPO可抑制MPP^＋诱导的PC12绌胞死亡,其作用机制可能其自身抗氧化和抗凋亡的特性有关。     

丹参川芎嗪注射液对Aβ损伤的PC12细胞保护作用及机制研究

目的 探讨丹参川芎嗪注射液对Aβ损伤的PC12细胞可能的保护作用及机制。方法 将PC12细胞分为5组:空白对照组(未加任何处理药物)、Aβ诱导组(20 μmol/L Aβ处理组)和预处理组(分别加入浓度为5 ml/L、10 ml/L、20 ml/L的丹参川芎嗪注射液孵育24 h后加20 μmol/L Aβ),通过CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察PC12细胞核的改变,荧光分光光度计测定LDH、SOD、GSH及caspase-3活性水平,免疫组织化学方法观察细胞色素C(Cyt-C)蛋白释放水平,Western Blot检测Bcl-2的表达水平。结果 丹参川芎嗪注射液(5、10、20 ml/L)预处理对Aβ诱导的PC12细胞损伤有较好的保护作用,其保护作用随着药物浓度的增加而增强。它能增加Aβ损伤的PC12细胞增殖活力,减少Aβ诱导的PC12细胞凋亡,降低细胞核凝聚现象,抑制Aβ损伤的PC12细胞LDH释放,增强SOD和GSH活性,促进Cyt-C在细胞内表达,降低caspase-3活性,促进Bcl-2的表达。结论 丹参川芎嗪注射液对Aβ诱导的PC12细胞损伤具有与线粒体通路相关的保护作用,其保护作用与它抑制细胞凋亡、抗氧化应激、维持线粒体正常功能、抑制caspase-3的激活、促进抗凋亡因子Bcl-2的表达有关。     

芍药苷通过分子伴侣自噬通路保护PC12细胞

目的 研究芍药苷对PC12细胞的保护作用,并探讨其对分子伴侣自噬通路的影响.方法 环境毒素MPP＋诱导PC12细胞损伤,同时给予芍药苷进行干预,检测细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率及细胞凋亡率的变化,并检测分子伴侣自噬相关蛋白Lamp2a表达水平的变化.结果 MPP＋处理24h,PC12细胞的存活率降低,漏出至上清液中的LDH增多,细胞凋亡率明显升高.芍药苷（25μmol·L-1）显著提高了PC12细胞的存活率,减少了LDH的漏出,降低了细胞凋亡率.Western blot显示MPP＋导致Lamp2a的表达升高,芍药苷能够显著抑制Lamp2a的激活.结论 MPP＋导致PC12细胞损伤和分子伴侣自噬的过度激活,而芍药苷对PC12细胞具有明显的保护作用,并显著降低了分子伴侣自噬通路的活性.     

14-3-3蛋白过表达减轻1-甲基-4-苯基吡啶离子对PC12细胞的毒性(英文)

目的研究14-3-3蛋白过表达对1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP )诱导的PC12细胞死亡的影响作用及其可能的机制。方法构建pcDNA3.1( )-14-3-3 真核表达质粒,用脂质体2000转染PC12细胞;Western blot技术检测PC12细胞中14-3-3蛋白、Bcl-2 蛋白, 和BAD蛋白的表达;然后分别用MTT法、酶标仪及流式细胞仪检测PC12细胞的活力、caspase的活性及PC12细胞的凋亡率。结果(1)将pcDNA3.1( )-14-3-3质粒转染PC12细胞3周后,14-3-3蛋白的表达显著增加;(2)MPP 诱导PC12细胞存活率的下降是剂量依赖性的,当MPP 的浓度达100 μmol/L时,PC12细胞的存活率丧失约50%;(3)caspase 的活性随着MPP 浓度的增加而增高,当MPP 浓度到达100 μmol/L时caspase的活性也到达最大值,而当MPP 浓度超过100 μmol/L时,caspase的活性急剧下降;(4)用100 μmol/L 的MPP 处理PC12细胞24 h后,PC12细胞的凋亡率为26.5%,14-3-3蛋白的过表达使PC12细胞的凋亡率下降到8.6%;(5)用100 μmol/L MPP 处理PC12细胞后,Bcl-2蛋白的表达趋于下调而BAD蛋白的表达上调,14-3-3蛋白的过表达能显著的增加Bcl-2蛋白的表达而使BAD蛋白的表达下调。结论14-3-3蛋白过表达通过上调Bcl-2蛋白的表达并下调BAD蛋白的表达,减少了MPP 诱导的PC12细胞的凋亡,从而发挥对PC12细胞的保护作用。这些结果可能为PD的治疗提供新的药物靶点。     

