改良羊水细胞染色体制备法在产前诊断中的应用

羊水细胞培养及染色体制备是染色体病产前诊断的主要手段.由于羊水细胞培养一直存在技术要求高,难度大,培养时间长,易污染,分裂相较少等问题,是许多单位开展产前诊断的难点.近年来,我们在传统的羊水细胞培养技术基础上进行不断探索改进,建立了一种操作简便、快速、稳定、成功率高的羊水细胞染色体制备方法[1,2],取得了满意的效果.     

羊水细胞培养40例结果报告

自1966年Steeld和Breg进行羊水细胞培养,并染色体分析成功以来,此项技术巳日益广泛地用于产前诊断。由于影响因素较多,羊水细胞培养仍较困难。近年来国内陆续有较高成功率的报告。本文报告40例羊水细胞培养结果。取材与方法一、羊水来源:采自行羊膜穿刺引产的孕妇,孕期均选16～20周者,抽20毫升羊水,分装2支灭菌离心管内,送实验室。     

产前诊断羊水细胞培养分析

目的探讨羊水细胞培养用于产前诊断的临床效果。方法对我院2006年4月至2007年12月产科门诊产前诊断指征疑有胎儿染色体异常孕妇46例,采用羊水细胞改良培养方法,进行产前诊断,分析胎儿染色体异常的主要核型与频率。结果43例羊水细胞一次培养成功率为95.6%,采用改良羊水细胞培养,培养时间缩短,检出染色体异常核型3例,异常率为6.97%。结论羊水细胞培养可有效判断分析胎儿染色体异常核型,为孕妇是否终止妊娠提供了确切依据。     

993例遗传咨询病例的染色体研究

我院于1980年1月开展遗传咨询门诊及染色体核型分析,现对993例咨询结果报道如下。临床资料993例中,女性622例,男性271例,年龄1天～64岁。咨询原因见附表,根据体格检查,生殖器检查,外周血染色体G 带、C 带、性染色质检查,血和羊水甲胎蛋白的测定,羊水细胞培养,绒毛染色体G 带、R 带检查,家系调查等结果进行分析。     

羊水细胞培养用于染色体病产前诊断分析

目的探讨羊水细胞培养对孕中期孕妇进行产前诊断的可行性及必要性,防止染色体病患儿的出生。方法对293例有产前诊断指征的孕妇进行羊膜腔穿刺,采取羊水细胞培养,制备中期染色体,分析胎儿核型,进行产前诊断。结果发现染色体异常14例,异常率4．78％,其中数目异常9例,结构异常5例,不同产前诊断指征分组中的异常率不同,以夫妇一方为染色体异常组异常率最高。结论妊娠中期对有产前诊断指征的孕妇进行羊水细胞培养染色体核型分析是产前诊断的重要手段,而血清学筛查,染色体检查和超声检查三者相互结合对于预防出生缺陷意义重大。     

探讨羊水染色体检查在产前诊断中的应用

目的分析羊水染色体检查在产前诊断中的应用价值,避免异常染色体婴儿的出生。方法对924例疑似胎儿染色体异常孕妇实施羊水染色体检查。结果羊水细胞培养成功率为99.8%,检查出染色体异常的有38例,其中21-三体的有8例,18-三体的有8例,性染色体结构异常的有6例,性染色体数目异常的有2例,常染色体结构异常的有14例。结论羊水染色体检查是产前诊断中比较安全、可靠的一种技术,在指导我国优生优育工作者起着重要的作用,值得在医疗实践中推广使用。     

妊娠中期235例羊水细胞培养分析

目的探讨妊娠中期羊水细胞培养对产前诊断的可行性进行。方法235例有产前诊断指征的孕妇．在16-24周行羊膜腔穿刺取羊水细胞培养,分析胎儿染色体核型。结果羊膜腔穿刺成功234例,成功率99．57％;羊水细胞培养成功214例．成功率91．45％;检出异常核型8例,异常检出率（3．42％）。结论有产前诊断指征的孕妇应做羊水细胞产前诊断。     

