实时荧光定量PCR法在检测泌尿生殖道感染病原体中的应用

目的评价荧光定量PCR（FQ-PCR）在实验室检测泌尿生殖道病原体、淋病奈瑟菌（NG）、解脲脲原体（UU）和沙眼衣原体（CT）中的应用。方法 464例拟诊为泌尿生殖道感染者的临床标本,用培养法检测NG、UU病原体和胶体金免疫层析法检测CT抗原,对同一标本同时用FQ-PCR检测NG、UU或CT的核酸。结果 FQ-PCR和培养法检出NG阳性率分别为28.4%（63/222）和14.9%（33/222）,P〈0.01,检测UU的阳性率分别为41.7%（126/302）和32.5%（98/302）,P〈0.05,FQ-PCR和金标法检测CT阳性率分别为18.2%（57/314）和6.1%（19/314）,P〈0.001,FQ-PCR对3种病原体的检出率均明显高于培养法或金标法。结论 FQ-PCR法检测NG、CT以及UU在临床诊断NG,UU和CT感染中具有重要应用价值,是常规方法的有效补充。     

结核分枝杆菌及多重耐药性的快速检测:MTB/RIF实验及检测诊断系统

我国是结核病及耐药结核高发地区,年新发结核病例130万,新发结核病例耐药率为5.7％.痰涂片抗酸染色和临床放射影像学是结核病尤其是肺结核的主要诊断手段.但痰涂片阳性率偏低,新发肺结核病例涂阳率仅28％,而且结核病的影像学表现缺乏特异性.缺乏简单、准确、快速的诊断手段一直是我国实现结核病防控目标的瓶颈.结核分枝杆菌/利福平耐药(MTB/RIF)检测诊断系统运用半槽式(hemi-nested)RT-PCR及荧光探针报告技术(beacon technology),特异性扩增并检测结核分枝杆菌特有并与利福平耐药密切相关的rpoB基因片段.以PCR循环阈值反映标本中的结核分枝杆菌载量,进行半定量分析.该系统以结核杆菌培养作为标准对照,对疑诊肺结核患者痰标本的诊断总体敏感性为73.1％～90.0％,特异性99.0％～99.5％;对利福平耐药基因(MDR-TB的分子生物学标记物)诊断的敏感性为97.2％、特异性为98.3％.上样后系统可在2h内自动完成诊断及结果打印程序.由于系统特异性扩增rpoB基因片段,因此与非结核分枝杆菌及呼吸系统常见病原体无交叉反应.除外痰标本,该系统还能用于多种体液(胸腔积液、尿、脑脊液以及支气管肺泡灌洗液等)和肺组织匀浆中结核分枝杆菌的检测.该系统的诊断敏感性较抗酸染色高l00倍,与结核分枝杆菌培养相近,但后者从加样至报告的平均时间为16d(平板培养基)或30d(液体培养基).与传统结核诊断实验室诊断技术相比,本系统还具有操作简便、不产生传染性生物气溶胶等优点.     

痰液和BALF的结核分枝杆菌培养对部队肺结核患者的诊断价值比较

目的 评估痰和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)的结核分枝杆菌快速培养对部队肺结核患者的诊断价值.方法 以来自部队的痰涂片检测阴性的疑似肺结核患者为研究对象,收集病员的痰液和BALF标本,采用BACTEC MGIT 960液体培养法(简称MGIT 960法)分别进行结...     

夹层杯集菌离心涂片法初筛肺结核患者的临床应用价值

目的探讨夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌提高门诊肺结核患者诊断准确率的临床应用价值。方法对1 762例门诊疑似肺结核患者的痰标本同时进行直接涂片法、浓缩集菌涂片法和夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌,比较3种方法对即时痰的阳性检出率;对145例确诊肺结核住院患者的痰标本同时进行浓缩集菌涂片法和夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌,比较2种方法对清晨痰的阳性检出率。结果夹层杯集菌离心涂片法检测门诊即时痰标本抗酸杆菌阳性检出率为15.6%,明显高于浓缩集菌涂片法(9.2%)和直接涂片法(5.9%)(P<0.05);同时夹层杯集菌离心涂片法在检测确诊肺结核住院患者的清晨痰标本阳性检出率显著高于浓缩集菌涂片法(P<0.05)。结论夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌能够有效地提高门诊患者的确诊率,减少肺结核病的漏诊率,为临床医生的诊断治疗提供了重要参考依据。     

