缬沙坦对改善大鼠动脉血管内皮功能的研究

目的研究缬沙坦对离体大鼠主动脉内皮依赖性舒张的影响。方法选择老龄Wistar大鼠30只,随机分为老龄组15只,缬沙坦组15只,利用组织器官水浴系统,通过乙酰胆碱,测量离体主动脉环的舒张反应变化（%）。同时测定NOS在不同组大鼠主动脉中的含量。结果⑴老龄组主动脉环对乙酰胆碱（Ach,10-9～10-5 mol/L）诱发的血管内皮舒张反应均较缬沙坦组明显下降,两组之间差异具有显著性（P〈0.01）。⑵在老龄组主动脉环血管内膜层可见棕褐色的反应颗粒,但与缬沙坦组相比较,可发现棕褐色的反应颗粒明显减少,NOS的分布下降降低（P〈0.01）。结论随年龄增加,血管内皮细胞释放的NO逐渐减少,引起血管内皮舒张性降低,NOS随年龄的增加表达下降。与老龄组主动脉环相比,缬沙坦组主动脉环NO以及NOS的表达升高。     

大承气汤对大鼠肠平滑肌细胞内磷酸二酯酶的影响

目的：探讨大承气汤的“通里功下”作用与肌醇脂质信号系统的关系，进一步阐明大承气汤的作用机制，方法：采用反相高效液相色谱法分别测定了手术对照组，肠梗阻模型组，不同剂量大承气汤组的大鼠肠平滑肌细胞内磷酸二酯酶（PDE）的含量，结果：体内实验发现：50％，100％，250％，大承气汤可使肠梗阻大鼠肠平滑肌细胞内PDE含量明显升高（P＜0．05），体外实验发现：50％，100％，250％大承气汤可使肠便阻大鼠平滑肌细胞内PDE含量明显升高（P＜0．05），结论：大承气汤可使大鼠肠平滑肌细胞内钙调蛋白（CaM)活性提高，由此推断，大承气汤的通里攻下作用很可能是通过激活肌醇脂质（IP3）信号转导系统使胃肠道平滑肌细胞内Ca2 释放增加，再通过CaM间接地激活一系列的蛋白激酶而实现。     

高盐饮食对大鼠离体胸主动脉环收缩功能的影响及其机制

目的:观察高盐饮食早期大鼠离体胸主动脉环的收缩改变,并探讨其可能的机制.方法:雌性SD大鼠20只,随机均分成正常饮食(NC)组和高盐饮食(HS)组.喂养2 w后,水合氯醛麻醉,测量动脉血压.采用大鼠离体胸主动脉环灌流,在去除血管环内皮后,观察苯肾上腺素(PE)对血管的收缩情况.先用无钙液预处理去内皮血管环,用苯肾上腺素(PE)收缩血管环,观察两组的收缩情况;再用无钙液加肝素阻断三磷酸肌醇(IP3)诱导的细胞内钙离子的释放,观察PE对两组血管环的收缩情况进而分析甘油二酯-蛋白激酶C(DG-PKC)通路的情况.结果:两组血压差异没有显著性;用无钙液预处理后再加PE,发现HS组去内皮血管环的收缩幅度显著此NC组高(P＜0.01);用无钙液加肝素预处理后再加PE,发现HS组去内皮血管环的收缩幅度也显著高于NC组(P＜0.01).结论:高盐饮食大鼠早期血压虽然是正常的,但血管平滑肌对激动剂的收缩反应已经加强,这种反应可能与其细胞内钙离子浓度升高有关,其中主要是DG-PKC途径的活性增强.     

大承气汤颗粒剂对大鼠肠平滑肌细胞内三磷酸肌醇的影响

观察了大承气汤颗粒对大鼠肠平滑肌细胞内三磷酸肌醇（ＩＰ３）的影响。体内外实验发现：５０％，１００％，２５０％大承报汤可使肠梗阻大鼠肠平滑肌细胞内ＩＰ３含量明显升高（Ｐ〈０．０５），ＩＰ３可介导肠道平滑肌的收缩，大承气汤的通里攻下，增强胃肠道推进功能的作用很可能是通过激活肌醇脂质ＩＰ３信号转导系统使胃肠平滑肌细胞内Ｃａ＾２＋释放增加，再通过钙调蛋白间接地激活一系列的蛋白激酶而实现的。     

