后海穴区CB-HRP轴浆运输追踪的神经元节段性分布及相应运动神经无形态观察

用CB－HRP对大鼠后海穴区进行神经节段性分布的研究。在L6～S木水平标记出该穴相关运动神经元（Mn）的树突形成软膜下树突丛和空管膜下树突丛，两者均为嫌高尔基树突。有些远端树突穿越到对侧灰质。在背角和背连合核（DCN，S1～2）区域内CB-HRP标记的初级跨节感觉纤维和标记的前终末纤维可与送行标记的Mn树突汇聚和重叠。电针或免疫注射动物的Mn，其树突软膜下丛和室管膜下丛减少。结果提示后海穴区的神经支配在脊髓内形成传A-DCN整合-传出模式的神经反射回路，相关Mn（L6～S1）可能参与后海穴位作用。     

鸡后海、大椎、足三里穴区神经支配脊髓节段性分布的示踪研究△

目的 研究鸡后海、大椎、足三里穴区神经支与的脊髓节段性分布。方法 采用霍乱纱Ｂ亚单位结合辣根过氧化物酶（ＣＢ－ＨＲＰ）穴位注射追踪标记方法。结果 （１）后海穴跨节顺行标记纤维（ＬＳ８－１４）密集于背角及曳连合核处,逆行标记的神经元位于腹角并人有丰富的树突,在腹肴的背面及背连合核中也有逆行标记神经无胞体。（２）大椎穴神经支配的脊髓节段２在颈膨大的尾侧（Ｃ１０－Ｔ２）。从背根和背角Ⅰ、Ⅱ层到Ⅸ层有相连     

脊髓运动神经元嫌Golgi树突的再论证

以ＣＢ－ＨＲＰ法（前后肢５块肌注射）和Ｇｏｌｇｉ法，对同窝大鼠脊髓相应切片进行观察，佐以还原银切片分析。以前角外侧部细胞数相比，ＣＢ－ＨＲＰ切片是Ｇｏｌｇｉ切片的２倍。以标记或浸染的侧索内白质树突（ＷＭＤ）的表面密度相比，ＣＢ－ＨＲＰ胫骨前肌注射者是Ｇｏｌｇｉ切片的２．９倍。ＣＢ－ＨＲＰ各肌注射组的ＷＭＤ均能长达侧索周边部，其中不少形成软脊膜下边缘丛，即嫌Ｇｏｌｇｉ树突（ＧＢＤ）。前角内侧部细胞远达中央管室管膜的树突，是另一种ＧＢＤ。这两种ＧＢＤ均未能在Ｇｏｌｇｉ切片上显示。ＧＢＤ的存在改变了脊髓细胞构筑的基本概念，不同于比较解剖学的先前结论。     

脊髓运动神经元嫌Golgi树突的更论证

以ＣＢ－ＨＲＰ法（前后肢５块肌注射）和Ｇｏｌｇｉ法，对同窝大鼠脊髓相应切片进行观察，佐以还原银切片分析。以前角外侧部细胞数相比，ＣＢ－ＨＲＰ切片是Ｇｏｌｇｉ切片的２倍。以标记或浸染的侧索内白质树突（ＷＭＤ）的表面密度相比，ＣＢ－ＨＲＰ胫骨前肌注射者是Ｇｏｌｇｉ切片的２．９倍。ＣＢ－ＨＲＰ各肌注射组的ＷＭＤ均能长达侧索周边部，其中不少形成软脊膜边缘丛，即嫌Ｇｏｌｇｉ树突（ＧＢＤ）。前角内侧部细胞远达     