H2O2预处理通过上调14-3-3蛋白表达减轻MPP+对PC12细胞的毒性作用

目的 探讨H2O2预处理(HPP)1-甲基4-苯基吡啶离子(MPP )诱导PC12细胞损伤的保护作用和可能的机制.方法 采用4甲基偶氮唑盐法(MTT法)、自动生化分析仪、4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法及免疫印迹(western blot)技术分别检测细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞凋亡及14-3-3蛋白的表达.结果 H2O2预处理能够上调14-3-3蛋白表达,增加PC12细胞活力(MPP 组52.46%±6.15%,HPP MPP 组83.78%±5.84%),抑制LDH的活性[MPP 组(37.31±3.99)U/L,HPP MPP 组(12.49±2.26)U/L];抑制细胞凋亡(MPP 48.72%±6.68%,HPP MPP 组17.56%±5.21%).结论 H202预处理能减轻MPP 对PCI2细胞的毒性损伤作用,这种保护作用是通过上调14-3-3蛋白的表达实现的.     

灵芝多糖对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的保护性研究

目的观察灵芝多糖(GLP)对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法将Aβ25-35或(和)不同浓度的GLP加入体外培养的PC12细胞中,用MTT检测PC12细胞活力的变化;以DCFH-DA来检测细胞内活性氧(ROS)水平的改变;通过Western Blotting来检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果 Aβ25-35处理36h后的PC12细胞存活率仅为对照的60.7%,细胞内ROS水平上升到原来的222.7%,同时Bcl-2/Bax比值下降,为对照组的60.0%。经不同浓度的GLP预处理后,细胞存活率均显著提高,分别能达到69.7%,80.7%和88.3%(P<0.01);10g/ml GLP预处理PC12细胞24h后,细胞内ROS水平下降至正常组的160.6%,Bcl-2/Bax比值升高到93.6%,P值均<0.01。结论 GLP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤有保护作用。     

莱菔硫烷拮抗PC12细胞氧化应激损伤的机制

目的 探讨莱菔硫烷对体外1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞氧化损伤模型是否具有保护作用及其机制.方法 以MPP+损伤PC12细胞制备氧化损伤模型.不同浓度的莱菔硫烷加入培养基观察各组细胞生长情况.后续实验分成4组:正常对照组(A)、莱菔硫烷组(B)、MPP+损伤组(C)、莱菔硫烷预处理+MPP+损伤组(D).通过MTT比色法检测细胞活力,观察不同浓度莱菔硫烷预处理PC12细胞活力变化及不同分组PC12细胞活力变化;流式细胞术检测不同分组PC12细胞中细胞凋亡率的变化;免疫印迹法测定不同分组PC12细胞内转录因子相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)及醌还原氧化酶1(NQ01)蛋白的表达变化.结果 A组细胞存活率(98.70％)与MPP+(500μmol/L)组(58.16％)相比差异有统计学意义(F =21.83,P＜0.05),D组细胞存活率明显提高.C组细胞凋亡率升高,D组细胞与C组相比差异有统计学意义,莱菔硫烷预处理后细胞凋亡率明显减低.C组Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达下降,D组Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达升高.结论 莱菔硫烷对MPP+诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,莱菔硫烷对MPP+诱导的PC12细胞损伤的保护作用可能通过激活Nrf2-抗氧化反应元件通路途径实现.     

6-OHDA诱导PC12细胞凋亡及作用机制

目的 探讨6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞损伤的可能作用机制.方法 不同剂量6-OHDA加入培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cell,PC12)24h后,用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞的活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率以及Bax、Bcl-2的蛋白表达.结果 在加入不同浓度的6-OHDA时PC12细胞活力显著下降,细胞凋亡百分率对照组为8.73±1.09,不同浓度的6-OHDA处理组显著上升,分别为10.97±1.52、25.77±0.95、57.94±1.23,较对照组有显著性差异(P<0.01),并且Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上升,Bcl-2/Bax比值和正常组比较有显著性差异(P<0.01).结论 6-OHDA能显著诱导PC12细胞损伤,并呈剂量依赖性,其作用机制涉及到促进细胞内bax,以及抑制Bcl-2的表达.     