葛根素对大鼠豚鼠主动脉肺动脉血管平滑肌的作用

目的：观察葛根素（Pur)对大鼠，豚鼠离体主动脉，肺动脉血管平滑肌的作用。方法；动物急性处死后取出主动脉和肺动脉，挂于含10mlKH液并通入混合气体的浴管中，然后观察Pur的作用。结果：Pur本身对血管无明显作用；在去甲肾上腺素（NA）作用下Pur对大鼠主动脉有促进和抑制收缩的双向作用，对肺动脉仅有抑制收缩作用。对豚鼠血管具有促进收缩作用；Pur可抑制不同浓度KCl引起血管的收缩反应，同时不同浓度Pur对KCl的抑制作用存在明显的剂量依赖性；Pur与心得安，哌唑嗪有类似作用。结论：Pur对血管无直接作用。但可以明显影响NA，KCl的量效曲线，推测Pur具有β和α受体的阻断作用。     

三磷酸肌醇变化与逼尿肌不稳定关系的研究

【目的】探讨大鼠逼尿肌组织三磷酸肌醇[Inositol（1,4,5）-trisphosphate,IP门变化与逼尿肌不稳定（Detrusorinstabilitv,DI）的关系。【方法】建立DI大鼠模型,分别检测DI大鼠,逼尿肌稳定（detrusorstability,DS）大鼠及经卡巴可（Carbach01）处理的Ds大鼠逼尿肌原代培养细胞IP,含量。应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测DI及DS大鼠逼尿肌组织三磷酸肌醇受体（1nositol（1,4,5）-trisphosphatereceptor,IP3R）亚型变化。【结果】DI大鼠逼尿肌原代培养细胞IP3含量显著高于Ds鼠（P〈0．01）,经105 mmolflcarbachol刺激后,DS大鼠逼尿肌原代培养细胞IP3含量较刺激前显著升高（P〈0．01）。DS及DI大鼠膀胱逼尿肌组织均有IP3RI、Ⅱ、Ⅲ亚型表达,DI大鼠IP,RI、Ⅱ亚型表达显著高于DS大鼠（P〈0．05）,IP,RⅢ亚型表达差异无统计学意义（P〉0．05）。【结论】肌醇脂质信号传导通路可能参与了逼尿肌不稳定的形成,IP3含量的增高及IP3RI、Ⅱ亚型表达增强可能在其中起着重要作用。     

肝硬化大鼠血管平滑肌细胞Gq蛋白信号转导功能的研究

目的 为观察肝硬化大鼠动脉血管平滑肌细胞对血管紧张素Ⅱ（ＡＴ－Ⅱ）是否存在受体后Ｇｑ蛋白信号转导的异常。方法 采用总胆管结扎制血大鼠肝硬化模型，分离主动脉血管平滑肌细胞后进行细胞培养，并予免疫组化鉴定。分别采用细胞感应微生理探测系统、三磷酸肌醇（ＩＰ３）分析法、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测血管平滑肌细胞ＡＴ－Ⅱ受体介导的细胞外液酸化速率（ＥＣＡＲ）、ＩＰ３生成、Ｐ４２／４４丝裂原激活的蛋白激酶（ＭＡＰ     

不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌Ca^2＋／CaM—PP活性变化

目的：研究不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌Ca^2 /CaM-PP活性变化。方法：应用酶活性测定方法，对12周，16周SHR大鼠和Wistar大鼠的A、MA、CA血管平滑肌Ca^2 /CaM-PP进行活性比较，结果：Wistar大鼠随年龄增长，Ca^2 /CaM-PP活性呈上升趋势，而SHR鼠其阻力血管该酶活性降低，但随年龄变化不明显。结论：（1) 自发性高血压使阻力血管平滑肌Ca^2 /CaM-PP下降，但12周与16周间无显著差异。（2）不同种鼠血管平滑肌该酶活性变化不同。     