痰菌阴性L型菌阳性的60例肺结核病人的临床分析

为了解痰菌阴性(-)L型菌阳性( )肺结核病人的临床表现和特点，对204例痰涂片及培养均阴性的肺结核病人做痰标本L型菌分离培养，依据L型菌分离培养的结果分为60例L型菌( )组及144例L型菌(-)组，并将其主要症状、X线表现及治疗结果进行比较。结果204例痰菌阴性肺结核L型菌检出率为29．4％，L型菌( )组的干酪病灶和干酪空洞多于L型菌(-)组，L型菌(-)组病灶的显著吸率(病灶吸收≥50％)高于L型菌( )组。作者认为，L型菌的存在提示病变有活动性，结核病的治疗必须坚持合理的全程化疗，直至痰中消灭L型菌。     

荧光定量PCR测定支气管肺泡灌洗液中Tb DNA诊断肺结核的临床价值

目的探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）技术测定支气管肺泡灌洗液中Tb DNA在肺结核诊断中的价值。方法对43例肺结核患者、63例非肺结核患者支气管肺泡灌洗液（BAFL）用FQ-PCR检测Tb DNA。结果荧光定量PCR检测BALF诊断肺结核的度=65．1％；特异度=98．4％；准确度=84．9％。结论荧光定量PCR方法检测BALF中Tb DNA诊断肺结核具有很好的敏感性、特异性，对肺结核的诊断有价值。     

肺结核诊断中PCR和多项指标联合应用

对91例肺结核和53例结核性胸膜炎患者痰、胸水标本进行结核-聚合酶链反应,91例肺结核进行痰涂片检测,并设53例非结核性肺部疾病作为对照。所有病人均进行PPD-S皮试和血清活动性结核标记物测定。结果表明:结核组痰、胸水聚合酶链反应和痰涂片阳性率分别为45.83％和23.08％(P<0.01)。对聚合酶链和其他指标在临床诊断肺结核中的应用及影响因素进行了分析。     

肺结核病人痰涂片和培养结果与临床关系的分析

肺结核病人痰涂片和培养阳性与阴性的4种组合形式各占多大比例,以及它们的临床意义对于临床医生正确估价涂片和培养在结核病诊断和疗效监测中的作用,是有价值的。 我们在研究中常规留取住院肺结核病人晨痰137份,按标准化方法进行结核菌的分离培养。每份痰标本同时接种7～9种培养基(包括改良罗氏、丙酮酸钠、白芷改良和小川氏4种培养基)。痰涂片按标准化常规方法操作,抗酸染色并作镜检。 结果:137份痰标本涂片(简称涂)阳性率为41.6％(57/137),累计培养(简称培)阳性率为50.4％(69/137),二法相差不显著(t=1.46,P>0.05)。 137份痰标本中,涂( )培(-)9份,占6.6％。涂(-)培( )标本21份,占15.3％。这     

中西医结合治疗耐多药肺结核疗效观察

目的：观察中西医结合治疗耐多药肺结核的疗效。方法：对耐多药肺结核61例随机分为观察组30例及对照组31例。对照组采用全身抗结核方案治疗,观察组在全身抗结核方案治疗的同时,加用局部介入用药并配合中药进行综合治疗。结果：观察组痰菌阴转率96．7％,对照组痰菌阴转率64．5％,两组比较,差异非常显著（P〈0．01）;观察组病灶总显效率96．7％,对照组病灶总显效率54．7％,两组比较,差异非常显著（P〈O．01）。不良反应两组比较,差异不显著（P〉O．05）。结论：采用中西医结合治疗耐多药肺结核疗效更为显著。     

卡介菌多糖核酸联用短程治疗肝功损害肺结核患者疗效观察

目的评价卡介菌多糖核酸（Polysacehafide nucleic aeidefraetion of BCG,BCG-PSN）作为免疫调节剂与异蝈肼、链霉素、利福喷丁和乙胺丁醇联用治疗初治痰涂阳性肝功损害肺结核患者的有效性和安全性。方法6l例因利福平治疗1—2周后出现肝功损害痰涂阳性肺结核患者随机分为试验组（3I例）和对照组（30倒）。试验组给予BCG—PSN与异烟肼、链霉素、利福喷丁和乙胺丁醇联用。对照组仅给予相同联合化疗，观察并分析其疗效及肝功能变化。结果试验组6个月痰菌阴转率、病变吸收好转率分别为93．2％和96．8％，对照组分别为83．3％和93．3％。经统计学处理。试验组6个月痰菌阴转率明显高于对照组（P〈0．05），两组病变吸收好转率无明显差异（P〉0．05）；而肝功能改善情况两组结果相近；试验组第6个月血清IgG、CD8（％）测值比对照组明显降低（P〈0.05），相反CD4（％）、CD4／CD8和C3测值比对照组明显增高（P〈0．05）。结论BCG-PSN注射液可通过改善患者免疫功能。明显提高短程化疗肝功能损害肺结核患者的初治疗效，且使用方便、安全。     