曲札茋苷对二氯化钴诱导PC12细胞氧化应激的保护作用

目的 探讨曲札茋苷注射液对二氯化钴诱导PC12细胞氧化应激的保护作用及其机制。方法 取对数生长期PC12细胞随机分为5组:对照组、模型组、曲札茋苷低水平组、曲札茋苷高水平组、依达拉奉组; 甲基三氯硅烷(Methyltrichlorosilane,MTS)法检测细胞活力:分光光度法检测超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)水平; 荧光探针法检测活性氧(Reactive oxygen species,ROS)荧光强度; Western Blot法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2-相关X(Bcl-2-Associated X,Bax)蛋白的表达水平。结果 与对照组比较,模型组细胞活力下降,SOD活性降低,LDH释放增加,活性氧水平增高,Caspase-3,Bax蛋白的表达水平上升,Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05); 与模型组比较,曲札茋苷组、依达拉奉组细胞活力上升,SOD活性升高,LDH释放较少,活性氧水平降低,Caspase-3,Bax蛋白的表达水平下降,Bcl-2蛋白表达水平上升(P<0.05)。结论 曲札茋苷可明显升高氧糖剥夺/复糖复氧PC12细胞的存活率,其机制可能是通过调控相关凋亡蛋白的表达,从而抑制细胞的凋亡。     

替莫唑胺及甲泼尼龙对人胶质瘤细胞放射治疗敏感性的影响

目的探讨替莫唑胺（TMZ）和甲泼尼龙（MP）对人胶质瘤细胞系U251放射治疗敏感性的影响,以期为临床优化治疗方案提供依据。方法经体外传代培养的U251细胞根据治疗方案的不同,分为对照组、放射治疗（R）组、放射治疗＋替莫唑胺（R＋TMZ）组、放射治疗＋甲泼尼龙（R＋MP）组、放射治疗＋替莫唑胺＋甲泼尼龙（R＋TMZ＋MP）组,分别予以放射治疗（2Gy／24h）、替莫唑胺、甲泼尼龙及三者联合治疗。采用磺酰罗丹明B（SRB）比色法、流式细胞术和Western blotting法分析U251细胞增殖率和凋亡率,观察凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达变化。结果放射线照射联合甲泼尼龙治疗后,U251细胞存活率明显升高（均P=0．000）;但经体外培养24和48h后,三者联合治疗组（R＋TMZ＋MP组）U251细胞增殖率显著高于放射治疗联合替莫唑胺组（P=0．000）。除对照组外,不同抗肿瘤治疗组U251细胞凋亡率均呈现升高趋势（P=0．000）,但放射治疗联合甲泼尼龙组细胞凋亡率显著低于其他各组（均P=0．000）。经放射线照射联合替莫唑胺和三者联合治疗后,U251细胞Bax蛋白表达水平升高（P=0．000）,而放射线照射联合甲泼尼龙和三者联合治疗,Bcl-2蛋白表达水平升高;其中以放射治疗联合替莫唑胺组Bax／Bcl-2比值最高（P=0．000）,放射治疗联合甲泼尼龙组最低（P=0．000）。结论甲泼尼龙可以诱导人胶质瘤细胞产生放射抵抗,而替莫唑胺对甲泼尼龙诱导的放射抵抗具有增敏作用。提示：胶质母细胞瘤患者在应用甲泼尼龙减轻放射治疗不良反应过程中所诱导的放射治疗抵抗可通过同时应用替莫唑胺而抵消。     

L—dopa诱导PC12细胞凋亡及Bcl—2、Bax表达的改变

目的：探讨L－dopa治疗帕金森病（PD）疗效减退的机制及其毒性作用机制。方法：以PC12细胞为多巴胺神经元的细胞模型,利用PI／HO33342双染结合荧光显微镜技术、电镜技术、流式细胞术及免疫荧光技术检测不同浓度的L-dopa对CPC12铁凋亡诱导作用及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的改变。结果50、100、150μmol/L不同浓度L－dopa处理组凋亡率分别为12．4％、24．4％、37．2％、PI／HO33342双染可区别凋亡,坏死和正常细胞,且可以见到染色质碎裂;电镜下可见早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞,给予L-dopa处理后,Bcl-2的表达量减少,与凋亡率呈显著负相关;Bax的表达量增加,与凋亡率呈显著正相关。结论：L－dopa诱导PC12细胞凋亡且呈量效关系,提示L－dopa可能是通过凋亡途径损害多巴胺神经元导致疗效减退,其机制可能是通过改变Bcl-2/Bax的比值来介导细胞凋亡。     