大鼠触液神经元的免疫组化观察

应用５－ＨＴ、ＤＢＨ、ＰＮＭＴ、ＧＡＢＡ、加压素、催产素、Ｐ物质、Ｌ－ＥｎＫ，Ｍ－ＥｎＫ，Ｄｙｎ－Ａ、神经降压肽（ＮＴ）及ＣＧＲＰ抗血清的免疫组化法，检测了大鼠脑室中央管系统（ＣＣＣＶＳ）的室管膜与软膜面的一些ＣＳＦＣ神经元。研究表明：管膜上皮和软膜结缔组织中，存在有多种递质或调质的阳性ＣＳＦＣ神经元。脑室游离面除由管膜表面神经元胞体或突起及远隔部位神经元突起伸入与脑脊液接触外，管膜上皮间神经元也     

大鼠触液神经元的免疫组化观察

应用５－ＨＴ、ＤＢＨ、ＰＮＭＴ、ＧＡＢＡ、加压素、催产素、Ｐ物质、Ｌ－ＥｎＫ、Ｍ－ＥｎＫ、 Ｄｙｎ－Ａ、神经降压肽（ＮＴ）及ＣＧＲＰ抗血清的免疫组化法，检测了大鼠脑室中央管系统 （ＣＣＣＶＳ）的室管膜与软膜面的一些ＣＳＦＣ神经元。研究表明：管膜上皮和软膜结缔组织中， 存在有多种递质或调质的阳性ＣＳＦＣ神经元。脑室游离面除由管膜表面神经元胞体或突起及 远隔部位神经元突起伸入与脑脊液接触外，管膜上皮间神经元也可伸入突起，构成ＣＳＦＣ神经 元。它们的突起也可和远隔部位神经元连系。管膜上皮间神经元大多可排列成数层；细胞形 态以多突或多角形为主，这与以往报道认为主要为双极神经元不同。此外本研究也观察到具 有两个突起的双极神经元与脑组织中神经元发出膨体状轴突支配管膜上皮。     

大鼠中缝背核至尾壳核的SOM能投射——HRP法与PAP法的联合研究

采用ＨＲＰ逆行追踪与免疫细胞化学相结合的方法对大鼠中缝背核至尾壳核的ＳＯＭ能纤维投射进行了研究。结果显示，将ＨＲＰ注射至尾壳核，并用ＨＲＰ＿ＰＡＰ法联合应用技术后，在大鼠中缝背核内均可见到明显的双重染色胞体，即ＨＲＰ＿ＳＯＭ双标记核周体，其分布具有一定的局部定位关系。这类细胞主要位于中缝背核尾侧部，且缝际区多于外侧区。表明中缝背核至尾壳核的投射，含有生长抑素样纤维。此外，在该核内还可见到数量不等的ＨＲＰ和ＳＯＭ能单标记细胞，它们散布在双标记细胞之间。上述结果表明，大鼠尾壳核接受中缝背核的传入投射，该投射纤维呈现ＳＯＭ样免疫反应。     

大鼠大脑皮质—蓝斑—小脑通路：HRP溃变电镜研究

目的 为了在超微水平上证实皮质－ＬＣ－小脑通路的存在。方法 采用顺行溃变与ＨＲＰ逆行示踪相结合电镜技术。结果 在ＬＣ颅则部观察到中（ｄ〈２ｕｍ）、小（ｄ〈１ｕｍ）型溃变前囊，以电子致密型为主，偶见神经微丝型溃变。电子致密型溃变前囊中的小泡以圆形清亮小泡为主，偶见大颗粒小泡和扁平小泡。同时在ＬＣ的颅侧部观察到大量ＨＲＰ逆标神经元胞体和树突，部分溃变前囊与ＨＲＰ逆标神经元形成非对称型轴－树突触，部分溃变的前囊与非ＨＲＰ标记树突形成轴－树突触。结论皮质－ＬＣ投射和ＬＣ－小脑投射在ＬＣ内存在单突触连接；皮质纤维不仅投向ＬＣ内的小脑投射神经元，也投向ＬＣ内其它神经元。     