母牛分枝杆菌辅助治疗复治涂阳肺结核疗效观察

目的观察和评价母牛分枝杆菌（微卡）作为免疫调节剂辅助治疗复治涂阳肺结核的临床疗效与安全性。方法选取本院2006年3月-2008年11月期间93例复治涂阳肺结核患者,采用人院随机分组分成治疗组47例和对照组46例,两组化疗均采用3DRtSLE／6DRtE方案,治疗组加用母牛分枝杆菌（微卡）每2周1次,共9个月。观察治疗后两组患者肺部病灶吸收、痰菌阴转、临床症状等改变情况。结果疗程结束时治疗组与对照组胸部X线病灶显效率分别为89．4％和71．7％（P〈0．05）;空洞闭合率分别为87．2％和67．4％（P〈0．05）;治疗3、6、9个月末痰菌阴转率治疗组为65．9％、83．0％、95．7％,对照组为47．8％、65．2％、78.3％（P〈0．05）;疗程结束时治疗组与对照组临床症状改善无显著差异（P〉0．05）。治疗组母牛分枝杆菌不良反应：发热1例,皮下硬结1例。结论母牛分枝杆菌辅助治疗复治涂阳肺结核,能增强免疫细胞活性,促进肺部病灶吸收,提高痰菌转阴率,且安全性好,是较好的结核病免疫治疗制剂。     

母牛分枝杆菌辅助治疗复治涂阳肺结核疗效观察

目的观察和评价母牛分枝杆菌（微卡）作为免疫调节剂辅助治疗复治涂阳肺结核的临床疗效与安全性。方法选取本院2006年3月～2008年11月期间93例复治涂阳肺结核患者,采用入院随机分组分成治疗组47例和对照组46例,两组化疗均采用3DRtSLE/6DRtE方案,治疗组加用母牛分枝杆菌（微卡）每2周1次,共9个月。观察治疗后两组患者肺部病灶吸收、痰菌阴转、临床症状等改变情况。结果疗程结束时治疗组与对照组胸部X线病灶显效率分别为89.4%和71.7%（P〈0.05）;空洞闭合率分别为87.2%和67.4%（P〈0.05）;治疗3、6、9个月末痰菌阴转率治疗组为65.9%、83.0%、95.7%,对照组为47.8%、65.2%、78.3%（P〈0.05）;疗程结束时治疗组与对照组临床症状改善无显著差异（P〉0.05）。治疗组母牛分枝杆菌不良反应：发热1例,皮下硬结1例。结论母牛分枝杆菌辅助治疗复治涂阳肺结核,能增强免疫细胞活性,促进肺部病灶吸收,提高痰菌转阴率,且安全性好,是较好的结核病免疫治疗制剂。     

人工关节假体材料表面物理特性对结核分枝杆菌黏附的影响研究

目的：探讨不同人工关节假体材料表面物理特性对结核分枝杆菌（ MTB ）黏附的影响。方法以表面抛光涂层、钛涂层和羟基磷灰石涂层为实验材料,对材料进行表面形貌分析以及表面粗糙度、接触角和表面能的测定。选用MTB为研究菌株,体外共培养法培养,通过扫描电镜对MTB的形态、在材料表面的黏附情况和黏附量进行观察。综合评价人工关节假体材料的表面物理特性对细菌增殖和黏附的影响。结果钛涂层和羟基磷灰石涂层材料表面为疏水性材料,抛光涂层为亲水性材料,接触角及表面能存在显著性差异（P＜0．05）。细菌培养过程中3种材料菌液的D值无显著性差异（P＞0．05）。 MTB在钛涂层介面黏附量最多,羟基磷灰石涂层次之,抛光涂层介面最低,且各种材料间差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 MTB在人工关节假体材料表面的黏附与其表面物理特性有关,在粗糙度高及疏水性低的材料表面有较高的黏附性。     

莫西沙星与左氧氟沙星对青年耐多药肺结核的疗效研究

目的 比较莫西沙星与左氧氟沙星在治疗青年耐多药肺结核病（MDR-PTB）中的疗效与安全性.方法 选择青年MDR-PTB患者84例,随机分为两组.所有患者均给予相同的抗结核药物治疗,对照组患者加服左氧氟沙星片0.6 g/d,试验组患者加服莫西沙星片0.4 g/d,疗程均为12个月.观察两组痰结核杆菌阴转情况、疗效及不良反应发生情况.结果 试验组在治疗3、6、9、12个月时,结核杆菌阴转率均显著高于对照组（P＜0.05）,总有效率（90.48%）也显著高于对照组（54.76%）（P＜0.05）,而两组不良反应发生率无统计学差异（P＞0.05）.结论 莫西沙星较左氧氟沙星治疗青年MDR-PTB疗效更好,且安全可靠.     