滨蒿内酯对离体大鼠主动脉平滑肌作用的研究

目的 :研究滨蒿内酯 (scoparone ,Scop)对离体大鼠主动脉平滑肌张力的影响。方法 :通过测定离体血管环张力变化 ,观察Scop对主动脉平滑肌的舒张作用及与苯肾上腺素 (PE)、普萘洛尔 (Prop)和氯化钾 (KCl)之间的相互作用。结果 :Scop舒张离体主动脉平滑肌 ,并且对内皮完整 (EC +)标本的舒张作用明显大于去内皮 (EC - )标本 ,半抑制浓度 (IC50 )分别为 (10 0± 0 4 ) μmol/L(CE +)与 (83 2± 0 8) μmol/L(EC - ) (P <0 0 1) ;Scop使PE量效曲线下移 ,呈非竞争性抑制 ,亲和力指数 (PD2 )分别为 4 93± 0 0 5 (EC +)与 2 94± 0 14 (EC - ) ;Prop(1μmol/L)对Scop舒张血管平滑肌作用无影响 ;Scop不能抑制Prop所致血管平滑肌收缩 ;Scop对血管平滑肌的依内钙及依外钙性收缩均有明显抑制作用。结论 :Scop可舒张离体大鼠主动脉平滑肌 ,此作用与内皮细胞的功能有一定关系。Scop抑制血管平滑肌依内钙与依外钙性收缩可能是Scop舒张血管平滑肌的主要机制     

催产素舒张血管的作用及其机制

目的观察催产素（OT）的血管舒张作用并探讨其可能机制。方法采用大鼠离体血管功能实验装置,描记张力变化,血管按随机数表分组,每组6枚血管环,分别保留或去除内皮,各阻断剂预处理30min之后做OT舒张曲线。结果 OT不能舒张苯肾上腺素（PE）预收缩的内皮完整非孕大鼠血管环。而OT（0.1U-3.2U）浓度依赖性地舒张苯肾上腺素（PE）预收缩的内皮完整或去除内皮的大鼠胸主动脉环。一氧化氮合成酶抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯（L-NAME）可抑制PE诱导的血管舒张作用（P〈0.01）;环氧合酶抑制剂吲哚美辛（Indo）对PE诱导的血管舒张作用无影响。钾通道阻断剂四乙胺（TEA）3mmol/L预处理可减弱OT对内皮完好血管的舒张效应。OT对PE诱导的血管舒张作用与Ca2＋浓度无关。结论 OT具有舒张孕鼠血管作用,其机制与NO-cGMP途径和血管平滑肌钾通道有关。     

肺、脑动脉内皮和平滑肌细胞急性缺氧时某些第二信使的变化

目的研究急性缺氧时细胞内第二信使系统的变化。方法培养猪肺、脑动脉内皮细胞与平滑肌细胞,测定在急性缺氧时胞浆游离钙、磷酸肌醇和环核苷酸的变化。结果肺动脉内皮细胞缺氧时有Ｃａ内流增加、ＩＰ３和ｃＡＭＰ无明显变化,ｃＧＭＰ于缺氧４ｍｉｎ升至高峰,随即回降;而脑动脉内皮细胞缺氧时不仅有Ｃａ内流,且有内钙释放、ＩＰ３和ｃＡＭＰ增多,ｃＧＭＰ浓度在缺氧８ｍｉｎ时仍继续上升。肺与脑动脉平滑肌细胞间缺氧时第二信使的变化,仅有ｃＧＭＰ不同。结论内皮细胞的异质性可能与两血管反应性差异有关。     

平滑肌细胞双信使系统与钙火花相关性研究

在平滑肌细胞的肌醇脂质代谢中产生的肌醇三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)是胞内重要的第二信使,由它们激动的IP3/Ca2+和DAG/蛋白激酶C(PKC)途径,即是调控胞内许多生理过程的重要信号途径。因此又把这一以肌醇磷脂代谢为基础的细胞信号系统称为“双信使系统”。大量研究表明,双信使系统与平滑肌细胞胞内Ca2+浓度的调节、胞内局部Ca2+释放事件、钙火花的产生和调控紧密相关。本文就此方面的研究进展进行综述。     

C-TYPE NATRIURETIC PEPTIDE INHIBITS UPREGULATION OF αl-ADRENOCEPTOR AND INOSITOL 1,4,5-TRISPHOSPHATE RECEPTOR IN RAT VASCULAR SMOOTH MUSCLE AFTER VASCULAR ENDOTHELIAL INJURY

Objective. In a model of balloon injury of rat aortic endothelium, the effects of C-type natriuretic peptide(CNP) on al-adrenoreceptar and inositol 1,4,5-triphosphate (IP3) receptor were studied. Methods. Aortic injuries were produced by vascular endothelium-denudation, αl- adrenoreceptor in smooth muscle sarcolemma and IP3 receptor in smooth muscle sarcoplasmic reticulum in the rat aorta were assayed by radioactive analysis method. Results. It was found that neoinfma was formed and the coraents of DNA, collagen and elastin of each intimamedia were significantly increased in 7 days and 21 days after balloon injury of rat aorta, α1-adrenoreceptor in smooth muscle sarcolemma and IP3 receptor in sarcoplasmic reticulum were also upwodated. Results also showed that the administration of CNP i.p significantly decreased the contents of DNA, collagen and elaslin of each iraima-media, and inhibited the up-regulation of α1-adrenoreceptor and IP3 receptor. Conelusion. The inhibition of the up-regulation of α1-adrenoreceptor and IP3 receptor by CNP might be one of the mechanisms of its suppressive action on intimal proliferation.     