黄芩苷通过上调lncRNAH19表达来减轻MPP+诱导的PC12细胞神经毒性

目的 探讨黄芩苷是否通过上调长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)H19表达来减轻1-甲基4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP⁺)诱导的PC12细胞神经毒性。方法 分别采用0.5、0.75、1、2 mmol/L MPP⁺和10、20、50和70 μmol/L黄芩苷作用PC12细胞,后续试验使用水平分别选择0.75 mmol/L MPP⁺和50 μmol/L黄芩苷; 以0.75 mmol/L MPP⁺损伤PC12细胞,体外模拟帕金森病,并加入黄芩苷; 采用四甲基偶氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)进行细胞活力测定,Annexin V-异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate isomer,FITC)/碘化丙啶(Propidium iodide,PI)双染法进行凋亡定量分析,蛋白质印迹分析(Western blot)检测Pro-天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3,Cleaved-caspase-3,B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的相对表达水平,实时定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)进行lncRNA H19的相对表达水平检测; 在PC12细胞中转染lncRNA H19小干扰RNA(lncRNA H19 siRNA,si-H19),并加入MPP⁺和黄芩苷,考察PC12细胞增殖、凋亡等变化。结果 与对照组比较,MPP⁺降低PC12细胞的存活率、Bcl-2蛋白、lncRNA H19相对表达水平,提高PC12细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3,Bax蛋白相对表达水平(P<0.05),而Pro-caspase-3蛋白相对表达水平无明显变化(P>0.05)。与MPP⁺组比较,黄芩苷显著提高MPP⁺诱导的PC12细胞的存活率、Bcl-2蛋白、lncRNA H19相对表达水平,降低PC12细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3,Bax蛋白相对表达水平(P<0.05),而Pro-caspase-3蛋白相对表达水平无明显变化(P>0.05)。转染si-H19后黄芩苷和MPP⁺诱导的PC12细胞的存活率、Bcl-2蛋白相对表达水平降低,PC12细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3,Bax蛋白相对表达水平升高(P<0.05),而Pro-caspase-3蛋白相对表达水平无明显变化(P>0.05)。结论 黄芩苷上调lncRNA H19表达,提高MPP⁺诱导的PC12细胞活力和降低其凋亡,减轻MPP⁺诱导的PC12细胞神经毒性。     

14-3-3蛋白过表达减轻1-甲基-4-苯基吡啶离子对PC12细胞的毒性

目的 研究14—3—3蛋白过表达对1-甲基-4苯基吡啶离子（MPP^＋诱导的PC12细胞死亡的影响作用及其可能的机制。方法 构建pcDNA3．1（＋）-14—3—3真核表达质粒,用脂质体2000转染PCI2细胞;Westernn blot技术检测PC12细胞中14—3—3蛋白、Bcl-2蛋白,和BAD蛋白的表达;然后分别用MTT法、酶标仪及流式细胞仪检测PC12细胞的活力、caspase的活性及PC12细胞的凋亡率。结果 （1）将pcDNA3．1（＋）-14—3—3质粒转染PCI2细胞3周后,14—3—3蛋白的表达显著增加;（2）MPP^＋诱导PC12细胞存活率的下降是剂量依赖性的,当MPP^＋的浓度达100μmol／L时,PC12细胞的存活率丧失约50％;（3）caspase的活性随着MPP^＋浓度的增加而增高,当MPP^＋浓度到达100μmol／L时caspase的活性也到达最大值,而当MPP^＋浓度超过100μmol／L时,caspase的活性急剧下降;（4）用100μmol／L的MPP^＋处理PC12细胞24h后,PC12细胞的凋亡率为26．5％,14—3—3蛋白的过表达使PC12细胞的凋亡率下降到8．6％;（5）用100μmol／LMPP^＋处理PC12细胞后,Bcl-2蛋白的表达趋于下调而BAD蛋白的表达上调,14—3-3蛋白的过表达能显著的增加Bcl-2蛋白的表达而使BAD蛋白的表达下调。结论 14—3—3蛋白过表达通过上调Bcl-2蛋白的表达并下调BAD蛋白的表达,减少了MPP^＋诱导的PC12细胞的凋亡,从而发挥对PC12细胞的保护作用。这些结果可能为PD的治疗提供新的药物靶点。     