脊柱结核单纯病灶清除术的疗效评价

目的探讨单纯结核病灶清除术治疗脊柱稳定性未完全破坏脊柱结核的疗效。方法 2007年1月至2009年12月手术治疗成人胸、腰椎脊柱稳定性未完全破坏脊柱结核患者53例,男29例,女24例;年龄22～73岁,平均36.2岁;病史3～48个月,平均17个月。按患者意愿分为两组,即实验组与对照组,其中实验组31例,对照组22例,对照组行彻底的清除病灶术,实验组行单纯结核病灶清除术,平均随访38个月,对比两组患者手术后疗效、并发症和经济费用。结果两组患者手术疗效无显著性差异（P〉0.05）,对照组患者并发症较重且费用明显增加（P均〈0.01）。结论脊柱结核单纯病灶清除术对于脊柱稳定性未完全破坏的患者,尤其是经济条件较差的患者仍不失为一种经济有效的治疗手段。     

卡介菌多糖核酸注射液对部队肺结核患者免疫球蛋白和C3、C4的影响

 目的 观察卡介菌多糖核酸注射液对部队肺结核患者抗结核治疗前后免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和补体C3、C4的影响,评价该药治疗肺结核的免疫调节作用.方法 肺结核患者随机分为治疗组和免疫治疗组.两组都使用短程标准抗结核方案2HRZF/4HR,免疫治疗组联合使用卡介菌多糖核酸注射液,治疗前和治疗开始后第1、2个月检查IgA、IgG、IgM和C3、C4,并与20例健康人血清作对照组.结果　和健康对照组比较,两组肺结核患者治疗前IgG、IgM和C3有不同程度下降(P＜0.05),而C4下降不明显(P＞0.05),治疗前两组肺结核患者上述指标间差异无显著性(P＞0.05);免疫治疗组采用卡介菌多糖核酸注射液后IgM、IgG和C3、C4明显增高,显著高于治疗组(P＜0.05),而IgA变化不明显(P＞0.05).卡介菌多糖核酸治疗组患者疗效好于对照组(P＜0.05).结论 卡介菌多糖核酸注射液具有调节肺结核患者机体免疫功能作用,可辅助提高抗结核药物对肺结核疗效.     

老年肺结核患者外周血NKG2A、NKG2D表达及相关分析

目的了解老年肺结核患者NKG2A、NKG2D表达水平的变化情况,为肺结核免疫治疗提供新思路和理论依据。方法应用流式细胞术分析100例老年初治肺结核患者和89例老年健康体检者外周血中NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D表达水平。结果结核组与体检组相比,NKG2D表达明显降低,NKG2A表达明显上调;单纯肺结核患者与肺结核合并肺外结核患者相比,后者NKG2A表达更高（P〈0.05）;在结核组中,NKG2D表达率随着病灶受累范围增加而明显下降（P〈0.05）;在菌阴肺结核组与菌阳肺结核组、空洞组与无空洞组之间,NKG2A、NKG2D表达率的差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论测定老年初治肺结核患者外周血NKG2A、NKG2D,对于了解其机体免疫功能状态、估计病情具有一定临床价值,为免疫治疗提供重要理论依据。     

Investigation of tuberculosis prevalence by acid-fast stain,culture and real-time PCR method in forensic autopsies

Tuberculosis (TB) is still one of the most important diseases and causes of death in the world. We aimed to investigate TB prevalence in forensic autopsy cases in Turkey by the acid-fast bacilli (AFB) staining, TB culture and real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) methods in paraffin-embedded tissues. From January 2012 to January 2015, 1676 tissue samples were examined under AFB staining and TB culture, and 85 paraffin-embedded tissue samples under RT-PCR from 14,083 prospectively-investigated forensic autopsy cases in the Istanbul Council of Forensic Medicine. Positivity with microbiological methods (AFB staining and/or TB culture and/or RT-PCR) was detected in 43 (0.3%) out of 73 (0.5%) cases in which TB was diagnosed with histopathological findings. Acid-fast bacilli were detected in 14 tissue samples by AFB staining, and a total of 11 tissue samples were found culture-positive in the Löwenstein-Jensen medium. Mycobacterium tuberculosis DNA was positive in 36 samples with RT-PCR. Eleven (15%) cases were detected as miliary tuberculosis. Microbiological sampling should accompany autopsy findings and histopathological sampling for post-mortem identification and notification of active TB during forensic autopsies. Diagnosis of TB in forensic autopsies would contribute to clarifying the cause of death and to the collection of epidemiological data in Turkey, particularly in ante-mortem undiagnosed cases.