产前胎儿质量预测研究

“控制人口数量,提高人口质量”这是我国的人口政策,为了提高人口的素质,产前预测胎儿质量是优生学的重要课题。近20年来,羊水穿刺作为产前诊断的手段,已广泛应用于临床,国内外大量的实践证明,是比较安全的诊断方法,是防止染色体缺陷儿出生的重要手段之一。兹将我省羊水细胞培养协作组1983年6月～1984年6月共进行羊水细胞培养611例报导如下。资料来源与操作1.羊水的收集:羊水标本采集由7个组选自     

改良荧光原位杂交技术在产前诊断中的应用

目的探讨改良荧光原位杂交(FISH)技术快速产前诊断染色体异常的应用价值。方法改变FISH操作过程中杂交液用量,对258例孕妇羊水细胞进行FISH快速产前诊断和常规细胞培养核型分析。结果 258例羊水样本常规细胞培养结果与FISH检测常见的染色体数目与核型分析的结果符合率为100%。结论优化FISH技术能快速、准确检测常见的5种染色体数目异常,使用试剂量少、价廉,可作为经典染色体核型分析的辅助方法。     

B超引导下羊膜腔穿刺术在产前诊断中的应用

目的探讨B超引导下的羊膜腔穿刺术在产前诊断应用中的安全性及羊水细胞染色体核型分析、地中海贫血基因检测在产前诊断中的应用价值。方法选取2009年11月至2011年1月妊娠16～27周在茂名市妇幼保健院行B超引导下羊膜腔穿刺术的孕妇103例,对羊水中胎儿脱落细胞进行培养,做染色体核型分析;夫妇双方同种类型地中海贫血者,行羊水细胞地中海贫血基因检测。结果B超引导下的羊膜腔穿刺术103例,羊水细胞培养成功102例,检出异常核型9例,检出率为8．8％,其中三体综合征1例,占11．1％,其他异常8例,占88．9％;羊水地中海贫血基因检测24例,其中重型地中海贫血5例,占20．8％。结论产前针对有指征的孕妇于中孕期行B超引导下羊膜腔穿刺术,进行羊水细胞培养染色体核型分析及地中海贫血基因检测十分必要,B超引导下羊膜腔穿刺术是目前安全、有效、可靠的介入性产前诊断方法。     

Potential role of culture mediums for successful isolation and neuronal differentiation of amniotic fluid stem cells

In recent years, the use of stem cells has generated increasing interest in regenerative medicine and cancer therapies. The most potent stem cells derive from the inner cell mass during embryonic development and their use yields serious ethical and methodological problems. Recently, a number of reports suggests that another suitable source of multipotent stem cells may be the amniotic fluid. Amniotic fluid mesenchymal stem cells (AFMSCs) are capable of extensive self-renewal, able to differentiate in specialized cells representative of all three germ layers, do not show ethical restriction, and display minimal risks of teratomas and a very low immunogenity. For all these reasons, amniotic fluid appears as a promising alternative source for stem cell therapy. Their recent discovery implies a lack of knowledge of their specific features as well as the existence of a protocol universally recognized as the most suitable for their isolation, growth and long-term conservation. In this study, we isolated stem cells from six amniotic fluids; these cells were cultured with three different culture mediums (Mesenchymal Stem Cell Medium (MSCGM), PC-1 and RPMI-1640), characterized by cytofluorimetric analysis, and then either frozen or induced to neuronal differentiation. Even if the immunophenotype seemed not to be influenced by culture medium (all six samples cultured in the above-mentioned mediums expressed surface antigens commonly found on stem cells), cells showed different abilities to differentiate into neuron-like cells and to re-start the culture after short/long-term storage. Cells isolated and cultured in MSCGM showed the highest proliferation rate, and formed neuron-like cells when sub-plated with neuronal differentiation medium. Cells from PC-1, on the contrary, displayed an increased ability to re-start culture after short/long term storage. Finally, cells from RPMI-1640, even if expressing stem cells markers, were not able to differentiate in neuron-like cells. Further studies are still needed in order to assess the effective role of culture medium for a successful isolation, growth, differentiation and storage of AFMSCs, but our data underline the importance of finding a universally accepted protocol for the use of these cells.     