败血症大鼠肝细胞内核膜三磷酸肌醇受体的改变

目的：观察早期、晚期败血症大鼠肝细胞内核膜上１,４,５三磷酸肌醇受体（ｉｎｏｓｉｔｏｌ１,４,５ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ＩＰ３Ｒ）的变化。方法：通过结扎并穿刺盲肠制作大鼠败血症模型,差速离心分离内核膜,［３Ｈ］ＩＰ３放射配体分析肝内核膜ＩＰ３Ｒ与其配体的最大结合容量（Ｂｍａｘ）及亲和力（Ｋｄ）。４５Ｃａ２＋转运测定内核膜ＩＰ３Ｒ释放Ｃａ２＋功能。结果：早期和晚期败血症Ｂｍａｘ分别增加１４％（Ｐ＜０．０５）和９１％（Ｐ＜０．０１）。但Ｋｄ值无明显变化（Ｐ＞０．０５）。ＩＰ３引起４５Ｃａ２＋转运在败血症时也相应增加。结论：在败血症时肝细胞核被膜ＩＰ３Ｒ发生上调,其释放Ｃａ２＋的能力增强,但结构可能未发生变化。     

三磷酸肌醇剌激心肌成纤维细胞的增殖

目的　探讨钙调神经磷酸酶 (CaN)依赖的信号通路在三磷酸肌醇 (IP3)剌激的乳鼠心肌成纤维细胞 (FBs)增殖中的作用。方法　以培养的FBs为模型 ,用IP3剌激FBs内Ca2 +释放 ,环孢素A(CsA)阻断CaN ,维拉帕米 (Ver)阻断FBs钙通道 ,检测FBs的CaN、丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)、蛋白激酶C(PKC)活性 ,用3H 亮氨酸及3H 胸腺嘧啶掺入量作为反应FBs增殖的指标。结果　IP3剌激组FBs蛋白核酸合成速率明显增高 ,与对照组相比差异显著 (P <0 .0 1 ) ;CsA及Ver能明显抑制IP3介导的FBs蛋白核酸合成速率增高 ,与IP3剌激组相比差异显著 (P <0 .0 1 )。同时发现IP3剌激组CaN、PKC活性与对照FBs相比差异显著 (P <0 .0 5,P <0 .0 1 )。CsA和Ver抑制IP3介导的FBs的CaN活性增高 ,Ver抑制IP3介导的FBs的PKC活性增高。结论　CaN在IP3剌激的FBs增殖中起重要作用 ,但CaN信号通路不是IP3剌激FBs增殖的唯一信号通路 ,其它信号通路也可能参与了IP3剌激的FBs增殖。     

钙超载大肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变

目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞内是否存在钙离子（Ｃａ＾２＋）稳态调节异常。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）与正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）静息态的胞浆与核内游离Ｃａ＾２＋水平（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ,〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）,以及在多各药物刺激下Ｃａ＾２＋稳态调节的差异。结果 两种Ｖ     

三磷酸肌醇、钙离子在胃泌素促人结肠癌SW480细胞株增殖中的作用

目的：探讨胃泌素对人结肠癌细胞株ＳＷ４８０内三磷酸肌醇（ＩＰ３）、钙离子（Ｃａ２＋）的影响及其在细胞增殖中的作用,为结肠癌抗信息传导治疗提供实验依据。方法：①３Ｈ－肌醇标记细胞进行ＩＰ３分析。②应用Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ－２检测细胞内Ｃａ２＋的浓度。③ＭＴＴ比色分析法检测活细胞数（吸光度Ａ值）。结果：５肽胃泌素（Ｐｅｎｔａｇａｓｔｒｉｎ,ＰＧ）可使ＳＷ４８０细胞内ＩＰ３、Ｃａ２＋水平升高,同时活细胞数Ａ值增加;５肽胃泌素与其受体拮抗剂丙谷胺（Ｐｒｏｇｌｕｍｉｄｅ,ＰＧＬ）合用时,癌细胞内ＩＰ３、Ｃａ２＋水平和活细胞数Ａ值均无明显变化。结论：提示胃泌素可能通过肌醇脂质信号传导途径促进人结肠癌细胞株ＳＷ４８０的增殖     