大鼠脑干5－羟色胺神经元至腰骶髓的投射研究

应用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）逆行追踪法结合免疫细胞化学双重标记法，观察了大鼠脑子５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔｍｉｎｅ，５－ＨＴ）神经元向脊髓腰６（Ｌ６）和骶１（Ｓ１）节段的纤维投射。结果表明：在脑桥尾侧网状核、前庭神经外侧核、巨细胞网状核、外侧旁巨细胞网状核、外侧网状核三叉下亚核、中缝大核及中缝苍白核出现ＨＲＰ－５－ＨＴ双标记细胞。提示Ｌ６和Ｓ１节段的５－ＨＴ传入纤维起源是广泛的，不仅延髓网状结构，而且脑桥网状结构和脑神经核内的５－ＨＴ能神经元也向Ｌ６和Ｓ１投射。     

家兔延髓嘴端腹外侧区向膈神经核的轴突投射

目的：探讨家兔延髓嘴端腹外侧区与膈神经核之间的神经结构联系。方法;用逆行票房方法,将ＣＢ－ＨＲＰ（１％,１００ｎｌ）注入脊髓Ｃ５节段膈神经核内,观察延髓嘴端腹外侧区逆行票房神经元的分布。结果：在面神经后腹内侧区（Ｂｏｔｚｉｎｇｅｒ复合体）、旁巨细胞外侧核（ＰＧＣＬ）观察到大量ＨＲＰ逆行标记神经元。在斜方体后核观察到少数散在的标记神经元。结论：膈运动神经元接受发自Ｂｏｔｚｉｎｇｅｒ复合休、ＰＧＣＬ的     

大鼠脊髓前角运动细胞白质树突的电镜观察

在电镜下对未作标记及类霍乱原结合辣根过氧化物酶(CB-HRP)标记的大鼠脊髓运动细胞白质树突(WMD)进行观察,发现其全程上确有大量轴-树突触存在。突触小泡以清亮圆形和椭圆形为主,偶见有颗粒小泡与清亮小泡共存。此结果为脊髓运动细胞机能调节的旁侧回路假说提供了形态学依据。本文还就WMD传入联系的比较解剖学和可能的生理学特性,以及TMB电镜组织化学方法作了初步的讨论。     

大鼠脊髓排尿反射通路的形态学研究

目的研究大鼠脊髓水平的排尿反射路径.方法于大鼠膀胱壁注入结合霍乱毒素B亚单位的辣根过氧化物酶（CB-HRP）,研究膀胱感觉传入末梢在脊髓内的分布部位.于L1～L2 节段的中间侧细胞柱及骶副交感核分别给予辣根过氧化酶（HRP）和结合麦芽凝集素的辣根过氧化物酶（WGA-HRP）,分别在L6～S1检测逆标神经元和L1～L2检测顺行示踪末梢.结果膀胱感觉末梢从脊髓后角进入脊髓后,主要分布走向至骶副交感核和后联合核.于交感中枢给予HRP后,在副交感中枢的背内侧发现有逆标的非胆碱能性神经元,且该神经元的所在部位正好位于膀胱的感觉末梢分布的部位.于骶副交感核给予WGA-HRP后,发现在L1～L2节段中间侧细胞柱区有顺行的神经末梢.结论脊髓内部除了有盆神经-副交感中枢-盆神经的反射通路以外,可能还存在有盆神经-交感中枢-腹下神经的反射路径.     

以CB-HRP标记支配大鼠坐骨海绵体肌、球海绵体肌和胸乳突肌的神经元及其树突

给成年雄鼠的坐骨海绵体肌,球海绵体肌注射酶标类霍乱原,在腰骶段脊髓灰质可标出三组神经元:背内侧组(DM)、腹组(V)及腹外侧组(VL)。各组神经元树突通过不同途径抵达软脊膜下,DM组神经元树突可达室管膜下。给雄鼠胸乳突肌注射CB-HRP,在颈髓标出:背内侧组(DM)、腹组(V)及位于Rexed第X板层(或Rexed第Ⅶ板层最内侧)的背内侧背组(RDM)三组神经元。RDM组的发现为胸乳突肌的特殊内脏运动的本质提供了新证据.DM组神经元树突可达软膜下和室管膜下,RDM神经元树突可达室管膜下。上述软膜下及室管膜下树突的存在,反映了中枢运动神经元“旁侧回路”存在的普遍性。     