脑源性神经生长因子通过调节Bax/Bcl表达抑制β-淀粉样蛋白诱导的细胞凋亡

目的 探讨BDNF对凝聚态β-淀粉样蛋白25-35片断(Aβ25-35)诱导细胞损伤特别是凋亡的影响.方法 MTT法观察细胞活力,Annexin V-PI双染色法观察细胞凋亡,Western blotting法检测Bax及Bcl-2表达,应用Trk B受体抑制剂K252a(200 nmol/L)观察50 ng/mL BDNF对20 μmol/L的Aβ25-35诱导细胞损伤的抑制作用机制.结果 MTT检测结果及Annexin V-PI双染色法发现50ng/mL的BDNF预处理可显著地抑制20μmol/L的Aβ25-35诱导的PC12细胞活力的下降及细胞凋亡;Western blotting检测发现50 ng/mL的BDNF对20μmol/L的Aβ25-35诱导的PC12细胞Bax表达升高、Bcl-2表达降低及Bax/Bcl-2比值上调均有明显的抑制作用,该作用可被Trk B受体抑制剂K252a(200 nmol/L)抑制.结论 BDNF对Aβ25-35诱导的细胞损伤特别是细胞凋亡具有保护作用,该保护作用是通过与其特异性受体Trk B结合实现的.

Abstract：

Objective To investigate the effect of BDNF on cell injuries, cell apoptosis especially, induced by 25-35 segment of β-amyloid protein (Aβ25-35) at condensed state in PC12 cells.Methods The viability of PC12 cells, the apoptosis of PC12 cells and the expressions of Bax and Bcl-2 were detected by MTT, Annexin V-PI staining and Western blotting, respectively. Trk B receptor inhibitor K252a (200 nmol/l) was employed to observe the mechanism of 50 ng/ml BDNF on Aβ25-35 (20 μmol/L)-induced cell injury. Results BDNF (50 ng/ml) could significantly prevent the decrease of cell viability and cell apoptosis, and the increase of Bax expression and the decrease of Bcl-2 expression induced by 20 μmol/L Aβ25-35, and prevent the increase of up-regulation of Bax/Bcl-2 ratio; and these effects were blocked by K252a (200 nmol/1). Conclusion BDNF can prevent Aβ25-35-induced cell injury, cell apoptosis especially, by binding to its specific receptor Trk B.     

The role of phospholipid methylation in 1-methyl-4-phenyl-pyridinium ion (MPP+)-induced neurotoxicity in PC12 cells

Excessive methylation has been proposed to be involved in the pathogenesis of Parkinson's disease (PD), via mechanisms that involve phospholipid methylation. Meanwhile, 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) was found to stimulate phospholipid methylation via the oxidized metabolite, 1-methyl-4-phenyl-pyridinium (MPP+), in the rat brain and liver tissues. In the present study, we investigated the effect of MPP+ on phosphatidylethanolamine N-methyltransferases (PENMT) and the potential role of this pathway in MPP(+)-induced neurotoxicity using PC12 cells. The results obtained indicate that MPP+ stimulated phosphatidylethanolamine (PTE) methylation to phosphatidylcholine (PTC) and correspondingly increased the formation of lysophosphatidylcholine (lyso-PTC). Moreover, the addition of S-adenosylmethionine (SAM) to the cell culture medium increases MPP(+)-induced cytotoxicity. The incubation of 1mM MPP+ and various concentrations of SAM (0-4 mM) decreased the viability of PC12 cells from 80% with MPP+ alone to 38% viability with 4 mM SAM for 4 days incubation. The data also revealed that the addition of S-adenosylhomocysteine (SAH), a methylation inhibitor, offered significant protection against MPP(+)-induced cytotoxicity, indicating that methylation plays a role in MPP(+)-induced cytotoxicity. Interestingly, lyso-PTC showed similar actions to MPP+ in causing many cytotoxic changes with at least 10 times higher potency. Lyso-PTC induced dopamine release and inhibited dopamine uptake in PC12 cells. Lyso-PTC also caused the inhibition of mitochondrial potential and increased the formation of reactive oxygen species in PC12 cells. These results indicate that phospholipid methylation pathway might be involved in MPP+ neurotoxicity and lyso-PTC might play a role in MPP(+)-induced neurotoxicity.