羊水栓塞18例临床分析

目的通过对18例羊水栓塞(AFE)患者的临床分析,找出其诱发高危因素,并提出防治措施。方法对我院1995年1月至2010年12月15年间发生的12例羊水栓塞患者及县乡转入的6例羊水栓塞患者的临床资料进行回顾性分析。结果产时干预(静脉滴注催产素及蓖麻油炒鸡蛋,人工剥膜)、胎膜早破、宫缩过强、瘢痕子宫、经产妇、剖宫产术等是羊水栓塞的诱发因素。本院发生的12例AFE患者中,6例救治成功,6例死亡,死亡率50%。以胸闷、憋气、呼吸困难、突发呼吸心跳骤停起病的病例抢救成功率低;以阴道出血为主要表现的病例抢救成功率高。结论早期诊断,及时应用肾上腺素皮质激素,尽早使用肝素,快速补充血容量及纤维蛋白质,去除致病因子及早行子宫切除术,可提高抢救的成功率;加强产时保健。保护、支持,促进自然分娩,减少不必要的医疗干预是预防AFE发生的有效措施。     

孕期优生筛查对出生缺陷干预效果的影响分析

目的探讨检测孕妇血清中妊娠相关蛋白A(PAPPA)、甲胎蛋白(AFP)、绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平,结合B超检查、羊水检测等手段,对江苏省苏北某地区目标疾病唐氏综合征、神经管缺陷进行筛查和诊断。方法本筛查采用时间分辨荧光法测定孕妇血清中PAPPA、AFP、β-HCG水平,结合各种相关的影响因素,进行风险评估。结果接受产前筛查的中孕孕妇1807例中,共筛查出中孕高风险21-三体、18-三体、神经管缺损110例,阳性率达6.09%;且高危孕妇筛查阳性率随着孕妇年龄的增加而升高。110例筛查阳性孕妇中,有84例孕妇接受羊水染色体检查,共检查出染色体异常2例,其中21-三体1例;18-三体1例;B超检查出神经管缺损1例(脊柱裂1例),脑积水1例,先天性心脏病2例。均行引产术,引产率100%。结论采取检测孕妇血清中PAPPA、AFP、β-HCG水平,结合B超、羊水检测手段,对筛查唐氏综合征、神经管缺陷等出生缺陷,降低其出生率有重要意义。     

两种唐氏综合征产前筛查方法的比较分析

目的比较酶联免疫吸附技术(ELISA)和全自动时间分辨荧光免疫分辨技术(解离增强镧系元素荧光免疫分析,DELFIA)筛查唐氏综合征(Down's syndrome,DS)的筛查效率。方法采用ELISA法和DELFIA法分别对6732例孕妇的血清AFP、HCG、uE3三项指标进行检测,并用两种方法各自的配套筛查软件对DS的风险值进行评估,对部分高风险孕妇进行了羊水染色体的检查,未进行羊水染色体检查的孕妇均随访至妊娠结局一个月。结果ELISA法有489例孕妇为高风险,DELFIA法有686例孕妇为高风险。羊水染色体核型分析结果有4例为21-三体综合征,1例平衡移位,2例为18-三体综合征;其他孕妇妊娠结局显示有6例死胎引产,其中1例为21-三体综合征(两种筛查方法都显示假阴性)。结果显示ELISA的筛查阳性率为7.3%、假阳性率为7.1%、假阴性率为12.5%、检出率为87.5%;DELFIA筛查阳性率为10.2%、假阳性率为10.1%、假阴性率为12.5%、检出率为87.5%。两种方法比较无显著性差异(P>0.05)。两种方法各自校正中位数后重新计算风险值,5例唐氏患儿都能检出。结论ELISA法和DELFIA法都可以用于DS的筛查,各实验室要建立自己的MOM值,对提高DS的筛查效率,降低DS患儿的出生具有重要的意义。     