Different effects of isoflurane and sevoflurane on cytotoxicity

Background Isoflurane, a commonly used inhaled anesthetic, induces apoptosis in primary rat cortical neurons of rat in a concentration- and time-dependent manner by an unknown mechanism. We hypothesized that isoflurane induced apoptosis by causing abnormal calcium release from the endoplasmic reticulum （ER） via activation of inositol 1,4,5-trisphosphate （IP3） receptors. Sevoflurane has a reduced ability to disrupt intracellular calcium homeostasis and is a less potent cytotoxic agent. This study examined and compared the cytotoxic effects of isoflurane and sevoflurane on rat primary cortical neurons and their relationship with disruption of intracellular calcium homeostasis and production of reactive oxygen species （ROS）.
Methods Primary rat cortical neurons were treated with the equivalent of 1 minimal alveolar concentration （MAC） of isoflurane and sevoflurane for 12 hours. MTT reduction and LDH release assays were performed to evaluate cell viability. Changes of calcium concentration in the cytosolic space, [Ca^2＋]c, and production of ROS were determined after exposing primary rat cortical neurons to isoflurane and sevoflurane. We also determined the effects of IP3 receptor antagonist xestospongin C on isoflurane-induced cytotoxicity and calcium release from the ER in primary rat cortical neurons.
Results -Isoflurane at 1 MAC for 12 hours induced cytotoxicity in primary rat corticai neurons, which was also associated with a high and fast elevation of peak [Ca^2＋]c. Xestospongin C significantly ameliorated isoflurane cytotoxicity in primary cortical neurons, as well as inhibited the calcium release from the ER in primary cortical neurons. Isoflurane did not induce significant changes of ROS production in primary rat cortical neurons. Sevoflurane, at equivalent exposure to isoflurane, did not induce similar cytotoxicity or elevation of peak [Ca^2＋]c in primary rat cortical neurons.
Conclusion These results suggested that isoflurane induced elevation in [Ca^2＋]c, partially via elevated a     

三磷酸肌醇受体各亚型在大鼠气道平滑肌细胞中的表达以及在慢性哮喘中的作用

目的检测正常大鼠气道平滑肌细胞中三磷酸肌醇受体(Inositol 1,4,5 triphosphate receptors, IP3R)各亚型的表达以及在慢性哮喘中的作用.方法采用胶原酶消化法培养大鼠气道平滑肌细胞,RT-PCR方法测定IP3R亚型的表达,并将纯化的PCR产物与pGEM-T载体连接后进行DNA序列分析;卵蛋白致敏并激发大鼠制备慢性哮喘模型,RT-PCR测定各受体mRNA表达水平的变化.结果大鼠气道平滑肌细胞中IP3R的3种亚型共表达,测序结果与GenBank中登录的序列完全一致;制备的慢性哮喘模型中,病理切片显示平滑肌层及粘膜层明显增厚,IP3R1的表达较对照组有明显的上调P＜0.01.结论大鼠气道平滑肌细胞中IP3R 3种亚型共表达,提示存在着复杂的细胞内钙调节机制;并且IP3R1在慢性哮喘的发生过程中可能起了一定的作用.     

丙泊酚预处理对兔心肌缺血再灌注损伤能量代谢的影响(英文)

目的观察丙泊酚预处理对兔心肌缺血再灌注损伤（MIRI）能量代谢的影响。方法实验用新西兰雄性大白兔40只，随机分为4组（n=10）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IP组）和丙泊酚预处理组（PP组）。采用高效液相色谱（HPLC）法测定心肌组织中高能磷酸化合物三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）和总腺苷酸量（TAN）、能荷（EC）的含量。检测心肌组织Na＋／K＋-ATPase，Ca^2＋／Mg2＋-ATPaSe和血清乳酸脱氢酶（LDH）及肌酸激酶（CK）的活性。结果IP组和PP组较IR组的ATP、ADP、AMP、TAN和EC含量明显增加，ATPase活性显著升高，LDH、CK-MB含量明显降低（P〈0．05，P〈0．01）。而IP组与PP组比较，各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论丙泊酚预处理同缺血预处理一样可改善缺血再灌注损伤时的心肌能量代谢，其作用机制可能与增加缺血区的心肌能量储备。保护ATPase活性，改善能量代谢障碍有关。