皮质脊髓束谷氨酸能投射的定性追踪——光镜和电镜研究

用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）与免疫细胞化学结合和免疫电镜方法研究了大鼠皮质脊髓束的化学性质以及它们与脊髓神经细胞之间的超微结构关系。一侧脊髓背角或部分腹角注射ＨＲＰ后,光镜下在大鼠对侧大脑皮质第４区第Ⅳ层可见３种细胞：①谷氨酸（Ｇｌｕ）样免疫反应阳性细胞;②ＨＲＰ单标细胞;③ＨＲＰ和谷氨酸样免疫反应双标细胞。在大鼠脊髓腹角可见大量谷氨酸免疫反应阳性胞体和纤维。电镜下,在脊髓腹角内谷氨酸样免疫反应产物呈细小颗粒状沉淀,分布于树突、轴突、核周质以及星形胶质细胞内。此外,尚可见３种类型的突触：①Ｇｌｕ阴性轴突与Ｇｌｕ阳性树突构成的轴树突触;②Ｇｌｕ阳性轴突与Ｇｌｕ阴性树突构成的轴树突触;③Ｇｌｕ阳性轴突与Ｇｌｕ阴性轴突构成的轴轴突触。以上结果表明：大鼠皮质脊髓束至少有一部分纤维是谷氨酸能投射,这些纤维起自对侧大脑皮质,在脊髓内下行,主要终止于背角,部分终止于腹角,经中间神经元形成突触调控脊髓腹角细胞     

心脏与内关穴神经投射相关关系研究——Ⅰ,心脏的神经投射

为研究心脏与内关穴神经投射的关系,作者建立了以调整心脏功能,以心电变化为指标的内关“得气”动物模型。用类霍乱原结合辣根过氧化物酶(CB-HRP)为标记物,分别注入“得气”的内关穴及左、右心室壁,追踪观察心室和内关穴区各类神经纤维胞体在中枢和周围神经节内分布和形态特点。标记心脏的结果:在一定节段的脊神经节、交感神经节、脊髓灰质和迷走神经下节中都出现了酶标记细胞。在脊髓Rc-1ando胶状质、脊髓前角、延髓迷走神经核区也见有酶标记细胞,从而更新了心脏神经支配的传统概念。     

大鼠皮质脊髓束Luxol Fast Blue染色

目的:探讨显示大鼠皮质脊髓束的特殊染色方法。方法:选用正常成年SD大鼠延髓和脊髓冰冻切片,应用Luxol Fast Blue染色法进行染色。结果:Luxol Fast Blue染色后,在延髓和脊髓切片中可见灰质呈淡红色,白质呈蓝色,延髓锥体染成深蓝色。锥体中Luxol Fast Blue标记的深蓝色阳性纤维,经锥体交叉后至脊髓灰质后连合背侧,沿脊髓后索腹侧深层下行,至荐段后逐渐消失。在延髓锥体和脊髓颈、胸、腰段后索中,深蓝色的Luxol Fast Blue阳性纤维边界清晰,与周围结构区分明显。结论:运用Luxol Fast Blue染色可清楚显示大鼠皮质脊髓束在脊髓内的定位,是一种简便可靠的皮质脊髓束形态学研究方法。     

Ⅱ.内关穴的神经联系

采用类霍乱原结合辣根过氧化物酶(CB-HRP)作为标记物,注入本组制备的内关穴得气的动物模型内关穴内。根据传入和传出神经对标记物的摄取和逆行传递的原理,追踪和观察了分布在内关穴内的各类神经纤维胞体在脊神经节、脊髓灰质、交感神经节中的节段性分布状况,从而探讨了内关穴与心脏之间的神经联系。