妊娠期肝内胆汁淤积症对羊水性状与妊娠结局的影响

目的分析妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）对羊水性状与妊娠结局的关系。方法对我院2006年3月至2009年9月住院分娩的患者资料进行回顾性分析,统计羊水污染率、新生儿窒息率、围生儿死亡率及剖宫产率等。结果120例ICP中轻度50例,重度70例。羊水污染44例（ICP羊水Ⅱ级20例,ICP羊水Ⅲ级24例）,重度ICP的羊水污染率为57．22％。44例ICP羊水Ⅱ级及Ⅲ级病例中出现11例新生儿窒息。结论ICP的羊水性状与病情程度基本一致,羊水污染预示着不良的妊娠结局,适时终止妊娠可降低围生儿病率。     

复发性胬肉羊膜移植治疗探讨

目的探讨羊膜移植治疗复发性胬肉的临床效果。方法使用新鲜羊膜移植治疗复发性胬肉70例(79眼),手术切除复发胬肉后,即将羊膜移植片各方固定在巩膜浅层4~5针,确保移植片展平,将羊膜与结膜间断缝合,术后加压包扎3d左右,局部及全身应用激素和抗生素,术后14d拆线。术后随访12~36个月。结果70例(79眼)患者只有3例(3只眼)复发,其余67例(76眼)全部治愈,治愈率95.71%。结论羊膜移植可以有效减少翼状胬肉的复发,且取材容易、经济,不需通过眼库取得,尤其适合基层医院。     

经宫颈羊水置换术治疗产时羊水胎粪污染探讨

目的：评价经宫颈羊水置换术治疗产时羊水胎粪污染的疗效。方法我院在2010年1月-2013年1月期间共收治了37例羊水胎粪污染的孕妇,对所有孕妇均采取了羊水置换术治疗,统计治疗后的疗效。结果37例接受羊水置换术的孕妇在分娩羊水污染程度得到了极大的改善,其中29例羊水澄清,无1例出现羊水Ⅲ°污染;所有新生儿中均未出现MAS症,仅有1例出现了新生儿窒息,且没有1例出现术后并发症。结论经宫颈羊水置换术,可有效改善胎儿宫内羊水胎粪污染的状况,降低MAS的发生率和新生儿的窒息率。     

未足月胎膜早破后羊水指数对孕妇妊娠结局及新生儿的影响

目的 探究未足月胎膜早破后羊水指数对孕妇妊娠结局及新生儿的影响.方法 选择2015年4月至2016年8月本院收治的120例未足月胎膜早破孕妇为研究对象,按羊水量分为对照组(羊水量正常)和观察组(羊水量异常),每组60例.比较两组孕妇分娩方式、围产期并发症发生情况以及新生儿情况.结果 两组孕妇经阴助产率比较,差异无统计学意义(P＞0.05);观察组剖宫产率为65.00％,明显高于对照组的25.00％;观察组经阴正常产率为23.33％,低于对照组的60.00％;观察组脐带脱垂、产褥感染、绒毛膜羊膜炎等并发症发生率明显高于对照组,差异有统计学意义(均P＜ 0.05);观察组新生儿死亡率为18.33％,新生儿宫内感染率为15.00％,羊水粪染率为13.33％,新生儿窒息率为16.67％,对照组新生儿死亡率为5.00％,新生儿宫内感染率为1.67％,羊水粪染率为1.67％,新生儿窒息率为3.33％,组间比较,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 未足月胎膜早破后羊水过少或过多均可增加孕妇剖宫产率,增加孕妇并发症及新生儿不良情况的风险,可将胎膜早破后检测的羊水指数作为观察母婴情况的重要指标.